血清尿酸浓度测定

血清尿酸浓度测定

一、实验目的：

1、掌握酶联比色法测定血清尿酸的原理和操作方法。

2、熟悉血清尿酸测定的临床意义。

3、了解试剂盒的特点和实用价值

二、实验原理：

去蛋白血滤液中的尿酸在尿酸酶催化下被氧化成尿囊素，CO2，和H2O2，后者在过氧化物酶和色素原性氧受体存在下，将过氧化氢分解为氧和水，同时使色素原性氧受体４－氨基安替比林和酚去氢缩合为醌亚胺，醌亚胺为红色复合物。在一定条件下，醌亚胺染料的颜色深浅与尿酸的含量成正比，据此可推算出尿酸的浓度。

三、实验步骤：

按说明书进行操作。

1.样品当日空腹采集的无溶血、无乳糜的血清。

2.试剂配制 R1试剂48mL+R2试剂12mL，混匀。

3.按照下表操作

混匀，37℃水浴10分钟。

4.比色以空白管调零，于510nm处比色，读取各管吸光度值。

四、结果与分析：

空白管标准管样品管

A5100.000 0.040 0.036

由标准管法，待测血清尿酸浓度（μmol/L）=(0.036/0.040)×400=360μmol/L

五、讨论

1.在使用分光光度计时不可将试剂溅入仪器。

2.紫外分光光度计在使用前需用空白管对其波长进行校正。

3.注意控制反应条件即温度、时间及溶液pH值。此实验还可以探讨反应条件不同是否会对测定结果造成影响。

4.各管在加入试剂前一定要编号，加入试剂使按上表操作，以确保每管的加样量准确。

5.尿酸标准液须防止污染，2～8°C密封保存。

6.测定血清尿酸的方法还有磷酸三钠法、碳酸钠法。但以尿酸酶紫外法为佳，其特异性和抗干扰性好，标本用量少，不需做蛋白滤液，方法简便快捷。

六、结论

本实验通过尿酸酶紫外法测得样品血清尿酸的浓度为360μmol/L，在参考范围之内。

七、临床意义

尿酸是人体嘌呤代谢产物。我们体内的老旧细胞，还有食物，尤其是富含嘌呤的食物（如动物内脏、海鲜等）在体内新陈代谢过程中，其分解产生嘌呤后，会在肝脏中合成为尿酸。大部分尿酸经肾脏随尿液排出体外，少部分通过粪便和汗液排出。正常情况下，体内的尿酸处于平衡状态。但如果体内产生过多或排泄障碍，血清尿酸会增高。血清尿酸升高的情况主要有：

1、痛风症痛风患者血清中尿酸增高，但有时亦会出现正常尿酸值。

2、核酸代谢增加如白血病，多发行骨髓瘤，真性红细胞增多症等血清尿酸值亦常见增高。

3、肾功能减退常伴有血清尿酸增高。

4、中毒氯仿、四氯化碳、铅中毒等。

5、食用富含核酸的食物。