血型鉴定常见的疑难问题分析及处理

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二、正定型---红细胞自身相关问题
7.获得性类B 由于革兰氏阴性杆菌的作用，红细胞可 获得“类B”的活性。(肠梗阻、结肠、直肠癌或其 他下消化道疾病时肠壁通透性增加，细菌多糖入血， 使A型患者出现获得性类B现象) 8.可溶性血型物质增多 胃或胰腺恶性肿瘤患者血清中 可能含有过多的可溶性血型物质，这些物质中和抗A （B）血清从而影响正定型结果。
病原因而引起血型抗原减弱的可能性；对
消化系统的疾病的患者应考虑到由于产生
“类B物质”而导致血型鉴定错误的可能
性；对于多次输血的患者应考虑其体内产
生免疫性抗体的可能性，等等。
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疑难血型鉴定

共同特点:正反定型不。
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ABO血型正反定型不符及其原因
1.技术和管理错误
2.正定型---红细胞自身相关问题 3.反定型---血清自身相关问题
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ABO定型常见问题的解决方法
冷自身抗体
* * * * 将血清和红细胞分别在37孵育后再混合 用37℃温盐水洗涤红细胞、45℃热放散3分钟 巯基试剂(DTT)处理红细胞 自身吸收去除血清中的自身冷抗体
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ABO定型常见问题的解决方法
室温反应的同种抗体
* 用谱细胞做抗体鉴定 * 选择没有相应抗原的A、B细胞做反定型

血型参比实验室必须全面分析病历情况，有选择的运用相应的 实验手段来解决问题，另外在接受检测申请时，还应详细了解 患者的既往史-性别、年龄、民族、临床诊断及临床症状和患者
的输血史和用药史，如女性已婚患者还应询问其妊娠史。这些
都对解决问题至关重要。
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血型血清学的工作特点

例如：对于白血病患者，应考虑到由于疾
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正反定型不符一Biblioteka Baidu处理程序
二、 使用试管法重做试验并判断可能的原因 试管法定型的优点
1.可以反复离心看结果。 2.可以随意延长抗原抗体反应时间，可以改 变反应温度（4℃、37℃孵育），有利于弱抗原、 抗体的检出或排除冷凝集素的干扰。 3.可以观察红细胞混合外观现象。 4.可以观察红细胞溶血现象。
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小 结（二）
三、血型抗体增多（额外的反应）的原因



异常的血浆蛋白（串钱状假凝集）：多见于如多发性 骨髓瘤、巨球蛋白血症、何杰金淋巴瘤、严重的肝病 等患者 。 高分子聚合物的影响：血浆增容剂（葡聚糖、PVP等） 也会引起缗钱状凝集导致假阳性结果。 不规则抗体或自身冷凝集素的存在 纤维蛋白原的影响
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ABO定型常见问题的解决方法
获得性B红细胞
* 询问病史 * 酸化抗-B血清（pH6.0) * 唾液型物质检测
* 家系调查证明没有遗传基础
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ABO定型常见问题的解决方法
致敏红细胞造成的假阳性
洗涤后的压积受检红细胞于56℃水浴放散10分 钟，直至直抗试验阳性结果明显减弱或消失， 再次洗涤放散后的细胞用于正定型试验。
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ABO定型常见问题的解决方法
*缗钱状凝集：洗涤红细胞、盐水替代试验 * 前带现象：稀释血清后再做试验
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疑难血型举例
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疑难血型鉴定常用的辅助实验



吸收试验 放散试验（常用热放散） DTT（二硫苏糖醇）处理自身凝集红细胞 唾液血型物质测定（中和试验） 分子生物学技术进行基因型检测
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血型血清学的工作特点

鉴定技术因不同情况而异，没有一个固定的格式，因此在试验 过程中随时分析试验结果，选择最有效的方案(程序)是必要的。
3.Cis-AB型（顺式AB型） 指从父母的一方同时得到A和B 基因在一条染色体上，而另一条染色体上是从父母中另 一方来的O基因。顺式AB细胞的B抗原较弱，类似B3亚型。
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二、正定型---红细胞自身相关问题
4.嵌合体血型 体内有两群红细胞，定型时显示“混 合外观凝集”现象。也可见于ABO不同型的骨髓移植 术后。真正的嵌合体非常少见，可出现于双胞胎， 在胚胎期由于血管的吻合使得2个胎儿的血液发生混 合，2种血液都被机体认做自我，不产生抗体。人工 嵌合状态可出现于输血后（如O型红细胞输给A或B型 人），骨髓移植术后，交换输血及母体、胎儿出血。
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小 结（三）
四、血型抗体减弱的原因

血浆置换治疗后 低丙种球蛋白血症 年龄因素：婴儿、老年人抗体水平低。 骨髓移植术后
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正反定型不符一般处理程序
一、 询问、查阅病史

患者的年齡 患者的病史 患者的近期输血史 患者的近期用药史 患者是否进行了骨髓移植 患者以前的血型 患者是否进行过血浆置换术
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小 结（一）
一、红细胞抗原增多（额外的反应）的原因


红细胞致敏：直接抗人球蛋白试验阳性。 红细胞多凝集现象 红细胞发生自凝现象 获得性类B 其它：近期异型输血、嵌合体血型
二、红细胞抗原减弱的原因

异常基因型（ABO亚型等） Cis-AB型（顺式AB型） 疾病因素导致抗原减弱（常见于白血型等血液病患者） 可溶性血型物质增多（常见于胃或胰腺恶性肿瘤患者）
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二、正定型---红细胞自身相关问题
9. 红细胞发生自凝现象
10. 近期输血
患者血清中的高效
价自身冷凝集素使红细胞发生凝集。 曾异型输血，使病人血液标 本成为不同型别的红细胞混合物，定型时 显示“混合外观凝集”现象。
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三、反定型---血清自身相关问题
1.血浆置换治疗后 近期内进行大量的血浆置换治疗，影 响抗体效价，造成反定型困难。 2.异常的血浆蛋白 病人血浆中异常的白蛋白、球蛋白比 例和高浓度的纤维蛋白原等能导致缗钱状形成，造成假 凝集现象，多见于如多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症、何 杰金淋巴瘤、严重的肝病等患者 。 3.高分子聚合物的影响 血浆增容剂（葡聚糖、PVP等）也 会引起缗钱状凝集导致假阳性结果。
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三、反定型---血清自身相关问题
4.不规则抗体或自身冷凝集素的存在 受检者血浆中含 有ABO血型抗体以外的IgM类不规则抗体与试剂A、B、 O细胞上的相应抗原起反应。 5. 低丙种球蛋白血症 低丙种球蛋白血症病例 (如白血 病、淋巴瘤及使用免疫抑制剂的患者、先天丙种球蛋 白缺乏的患者、免疫缺陷的患者) 可能会因免疫球蛋 白水平全面下降使血清定型时不见凝集或仅见弱凝集 反应。
中心血型参比实验室提出的检测申请不外有以下几种
情况:
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血型参比实验室涉及的检测内容

血型鉴定困难 交叉配血困难 输血反应原因分析 其它：如母婴血型不合新生儿溶血病检测、 coombs试验、血小板抗体检测等。

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ABO血型常规定型方法

玻片法、纸片法 试管法 微量板法 微柱凝集法
血型鉴定常见的疑难问 题分析及处理
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概述
随着输血医学的发展，输血安全问题日益引起
各方面的关注，输血安全主要体现在两方面内容， 一是经血传播疾病问题，二是血液免疫学方面的 问题即血型血清方面的问题。
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概述

血型血清学不同于一般的临床医学检验，有其自身特 点。一般临床医学检验的工作流程十分明了，即接受 临床医生的申请，按各项检验的操作规程完成其申请 内容并反馈结果。而血型血清学方面的检查则与此有 很大的不同，临床医生及各医院输血科向血站和血液
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ABO定型常见问题的解决方法
ABO亚型
* 正定：抗-A、抗-B、抗-AB、抗-A1、抗-H * 反定：A1c、A2c、Bc、Oc、自身对照 *正反定型在不同温度下反应并比较凝集强度的变化 * 吸收放散试验 * 唾液血型物质检测 * 有条件者可作家系调查或PCR检测血型基因
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一、技术和管理错误
（1）标本或试剂搞错，造成假阳性或假阴性结果。 （2）器材不洁产生假阳性结果。
（3）试剂污染或失效产生假阳性或假阴性结果。
（4）离心过度或不足，产生假阳性或假阴性结果。
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二、正定型---红细胞自身相关问题
1.红细胞致敏 直接抗球蛋白试验阳性的红细胞（如自身 免疫性溶血性贫血患者的红细胞）在含高蛋白介质的试 剂中可发生凝集，产生假阳性结果。 2. 异常基因型 ABO亚型的弱抗原常规方法难以检出，产 生假阴性结果。
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ABO定型常见问题的解决方法
A、B抗原减弱
* * * * * 延长孵育时间、4℃孵育 酶处理红细胞 吸收放散试验 唾液血型物质检测 既往血型调查
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ABO定型常见问题的解决方法
抗体减弱
* * * * 延长孵育时间、4℃孵育 酶处理试剂红细胞 既往血型调查 免疫球蛋白水平测定
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二、正定型---红细胞自身相关问题
5. 疾病因素导致抗原减弱 常见的如白血病、何杰金病、 10号染色体转位、红细胞系统极度增生如海洋性贫血等 病人 ABO 血型抗原可受到暂时抑制，抗原减弱检出困难。 红细胞 ABO 抗原减弱与病程有关，病情缓解时抗原性会 恢复。 6.红细胞多凝集现象 当病人感染细菌或病毒后，病毒或 细菌产生的酶使红细胞上掩蔽的T 抗原暴露激活，由于 正常人血清中都含有抗-T抗体，因此可与正常人血清产 生凝集反应，正定型试验假阳性。
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三、反定型---血清自身相关问题
6.年龄因素 在未产生自己抗体的婴儿、由母亲被 动获得抗体的婴儿，或抗体水平下降的老人，试 验时可出现不见凝集或仅见弱凝集反应等异常结 果。
7.骨髓移植术后 ABO不同型骨髓移植患者术后。 8.纤维蛋白原的影响 使用血浆或凝固不完全的血 清会形成很小的纤维蛋白凝集包裹的红细胞凝块。