8实验八 蜂蜜中掺假的检测
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三、实验结果：
1、现象：A、B两管均无白色絮状物产生，所以此蜂蜜中不掺有蔗糖。
2、现象：滴5% AgNO3指示剂后，无白浊状沉淀产生，因此此蜂蜜中不含有转化糖。
3、现象：与正常蜂蜜做对照，无蓝色、蓝紫色或红色出现，所以没有掺杂淀粉类物质。
4、现象：第一次无白色沉淀产生，第二次无淡蓝色绒毛状沉淀产生，两次试验均为阴性，因此蜂蜜内不含有羧甲基纤维素钠。
黄山学院教案
周次
日期
课时安排
3课时
课题
实验八蜂蜜中掺假的检测
重点难点
教学目标
1、了解蜂蜜中常见的掺假物的种类。
2、掌握检测蜂蜜中掺假物的方法。
教学方法教学手段
1．要求学生实验前认真预习实验内容，实验前教师检查并批改预习报告，了解学生预习情况。
2．实验前先进行重点的讲解和示范基本操作、实验步骤中的注意事项，实验过程中巡回指导。
试验方法：取蜂蜜10g于另一烧杯中，加入95%酒精20mL。充分搅拌均匀，即有白色絮状物析出，取白色絮状物2g于另一烧杯中，加热水100mL，搅拌均匀，冷却后备用。
取上述备检液30mL于锥形瓶中，加盐酸3mL，观察有无白色沉淀产生。
另取上述备液50mL于另一锥形瓶中，加1%CuSO4溶液100mL，观察有无淡蓝色绒毛状沉淀产生。
（1）准确称取蜜样1g，加水定容至50mL、混匀。吸取此稀释蜜样5mL于100mL容量瓶中，加水3mL，再加4mL浓度为2mol/L的KOH溶液，混匀后于沸水中加热5min，冷却后用水定容至100mL。于试管中取此稀释液1mL，加水1mL、蒽酮试剂6mL、混匀，置沸水浴中3.5min后，迅速冷却。用1cm比色皿于635nm下测吸光度。
】
2.硝酸银快速检验法
取蜜样2份（各1g）分别置于两支试管中，各加水4mL、混匀。其中A试管加2%AgNO3溶液2滴，B试管加1% AgNO3溶液2滴，观察有无白色絮状物产生。
判别：A管中有白色絮状物产生，蔗糖含量疑为1%以上；B管中如有白色絮凝物产生，蔗糖含量疑为4%以上。
（二）、蜂蜜中掺人工转化糖
二、实验步骤：
（一）、蜂蜜中掺蔗糖
人为将蔗糖熬成浆状掺入蜂蜜中出售是最常见的掺假现象，其特点是色泽鲜艳明亮，多为浅黄色，味淡，回味短，有一种糖浆味。
1蒽酮比色法
蒽酮-硫酸水溶液与碳水化合物生成一种蓝绿色物质,是糖类特有反应。该反应曾用于测定果蔬中的蔗糖，也有人将这一特有反应用于蜂蜜中蔗糖的测定,可不经分离而直接测定蜂蜜中的蔗糖含量。其原理为蔗糖在浓硫酸作用下先水解为单糖分子，并迅速脱水成糠醛衍生物，糠醛衍生物再与蒽酮反应生成有色化合物，以比色法测定蔗糖的含量。工作中先将蜂蜜样品用稀碱煮沸一定时间, 破坏掉葡萄糖和果糖, 剩下的蔗糖与蒽酮-硫酸水溶液在沸水浴中显色。然后测定其吸光度, 再通过工作曲线即可求出蔗糖的含量。
V4——显色时吸取的检液体积，1 mL；
m——称取的蜂蜜样品质量，1 g。
（4）判别 正常蜂蜜中蔗糖含量约为5%以下，个别品种可能达8%，通过对比克判别蜂蜜中是否掺假有蔗糖。本法灵敏度高，可检出测样中掺0.5%蔗糖的含量。
注意，蒽酮试剂必须现配现用。
【溶液中的物质的量浓度与体积变化的等式：
溶液中的溶质质量分数与溶液质量变化的等式：
蔗糖在稀酸作用下可转化为含葡萄糖和果糖的糖浆，俗称转化糖浆或果葡糖浆。掺有人工转化糖浆的蜂蜜稀薄、粘度小，波美度大，可通过检测CL-的存在予以判别。
试验方法：取1g蜜样于试管中，加水5mL混匀后，加1—2滴5% AgNO3指示剂，如呈白浊状，疑掺有人工转化糖（与正常蜂蜜对照）。
（三）、蜂蜜中掺淀粉类物质
蜂蜜中如掺加有米汤、糊精及淀粉类物质，外观浑浊不透明，蜜味淡薄，用水稀释后溶液浑浊不清。
试验方法：取蜂蜜2g于试管中。加水10mL。加热至沸后冷却，加0.1mol/L碘液2滴，观察颜色变化。同时做正常蜂蜜对比试验。
判别：如有蓝色、蓝紫色或红色出现，疑为掺有淀粉类物质。
（四）、蜂蜜中掺羧甲基纤维素钠
羧甲基纤维素钠（CMC-Na）是一种增稠剂，掺加入蜂蜜后，蜂蜜颜色变深，粘稠度变大。
判别：若上述两项试验均呈阳性，则被检蜂蜜疑掺有羧甲基纤维素钠。
试剂的准备：
蒽酮试剂：取蒽酮试剂0.4g溶于H2SO4(84份浓H2SO4与16份水混合)100mL溶液中。
2mol/L的KOH溶液：称取KOH固体11.2g于100ml容量瓶定容【KOH分子量56.1,
5%的AgNO3溶液：称取5gAgNO3晶体于100ml容量瓶定容
（2）标准曲线制备 取蔗糖标准使用液（100μg/mL）0.0,0.2 mL,0.4mL,0.6 mL,0.8 mL,1.0mL分别于试管中，各加水补足至2mL，如上法（再加蒽酮试剂6mL、混匀，置沸水浴中3.5min后，迅速冷却。用1cm比色皿于635nm下测吸光度，）显色测吸光度，绘制标准曲线。
（3）结果计算
蜂蜜中蔗糖含量（%）按下式计算：
蜂蜜中蔗糖含量=（m1×V1×V3）/(V2×V4×m×1000×1000) ×100%
式中m1——由标准曲线查得蔗糖含量，ug；
V1——第一次稀释体积，50mL;
为使单位化统一
V2——吸取稀释蜜样毫升数，5mL；
V3——第二次稀释定容体积，100 mL；
教
学
过
程
教
学
过
程
一、蜂蜜介绍
蜂蜜中含葡萄糖和果糖，约占65-80%；蔗糖极少，不超过8%；水分16-25%；糊精和非糖物质、矿物质、有机酸等含量在5%左右。此外，还含有少量的酵素、芳香物质和维生素等。蜜源植物品种不同，蜂蜜的成分也不一样。新鲜成熟的蜂蜜，为粘稠的透明或半透明的胶状液体，有的蜂蜜在较低的温度下放置，可以逐渐凝结成晶体。蜜的比重为1.401-1.443。
综上所述，此蜂蜜中没有添加蔗糖、转化糖、饴糖、淀粉类物质、羧甲基纤维素钠等物质。
课后作业
教学后记
数据处理：
蔗糖标准使用液（100μg/mL）0.0,0.2 mL,0.4mL,0.6 mL,0.8 mL,1.0mL于635nm下测吸光度
蔗糖标百度文库使用液 ml
0.00
0.20
0.40
0.60
0.80
1.00
吸光度
0.056
0.298
0.418
0.504
0.62
0.714
样品吸光度
0.401
将样品吸光度y=0.401代入y=0.6203x+0.1249，解得
x=0.445 ml
蔗糖标准使用液浓度100μg/mL
代入
蔗糖含量为4.45%故所测样品为正常蜂蜜。
1、现象：A、B两管均无白色絮状物产生，所以此蜂蜜中不掺有蔗糖。
2、现象：滴5% AgNO3指示剂后，无白浊状沉淀产生，因此此蜂蜜中不含有转化糖。
3、现象：与正常蜂蜜做对照，无蓝色、蓝紫色或红色出现，所以没有掺杂淀粉类物质。
4、现象：第一次无白色沉淀产生，第二次无淡蓝色绒毛状沉淀产生，两次试验均为阴性，因此蜂蜜内不含有羧甲基纤维素钠。
黄山学院教案
周次
日期
课时安排
3课时
课题
实验八蜂蜜中掺假的检测
重点难点
教学目标
1、了解蜂蜜中常见的掺假物的种类。
2、掌握检测蜂蜜中掺假物的方法。
教学方法教学手段
1．要求学生实验前认真预习实验内容，实验前教师检查并批改预习报告，了解学生预习情况。
2．实验前先进行重点的讲解和示范基本操作、实验步骤中的注意事项，实验过程中巡回指导。
试验方法：取蜂蜜10g于另一烧杯中，加入95%酒精20mL。充分搅拌均匀，即有白色絮状物析出，取白色絮状物2g于另一烧杯中，加热水100mL，搅拌均匀，冷却后备用。
取上述备检液30mL于锥形瓶中，加盐酸3mL，观察有无白色沉淀产生。
另取上述备液50mL于另一锥形瓶中，加1%CuSO4溶液100mL，观察有无淡蓝色绒毛状沉淀产生。
（1）准确称取蜜样1g，加水定容至50mL、混匀。吸取此稀释蜜样5mL于100mL容量瓶中，加水3mL，再加4mL浓度为2mol/L的KOH溶液，混匀后于沸水中加热5min，冷却后用水定容至100mL。于试管中取此稀释液1mL，加水1mL、蒽酮试剂6mL、混匀，置沸水浴中3.5min后，迅速冷却。用1cm比色皿于635nm下测吸光度。
】
2.硝酸银快速检验法
取蜜样2份（各1g）分别置于两支试管中，各加水4mL、混匀。其中A试管加2%AgNO3溶液2滴，B试管加1% AgNO3溶液2滴，观察有无白色絮状物产生。
判别：A管中有白色絮状物产生，蔗糖含量疑为1%以上；B管中如有白色絮凝物产生，蔗糖含量疑为4%以上。
（二）、蜂蜜中掺人工转化糖
二、实验步骤：
（一）、蜂蜜中掺蔗糖
人为将蔗糖熬成浆状掺入蜂蜜中出售是最常见的掺假现象，其特点是色泽鲜艳明亮，多为浅黄色，味淡，回味短，有一种糖浆味。
1蒽酮比色法
蒽酮-硫酸水溶液与碳水化合物生成一种蓝绿色物质,是糖类特有反应。该反应曾用于测定果蔬中的蔗糖，也有人将这一特有反应用于蜂蜜中蔗糖的测定,可不经分离而直接测定蜂蜜中的蔗糖含量。其原理为蔗糖在浓硫酸作用下先水解为单糖分子，并迅速脱水成糠醛衍生物，糠醛衍生物再与蒽酮反应生成有色化合物，以比色法测定蔗糖的含量。工作中先将蜂蜜样品用稀碱煮沸一定时间, 破坏掉葡萄糖和果糖, 剩下的蔗糖与蒽酮-硫酸水溶液在沸水浴中显色。然后测定其吸光度, 再通过工作曲线即可求出蔗糖的含量。
V4——显色时吸取的检液体积，1 mL；
m——称取的蜂蜜样品质量，1 g。
（4）判别 正常蜂蜜中蔗糖含量约为5%以下，个别品种可能达8%，通过对比克判别蜂蜜中是否掺假有蔗糖。本法灵敏度高，可检出测样中掺0.5%蔗糖的含量。
注意，蒽酮试剂必须现配现用。
【溶液中的物质的量浓度与体积变化的等式：
溶液中的溶质质量分数与溶液质量变化的等式：
蔗糖在稀酸作用下可转化为含葡萄糖和果糖的糖浆，俗称转化糖浆或果葡糖浆。掺有人工转化糖浆的蜂蜜稀薄、粘度小，波美度大，可通过检测CL-的存在予以判别。
试验方法：取1g蜜样于试管中，加水5mL混匀后，加1—2滴5% AgNO3指示剂，如呈白浊状，疑掺有人工转化糖（与正常蜂蜜对照）。
（三）、蜂蜜中掺淀粉类物质
蜂蜜中如掺加有米汤、糊精及淀粉类物质，外观浑浊不透明，蜜味淡薄，用水稀释后溶液浑浊不清。
试验方法：取蜂蜜2g于试管中。加水10mL。加热至沸后冷却，加0.1mol/L碘液2滴，观察颜色变化。同时做正常蜂蜜对比试验。
判别：如有蓝色、蓝紫色或红色出现，疑为掺有淀粉类物质。
（四）、蜂蜜中掺羧甲基纤维素钠
羧甲基纤维素钠（CMC-Na）是一种增稠剂，掺加入蜂蜜后，蜂蜜颜色变深，粘稠度变大。
判别：若上述两项试验均呈阳性，则被检蜂蜜疑掺有羧甲基纤维素钠。
试剂的准备：
蒽酮试剂：取蒽酮试剂0.4g溶于H2SO4(84份浓H2SO4与16份水混合)100mL溶液中。
2mol/L的KOH溶液：称取KOH固体11.2g于100ml容量瓶定容【KOH分子量56.1,
5%的AgNO3溶液：称取5gAgNO3晶体于100ml容量瓶定容
（2）标准曲线制备 取蔗糖标准使用液（100μg/mL）0.0,0.2 mL,0.4mL,0.6 mL,0.8 mL,1.0mL分别于试管中，各加水补足至2mL，如上法（再加蒽酮试剂6mL、混匀，置沸水浴中3.5min后，迅速冷却。用1cm比色皿于635nm下测吸光度，）显色测吸光度，绘制标准曲线。
（3）结果计算
蜂蜜中蔗糖含量（%）按下式计算：
蜂蜜中蔗糖含量=（m1×V1×V3）/(V2×V4×m×1000×1000) ×100%
式中m1——由标准曲线查得蔗糖含量，ug；
V1——第一次稀释体积，50mL;
为使单位化统一
V2——吸取稀释蜜样毫升数，5mL；
V3——第二次稀释定容体积，100 mL；
教
学
过
程
教
学
过
程
一、蜂蜜介绍
蜂蜜中含葡萄糖和果糖，约占65-80%；蔗糖极少，不超过8%；水分16-25%；糊精和非糖物质、矿物质、有机酸等含量在5%左右。此外，还含有少量的酵素、芳香物质和维生素等。蜜源植物品种不同，蜂蜜的成分也不一样。新鲜成熟的蜂蜜，为粘稠的透明或半透明的胶状液体，有的蜂蜜在较低的温度下放置，可以逐渐凝结成晶体。蜜的比重为1.401-1.443。
综上所述，此蜂蜜中没有添加蔗糖、转化糖、饴糖、淀粉类物质、羧甲基纤维素钠等物质。
课后作业
教学后记
数据处理：
蔗糖标准使用液（100μg/mL）0.0,0.2 mL,0.4mL,0.6 mL,0.8 mL,1.0mL于635nm下测吸光度
蔗糖标百度文库使用液 ml
0.00
0.20
0.40
0.60
0.80
1.00
吸光度
0.056
0.298
0.418
0.504
0.62
0.714
样品吸光度
0.401
将样品吸光度y=0.401代入y=0.6203x+0.1249，解得
x=0.445 ml
蔗糖标准使用液浓度100μg/mL
代入
蔗糖含量为4.45%故所测样品为正常蜂蜜。