煎煮时间对生大黄中五种游离蒽醌的影响

煎煮时间对生大黄中五种游离蒽醌的影响【摘要】［目的］研究五种游离蒽醌（芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚等）的总含量与煎煮时间的关系。［方法］采用高效液相色谱法，以甲醇－0.1%磷酸（85∶15）为流动相，检测波长：254nm；流速：1.0ml/min，柱温：室温，检测生大黄煮沸之后每2分钟时所取水煎液样品中五种游离蒽醌的含量.［结果］在煮沸后20min内，五种游离蒽醌的总含量呈上升趋势；之后，呈下降趋势。［结论］沸腾后仍用武火继续煎煮约20min时五种游离蒽醌的总含量最高。

【关键词】生大黄游离蒽醌高效液相色谱法

Abstract:［Objective］To determine the relation between the total count of the five free anthraquinone（A loe emodin，Rhein，Emodin，Chrysophanol，Physcion） in Radix et Rhizoma Rhei and the decoction time.［Method］HPLC was used with the chromatographic conditions as follows：mobile phase：methanol

0.1% phosphonic acid solution = 85 ：15，detection wave length：254nm，flow rate：1.0 ml/min，column temperature：room temperature.The count of the five free anthraquinone in the decoction taken in every 2 minutes after the solution boiled was determined.［Results］During the 22 minutes after the solution was boiled，the total count took on a ascending tendency，

afterwards，it took on a descending tendency.［Conclusion］The biggest number of the total count was obtained 20min after the solution was boiled.

Key words:Radix et Rhizoma Rhei；Free Anthraquinone；HPLC

大黄（Rheum officnale Baill）为蓼科植物掌叶大黄（Rheum palmatumd）、药用大黄（Rheum officinale Baill）及唐古特大黄（Rheum tanguticum.Maxim.ex Balf）的根茎。生大黄具有泻下攻积作用而主要用于便秘，除此之外，还因其清热解毒、活血止血等功效，临床上广泛应用于急性胆道感染、急性细菌性痢疾、炎症性肠病、消化性溃疡等疾病。现代药理研究表明，生大黄中含有80多种不同种类的化合物，主要成分是蒽醌衍生物及二蒽酮类衍生物［1］。在抗菌及保护肠道粘膜等方面发挥作用的主要成份是游离蒽醌，包括芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚等［2］。因煎煮时间不同，大黄水煎液中各成分的含量会发生变化，其功效也必然有所不同。本文采用高效液相色谱法探讨了煎煮时间对生大黄中五种游离蒽醌含量的影响，现介绍如下。

1 仪器、药品和试剂

Waters系列510 HPLC Pump；Shimadzu SPD10A UV Vis 检测器；浙江大学N2000 色谱工作站。大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚、芦荟大黄素标准品：购自中国药品生物检定所；生大黄饮片由浙江中医药大学实验药厂提供，经本院中药教研室鉴定，为当年产正品生大黄。甲醇为一级色谱纯，液相色谱用水为纯净水，无水乙醚等其它化学试剂均为分析纯。

2 方法和结果

2.1 色谱条件 Hypersil BDS C18柱（4.6mm×250mm，10μm）；流动相：甲醇－0.1%磷酸（85∶15）；检测波长：254nm；流速：1.0ml/min；柱温：室温。在该色谱条件下生大黄中五种蒽醌类成分均达到基线分离，见图1。

A：对照品 B：样品 C：阴性对照1芦荟大黄素 2大黄酸 3大黄素 4大黄酚 5大黄素甲醚

图1 HPLC 色谱图（略）

2.2 对照品溶液的制备精密称取芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚及大黄素甲醚标准品各约1mg，置于10ml棕色容量瓶中，用甲醇定容至刻度，备用。分别取以上各对照品溶液100μl，转移至