齐墩果酸5种含量测定方法的比较研究_邸金明
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２ 方 法 ２．１ 可 见 分 光 光 度 法 ２．１．１ 测定波长的 选 择 取 齐 墩 果 酸 对 照 品 适 量， 精密称定，用甲醇溶 解，制 成 一 定 质 量 浓 度 的 齐 墩 果 酸标准溶液；精 密 移 取 齐 墩 果 酸 标 准 溶 液 ０．６０ ｍＬ 于 具 塞 试 管 中 ，挥干 甲 醇，加 入 ５０ｇ·Ｌ－１ 的 香 草 醛－冰
ｄｅｔｅｃｔ ｏｌｅａｎｏｌｉｃ ａｃｉｄ ｃｏｎｔｅｎｔ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅｌｙ ａｎｄ ｓｕｉｔａｂｌｅ ｆｏｒ ｔｈｅ ｑｕａｌｉｔｙ ｃｏｎｔｒｏｌ ｏｆ ｏｌｅａｎｏｌｉｃ ａｃｉｄ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ｏｌｅａｎｏｌｉｃ ａｃｉｄ；ｃｏｎｔｅｎｔ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ；ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄｓ；ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ
关 键 词 ：齐 墩 果 酸 ；含 量 测 定 ；测 定 方 法 ；比 较
ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００４－２４０７．２０１３．０５．０１７ 中 图 分 类 号 ：Ｒ９２７．２ 文 献 标 志 码 ：Ａ 文 章 编 号 ：１００４－２４０７（２０１３）０５－０４８３－０４
基金 项 目：国 家 级 大 学 生 创 新 性 实 验 计 划 项 目 （Ｎｏ． ０９１０６９８４８）；西 安 交 通 大 学 本 科 生 开 放 实 验 项 目
作 者 简 介 ：邸 金 明 ，男 ，２００８ 级 本 科 生 ＊通 信 作 者 ：郭 琦 ，女 ，副 教 授
司）；ＡＮＡＳＴＡＲ 色 谱 工 作 站 （中 国 奥 泰 科 技 有 限 公 司）；ＣＳ－９３０ 薄 层 色 谱 扫 描 仪 （日 本 ＳＨＩＭＡＤＺＵ 公 司）；紫外分光光度计（ＳＰ－２１０２ＵＶ 型，上海光谱 仪 器 有限公司）；ＡＵＹ２２０电子分析天平（日本 ＳＨＩＭＡＤ－ ＺＵ 公司）；ＫＱ３２００ＤＢＢ 型 数 控 超 声 波 清 洗 器 （昆 山 禾创超 声 仪 器 有 限 公 司 ）；ＲＣＨ－６４２Ａ４５ 电 吹 风 （上 海万里风厂）；１０１－２ＡＢ 电热恒温鼓风干燥箱（天津市 泰 斯 特 仪 器 有 限 公 司 ）；微 量 进 样 器 （宁 波 市 镇 海 玻 璃 仪 器 厂 ）；Ｐ－０１ 层 析 缸 （上 海 信 谊 仪 器 厂 ）。 １．２ 试药 齐墩 果 酸 对 照 品 （中 国 药 品 生 物 制 品 检 定所，供含量测定用，１１０７０９－２００５０５）；齐墩果 酸 原 料 药（陕西森弗生物技术有限公司，批号 ＱＤＧＳ０９０４１７， ＱＤＧＳ０９０４１８）；冰醋酸、高氯 酸、硫 酸、乙 醇、甲 醇、氢 氧化钾等均为分析纯；硅 胶 Ｇ（青 岛 海 洋 化 工 有 限 公 司）。
ｈｔｔｐ：／／ＸＢＹＺ．ｃｂｐｔ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ
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西 北 药 学 杂 志 ２０１３ 年 ９ 月wk.baidu.com 第 ２８ 卷 第 ５ 期
醋酸溶液０．２０ｍＬ、高氯酸０．８０ｍＬ，摇匀，置于７０ ℃水 浴中１５ｍｉｎ，冷至室 温，加 入 冰 醋 酸 ４．００ ｍＬ，摇 匀。 以 不加齐墩果酸标准溶液与上述同法操作制备的溶液为 空白，在紫外分光光度计上，于４００～８００ｎｍ 波长范围内 扫描。结果表明，齐墩果酸在５４８ｎｍ 波长处有最大吸 收，因此选定５４８ｎｍ 为测定波长。 ２．１．２ 线 性 范 围 考 察 分 别 吸 取 齐 墩 果 酸 标 准 溶 液 （１２１．９ ｍｇ·Ｌ－１）０．２０，０．４０，０．６０，０．８０ 和 １．００ ｍＬ，置 于 具 塞 试 管 中 ，按２．１．１ 方 法 处 理 ，同 时 做 空 白实验，在 ５４８ｎｍ 波长处测定吸光度值。 以齐墩果 酸的质量浓度（Ｃ，ｍｇ·Ｌ－１）为横 坐 标、吸 光 度 值（Ａ） 为纵坐标，进行线性回归，回 归 方 程：Ａ＝０．０３９ ８Ｃ＋ ０．００６ １，ｒ＝０．９９９ ０。结 果 表 明，齐 墩 果 酸 质 量 浓 度 在 ４．８７６～２４．３８ ｍｇ·Ｌ－１范 围 内 与 吸 光 度 值 呈 现 良 好的线性关系。 ２．１．３ 含 量 测 定 取 本 品 适 量 ，精 密 称 定 ，用 甲 醇 溶 解，制成 质 量 浓 度 约 为 １００ ｍｇ·Ｌ－１ 的 溶 液，摇 匀。 精密 移 取 该 溶 液 一 定 量，置 于 具 塞 试 管 中，按 ２．１．２ 项下 处 理；同 时 做 空 白 实 验，在 ５４８ｎｍ 波 长 处 测 定 吸 光 度 值 ，计 算 即 得 。 ２．２ 紫 外 分 光 光 度 法 ２．２．１ 测 定 波 长 的 选 择 精 密 称 取 齐 墩 果 酸 对 照 品 适量，加甲醇溶解，制成质 量 浓 度 为 ２．０３２ｇ·Ｌ－１的 齐墩果 酸 储 备 液；精 密 吸 取 齐 墩 果 酸 储 备 液 ０．５０ ｍＬ，置于１０ ｍＬ 量 瓶 中，加 甲 醇 稀 释 至 刻 度，摇 匀， 制 成 质 量 浓 度 为 １０１．６ ｍｇ·Ｌ－１的 溶 液 ，以 甲 醇 为 空 白，于２００～４００ｎｍ 波长范围内扫描。 结果表 明，齐 墩果酸在２０７ｎｍ 波长 处 有 最 大 吸 收，但 因 甲 醇 在 此 波长也 有 吸 收，为 了 消 除 溶 剂 对 测 定 的 影 响，故 选 ２１５ｎｍ 为检测波长。 ２．２．２ 线 性 范 围 考 察 精 密 量 取 齐 墩 果 酸 储 备 液 ０．２０，０．３５，０．５０，０．６５和０．８０ ｍＬ，分别置于 １０ ｍＬ 量瓶中，加甲 醇 稀 释 至 刻 度，摇 匀，制 成 质 量 浓 度 为 ４０．６４，７１．１２，１０１．６，１３２．１ 和 １６２．６ ｍｇ·Ｌ－１ 的 标 准系列溶液。 以甲醇为空白，于 ２１５ｎｍ 波长处测定 吸光度值 Ａ。以质 量 浓 度 Ｃ（ｍｇ·Ｌ－１）对 Ａ 进 行 线 性 回 归 ，得 回 归 方 程 为 ：Ａ＝０．００４ ９Ｃ＋０．００４ １，ｒ＝ ０．９９９ ２。结 果 表 明，齐 墩 果 酸 质 量 浓 度 在 ４０．６４～ １６２．６ｍｇ·Ｌ－１范围内，吸光度 值 与 相 应 的 质 量 浓 度 呈良好的线性关系。 ２．２．３ 含 量 测 定 取 本 品 适 量 ，精 密 称 定 ，用 甲 醇 溶 解 ，制 成 质 量 浓 度 约 为 １００ ｍｇ·Ｌ－１的 溶 液 ，摇 匀 ，在 ２１５ｎｍ 波长处测定吸光度值，计算即得。 ２．３ 薄 层 色 谱 法 ２．３．１ 色谱条件 展开剂为氯仿－丙酮（４∶１）；显色剂 为１００ｇ·Ｌ－１硫 酸 乙 醇 溶 液；测 定 波 长λｓ＝５２５ｎｍ，参
齐墩果酸（ｏｌｅａｎｏｌｉｃ ａｃｉｄ，ＯＡ）为 一 种 天 然 产 物 化学成分，属于β－香 树 脂 醇 型 五 环 三 萜 类 化 合 物，广 泛 存 在 于 自 然 界 多 种 植 物 中 。 据 不 完 全 统 计 ，齐 墩 果 酸存在 于 约 ６０ 个 科 １９０ 种 植 物 中［１］，以 游 离 或 结 合 成苷的形式存在。 研 究 表 明，齐 墩 果 酸 毒 性 很 低，具 有 抗 病 毒 、抗 炎 、增 强 免 疫 和 抑 制 免 疫 （免 疫 双 向 调 节 作 用 ）、抑 制 血 小 板 凝 集 、降 血 脂 、降 糖 、保 肝 、护 肾 、抗 艾滋病毒等多种生物活性 。 ［２］ 目前卫生部颁标 准 中， 齐墩果酸的含量测定方法为酸碱滴定法 。 ［３］ 同 时，各 文献报道的含量 测 定 方 法 还 有 高 效 液 相 色 谱 法 、 ［４，６］ 薄层色谱法［５－６］、紫 外 分 光 光 度 法［７］等。 笔 者 分 别 用 酸 碱 滴 定 法 （标 准 法 ）、可 见 分 光 光 度 法 （Ｖｉｓ）、紫 外 分 光光度法（ＵＶ）、薄 层 色 谱 法（ＴＬＣ）和 高 效 液 相 色 谱 法（ＨＰＬＣ）对齐墩果酸含量进行考察，同 时 对 测 定 结 果进行了比较。 １ 仪 器 与 试 药 １．１ 仪器 ＬＣ－１０Ａ 高 效 液 相 色 谱 仪 （日 本 岛 津 公
Ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ ｓｔｕｄｙ ｏｎ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄｓ ｆｏｒ ｏｌｅａｎｏｌｉｃ ａｃｉｄ
ＤＩ Ｊｉｎｍｉｎｇ，ＬＩＵ Ｂｉｎｂｉｎ，ＺＨＡＯ Ｊｉｎｇ，ＧＵＯ Ｑｉ＊ （Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，Ｘｉ′ａｎ Ｊｉａｏｔｏｎｇ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｘｉ′ａｎ ７１００６１，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｃｏｍｐａｒｅ ｔｈｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄｓ ｆｏｒ ｏｌｅａｎｏｌｉｃ ａｃｉｄ．Ｍｅｔｈｏｄｓ ① Ａｃｉｄ－ｂａｓｅ ｔｉｔｒａｔｉｏｎ ａｎａｌｙｓｉｓ ｍｅｔｈｏｄ； ② ｖｉｓｉｂｌｅ ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｙ ａｎａｌｙｓｉｓ（Ｖｉｓ）：ｕｓｉｎｇ ｖａｎｉｌｌｉｎ－ｇｌａｃｉａｌ ａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ－ｐｅｒｃｈｌｏｒｉｃ ａｃｉｄ ｓｏｌｕｔｉｏｎ ａｓ ｔｈｅ ｃｏｌｏｒ ｄｅｖｅｌｏｐｉｎｇ ｒｅａ－ ｇｅｎｔ，ａｎｄ ｄｅｔｅｃｔｉｎｇ ａｔ ｔｈｅ ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ ｏｆ ５４８ｎｍ；③ ｕｌｔｒａｖｉｏｌｅｔ ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｙ ａｎａｌｙｓｉｓ（ＵＶ）：ｕｓｉｎｇ ｍｅｔｈａｎｏｌ ａｓ ｔｈｅ ｓｏｌｖｅｎｔ ａｎｄ ｄｅｔｅｃｔｉｎｇ ａｔ ｔｈｅ ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ ｏｆ ２１５ｎｍ；④ ＴＬＣ ｓｃａｎｎｉｎｇ ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ：ｕｓｉｎｇ ｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍ－ａｃｅｔｏｎｅ （４∶１）ａｓ ｔｈｅ ｄｅｖｅｌｏｐｉｎｇ ｓｏｌｖｅｎｔ，１００ｇ·Ｌ－１ ｅｔｈａｎｏｌ ｓｏｌｕｔｉｏｎ ｏｆ ｓｕｌｆｕｒｉｃ ａｃｉｄ ａｓ ｔｈｅ ｃｏｌｏｒ ｄｅｖｅｌｏｐｉｎｇ ｒｅａｇｅｎｔ，５２５ｎｍ ａｓ ｔｈｅ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ ａｎｄ ７００ｎｍ ａｓ ｔｈｅ ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ；⑤ ｈｉｇｈ ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ ｌｉｑｕｉｄ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ （ＨＰＬＣ）：ｓａｍｐｌｅｓ ｗｅｒｅ ａｎａｌｙｚｅｄ ｏｎ ａ Ｃ１８ｃｏｌ－
ｕｍｎ ｂｙ ｕｓｉｎｇ ｍｅｔｈａｎｏｌ ａｓ ｔｈｅ ｍｏｂｉｌｅ ｐｈａｓｅ．Ｔｈｅ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ ｗａｓ ２２０ｎｍ．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｃｏｎｔｅｎｔｓ ｏｆ ｔｈｅ ｓａｍｅ ｓａｍｐｌｅｓ ｗｅｒｅ ｍｅａｓｕｒｅｄ ｂｙ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ａｎａｌｙｓｉｓ ｍｅｔｈｏｄｓ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｔｈｅ ｍｅａｓｕｒｅｄ ｖａｌｕｅｓ ｏｆ ｆｉｖｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄｓ ｗｅｒｅ ｃｏｍｐａｒｅｄ ａｎｄ ｅｖａｌｕａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｖａｒｉａｎｃｅ ａｎａｌｙｓｉｓ．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｎｏ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ （Ｐ ＜０．０５）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｔｈｅ ｆｉｖｅ ｍｅｔｈｏｄｓ ｃａｎ
西 北 药 学 杂 志 ２０１３ 年 ９ 月 第 ２８ 卷 第 ５ 期
４８３
·药物分析·
齐墩果酸５种含量测定方法的比较研究
邸金明，刘彬彬，赵 婧，郭 琦＊ （西安交通大学药学院，西安 ７１００６１）
摘要：目的 比较５种分析方法测定齐墩果酸的含量。方法 ①酸碱滴定法；②可见分光光度法（Ｖｉｓ）：香草醛－冰醋酸－高氯 酸 溶 液为显色剂，在５４８ｎｍ 波长处测定；③紫外分光光度法（ＵＶ）：溶剂为甲醇，测定波长为２１５ｎｍ；④薄层扫描 测 定 法（ＴＬＣ）：展 开 剂为氯仿－丙酮（４∶１），以１００ｇ·Ｌ－１硫酸乙醇溶液为显色剂，测定波长λＳ为５２５ｎｍ，参比波长λＲ为７００ｎｍ；⑤高效液相 色 谱 法 （ＨＰＬＣ）：以十八烷基硅烷键合硅胶为填 充 剂，甲 醇 为 流 动 相，检 测 波 长 为 ２２０ｎｍ。 结 果 分 别 用 不 同 的 分 析 方 法 测 定 同 一 样 品，测量值彼此之间进行方差分析，Ｐ＜０．０５，即差异无统计学意义，结果基本一致。结论 ５种分析方法均 能 有 效 地 测 定 齐 墩 果 酸 的 含 量 ，适 用 于 齐 墩 果 酸 的 质 量 控 制 。
ｄｅｔｅｃｔ ｏｌｅａｎｏｌｉｃ ａｃｉｄ ｃｏｎｔｅｎｔ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅｌｙ ａｎｄ ｓｕｉｔａｂｌｅ ｆｏｒ ｔｈｅ ｑｕａｌｉｔｙ ｃｏｎｔｒｏｌ ｏｆ ｏｌｅａｎｏｌｉｃ ａｃｉｄ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ｏｌｅａｎｏｌｉｃ ａｃｉｄ；ｃｏｎｔｅｎｔ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ；ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄｓ；ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ
关 键 词 ：齐 墩 果 酸 ；含 量 测 定 ；测 定 方 法 ；比 较
ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００４－２４０７．２０１３．０５．０１７ 中 图 分 类 号 ：Ｒ９２７．２ 文 献 标 志 码 ：Ａ 文 章 编 号 ：１００４－２４０７（２０１３）０５－０４８３－０４
基金 项 目：国 家 级 大 学 生 创 新 性 实 验 计 划 项 目 （Ｎｏ． ０９１０６９８４８）；西 安 交 通 大 学 本 科 生 开 放 实 验 项 目
作 者 简 介 ：邸 金 明 ，男 ，２００８ 级 本 科 生 ＊通 信 作 者 ：郭 琦 ，女 ，副 教 授
司）；ＡＮＡＳＴＡＲ 色 谱 工 作 站 （中 国 奥 泰 科 技 有 限 公 司）；ＣＳ－９３０ 薄 层 色 谱 扫 描 仪 （日 本 ＳＨＩＭＡＤＺＵ 公 司）；紫外分光光度计（ＳＰ－２１０２ＵＶ 型，上海光谱 仪 器 有限公司）；ＡＵＹ２２０电子分析天平（日本 ＳＨＩＭＡＤ－ ＺＵ 公司）；ＫＱ３２００ＤＢＢ 型 数 控 超 声 波 清 洗 器 （昆 山 禾创超 声 仪 器 有 限 公 司 ）；ＲＣＨ－６４２Ａ４５ 电 吹 风 （上 海万里风厂）；１０１－２ＡＢ 电热恒温鼓风干燥箱（天津市 泰 斯 特 仪 器 有 限 公 司 ）；微 量 进 样 器 （宁 波 市 镇 海 玻 璃 仪 器 厂 ）；Ｐ－０１ 层 析 缸 （上 海 信 谊 仪 器 厂 ）。 １．２ 试药 齐墩 果 酸 对 照 品 （中 国 药 品 生 物 制 品 检 定所，供含量测定用，１１０７０９－２００５０５）；齐墩果 酸 原 料 药（陕西森弗生物技术有限公司，批号 ＱＤＧＳ０９０４１７， ＱＤＧＳ０９０４１８）；冰醋酸、高氯 酸、硫 酸、乙 醇、甲 醇、氢 氧化钾等均为分析纯；硅 胶 Ｇ（青 岛 海 洋 化 工 有 限 公 司）。
ｈｔｔｐ：／／ＸＢＹＺ．ｃｂｐｔ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ
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西 北 药 学 杂 志 ２０１３ 年 ９ 月wk.baidu.com 第 ２８ 卷 第 ５ 期
醋酸溶液０．２０ｍＬ、高氯酸０．８０ｍＬ，摇匀，置于７０ ℃水 浴中１５ｍｉｎ，冷至室 温，加 入 冰 醋 酸 ４．００ ｍＬ，摇 匀。 以 不加齐墩果酸标准溶液与上述同法操作制备的溶液为 空白，在紫外分光光度计上，于４００～８００ｎｍ 波长范围内 扫描。结果表明，齐墩果酸在５４８ｎｍ 波长处有最大吸 收，因此选定５４８ｎｍ 为测定波长。 ２．１．２ 线 性 范 围 考 察 分 别 吸 取 齐 墩 果 酸 标 准 溶 液 （１２１．９ ｍｇ·Ｌ－１）０．２０，０．４０，０．６０，０．８０ 和 １．００ ｍＬ，置 于 具 塞 试 管 中 ，按２．１．１ 方 法 处 理 ，同 时 做 空 白实验，在 ５４８ｎｍ 波长处测定吸光度值。 以齐墩果 酸的质量浓度（Ｃ，ｍｇ·Ｌ－１）为横 坐 标、吸 光 度 值（Ａ） 为纵坐标，进行线性回归，回 归 方 程：Ａ＝０．０３９ ８Ｃ＋ ０．００６ １，ｒ＝０．９９９ ０。结 果 表 明，齐 墩 果 酸 质 量 浓 度 在 ４．８７６～２４．３８ ｍｇ·Ｌ－１范 围 内 与 吸 光 度 值 呈 现 良 好的线性关系。 ２．１．３ 含 量 测 定 取 本 品 适 量 ，精 密 称 定 ，用 甲 醇 溶 解，制成 质 量 浓 度 约 为 １００ ｍｇ·Ｌ－１ 的 溶 液，摇 匀。 精密 移 取 该 溶 液 一 定 量，置 于 具 塞 试 管 中，按 ２．１．２ 项下 处 理；同 时 做 空 白 实 验，在 ５４８ｎｍ 波 长 处 测 定 吸 光 度 值 ，计 算 即 得 。 ２．２ 紫 外 分 光 光 度 法 ２．２．１ 测 定 波 长 的 选 择 精 密 称 取 齐 墩 果 酸 对 照 品 适量，加甲醇溶解，制成质 量 浓 度 为 ２．０３２ｇ·Ｌ－１的 齐墩果 酸 储 备 液；精 密 吸 取 齐 墩 果 酸 储 备 液 ０．５０ ｍＬ，置于１０ ｍＬ 量 瓶 中，加 甲 醇 稀 释 至 刻 度，摇 匀， 制 成 质 量 浓 度 为 １０１．６ ｍｇ·Ｌ－１的 溶 液 ，以 甲 醇 为 空 白，于２００～４００ｎｍ 波长范围内扫描。 结果表 明，齐 墩果酸在２０７ｎｍ 波长 处 有 最 大 吸 收，但 因 甲 醇 在 此 波长也 有 吸 收，为 了 消 除 溶 剂 对 测 定 的 影 响，故 选 ２１５ｎｍ 为检测波长。 ２．２．２ 线 性 范 围 考 察 精 密 量 取 齐 墩 果 酸 储 备 液 ０．２０，０．３５，０．５０，０．６５和０．８０ ｍＬ，分别置于 １０ ｍＬ 量瓶中，加甲 醇 稀 释 至 刻 度，摇 匀，制 成 质 量 浓 度 为 ４０．６４，７１．１２，１０１．６，１３２．１ 和 １６２．６ ｍｇ·Ｌ－１ 的 标 准系列溶液。 以甲醇为空白，于 ２１５ｎｍ 波长处测定 吸光度值 Ａ。以质 量 浓 度 Ｃ（ｍｇ·Ｌ－１）对 Ａ 进 行 线 性 回 归 ，得 回 归 方 程 为 ：Ａ＝０．００４ ９Ｃ＋０．００４ １，ｒ＝ ０．９９９ ２。结 果 表 明，齐 墩 果 酸 质 量 浓 度 在 ４０．６４～ １６２．６ｍｇ·Ｌ－１范围内，吸光度 值 与 相 应 的 质 量 浓 度 呈良好的线性关系。 ２．２．３ 含 量 测 定 取 本 品 适 量 ，精 密 称 定 ，用 甲 醇 溶 解 ，制 成 质 量 浓 度 约 为 １００ ｍｇ·Ｌ－１的 溶 液 ，摇 匀 ，在 ２１５ｎｍ 波长处测定吸光度值，计算即得。 ２．３ 薄 层 色 谱 法 ２．３．１ 色谱条件 展开剂为氯仿－丙酮（４∶１）；显色剂 为１００ｇ·Ｌ－１硫 酸 乙 醇 溶 液；测 定 波 长λｓ＝５２５ｎｍ，参
齐墩果酸（ｏｌｅａｎｏｌｉｃ ａｃｉｄ，ＯＡ）为 一 种 天 然 产 物 化学成分，属于β－香 树 脂 醇 型 五 环 三 萜 类 化 合 物，广 泛 存 在 于 自 然 界 多 种 植 物 中 。 据 不 完 全 统 计 ，齐 墩 果 酸存在 于 约 ６０ 个 科 １９０ 种 植 物 中［１］，以 游 离 或 结 合 成苷的形式存在。 研 究 表 明，齐 墩 果 酸 毒 性 很 低，具 有 抗 病 毒 、抗 炎 、增 强 免 疫 和 抑 制 免 疫 （免 疫 双 向 调 节 作 用 ）、抑 制 血 小 板 凝 集 、降 血 脂 、降 糖 、保 肝 、护 肾 、抗 艾滋病毒等多种生物活性 。 ［２］ 目前卫生部颁标 准 中， 齐墩果酸的含量测定方法为酸碱滴定法 。 ［３］ 同 时，各 文献报道的含量 测 定 方 法 还 有 高 效 液 相 色 谱 法 、 ［４，６］ 薄层色谱法［５－６］、紫 外 分 光 光 度 法［７］等。 笔 者 分 别 用 酸 碱 滴 定 法 （标 准 法 ）、可 见 分 光 光 度 法 （Ｖｉｓ）、紫 外 分 光光度法（ＵＶ）、薄 层 色 谱 法（ＴＬＣ）和 高 效 液 相 色 谱 法（ＨＰＬＣ）对齐墩果酸含量进行考察，同 时 对 测 定 结 果进行了比较。 １ 仪 器 与 试 药 １．１ 仪器 ＬＣ－１０Ａ 高 效 液 相 色 谱 仪 （日 本 岛 津 公
Ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ ｓｔｕｄｙ ｏｎ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄｓ ｆｏｒ ｏｌｅａｎｏｌｉｃ ａｃｉｄ
ＤＩ Ｊｉｎｍｉｎｇ，ＬＩＵ Ｂｉｎｂｉｎ，ＺＨＡＯ Ｊｉｎｇ，ＧＵＯ Ｑｉ＊ （Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，Ｘｉ′ａｎ Ｊｉａｏｔｏｎｇ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｘｉ′ａｎ ７１００６１，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｃｏｍｐａｒｅ ｔｈｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄｓ ｆｏｒ ｏｌｅａｎｏｌｉｃ ａｃｉｄ．Ｍｅｔｈｏｄｓ ① Ａｃｉｄ－ｂａｓｅ ｔｉｔｒａｔｉｏｎ ａｎａｌｙｓｉｓ ｍｅｔｈｏｄ； ② ｖｉｓｉｂｌｅ ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｙ ａｎａｌｙｓｉｓ（Ｖｉｓ）：ｕｓｉｎｇ ｖａｎｉｌｌｉｎ－ｇｌａｃｉａｌ ａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ－ｐｅｒｃｈｌｏｒｉｃ ａｃｉｄ ｓｏｌｕｔｉｏｎ ａｓ ｔｈｅ ｃｏｌｏｒ ｄｅｖｅｌｏｐｉｎｇ ｒｅａ－ ｇｅｎｔ，ａｎｄ ｄｅｔｅｃｔｉｎｇ ａｔ ｔｈｅ ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ ｏｆ ５４８ｎｍ；③ ｕｌｔｒａｖｉｏｌｅｔ ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｙ ａｎａｌｙｓｉｓ（ＵＶ）：ｕｓｉｎｇ ｍｅｔｈａｎｏｌ ａｓ ｔｈｅ ｓｏｌｖｅｎｔ ａｎｄ ｄｅｔｅｃｔｉｎｇ ａｔ ｔｈｅ ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ ｏｆ ２１５ｎｍ；④ ＴＬＣ ｓｃａｎｎｉｎｇ ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ：ｕｓｉｎｇ ｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍ－ａｃｅｔｏｎｅ （４∶１）ａｓ ｔｈｅ ｄｅｖｅｌｏｐｉｎｇ ｓｏｌｖｅｎｔ，１００ｇ·Ｌ－１ ｅｔｈａｎｏｌ ｓｏｌｕｔｉｏｎ ｏｆ ｓｕｌｆｕｒｉｃ ａｃｉｄ ａｓ ｔｈｅ ｃｏｌｏｒ ｄｅｖｅｌｏｐｉｎｇ ｒｅａｇｅｎｔ，５２５ｎｍ ａｓ ｔｈｅ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ ａｎｄ ７００ｎｍ ａｓ ｔｈｅ ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ；⑤ ｈｉｇｈ ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ ｌｉｑｕｉｄ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ （ＨＰＬＣ）：ｓａｍｐｌｅｓ ｗｅｒｅ ａｎａｌｙｚｅｄ ｏｎ ａ Ｃ１８ｃｏｌ－
ｕｍｎ ｂｙ ｕｓｉｎｇ ｍｅｔｈａｎｏｌ ａｓ ｔｈｅ ｍｏｂｉｌｅ ｐｈａｓｅ．Ｔｈｅ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ ｗａｓ ２２０ｎｍ．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｃｏｎｔｅｎｔｓ ｏｆ ｔｈｅ ｓａｍｅ ｓａｍｐｌｅｓ ｗｅｒｅ ｍｅａｓｕｒｅｄ ｂｙ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ａｎａｌｙｓｉｓ ｍｅｔｈｏｄｓ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｔｈｅ ｍｅａｓｕｒｅｄ ｖａｌｕｅｓ ｏｆ ｆｉｖｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄｓ ｗｅｒｅ ｃｏｍｐａｒｅｄ ａｎｄ ｅｖａｌｕａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｖａｒｉａｎｃｅ ａｎａｌｙｓｉｓ．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｎｏ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ （Ｐ ＜０．０５）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｔｈｅ ｆｉｖｅ ｍｅｔｈｏｄｓ ｃａｎ
西 北 药 学 杂 志 ２０１３ 年 ９ 月 第 ２８ 卷 第 ５ 期
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·药物分析·
齐墩果酸５种含量测定方法的比较研究
邸金明，刘彬彬，赵 婧，郭 琦＊ （西安交通大学药学院，西安 ７１００６１）
摘要：目的 比较５种分析方法测定齐墩果酸的含量。方法 ①酸碱滴定法；②可见分光光度法（Ｖｉｓ）：香草醛－冰醋酸－高氯 酸 溶 液为显色剂，在５４８ｎｍ 波长处测定；③紫外分光光度法（ＵＶ）：溶剂为甲醇，测定波长为２１５ｎｍ；④薄层扫描 测 定 法（ＴＬＣ）：展 开 剂为氯仿－丙酮（４∶１），以１００ｇ·Ｌ－１硫酸乙醇溶液为显色剂，测定波长λＳ为５２５ｎｍ，参比波长λＲ为７００ｎｍ；⑤高效液相 色 谱 法 （ＨＰＬＣ）：以十八烷基硅烷键合硅胶为填 充 剂，甲 醇 为 流 动 相，检 测 波 长 为 ２２０ｎｍ。 结 果 分 别 用 不 同 的 分 析 方 法 测 定 同 一 样 品，测量值彼此之间进行方差分析，Ｐ＜０．０５，即差异无统计学意义，结果基本一致。结论 ５种分析方法均 能 有 效 地 测 定 齐 墩 果 酸 的 含 量 ，适 用 于 齐 墩 果 酸 的 质 量 控 制 。