总糖的测定

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➢如果滴定后样品液的颜色变浅后又再 变深,说明滴定过量,需重新滴定。
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5.滴定时反应液不变色的原因及处理:
➢可能是样液含糖量过少或斐林试剂太 浓;
➢ 应加大称样量;
➢ 或减少稀释倍数; ➢ 或减少斐林试剂的用量,可各取1~
3mL,
计算时按比例折算。
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3. 计算
X
m M V
100
500
式中
X — 样品中还原糖的含量(以葡萄糖计),%;
m — 10mL斐林试剂相当于还原糖(以葡萄糖计)
的质量,g;
V — 测定时平均消耗样品溶液的体积,mL;
M — 样品质量,g。
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4.变色过程:
➢样液由深蓝色→蓝紫色→紫红色→红 色
➢或由深蓝色→蓝紫色→黄绿色→黄红 色
来自百度文库
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2. 操作方法
2.1 样品处理:将样品在组织捣碎机中捣成匀浆,称取约10--20g样品,溶解后置于250mL容量瓶中,加蒸馏水至刻度,混 匀,静置,过滤60-70mL。
2.2 样品转化:吸取处理好的样液50mL于100mL容量瓶中, 加盐酸5mL,摇匀。置水浴中加热,使溶液在2~2.5min内升 温至70℃,保持7.5~8min,使全部加热时间为10min。取出 迅 速 冷 却 至 室 温 。 用 20%NaOH 溶 液 中 和 ( 加 入 酚 酞 指 示 剂 1~2滴),样液至微红色为止,加蒸馏水至刻度,摇匀,注入 滴定管中。
实验一 总糖的测定
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1. 实验原理
斐林试剂法是利用斐林试剂的甲、乙液混合后, 甲液的硫酸铜与乙液的氢氧化钠作用生成天蓝色的氢 氧化铜沉淀,该沉淀在碱性溶液中与乙液的酒石酸钾 钠反应生成复杂的化合物(酒石酸钾钠铜)。酒石酸 钾钠铜是一种氧化剂,糖类的水解物都含有具还原性 的醛基或是酮基,在碱性条件下煮沸能使斐林试剂中 的二价铜离子还原为一价的氧化亚铜。根据斐林试剂 完全还原所需的糖量,计算出样品的总糖含量。
去,出现粉红色(或浅黄色)为终点。
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2.3.2 样品溶液正式测定:吸取5.0mL斐林氏甲 液 及 5.0mL 乙 液 ( 先 加 乙 液 再 加 甲 液 ) , 置 于 150mL锥形瓶中,加蒸馏水25mL,从滴定管中 滴加比预测体积少1~2mL的样品溶液,加入玻璃 珠3~5粒,控制在2min内加热至沸,然后趁沸继 续以每2秒1滴的速度滴定,直至溶液蓝色褪去, 出现粉红色(或浅黄色)终点,记录消耗样液的总 体积。同法平行操作2~3份,得出平均消耗体积。
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2.3 样液测定
2.3.1 样品溶液预测:吸取5.0mL斐林氏甲液及
5.0mL乙液(先加乙液再加甲液),置于三角瓶中,
加蒸馏水25mL,加入玻璃珠3~5粒,控制在2min
内加热至沸,趁沸以先快后慢的速度,从滴定管中
滴加样品溶液,并保持溶液沸腾状态,待溶液颜色
变浅时,以每秒1滴的速度滴定,直至溶液蓝色褪
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