JEV入侵BHK-21细胞内吞途径的初步研究

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ＰｒｅｌｉｍｉｎａｒｙｒｅｓｅａｒｃｈｏｎｔｈｅｅｎｄｏｃｙｔｉｃｐａｔｈｗａｙｏｆＪＥＶｅｎｔｒｙｉｎｔｏＢＨＫ一２１ｃｅｌｌｓ
ＣＡ（）Ｓａｎ — ｊｉｅ，ＨＵＡＮＧＨｅｎｇ，ＬＩＵＫａｉ，ＳＨＩＳｈｕａｎｇ — ｙａｎ，ＨＵＡＮＧＸｉａｏ — ｂｏ ’ ～，ＷＥＮＸｉｎ — ｔｉａｎ ’ 。 ’ 。
（１．ＳｗｉΒιβλιοθήκη BaiduｎｅＲｅｓｅａｒｃｈＣｅｎｔｅｒ，ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＰｒｅｖｅｎｔｉｖｅＶｅｔｅｒｉｎａｒｙＭｅｄｉｃｉｎｅ，
ＳｉｃｈｕａｎＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｙａ’ ａｎ６２５０１４，Ｃｈｉｎａ；
２．ＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＺｏｏｎｏｓｉｓ。ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＶｅｔｅｒｉｎａｒｙＭｅｄｉｃｉｎｅ，ＳｉｃｈｕａｎＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈｅｎｇｄｕ６１１１３０，Ｃｈｉｎａ３．ＳｉｃｈｕａｎＳｃｉｅｎｃｅ — ｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎＥｘｐｅｒｉｍｅｎｔＳｔａｔｉｏｎｏｆＶｅｔｅｒｉｎａｒｙＤｒｕｇｓａｎｄＶｅｔｅｒｉｎａｒｙ
中国人兽共患病学报
７６６
ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌｏｆＺｏｏｎｏｓｅｓ
２０１３，２９（８）
ＤＯＩ：１０．３９６９／ｃｊｚｊ．ｉｓｓｎ．１００２ —２６９４．２０１３．０８．００７
ＪＥＶ入侵ＢＨＫ一２１细胞内吞途径的初步研究
曹三杰，黄恒，刘凯，石双艳，黄小波。，文心田
摘要：目的利用Ｒｅａｌ — ｔｉｍｅＲＴ — ＰＣＲ技术研究，对乙型脑炎病毒入侵细胞的内吞途径进行初步研究。方法选用氯丙嗪、制霉菌素和细胞松弛素Ｄ３种药物分别处理细胞，以分别阻滞网格蛋白介导内吞途径、细胞膜穴样内陷途径和巨胞饮途径，然后进行ＪＥＶ感染实验，通过Ｒｅａｌ — ｔｉｍｅＲＴ－ＰＣＲ方法测定感染后１ｈ、１２ｈ、２４ｈ细胞内的病毒拷贝数。结果与仅实施感染实验、未进行药物处理的对照组比较，３种药物处理组的细胞内病毒拷贝数在感染后各时相点均呈现不同程度的下降，在
ｔｒｅａｔｅｄｗｉｔｈＣｈｌｏｒｐｒｏｍａｚｉｎｅ，ＮｙｓｔａｔｉｎａｎｄＣｙｔｏｃｈａｌａｓｉｎＤｔｏｂｌｏｃｋｃｌａｔｈｒｉｎ－ｍｅｄｉａｔｅｄｅｎｄｏｃｙｔｏｓｉｓ，ｃａｖｅｏｌａｅ — ｍｅｄｉａｔｅｄｅｎｄｏｃｙｔｏ —
ＢｉｏｌｏｇｉｃａｌＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ＭｉｎｉｓｔｒｙｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ，Ｙａ’ ａｎ６２５０１４，Ｃｈｉｎａ）
ＡＢＳＴＲＡＣＴ：Ｗｅａｐｐｌｉｅｄｒｅａｌ — ｔｉｍｅＰＣＲｔｏｓｔｕｄｙｔｈｅｅｎｄｏｃｙｔｉｃｐａｔｈｗａｙｏｆＪＥＶｅｎｔｒｙｉｎｔｏＢＨＫ一２１ｃｅｌｌｓ．ＢＨＫ一２１ｃｅｌｌｓｗｅｒｅ
感染１ｈ、１２ｈ和２４ｈ后，氯丙嗪处理组细胞内病毒拷贝数分别下降了５９．５８，５３．３４和６１．３５；细胞松弛素Ｄ组细胞内病毒拷贝数分别下降了２３．５９％，３Ｏ．７７和３Ｏ．１４％；制霉菌素组细胞内病毒拷贝数分别下降了３５．５６，３４．４Ｏ和３４．４Ｏ。结论乙型脑炎病毒主要利用网格蛋白介导内吞途径进入ＢＨＫ一２１细胞。关键词：乙型脑炎病毒；实时荧光定量ＲＴ — ＰＣＲ；内吞途径中图分类号：Ｒ３７３文献标识码：Ａ文章编号：１００２ —２６９４（２０１３）０８ —０７６６ —０５