褐藻糖胶 PPT课件
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乙醇分级沉淀法：粗多糖→配成5％水溶液→加乙醇至20 ％→离心→上清液加乙醇至75％→抽滤→沉淀用乙醇和丙 酮浸洗→40℃干燥→褐藻糖胶。
乙醇重沉淀
先用20%乙醇沉淀出褐藻酸,再加乙醇至60%乙醇 浓度，使褐藻糖胶沉淀出来。然后对60%乙醇沉 淀物进行乙醇重沉淀。
先加乙醇至30%乙醇浓度,没有沉淀生成。加乙醇 至70%乙醇浓度,褐藻糖胶呈半胶体,加入1ml的 10% NaCl溶液后,迅速絮凝。离心,沉淀用乙醇和 乙醚浸洗,干燥得砂状颜色的褐藻糖胶粉末。
降血糖作用
褐藻糖胶具有显著降血糖作用，可在24 h内维持 降糖效用口。当胰岛细胞受损伤时褐藻糖胶可能 对其有保护作用。给经四氧嘧啶诱导生成糖尿病 的小鼠注射一定量的褐藻糖胶后，能缓解其糖尿 病症状，减少饮水量，糖耐量明显改善。
对重金属及其他毒素的阻吸作用
大量研究表明褐藻糖胶是一种优质的膳食纤维。 在人体内具有较重要的生理功能，如促进胃肠蠕 动。吸附有毒物质并加速排出，尤其是吸附多种 有毒重金属如Pb、Sn、Cd等，减轻这些物质对 人体的毒害。从而在胃肠道内担任着“清道夫” 的角色。
2、季胺盐沉淀法
利用季胺盐如十六烷基氯化吡啶(CPC)或十 六烷基三甲基溴化铵(CTAB)能与褐藻糖胶 形成沉淀的性质,使褐藻糖胶沉淀出来,而这 一沉淀又可溶于高浓度的CaCl2或NaCl溶液。
粗多糖→配成2％水溶液→离心去除不溶物 →上清液中加5％ CTAB→离心收集沉淀→ 将沉淀溶于3mol／L CaCl2中→加乙醇至 60％→离心→沉淀用乙醇和丙酮浸洗 →40℃干燥→褐藻糖胶
研究中发现,对酸提法得到的羊栖菜褐藻糖胶粗品 采用乙醇分步沉淀法进行纯化效果较好。
对水提法得到的褐藻糖胶粗品,加入少量CaCl2进行纯 化效果较好。
褐藻糖胶在体外可以诱导白细胞介素和丙型干扰素(IFN一7)产生； 体内给药可增强T细胞、B细胞、巨噬细胞(Mqo)和自然杀伤细胞 (NK)的功能，促进绵羊红细胞(SRBC)的初次抗体应答。此外， 海藻多糖是小鼠B淋巴细胞有丝分裂原，对大鼠脾脏淋巴细胞和 人外周血液单个核细胞也有激活作用。从而证明了海藻多糖具有 增强机体免疫功能的作用。
一、褐藻糖胶的结构
由a-(1→3)连接的L-岩藻糖组成，部分岩藻 糖残基的C4位被硫酸根取代。在分子链内， 每2～3个岩藻糖残基就有一个由岩藻形成 的支链点。
二、褐藻糖胶物性
（1）褐藻糖胶是一种乳白色粉末。 （2）溶于水，不溶于乙醇、丙酮、氯仿等
有机溶
三、褐藻糖胶的生理活性
免疫调节作用
抑制肿瘤细胞生长
抑制肿瘤细胞生长的作用，可以有效的抑 制小鼠S—l80和Heps肿瘤细胞的生长。
四、褐藻糖胶的分离技术 1、酸提取法
海带
粉碎
提取2 次
滤液
离心
0.1moHCI
加NaOH
滤液加乙醇
粗品
减压干燥
乙醇洗脱
沉淀
2、水提取法
海带藻粉→热水浸提→离心→取上清液， 滤渣在同样条件再提取1次→合并2次滤液 →调节滤液pH至中性→减压浓缩→乙醇沉 淀→无水乙醚、丙酮洗涤2次→真空干燥→ 褐藻糖胶粗品在提取过程中
第六节 褐藻糖胶 （Fucoidan ）
褐藻糖胶 (FuCoidan)也称岩藻多糖、岩藻 多糖、岩藻聚糖硫酸酯，是水溶性多糖， 它存在于褐藻细胞间组织中我们所看到的 海带、掌状海带、泡叶藻和巨藻等表面渗 透出的粘液中，其主要成分是岩藻多糖。
主要组分
L-岩藻糖-4-硫酸酯，少量的半乳糖、甘露 糖、术糖、糖醛酸、阿拉伯糖及蛋白质等
将热水提取物配成1%水溶液→用3%CPC沉 淀→3000 r/ min 离心→沉淀溶于4 mol/LCaCl2 ,在37℃静置20h→加3倍乙醇 →10000r/ min离心→沉淀溶于水→透析→ 冷冻干燥。
3、透析法和酶消化法
用透析法除去溶液中的离子和小分子物质， 用酶消化法除去混杂在提取液中的蛋白质。
作为免疫增强剂，有预防放疗所致造血组织损伤，刺激造血恢复 及增强癌症患者的免疫功能
抗凝血作用
具有抗凝血的作用，它能够显著延长激活部分凝血活酶时问， 说明其具有明显的抗凝血作用。
褐藻糖胶具有明显的抗凝血和促纤溶的药理学活性，其活性作 用随褐藻糖胶浓度的增加而增强，但由于多糖的相对分子质量 大而不易被吸收，所以抗凝效果不及肝素，只适用于血粘度较 高的病人，仅可作为预防血栓形成的药物或保健品。研究发现， 多糖的抗凝血效果还跟摄取方式有关，静脉注射的效果明显高 于腹腔注射 。
五、褐藻糖胶的纯化技术
经上述方法提取得到的褐藻糖胶粗品通常 还含有部分水溶性褐藻酸、海带淀粉、蛋 白质淀法
利用褐藻酸在低浓度乙醇(20%～30%) 中发生沉淀,而褐 藻淀粉可溶于较高浓度乙醇( > 60%) 的性质,将褐藻糖胶 粗品用乙醇进行分步沉淀,从而除去杂质。
3、乙醇沉淀法
4、十六烷氯化吡啶(CPC)沉淀法
5、溶剂萃取法
6、氯化钙法
将褐藻酸转化为褐藻酸钙，避免了褐藻酸的溶出。 藻粉用2.5L,80％乙醇抽提，过滤，滤渣浸在 4.5L3．5％甲醛中过夜后倒出甲醛，风干，加入 2％CaCl2，水溶液，室温提取4 h，离心，沉淀 再于70℃提取2 h，合并两次上清液，减压浓缩， 透析，冷冻干燥，得褐藻糖胶粗品
乙醇重沉淀
先用20%乙醇沉淀出褐藻酸,再加乙醇至60%乙醇 浓度，使褐藻糖胶沉淀出来。然后对60%乙醇沉 淀物进行乙醇重沉淀。
先加乙醇至30%乙醇浓度,没有沉淀生成。加乙醇 至70%乙醇浓度,褐藻糖胶呈半胶体,加入1ml的 10% NaCl溶液后,迅速絮凝。离心,沉淀用乙醇和 乙醚浸洗,干燥得砂状颜色的褐藻糖胶粉末。
降血糖作用
褐藻糖胶具有显著降血糖作用，可在24 h内维持 降糖效用口。当胰岛细胞受损伤时褐藻糖胶可能 对其有保护作用。给经四氧嘧啶诱导生成糖尿病 的小鼠注射一定量的褐藻糖胶后，能缓解其糖尿 病症状，减少饮水量，糖耐量明显改善。
对重金属及其他毒素的阻吸作用
大量研究表明褐藻糖胶是一种优质的膳食纤维。 在人体内具有较重要的生理功能，如促进胃肠蠕 动。吸附有毒物质并加速排出，尤其是吸附多种 有毒重金属如Pb、Sn、Cd等，减轻这些物质对 人体的毒害。从而在胃肠道内担任着“清道夫” 的角色。
2、季胺盐沉淀法
利用季胺盐如十六烷基氯化吡啶(CPC)或十 六烷基三甲基溴化铵(CTAB)能与褐藻糖胶 形成沉淀的性质,使褐藻糖胶沉淀出来,而这 一沉淀又可溶于高浓度的CaCl2或NaCl溶液。
粗多糖→配成2％水溶液→离心去除不溶物 →上清液中加5％ CTAB→离心收集沉淀→ 将沉淀溶于3mol／L CaCl2中→加乙醇至 60％→离心→沉淀用乙醇和丙酮浸洗 →40℃干燥→褐藻糖胶
研究中发现,对酸提法得到的羊栖菜褐藻糖胶粗品 采用乙醇分步沉淀法进行纯化效果较好。
对水提法得到的褐藻糖胶粗品,加入少量CaCl2进行纯 化效果较好。
褐藻糖胶在体外可以诱导白细胞介素和丙型干扰素(IFN一7)产生； 体内给药可增强T细胞、B细胞、巨噬细胞(Mqo)和自然杀伤细胞 (NK)的功能，促进绵羊红细胞(SRBC)的初次抗体应答。此外， 海藻多糖是小鼠B淋巴细胞有丝分裂原，对大鼠脾脏淋巴细胞和 人外周血液单个核细胞也有激活作用。从而证明了海藻多糖具有 增强机体免疫功能的作用。
一、褐藻糖胶的结构
由a-(1→3)连接的L-岩藻糖组成，部分岩藻 糖残基的C4位被硫酸根取代。在分子链内， 每2～3个岩藻糖残基就有一个由岩藻形成 的支链点。
二、褐藻糖胶物性
（1）褐藻糖胶是一种乳白色粉末。 （2）溶于水，不溶于乙醇、丙酮、氯仿等
有机溶
三、褐藻糖胶的生理活性
免疫调节作用
抑制肿瘤细胞生长
抑制肿瘤细胞生长的作用，可以有效的抑 制小鼠S—l80和Heps肿瘤细胞的生长。
四、褐藻糖胶的分离技术 1、酸提取法
海带
粉碎
提取2 次
滤液
离心
0.1moHCI
加NaOH
滤液加乙醇
粗品
减压干燥
乙醇洗脱
沉淀
2、水提取法
海带藻粉→热水浸提→离心→取上清液， 滤渣在同样条件再提取1次→合并2次滤液 →调节滤液pH至中性→减压浓缩→乙醇沉 淀→无水乙醚、丙酮洗涤2次→真空干燥→ 褐藻糖胶粗品在提取过程中
第六节 褐藻糖胶 （Fucoidan ）
褐藻糖胶 (FuCoidan)也称岩藻多糖、岩藻 多糖、岩藻聚糖硫酸酯，是水溶性多糖， 它存在于褐藻细胞间组织中我们所看到的 海带、掌状海带、泡叶藻和巨藻等表面渗 透出的粘液中，其主要成分是岩藻多糖。
主要组分
L-岩藻糖-4-硫酸酯，少量的半乳糖、甘露 糖、术糖、糖醛酸、阿拉伯糖及蛋白质等
将热水提取物配成1%水溶液→用3%CPC沉 淀→3000 r/ min 离心→沉淀溶于4 mol/LCaCl2 ,在37℃静置20h→加3倍乙醇 →10000r/ min离心→沉淀溶于水→透析→ 冷冻干燥。
3、透析法和酶消化法
用透析法除去溶液中的离子和小分子物质， 用酶消化法除去混杂在提取液中的蛋白质。
作为免疫增强剂，有预防放疗所致造血组织损伤，刺激造血恢复 及增强癌症患者的免疫功能
抗凝血作用
具有抗凝血的作用，它能够显著延长激活部分凝血活酶时问， 说明其具有明显的抗凝血作用。
褐藻糖胶具有明显的抗凝血和促纤溶的药理学活性，其活性作 用随褐藻糖胶浓度的增加而增强，但由于多糖的相对分子质量 大而不易被吸收，所以抗凝效果不及肝素，只适用于血粘度较 高的病人，仅可作为预防血栓形成的药物或保健品。研究发现， 多糖的抗凝血效果还跟摄取方式有关，静脉注射的效果明显高 于腹腔注射 。
五、褐藻糖胶的纯化技术
经上述方法提取得到的褐藻糖胶粗品通常 还含有部分水溶性褐藻酸、海带淀粉、蛋 白质淀法
利用褐藻酸在低浓度乙醇(20%～30%) 中发生沉淀,而褐 藻淀粉可溶于较高浓度乙醇( > 60%) 的性质,将褐藻糖胶 粗品用乙醇进行分步沉淀,从而除去杂质。
3、乙醇沉淀法
4、十六烷氯化吡啶(CPC)沉淀法
5、溶剂萃取法
6、氯化钙法
将褐藻酸转化为褐藻酸钙，避免了褐藻酸的溶出。 藻粉用2.5L,80％乙醇抽提，过滤，滤渣浸在 4.5L3．5％甲醛中过夜后倒出甲醛，风干，加入 2％CaCl2，水溶液，室温提取4 h，离心，沉淀 再于70℃提取2 h，合并两次上清液，减压浓缩， 透析，冷冻干燥，得褐藻糖胶粗品