妇科白带涂片多功能染色联合革兰氏染色检查的临床分析
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1、BTR 法严格按照试剂说明书进行染色：白 带涂片彻底干后滴 R1 液 3～4 滴 （红色） 展开盖 满涂膜，染色 15S 后水洗，倒去多余水份，滴 R2 液 （蓝色） 3～4 滴，展开盖满涂膜，染色 15s 后 水洗，趁湿观察，如怀疑有革兰氏阴性双球菌， 干后用油镜观察。
2、革兰氏染色法 按照说明书进行染色：涂片
资料与方法 一、一般资料 随机收集 2017 年 1 月 -2017 年 12 月我院妇科门诊就诊的 1 022 例妇科白带标本。年龄 19～62 岁，平均 40.5 岁。
二、仪器和试剂 双目显微镜、BTR 染色液、 革兰氏染色液。
三、方法 用医用棉签采集少量分泌物，直 接涂在干净玻片的 1/3 处，小指大小，厚薄均匀， 自然晾干。每份标本同时进行 BTR 法染色法和革 兰氏染色法进行检测并根据白细胞、阴道乳酸杆 菌、杂菌的数量多少判定清洁度，分为Ⅰ-Ⅳ度， Ⅰ-Ⅱ度为正常，Ⅲ-Ⅳ度提示炎症、滴虫性阴道 炎、淋球菌性阴道炎、细菌性阴道炎等[1]。白细胞 以每高倍镜所见个数的平均值表示，滴虫、真菌 以检出即为阳性进行计数，线索细胞以每低倍镜 所见个数的平均值表示，细菌分为阴道乳酸杆菌 和杂菌，分别以占细菌总数的百分比表示，杂菌 包括革兰氏阳性球菌，革兰氏阴性球菌等等[2]，革 兰氏阴性双球菌以检出为阳性进行统计。
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白带检查是一项妇科常规检查，传统的白带 检查采用生理盐水直接涂片后镜检，受外界因素 及检测人员经验等因素影响较大，现我院已逐步 淘汰，采用了妇科白带检查中多功能染色法 （BTR），笔者运用 BTR 法联合革兰氏染色对 1 022 例白带标本进行染色后分级检测，并对常规指标 进行统计学分析，现报告如下。
表2 BTR法和革兰氏染色法清洁度判定结果（ =1 022）
清洁度 Ⅰ度 Ⅱ度 Ⅲ度 Ⅳ度
BTR 法 28 245 506 243
革兰氏染色法 32 176 696 118
2 种方法联合检测 28 208 524 262
收稿日期：2018-04-17 作者简介：陈剑 （1979～） 男，本科，主治医师，从事检验工作 17 年。 通信作者：冯磊 E-mail：fngj2004@163.com
干后用火焰固定。⑴加龙胆紫液染色 10～20s，水
洗后甩干。⑵加革兰氏碘溶液染色 10～20s，水洗 后甩干。⑶加脱色液脱色 10～20s，水洗后甩干。
⑷加沙黄溶液染色 10～20s 后水洗，自然干燥后油 镜下镜检。
四、统计学处理 采用 SPSS19.0 统计学软件
进行数据处理及统计学分析，采用 χ2 检验进行比 较， <0.05 结果有显著性差异。
［参考文献］
［1］ 尚红，王毓三，申子瑜.全国临床检验操作规程[M].第 4 版.北京：人民卫生出版社，2015：197.
［2］ 只晓娥，吴晓红.阴道清洁度判断标准的探讨[J].中国计 划生育学杂志,2006,123(1):57-58.
［3］ 李鸿滨，韦吕伟，伍桂枝.阴道分泌物检测方法的研究 进展[J].检验医学与临床，2013，10 (23):3215-3217.
细菌与环境对比鲜明，结构清晰易读，杂菌检出 率高于 BTR 法，尤其是对革兰氏阴性双球菌的检 出更有帮助，二者有显著差异。因此，在细菌的 检测上革兰氏染色优于 BTR 法。
综上所述，2 种方法各有侧重点，BTR 法简便快 捷，易操作。革兰氏染色操作繁琐，步骤多，但是在 检测细菌方面优于 BTR 法。2 种方法联合检测提高 了Ⅲ度和Ⅳ度白带标本的检出率。在大型妇科普查 和癌症筛查中，通常使用 BTR 法对白带进行染色镜 检，发现杂菌、线索细胞、革兰氏阴性双球菌等时联 合革兰氏染色镜检提高准确率十分有必要。
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云南医药 2018 年第 39 卷第 5 期
的湿片法。而革兰氏染色法是一种经典的鉴别染 色法，染色后细菌与环境形成鲜明的对比，可以 清楚的观察细菌形态、排列及结构，区分革兰氏 阴性菌和阳性菌，但是操作繁琐，不利于普查。 二者各有优缺点。通过对比发现，⑴BTR 检测法 中，白细胞的检出率＞革兰氏染色，而且 BTR 法 白细胞的形态颜色等优于革兰氏染色，两者有显 著性差异。分析原因，革兰氏染色火焰固定时在 一定程度上破坏了白细胞的结构。因此，BTR 法 辨别白细胞更准确。2 种方法对线索细胞、真菌的 检出率均较高，二者无显著性差异，2 种方法染色 后都能根据颜色、形态很好的做出准确的判断。 ⑵2 种方法对线索细胞、真菌的检出率均较高，二 者无显著性差异，2 种方法染色后都能根据颜色、 形态很好的做出准确的判断。⑶滴虫经 BTR 法染 色后，形态颜色甚至鞭毛都清晰易读，而革兰氏 染色经过火焰固定及染色后与白细胞混在一起不 易辨认，因此，BTR 法对滴虫的检出率大大高于 革兰氏染色，二者有显著差异。⑷革兰氏染色后，
云南医药 2018 年第 39 卷第 5 期
百度文库·经验交流·
妇科白带涂片多功能染色联合革兰氏染色检查的临床分析
陈 剑，张大莲，罗曼玲，徐文波，朱 莹，冯 磊
（玉溪市人民医院 检验科，云南 玉溪 653100）
关键词：多功能染色；革兰氏染色；联合检测 中图分类号：R446.1 文献标志码：B 文章编号：1006-4141 （2018） 05-0429-02
结 果 BTR 法和革兰氏染色法结果和清洁 度比较见表 1 和表 2。
讨 论 妇科常规检查中，BTR 法操作简便，
染色清晰易读，不需要特殊设备[3]，在一张涂片上 同时作滴虫、念珠菌属、线索细胞、纤毛菌、白 细胞、核异质细胞等多项检查，对病原体、细胞
等物质采用不同的染液着色，从而染成不同的颜 色，达到对病原体的鉴别作用，已逐步取代传统
表1 BTR法和革兰氏染色法结果比较（ =1 022）
检测项目 白细胞数 滴虫 真菌 线索细胞 杂菌 革兰氏阴性双球菌 阴道乳酸杆菌
BTR 法 22±5
68 206 212 28±6 18 52±8
革兰氏染色法 12±8 10 208 215 32±4 25 66±7
值 <0.01 <0.01 >0.05 >0.05 <0.01 <0.01 <0.01
2、革兰氏染色法 按照说明书进行染色：涂片
资料与方法 一、一般资料 随机收集 2017 年 1 月 -2017 年 12 月我院妇科门诊就诊的 1 022 例妇科白带标本。年龄 19～62 岁，平均 40.5 岁。
二、仪器和试剂 双目显微镜、BTR 染色液、 革兰氏染色液。
三、方法 用医用棉签采集少量分泌物，直 接涂在干净玻片的 1/3 处，小指大小，厚薄均匀， 自然晾干。每份标本同时进行 BTR 法染色法和革 兰氏染色法进行检测并根据白细胞、阴道乳酸杆 菌、杂菌的数量多少判定清洁度，分为Ⅰ-Ⅳ度， Ⅰ-Ⅱ度为正常，Ⅲ-Ⅳ度提示炎症、滴虫性阴道 炎、淋球菌性阴道炎、细菌性阴道炎等[1]。白细胞 以每高倍镜所见个数的平均值表示，滴虫、真菌 以检出即为阳性进行计数，线索细胞以每低倍镜 所见个数的平均值表示，细菌分为阴道乳酸杆菌 和杂菌，分别以占细菌总数的百分比表示，杂菌 包括革兰氏阳性球菌，革兰氏阴性球菌等等[2]，革 兰氏阴性双球菌以检出为阳性进行统计。
·429·
白带检查是一项妇科常规检查，传统的白带 检查采用生理盐水直接涂片后镜检，受外界因素 及检测人员经验等因素影响较大，现我院已逐步 淘汰，采用了妇科白带检查中多功能染色法 （BTR），笔者运用 BTR 法联合革兰氏染色对 1 022 例白带标本进行染色后分级检测，并对常规指标 进行统计学分析，现报告如下。
表2 BTR法和革兰氏染色法清洁度判定结果（ =1 022）
清洁度 Ⅰ度 Ⅱ度 Ⅲ度 Ⅳ度
BTR 法 28 245 506 243
革兰氏染色法 32 176 696 118
2 种方法联合检测 28 208 524 262
收稿日期：2018-04-17 作者简介：陈剑 （1979～） 男，本科，主治医师，从事检验工作 17 年。 通信作者：冯磊 E-mail：fngj2004@163.com
干后用火焰固定。⑴加龙胆紫液染色 10～20s，水
洗后甩干。⑵加革兰氏碘溶液染色 10～20s，水洗 后甩干。⑶加脱色液脱色 10～20s，水洗后甩干。
⑷加沙黄溶液染色 10～20s 后水洗，自然干燥后油 镜下镜检。
四、统计学处理 采用 SPSS19.0 统计学软件
进行数据处理及统计学分析，采用 χ2 检验进行比 较， <0.05 结果有显著性差异。
［参考文献］
［1］ 尚红，王毓三，申子瑜.全国临床检验操作规程[M].第 4 版.北京：人民卫生出版社，2015：197.
［2］ 只晓娥，吴晓红.阴道清洁度判断标准的探讨[J].中国计 划生育学杂志,2006,123(1):57-58.
［3］ 李鸿滨，韦吕伟，伍桂枝.阴道分泌物检测方法的研究 进展[J].检验医学与临床，2013，10 (23):3215-3217.
细菌与环境对比鲜明，结构清晰易读，杂菌检出 率高于 BTR 法，尤其是对革兰氏阴性双球菌的检 出更有帮助，二者有显著差异。因此，在细菌的 检测上革兰氏染色优于 BTR 法。
综上所述，2 种方法各有侧重点，BTR 法简便快 捷，易操作。革兰氏染色操作繁琐，步骤多，但是在 检测细菌方面优于 BTR 法。2 种方法联合检测提高 了Ⅲ度和Ⅳ度白带标本的检出率。在大型妇科普查 和癌症筛查中，通常使用 BTR 法对白带进行染色镜 检，发现杂菌、线索细胞、革兰氏阴性双球菌等时联 合革兰氏染色镜检提高准确率十分有必要。
·430·
云南医药 2018 年第 39 卷第 5 期
的湿片法。而革兰氏染色法是一种经典的鉴别染 色法，染色后细菌与环境形成鲜明的对比，可以 清楚的观察细菌形态、排列及结构，区分革兰氏 阴性菌和阳性菌，但是操作繁琐，不利于普查。 二者各有优缺点。通过对比发现，⑴BTR 检测法 中，白细胞的检出率＞革兰氏染色，而且 BTR 法 白细胞的形态颜色等优于革兰氏染色，两者有显 著性差异。分析原因，革兰氏染色火焰固定时在 一定程度上破坏了白细胞的结构。因此，BTR 法 辨别白细胞更准确。2 种方法对线索细胞、真菌的 检出率均较高，二者无显著性差异，2 种方法染色 后都能根据颜色、形态很好的做出准确的判断。 ⑵2 种方法对线索细胞、真菌的检出率均较高，二 者无显著性差异，2 种方法染色后都能根据颜色、 形态很好的做出准确的判断。⑶滴虫经 BTR 法染 色后，形态颜色甚至鞭毛都清晰易读，而革兰氏 染色经过火焰固定及染色后与白细胞混在一起不 易辨认，因此，BTR 法对滴虫的检出率大大高于 革兰氏染色，二者有显著差异。⑷革兰氏染色后，
云南医药 2018 年第 39 卷第 5 期
百度文库·经验交流·
妇科白带涂片多功能染色联合革兰氏染色检查的临床分析
陈 剑，张大莲，罗曼玲，徐文波，朱 莹，冯 磊
（玉溪市人民医院 检验科，云南 玉溪 653100）
关键词：多功能染色；革兰氏染色；联合检测 中图分类号：R446.1 文献标志码：B 文章编号：1006-4141 （2018） 05-0429-02
结 果 BTR 法和革兰氏染色法结果和清洁 度比较见表 1 和表 2。
讨 论 妇科常规检查中，BTR 法操作简便，
染色清晰易读，不需要特殊设备[3]，在一张涂片上 同时作滴虫、念珠菌属、线索细胞、纤毛菌、白 细胞、核异质细胞等多项检查，对病原体、细胞
等物质采用不同的染液着色，从而染成不同的颜 色，达到对病原体的鉴别作用，已逐步取代传统
表1 BTR法和革兰氏染色法结果比较（ =1 022）
检测项目 白细胞数 滴虫 真菌 线索细胞 杂菌 革兰氏阴性双球菌 阴道乳酸杆菌
BTR 法 22±5
68 206 212 28±6 18 52±8
革兰氏染色法 12±8 10 208 215 32±4 25 66±7
值 <0.01 <0.01 >0.05 >0.05 <0.01 <0.01 <0.01