第四章体细胞胚胎发生.
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( 4 )由于从任何材料都能得到胚状体,为基因工程技术应用于 生产提供桥梁; ( 5 )在人工种子的制作过程中可加入生长调节物质、微生物或 农药,人为控制植物的生长发育和抗逆性;
(6)人工种子在一定程度上可取代天然种子而节约粮食。
人工种子的制备方法和技术
1、目标物和外植体的选取
2、胚状体和胚类似物的诱导
一次分裂多为不均等分裂,顶细胞继续分裂形成多细
胞原胚,基细胞进行少数几次分裂形成胚柄。
体细胞胚发生中极性获得的诱导因子是植物激素和
外界刺激。
体细胞发生的生理隔离
在多种植物中观察到,早期的胚性细胞与周围
细胞还存在胞间连丝,但随着胚性细胞的发育,细
胞壁加厚,胞间连丝消失或被堵塞。
从大量体胚发生观察结果看,生理隔离是普遍
液胶包埋法、干燥包裹法和水凝胶法
人工种子制作流程图
人工种子的贮藏与萌发
1、人工种子贮藏技术
低温贮藏;液体芽试验
人工种子利用中的问题
(1)高质量的胚状体和不定芽的获得不普
遍;
(2)成本问题 ;
(3)移栽后的管理很重要。
结 束
质部等,三倍体的胚乳和单倍体的小孢子。可见物种、 外植体性质以及倍数性等的差异都不限制胚状体发生。
体细胞胚胎发生的方式
直接发生:从培养中的器官、组织、细胞或原生质体
直接分化成胚,中间不经过愈伤组织阶段。 间接发生:外植体先愈伤化,然后由愈伤组织细胞分 化成胚,这种方式最为常见。且胚状体的形成分两 个阶段完成:(1)胚胎发生从(EC)的形成 ; (2)胚状体的发育。
有营养物质和保护功能的物质中,在适宜的条件 下发芽出苗的颗粒体
结构:体细胞胚、人工胚乳、人工种皮
人工种子示意图
人工种子的优点
( 1 )可以使在自然条件下得不到种子或稀有的植物得以迅速繁 殖和保存;
(2)体细胞胚的繁殖速度快,比茎尖培养快速繁殖的效率还高, 可以在短时间内提供大量种苗;
( 3 )由于体细胞胚是无性生殖方式产生的,因而可以固定 F1代 杂种优势,使F1代杂交种可以多代利用;
第四章
体细胞胚胎发生
引言
体细胞胚(somatic embryo)或胚状体(embryoid):
指的是在植物组织培养中起源于一个非合子细胞、
经过胚胎发生和胚胎发育过程形成的具有双极性的 胚状结构。
定义表明:
它不同于合子胚,因为它不是两性细胞融合的产物;
它不同于孤雌胚或孤雄胚,因为它不是无融合生殖的产物;
植物体细胞胚胎发生的极性和生理隔离
体细胞胚胎具有两个明显的特点:
一是双极性(double polarity);
二是与母体组织或外植体的维管束系统无直接的
联系,处于较为孤立的状态,即存在生理隔离 (physiological isolation)。
体细胞胚胎发生的极性
单个胚性细胞与合子胚一样,具有明显的极性:第
存在的,有利于胚胎发生潜力的表达。由此认为生
理隔离是体细胞胚胎发生的先决条件。
影响体细胞胚胎发生的因子
生长调节物质
在离体条件下体细胞胚的发育包括两个步骤:
愈伤组织的建立和增殖需要含生长素的培养基,诱导出胚性细胞团 . 把胚性细胞团转移到生长素含量很低或完全没有生长素的培养基
(成胚培养基)上,就能发育为成熟的胚.
(1) 胚状体的诱导(遗传基因型、培养基及培养条件、 生长调节物质) (2)胚类似物:天然单极性繁殖体;微切段;处于分化 状态的繁殖体。 (3)胚状体或胚类似物的同步化和分选:
激素调节法;温度冲击法;饥饿法;阻断法;渗透调节 法、密度梯度调节法、过滤分选。
3、人工种子的包埋
理想的包埋材料应具有的特性
体细胞胚与合子胚的比较
(1)植物的合子胚是由双受精形成的,由合子发育 成的成熟种子不仅有胚乳,还有保护性的种皮。
离体培养诱导体细胞胚,没有经过受精作用,也
没有胚乳和种皮。
(2)极性和生殖隔离,两者有相似之处。
(3)两种胚的发育程序大体上是相似的。
体细胞胚的应用……人工种子
人工种子:
概念:将植物离体培养产生的体细胞胚包埋在含
(1)无毒无害,有生物相容性 (2)有一定的透气性和保水性 (3)有一定的强度,能维持胶囊的完整性 (4)可容纳和传递胚胎发育所需的营养物质、生长和发育的 控制剂、以及一些防腐剂和杀菌剂。
(1)人工胚乳的制备
实质上是适合胚状体萌发和生长发育的培养基配方
(2)人工种皮的研究
内外种皮的研究
(3)人工种子的包埋
它不同于组织培养中通过器官发生途径形成的茎芽和根,
因为它的形成经历与合子胚相似的发育过程,而且成熟的
胚状体是一个双极性结构。
体细胞胚胎发生的例证
胡萝卜 石龙芮 博落回 柑橘属植物
注:现在已知有很多种植物的各种不同的外植体,在离
体培养中都表现了体细胞胚胎发生的能力。包括二倍体
组织如茎段、子叶、茎尖、叶柄、贮藏根的韧皮部和木
氮源
氨态氮、硝态氮
其他因子
钾、溶解氧、活性炭、乙醇、
体细胞胚的成熟过程
体细胞胚常常能在原来的培养基上成熟和萌发 .
在不经冷处理就不能萌发的物种中,幼龄或成熟的 胚可能必须先经历一段低温之后才能正常地长成小 植株. 在柑橘属植物体细胞胚萌发期间,需要使用 GA3以促
进根和茎的发育.
(6)人工种子在一定程度上可取代天然种子而节约粮食。
人工种子的制备方法和技术
1、目标物和外植体的选取
2、胚状体和胚类似物的诱导
一次分裂多为不均等分裂,顶细胞继续分裂形成多细
胞原胚,基细胞进行少数几次分裂形成胚柄。
体细胞胚发生中极性获得的诱导因子是植物激素和
外界刺激。
体细胞发生的生理隔离
在多种植物中观察到,早期的胚性细胞与周围
细胞还存在胞间连丝,但随着胚性细胞的发育,细
胞壁加厚,胞间连丝消失或被堵塞。
从大量体胚发生观察结果看,生理隔离是普遍
液胶包埋法、干燥包裹法和水凝胶法
人工种子制作流程图
人工种子的贮藏与萌发
1、人工种子贮藏技术
低温贮藏;液体芽试验
人工种子利用中的问题
(1)高质量的胚状体和不定芽的获得不普
遍;
(2)成本问题 ;
(3)移栽后的管理很重要。
结 束
质部等,三倍体的胚乳和单倍体的小孢子。可见物种、 外植体性质以及倍数性等的差异都不限制胚状体发生。
体细胞胚胎发生的方式
直接发生:从培养中的器官、组织、细胞或原生质体
直接分化成胚,中间不经过愈伤组织阶段。 间接发生:外植体先愈伤化,然后由愈伤组织细胞分 化成胚,这种方式最为常见。且胚状体的形成分两 个阶段完成:(1)胚胎发生从(EC)的形成 ; (2)胚状体的发育。
有营养物质和保护功能的物质中,在适宜的条件 下发芽出苗的颗粒体
结构:体细胞胚、人工胚乳、人工种皮
人工种子示意图
人工种子的优点
( 1 )可以使在自然条件下得不到种子或稀有的植物得以迅速繁 殖和保存;
(2)体细胞胚的繁殖速度快,比茎尖培养快速繁殖的效率还高, 可以在短时间内提供大量种苗;
( 3 )由于体细胞胚是无性生殖方式产生的,因而可以固定 F1代 杂种优势,使F1代杂交种可以多代利用;
第四章
体细胞胚胎发生
引言
体细胞胚(somatic embryo)或胚状体(embryoid):
指的是在植物组织培养中起源于一个非合子细胞、
经过胚胎发生和胚胎发育过程形成的具有双极性的 胚状结构。
定义表明:
它不同于合子胚,因为它不是两性细胞融合的产物;
它不同于孤雌胚或孤雄胚,因为它不是无融合生殖的产物;
植物体细胞胚胎发生的极性和生理隔离
体细胞胚胎具有两个明显的特点:
一是双极性(double polarity);
二是与母体组织或外植体的维管束系统无直接的
联系,处于较为孤立的状态,即存在生理隔离 (physiological isolation)。
体细胞胚胎发生的极性
单个胚性细胞与合子胚一样,具有明显的极性:第
存在的,有利于胚胎发生潜力的表达。由此认为生
理隔离是体细胞胚胎发生的先决条件。
影响体细胞胚胎发生的因子
生长调节物质
在离体条件下体细胞胚的发育包括两个步骤:
愈伤组织的建立和增殖需要含生长素的培养基,诱导出胚性细胞团 . 把胚性细胞团转移到生长素含量很低或完全没有生长素的培养基
(成胚培养基)上,就能发育为成熟的胚.
(1) 胚状体的诱导(遗传基因型、培养基及培养条件、 生长调节物质) (2)胚类似物:天然单极性繁殖体;微切段;处于分化 状态的繁殖体。 (3)胚状体或胚类似物的同步化和分选:
激素调节法;温度冲击法;饥饿法;阻断法;渗透调节 法、密度梯度调节法、过滤分选。
3、人工种子的包埋
理想的包埋材料应具有的特性
体细胞胚与合子胚的比较
(1)植物的合子胚是由双受精形成的,由合子发育 成的成熟种子不仅有胚乳,还有保护性的种皮。
离体培养诱导体细胞胚,没有经过受精作用,也
没有胚乳和种皮。
(2)极性和生殖隔离,两者有相似之处。
(3)两种胚的发育程序大体上是相似的。
体细胞胚的应用……人工种子
人工种子:
概念:将植物离体培养产生的体细胞胚包埋在含
(1)无毒无害,有生物相容性 (2)有一定的透气性和保水性 (3)有一定的强度,能维持胶囊的完整性 (4)可容纳和传递胚胎发育所需的营养物质、生长和发育的 控制剂、以及一些防腐剂和杀菌剂。
(1)人工胚乳的制备
实质上是适合胚状体萌发和生长发育的培养基配方
(2)人工种皮的研究
内外种皮的研究
(3)人工种子的包埋
它不同于组织培养中通过器官发生途径形成的茎芽和根,
因为它的形成经历与合子胚相似的发育过程,而且成熟的
胚状体是一个双极性结构。
体细胞胚胎发生的例证
胡萝卜 石龙芮 博落回 柑橘属植物
注:现在已知有很多种植物的各种不同的外植体,在离
体培养中都表现了体细胞胚胎发生的能力。包括二倍体
组织如茎段、子叶、茎尖、叶柄、贮藏根的韧皮部和木
氮源
氨态氮、硝态氮
其他因子
钾、溶解氧、活性炭、乙醇、
体细胞胚的成熟过程
体细胞胚常常能在原来的培养基上成熟和萌发 .
在不经冷处理就不能萌发的物种中,幼龄或成熟的 胚可能必须先经历一段低温之后才能正常地长成小 植株. 在柑橘属植物体细胞胚萌发期间,需要使用 GA3以促
进根和茎的发育.