中药葛根微生物转化菌株的鉴定及转化特性的研究
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大理学 院学报
Ｊ ＯＵＲＮＡＬ ＯＦ ＤＡＬ Ｉ Ｕ ＮＩ Ｖ ＥＲＳ Ｉ ＴＹ
第１ ４ 卷 第ｌ ２ 期 ２ ０ １ ５ 年１ ２ 月
Ｖｏ Ｉ ． １ ４ Ｎｏ． １ ２ Ｄｅ ｃ ． ２ ０１ ５
［ Ｄ Ｏ Ｉ ］ １ ０ ． ３ ９ ６ ９／ ｊ ． ｉ ｓ ｓ ｎ ． １ ６ ７ ２ － ２ ３ ４ ５ ． ２ ０ １ ５ ． １ ２ ． ０ １ ５
２ ） 液体种子培养基 ： 酵母膏肽 ， 葡萄糖培养基
（ Ｙ Ｐ Ｄ） 。
３ ） 固体 转化 培 养基 （ ｇ ／ ５ ｏ ｏ ｍＬ 玻 璃瓶 ） ： 葛根 干
素、 大豆 素 、 大 豆苷 等 ） ， 总黄 酮具 有 扩张 冠状 动 脉 、
粉、 水 磨 食 米 粉各 ２ ０ ｇ ， 起 始 含水 量 （ 相 当于 葛根 干 粉 质量 ） ５ ０ ％。 ４ ） 菌落 观 察 培 养 基 ： Ｐ Ｄ Ａ平板 培 养 基 、 察 氏平 板 培养 基 、 沙 博 弱 氏培 养基 。
化 报道 如下 。
１ ． １ ． ４ ． １ 细菌
Ｙ Ｍ１ ０ １ １ 大肠埃 希 氏杆 菌 Ｅ ｓ ｃ ｈ ｅ ｒ ｉ ｃ ｈ ｉ ａ
ｃ ｏ ｌ ｉ ； Ｙ Ｍ１ ０ ２ ８ 藤黄 八 叠球 菌 Ｓ ａ ｒ ｃ ｉ ｎ ａ ｌ ｕ ｔ ｅ ａ ； Ｙ Ｍ１ ０ ２ ９白 色 葡 萄球 菌 Ｓ ｔ ａ ｐ ｈ ｙ ｌ ｏ ｃ ｏ ｃ ｃ ｕ ｓ ａ ｌ ｂ ｕ ｓ ； Ｙ Ｍ１ ０ ３ ３ 结 核 分 枝
１ ． １ ． ３ 培 养基 １ ） 固体 斜 面培 养 基 ： 马 铃 薯葡 萄糖 琼 脂 培养 基
（ Ｐ Ｄ Ａ） 。
药性 ， 提高疗效 ， 降低毒副作用 臼 。 葛根 Ｐ ｕ ｅ ｒ ａ ｒ ｉ ａ ｌ ｏ ｂ ａ ｔ ａ 为豆科植物野葛或粉葛 的
根， 葛根 的有 效成 分主要 是异 黄酮类 化合 物 （ 如 葛根
Ｙ Ｍ ３ ０ ７ ８ 皮 炎 单孢 枝 霉
１ ． １ ． １ 转 化 菌株
Ｈ ｏ ｒ ｍｏ ｄ ｅ ｎ ｄ ｒ ｕ ｍ ｄ ｅ ｒ ｍ ａ ｔ ｉ ｔ ｉ ｄ ｉ ｓ ； Ｙ Ｍ３ ０ ９ ６疣 状 毛 癣 菌
［ 收稿 日期 ］ ２ ０ １ ５ — ０ ５ — １ ４
［ 作者简介源自文库］ 宋艳秋 ， 讲师 ， 主要从 事微 生物 学研 究．
量得 到提 高； 同时， 抑菌活性较转化前有一定程度的增强 ， 抗 菌谱 变广 。
［ 关键词 ］ 葛根 ； 微生物转化； 鉴定 ； 抑菌
［ 中图分 类号］ Ｑ ９ ３ ９ ． ５ ： Ｒ ２ ８
［ 文献标志］ ｉ ｑ － ］ Ａ
［ 文章编号 ］ １ ６ ７ ２ — ２ ３ ４ ５ （ ２ ０ １ ５ ） １ ２ — ０ ０ ６ ４ — ０ ５
微 生物转化是利 用微 生物代谢 过程 中产生 的 某个或某一系列的酶对底物进行催化反应…， 具有
选择性高 、 反应条件温和、 副产 品少 等 优 点 。真 菌 在 微 生 物 中具 有种 类 多 、 次 生代 谢 产 物多 、 并 且
号Ｙ Ｍ３ ２ ０ ７ ， 保存于云南大学微生物研究所。 １ ． １ ． ２ 葛根 云南产 中药 ， 购于昆明市 中药批发市
场， 经 过 云南 省微 生 物研 究所 陈有 为研 究 员鉴 定 为
野葛Ｐ ｕ ｅ ｒ ａ ｒ ｉ ａ ｌ ｏ ｂ ａ ｔ ａ（ Ｗｉ ｌ ｌ ｄ ． ） Ｏ ｈ ｗ ｉ 的根 。
具有分解多种营养物质的强大酶类等特点 。因而
成 为 中草 药 微 生 物 转 化 的 主 要 功 能菌 。利 用 微 生 物转 化 中草 药 ， 与 一般 的加工 方 法相 比能大 幅改 变
增加冠状动脉血流量及降低心肌耗氧量等作用 。 在我 国 ， 葛根资源十分丰富 ， 开展对 中药材葛
根的微生物转 化研究 ， 对 提 高其 相 关 有 效 成 分 含 量， 产生 新 的活 性 成分 ， 节 省药 源 ， 减 轻毒 副 作用 等 方面都 必将 具有 重要 的经 济价值 和社 会 意义 。 通 过 反 复筛 选 ， 获得 １ 株 能够 较 好 转 化 葛根 有
１ 材 料 与 方 法
１ ． １ 材 料
杆 菌 Ｍｙ ｃ ｏ ｂ ａ ｃ ｔ ｅ ｒ ｉ ｕ ｍ ｔ ｕ ｂ ｅ ｒ ｃ ｕ ｌ ｏ ｓ ｉ ｓ 。
１ ． １ ． ４ ． ２ 皮肤 致 病 真菌
分 离 自福建 省 古 田县 红 曲米 ， 编
［ 修 回日期 ］ ２ ０ １ ５ — ０ ６ — ３ ０
效成 分 的丝状 真菌 ， 现将 该菌 株 的分 类鉴 定 结果 及
５ ） 指示菌培养基 ： 细菌类采用液体牛 肉膏蛋 白
胨培养基 ； 皮肤 致 病 真 菌 类 采 用 沙 博 弱 氏 培养 基 ；
植物致病真菌采用 Ｐ Ｄ Ａ培养基。
１ ． １ ． ４ 指 示 菌
其 转 化 中药 葛 根 的前 后 化 学 成 分 和 抑 菌 活性 的变
中药葛根微生物转化菌株的鉴定及转化特性的研究
宋艳秋 ， 陈有 为
（ １ ． 大理 大 学公 共 卫生 学 院 ， 云 南大理 ６ ７ １ ０ ０ ０ ； ２ ． 云 南大 学云 南省微 生物研 究所 ， 昆明 ６ ５ ０ ０ ９ １ ）
［ 摘 要］从 中药葛根的微生物转化试验 中， 获得 １ 株能够较好转化葛根有 效成分的丝状真菌 ， 编号为ＹＭ３ ２ ０ ７ ， 通 过对 该菌 的形 态特征观察￣ ． Ｉ Ｔ Ｓ 序列分析 ， 确定该菌为紫色红 曲￣ － Ｍｏ ｎ ａ ｓ ｃ ｕ ｓ ｐ ｕ ｒ ｐ ｕ ｒ ｅ ｕ ｓ 。经 ＨＰ Ｌ Ｃ定量分析显示 ， 转化后染料木素和葛根素含
总第 ｌ ４ ４ 期
宋艳秋 ， 陈有为
中药 葛根微 生物转化菌株的鉴定及转化特性的研究
第１ ４ 卷
Ｔ ｒ ｉ ｃ ｈ ｏ ｐ ｈ ｙ ｔ ｏ ｎ ｕ ｅ ｌ Ｔ ｕ ｃ ｏ ｓ ｕ ｍ； Ｙ Ｍ３ ０ ９ ９ 犬小 孢 子 菌 Ｍｉ ｃ ｒ ｏ ｓ —
Ｊ ＯＵＲＮＡＬ ＯＦ ＤＡＬ Ｉ Ｕ ＮＩ Ｖ ＥＲＳ Ｉ ＴＹ
第１ ４ 卷 第ｌ ２ 期 ２ ０ １ ５ 年１ ２ 月
Ｖｏ Ｉ ． １ ４ Ｎｏ． １ ２ Ｄｅ ｃ ． ２ ０１ ５
［ Ｄ Ｏ Ｉ ］ １ ０ ． ３ ９ ６ ９／ ｊ ． ｉ ｓ ｓ ｎ ． １ ６ ７ ２ － ２ ３ ４ ５ ． ２ ０ １ ５ ． １ ２ ． ０ １ ５
２ ） 液体种子培养基 ： 酵母膏肽 ， 葡萄糖培养基
（ Ｙ Ｐ Ｄ） 。
３ ） 固体 转化 培 养基 （ ｇ ／ ５ ｏ ｏ ｍＬ 玻 璃瓶 ） ： 葛根 干
素、 大豆 素 、 大 豆苷 等 ） ， 总黄 酮具 有 扩张 冠状 动 脉 、
粉、 水 磨 食 米 粉各 ２ ０ ｇ ， 起 始 含水 量 （ 相 当于 葛根 干 粉 质量 ） ５ ０ ％。 ４ ） 菌落 观 察 培 养 基 ： Ｐ Ｄ Ａ平板 培 养 基 、 察 氏平 板 培养 基 、 沙 博 弱 氏培 养基 。
化 报道 如下 。
１ ． １ ． ４ ． １ 细菌
Ｙ Ｍ１ ０ １ １ 大肠埃 希 氏杆 菌 Ｅ ｓ ｃ ｈ ｅ ｒ ｉ ｃ ｈ ｉ ａ
ｃ ｏ ｌ ｉ ； Ｙ Ｍ１ ０ ２ ８ 藤黄 八 叠球 菌 Ｓ ａ ｒ ｃ ｉ ｎ ａ ｌ ｕ ｔ ｅ ａ ； Ｙ Ｍ１ ０ ２ ９白 色 葡 萄球 菌 Ｓ ｔ ａ ｐ ｈ ｙ ｌ ｏ ｃ ｏ ｃ ｃ ｕ ｓ ａ ｌ ｂ ｕ ｓ ； Ｙ Ｍ１ ０ ３ ３ 结 核 分 枝
１ ． １ ． ３ 培 养基 １ ） 固体 斜 面培 养 基 ： 马 铃 薯葡 萄糖 琼 脂 培养 基
（ Ｐ Ｄ Ａ） 。
药性 ， 提高疗效 ， 降低毒副作用 臼 。 葛根 Ｐ ｕ ｅ ｒ ａ ｒ ｉ ａ ｌ ｏ ｂ ａ ｔ ａ 为豆科植物野葛或粉葛 的
根， 葛根 的有 效成 分主要 是异 黄酮类 化合 物 （ 如 葛根
Ｙ Ｍ ３ ０ ７ ８ 皮 炎 单孢 枝 霉
１ ． １ ． １ 转 化 菌株
Ｈ ｏ ｒ ｍｏ ｄ ｅ ｎ ｄ ｒ ｕ ｍ ｄ ｅ ｒ ｍ ａ ｔ ｉ ｔ ｉ ｄ ｉ ｓ ； Ｙ Ｍ３ ０ ９ ６疣 状 毛 癣 菌
［ 收稿 日期 ］ ２ ０ １ ５ — ０ ５ — １ ４
［ 作者简介源自文库］ 宋艳秋 ， 讲师 ， 主要从 事微 生物 学研 究．
量得 到提 高； 同时， 抑菌活性较转化前有一定程度的增强 ， 抗 菌谱 变广 。
［ 关键词 ］ 葛根 ； 微生物转化； 鉴定 ； 抑菌
［ 中图分 类号］ Ｑ ９ ３ ９ ． ５ ： Ｒ ２ ８
［ 文献标志］ ｉ ｑ － ］ Ａ
［ 文章编号 ］ １ ６ ７ ２ — ２ ３ ４ ５ （ ２ ０ １ ５ ） １ ２ — ０ ０ ６ ４ — ０ ５
微 生物转化是利 用微 生物代谢 过程 中产生 的 某个或某一系列的酶对底物进行催化反应…， 具有
选择性高 、 反应条件温和、 副产 品少 等 优 点 。真 菌 在 微 生 物 中具 有种 类 多 、 次 生代 谢 产 物多 、 并 且
号Ｙ Ｍ３ ２ ０ ７ ， 保存于云南大学微生物研究所。 １ ． １ ． ２ 葛根 云南产 中药 ， 购于昆明市 中药批发市
场， 经 过 云南 省微 生 物研 究所 陈有 为研 究 员鉴 定 为
野葛Ｐ ｕ ｅ ｒ ａ ｒ ｉ ａ ｌ ｏ ｂ ａ ｔ ａ（ Ｗｉ ｌ ｌ ｄ ． ） Ｏ ｈ ｗ ｉ 的根 。
具有分解多种营养物质的强大酶类等特点 。因而
成 为 中草 药 微 生 物 转 化 的 主 要 功 能菌 。利 用 微 生 物转 化 中草 药 ， 与 一般 的加工 方 法相 比能大 幅改 变
增加冠状动脉血流量及降低心肌耗氧量等作用 。 在我 国 ， 葛根资源十分丰富 ， 开展对 中药材葛
根的微生物转 化研究 ， 对 提 高其 相 关 有 效 成 分 含 量， 产生 新 的活 性 成分 ， 节 省药 源 ， 减 轻毒 副 作用 等 方面都 必将 具有 重要 的经 济价值 和社 会 意义 。 通 过 反 复筛 选 ， 获得 １ 株 能够 较 好 转 化 葛根 有
１ 材 料 与 方 法
１ ． １ 材 料
杆 菌 Ｍｙ ｃ ｏ ｂ ａ ｃ ｔ ｅ ｒ ｉ ｕ ｍ ｔ ｕ ｂ ｅ ｒ ｃ ｕ ｌ ｏ ｓ ｉ ｓ 。
１ ． １ ． ４ ． ２ 皮肤 致 病 真菌
分 离 自福建 省 古 田县 红 曲米 ， 编
［ 修 回日期 ］ ２ ０ １ ５ — ０ ６ — ３ ０
效成 分 的丝状 真菌 ， 现将 该菌 株 的分 类鉴 定 结果 及
５ ） 指示菌培养基 ： 细菌类采用液体牛 肉膏蛋 白
胨培养基 ； 皮肤 致 病 真 菌 类 采 用 沙 博 弱 氏 培养 基 ；
植物致病真菌采用 Ｐ Ｄ Ａ培养基。
１ ． １ ． ４ 指 示 菌
其 转 化 中药 葛 根 的前 后 化 学 成 分 和 抑 菌 活性 的变
中药葛根微生物转化菌株的鉴定及转化特性的研究
宋艳秋 ， 陈有 为
（ １ ． 大理 大 学公 共 卫生 学 院 ， 云 南大理 ６ ７ １ ０ ０ ０ ； ２ ． 云 南大 学云 南省微 生物研 究所 ， 昆明 ６ ５ ０ ０ ９ １ ）
［ 摘 要］从 中药葛根的微生物转化试验 中， 获得 １ 株能够较好转化葛根有 效成分的丝状真菌 ， 编号为ＹＭ３ ２ ０ ７ ， 通 过对 该菌 的形 态特征观察￣ ． Ｉ Ｔ Ｓ 序列分析 ， 确定该菌为紫色红 曲￣ － Ｍｏ ｎ ａ ｓ ｃ ｕ ｓ ｐ ｕ ｒ ｐ ｕ ｒ ｅ ｕ ｓ 。经 ＨＰ Ｌ Ｃ定量分析显示 ， 转化后染料木素和葛根素含
总第 ｌ ４ ４ 期
宋艳秋 ， 陈有为
中药 葛根微 生物转化菌株的鉴定及转化特性的研究
第１ ４ 卷
Ｔ ｒ ｉ ｃ ｈ ｏ ｐ ｈ ｙ ｔ ｏ ｎ ｕ ｅ ｌ Ｔ ｕ ｃ ｏ ｓ ｕ ｍ； Ｙ Ｍ３ ０ ９ ９ 犬小 孢 子 菌 Ｍｉ ｃ ｒ ｏ ｓ —