高氧液对家兔心肌缺血再灌注损伤保护作用的实验探究
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（二）实验模型的制备 １．家兔用戊巴比妥钠Ｏｏｍｇ／ｋｇ）从兔耳缘静脉注入进行麻醉。气管
切开捅管，左侧颈动脉插管并留置供采血用。开胸暴露，ＩＸ，脏，于冠状 动脉左室支中段１／２处穿线结扎造成心肌缺血，４０ｒａｉｎ后解除结扎再灌 注４０ｍｉｎ．于结扎前１０ｒａｉｎ、结扎后３０ｒａｉｎ、再灌后３０ｒａｉｎ分别从颈动 脉采血２ｍｌ，测定血浆中血清肌酸磷酸激酶（ＣＰＫ）、丙二醛（ＭＤＡ）的含 量和ＳＯＤ的活性．连续监铡心电图，观察心率及Ｓ－Ｔ段的变化。
化酶：内皮素：一氧化氨
第四军医大学硕士学位论文
Ｔｈｅ Ｓｔｕｄｙ ＯＵ Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ Ｈｙｐｅｒｏｘｉａ Ｌｉｑｕｉｄ
Ｏｉｌ Ｍｙｏｃａｒｄｉａ｜Ｉｓｃｈｅｍｉａ Ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ ｉｎ Ｒａｂｂｉｔｓ
ｌ＇ｏｓｔｇｒａｄｕａｔｅ： Ｓｕｎ Ｘｕｄｅ
Ｔｕｔｏｒ
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Ｐｒｏｆ
Ｃｈａｉ Ｗｅｉ
Ａ￥Ｓ０ｅｉａｔｅ Ｐｒｏｆ
Ｍｙｏｃａｒｄｉａｌ ｉｓｃｈｅｍｉｃ ｄｉｓｅａｓｅ ｉｓ ｏｎｅ ｏｆ ｔｈｅ ｓｅｖｅｒｅ ｄｉｓｅａｓｅ ｔｈａｔ
ｒｅｍａｉｎｓ ａ ｌｅａｄｉｎｇ ｃａｕｓｅ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｂｅｉｎｇ’ｓ ｍｏｒｔａｌｉｔｙ ａｎｄ ｍｏｒｂｉｄｉｔｙ ｎｏｗａｄａｙｓ．Ｃｕｒｒｅｎｔ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ｓｔｕｄｉｅｓ ｈａｖｅ ｒｅｖｅａｌｅｄ ｔｈａｔ ｃａｌｃｉｕｍ
结扎冠状动脉左室支，心肌缺血４０ｍｉｎ后解除结扎，再灌注４０ｒａｉｎ。用 平衡盐液按１０ｍｌ／ｋｇ静脉滴注，于动脉结扎前１０ｍｉｎ静滴１，３量，于再 灌注前１０ｍｉｎ静滴２，３量。ｆｌＩ）高氧液Ｎ（６只）：按Ｉ的方法将平衡盐液
改为高氧液。
２．健康家兔３６只，按随机分组原则分为三组：（Ａ组）对照组（１２ 只）：完成全部操作，穿线但不结扎冠状动脉，观察９０ｍｉｎ：（Ｂ组）缺血 组０２只）：缺血６０ｒａｉｎ．再灌注９０ｍｉｎ，用生理盐水１０ｍｌ／ｋｇ静脉滴注， 于左室支动脉结扎前１０ｍｉｎ静滴１／３量，再灌注时静滴２／３量；（Ｃ组） 高氧液治疗组０２只）：按Ｂ组的方法将生理盐水改为高氧液。
第四军医大学硕士学位论文
中英文全名对照表
英文缩写
英文全名
中文
ＳＯＤ ＭＤＡ ＣＰＫ ＥＴ Ｎ０ ＥＣＧ ＬＡＤ “Ｒ ０ＲＦ
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ＮＡＤ＋ ＬＰＤ
ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅ ｄｉｓｍａｔａｓｔ ｍａｌｏｎａｌｄｅｈｙｄｅ ｅｅａｒｔｉｎｅ ｐｈｏｓｐｈｏｋｉｎａｓｅ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｎ ｎｉｔｒｉｃ ｏｘｉｄｅ
高氧液对家兔心肌缺血再灌注损伤保护作用的实验研究
研究生：孙绪德 导 师：徐礼鲜教授
柴伟副教授
摘
要
ｆ急性心肌缺血性疾病是临床上常见病、多发病，是威胁人类健康
的主要疾病之一。近年来研究表明，钙超载和自由基是心肌缺血再灌 注损伤的重要机制，并针对性的对Ｃａ２＋拮抗剂和自由基清除剂进行了 多方面的研究，均取得了一定的效果．但引起心肌早期损害的直接因 素是缺血缺氧，如通过液体途径绘缺血心肌供０２，可能减轻缺血心肌
ｏｖｅｒｌｏａｄｉｎｇ ｐａｔｈｏｇｅｎｓｉｓ ｏｆ ｍｙｏｃａｒｄｉｄａｌ ｒ℃ｐｃｒｆｕｓｉｏｎ ｉｎｊｕｒｙ．Ｂｙ ｎｏｗｏｇｒｅｓｓ
／
三、结论、 高氧液能保护缺血再灌注心肌和红细胞ＳＯＤ的活性．降低血浆心 肌ＭＤＡ的含量和ＥＴ水平。使ＣＰＫ的漏出减少，心肌细胞超微结构 损伤明显减轻，因此高氧液对一１１，肌缺血再灌注损伤具有明显的预防和 治疗作用。对多种缺血缺氧性疾病的治疗有很好的应用前景。
９ｔｌｉｌ： 高氧液；再灌注损嘶氧自由基：丙二醛：超氧化物岐 、
ｌｌｉｏ喇ｊ玎固础ａｄｅｎｉｎｅｄｉｎｕｅｌｅｏｉｄｅ
ｌｉｐｏｉｄｉｃ ｐｅｒｏｘｉｄｅ
超氧化物岐化酶 丙二醛 血浆肌酸磷酸激酶 内皮素 一氧化氮 心电图 左前降支 缺血再灌注 氧自由基 羟自由基 二磷酸腺苷
三磷酸腺苷 过氧化氢酶 过氯化物酶
多形核白细胞
尼克睫嘲朗硝ｒ二獭
脂质过氧化物
第四军医大学硕士学位论文
２．家兔用戊巴比妥钠００ｍｇ／ｋｇ）从兔耳缘静脉注入进行麻醉．气管 切开插管，左铡颈动脉插管并留置供采血用．以家兔开胸冠状动脉左 宣支结扎，开放制备心肌缺血再灌注模型。实验结束时取血４ｍｌ，检测 ＮＯ、ＥＴ．实验结束后立即取左室壁心肌组织，电镜下观察心肌细胞超 镦结构；测心肌ＭＤＡ含量及Ｔ－ＳＯＤ活性．
ｅｌｅｃｔｒｏｃａｒｄｉｏｇｒａｍ ｌｉｆｅ ａｎｔｅｒｉｏｒ ｄｅｓｃｅｎｄｉｎｇ ｂｒａｎｃｈ ｉｓｃｈｅｍｉａ ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ ｏｘｉｄｅ ｒａｄｉｃａｌ ｆａｃｔｏｒ ｈｙｄｒｏｘｙｌ ｒａｄｉｃａｌ ａｄｅｎｏｓｉｎｅ ｄｉｐｈｏｓｐｈａｔｅ ａｄｅｎｏｓｉｎｅ ｔｒｉｐｈｏｓｐｈａｔｅ ｈｙｄｒｏｇｅｎ ｐｃｒｏｘｉｄａｓｅ ｐｃｒｏｘ／ｄａｓｅ Ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｏｎｕｃｌｅａｒ ｎｅｕｔｒｏｐｈｉｌ ｌｅｕｋｏｃｙｔｅｓ
的坏死程度，延长心肌的生存能力而产生一定治疗作用．孑本研究旨在
应用家兔心肌缺血再灌注模型，以心肌和血液自由基、生物化学和细 胞超微结构等变化为主要指标，探索高氧液体对缺血再灌注心肌的保 护作用．为临床各种缺血缺氧性疾病的治疗提供新的途径．
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ｆ一、实验方法
＼
（一）实验分组 Ｉ．健康家兔１２只，按随机分组原则分为两组：（Ｉ）对照组（６只）：
第四军医大学硕士学位论文
二、结果 高氧液能使抬高的心电图Ｓ．Ｔ段明显下降，缺血再灌注心肌ＣＰＫ 活性明显降低，与对照组比较（Ｐ＜ｏ．０５）或（Ｐ（ｏ．ｏｉ）。并发现高氧液能保 护缺血再灌注红细胞ＳＯＤ的活性．降低脂质过氧化反应代谢产物ＭＤＡ 的含量．同时发现高氧液能使心肌组织ＭＤＡ含量、ＥＴ水平明显下降， 心肌组织内Ｔ—ＳＯＤ活性及血清ＮＯ水平显著提高。与常规治疗组比较 （Ｐ＜ｏ．０５）或（Ｐ＜ｏ．０１）。高氧液能使缺血再灌注心肌细胞超微结构损伤明 显减轻，表现为：肌丝排列规则，线粒体嵴膜完整，基质透明，与对 照组比较差异明显ａ ７
切开捅管，左侧颈动脉插管并留置供采血用。开胸暴露，ＩＸ，脏，于冠状 动脉左室支中段１／２处穿线结扎造成心肌缺血，４０ｒａｉｎ后解除结扎再灌 注４０ｍｉｎ．于结扎前１０ｒａｉｎ、结扎后３０ｒａｉｎ、再灌后３０ｒａｉｎ分别从颈动 脉采血２ｍｌ，测定血浆中血清肌酸磷酸激酶（ＣＰＫ）、丙二醛（ＭＤＡ）的含 量和ＳＯＤ的活性．连续监铡心电图，观察心率及Ｓ－Ｔ段的变化。
化酶：内皮素：一氧化氨
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Ｔｈｅ Ｓｔｕｄｙ ＯＵ Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ Ｈｙｐｅｒｏｘｉａ Ｌｉｑｕｉｄ
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ｒｅｍａｉｎｓ ａ ｌｅａｄｉｎｇ ｃａｕｓｅ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｂｅｉｎｇ’ｓ ｍｏｒｔａｌｉｔｙ ａｎｄ ｍｏｒｂｉｄｉｔｙ ｎｏｗａｄａｙｓ．Ｃｕｒｒｅｎｔ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ｓｔｕｄｉｅｓ ｈａｖｅ ｒｅｖｅａｌｅｄ ｔｈａｔ ｃａｌｃｉｕｍ
结扎冠状动脉左室支，心肌缺血４０ｍｉｎ后解除结扎，再灌注４０ｒａｉｎ。用 平衡盐液按１０ｍｌ／ｋｇ静脉滴注，于动脉结扎前１０ｍｉｎ静滴１，３量，于再 灌注前１０ｍｉｎ静滴２，３量。ｆｌＩ）高氧液Ｎ（６只）：按Ｉ的方法将平衡盐液
改为高氧液。
２．健康家兔３６只，按随机分组原则分为三组：（Ａ组）对照组（１２ 只）：完成全部操作，穿线但不结扎冠状动脉，观察９０ｍｉｎ：（Ｂ组）缺血 组０２只）：缺血６０ｒａｉｎ．再灌注９０ｍｉｎ，用生理盐水１０ｍｌ／ｋｇ静脉滴注， 于左室支动脉结扎前１０ｍｉｎ静滴１／３量，再灌注时静滴２／３量；（Ｃ组） 高氧液治疗组０２只）：按Ｂ组的方法将生理盐水改为高氧液。
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中英文全名对照表
英文缩写
英文全名
中文
ＳＯＤ ＭＤＡ ＣＰＫ ＥＴ Ｎ０ ＥＣＧ ＬＡＤ “Ｒ ０ＲＦ
·ｏＨ ＡＤＰ Ａ：ｒＰ ＣＡＴ ＰＯＤ
ＰＭＮ
ＮＡＤ＋ ＬＰＤ
ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅ ｄｉｓｍａｔａｓｔ ｍａｌｏｎａｌｄｅｈｙｄｅ ｅｅａｒｔｉｎｅ ｐｈｏｓｐｈｏｋｉｎａｓｅ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｎ ｎｉｔｒｉｃ ｏｘｉｄｅ
高氧液对家兔心肌缺血再灌注损伤保护作用的实验研究
研究生：孙绪德 导 师：徐礼鲜教授
柴伟副教授
摘
要
ｆ急性心肌缺血性疾病是临床上常见病、多发病，是威胁人类健康
的主要疾病之一。近年来研究表明，钙超载和自由基是心肌缺血再灌 注损伤的重要机制，并针对性的对Ｃａ２＋拮抗剂和自由基清除剂进行了 多方面的研究，均取得了一定的效果．但引起心肌早期损害的直接因 素是缺血缺氧，如通过液体途径绘缺血心肌供０２，可能减轻缺血心肌
ｏｖｅｒｌｏａｄｉｎｇ ｐａｔｈｏｇｅｎｓｉｓ ｏｆ ｍｙｏｃａｒｄｉｄａｌ ｒ℃ｐｃｒｆｕｓｉｏｎ ｉｎｊｕｒｙ．Ｂｙ ｎｏｗｏｇｒｅｓｓ
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三、结论、 高氧液能保护缺血再灌注心肌和红细胞ＳＯＤ的活性．降低血浆心 肌ＭＤＡ的含量和ＥＴ水平。使ＣＰＫ的漏出减少，心肌细胞超微结构 损伤明显减轻，因此高氧液对一１１，肌缺血再灌注损伤具有明显的预防和 治疗作用。对多种缺血缺氧性疾病的治疗有很好的应用前景。
９ｔｌｉｌ： 高氧液；再灌注损嘶氧自由基：丙二醛：超氧化物岐 、
ｌｌｉｏ喇ｊ玎固础ａｄｅｎｉｎｅｄｉｎｕｅｌｅｏｉｄｅ
ｌｉｐｏｉｄｉｃ ｐｅｒｏｘｉｄｅ
超氧化物岐化酶 丙二醛 血浆肌酸磷酸激酶 内皮素 一氧化氮 心电图 左前降支 缺血再灌注 氧自由基 羟自由基 二磷酸腺苷
三磷酸腺苷 过氧化氢酶 过氯化物酶
多形核白细胞
尼克睫嘲朗硝ｒ二獭
脂质过氧化物
第四军医大学硕士学位论文
２．家兔用戊巴比妥钠００ｍｇ／ｋｇ）从兔耳缘静脉注入进行麻醉．气管 切开插管，左铡颈动脉插管并留置供采血用．以家兔开胸冠状动脉左 宣支结扎，开放制备心肌缺血再灌注模型。实验结束时取血４ｍｌ，检测 ＮＯ、ＥＴ．实验结束后立即取左室壁心肌组织，电镜下观察心肌细胞超 镦结构；测心肌ＭＤＡ含量及Ｔ－ＳＯＤ活性．
ｅｌｅｃｔｒｏｃａｒｄｉｏｇｒａｍ ｌｉｆｅ ａｎｔｅｒｉｏｒ ｄｅｓｃｅｎｄｉｎｇ ｂｒａｎｃｈ ｉｓｃｈｅｍｉａ ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ ｏｘｉｄｅ ｒａｄｉｃａｌ ｆａｃｔｏｒ ｈｙｄｒｏｘｙｌ ｒａｄｉｃａｌ ａｄｅｎｏｓｉｎｅ ｄｉｐｈｏｓｐｈａｔｅ ａｄｅｎｏｓｉｎｅ ｔｒｉｐｈｏｓｐｈａｔｅ ｈｙｄｒｏｇｅｎ ｐｃｒｏｘｉｄａｓｅ ｐｃｒｏｘ／ｄａｓｅ Ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｏｎｕｃｌｅａｒ ｎｅｕｔｒｏｐｈｉｌ ｌｅｕｋｏｃｙｔｅｓ
的坏死程度，延长心肌的生存能力而产生一定治疗作用．孑本研究旨在
应用家兔心肌缺血再灌注模型，以心肌和血液自由基、生物化学和细 胞超微结构等变化为主要指标，探索高氧液体对缺血再灌注心肌的保 护作用．为临床各种缺血缺氧性疾病的治疗提供新的途径．
第四军医大学硕士学位论文
ｆ一、实验方法
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（一）实验分组 Ｉ．健康家兔１２只，按随机分组原则分为两组：（Ｉ）对照组（６只）：
第四军医大学硕士学位论文
二、结果 高氧液能使抬高的心电图Ｓ．Ｔ段明显下降，缺血再灌注心肌ＣＰＫ 活性明显降低，与对照组比较（Ｐ＜ｏ．０５）或（Ｐ（ｏ．ｏｉ）。并发现高氧液能保 护缺血再灌注红细胞ＳＯＤ的活性．降低脂质过氧化反应代谢产物ＭＤＡ 的含量．同时发现高氧液能使心肌组织ＭＤＡ含量、ＥＴ水平明显下降， 心肌组织内Ｔ—ＳＯＤ活性及血清ＮＯ水平显著提高。与常规治疗组比较 （Ｐ＜ｏ．０５）或（Ｐ＜ｏ．０１）。高氧液能使缺血再灌注心肌细胞超微结构损伤明 显减轻，表现为：肌丝排列规则，线粒体嵴膜完整，基质透明，与对 照组比较差异明显ａ ７