临床微生物的鉴定与药敏
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镜检染色
革兰阴性杆菌，菌体呈多形体，球杆状 和长丝状，成对或成链排列，有鞭毛
鉴定
氧化酶、触酶试验阳性，有动力精氨酸水 解酶阳性，氧化分解葡萄糖，但不发酵
临床
术后伤口感染、褥疮、脓肿、烧伤后感染、化脓性 中耳炎，菌血症和院感的主要致病菌
嗜血杆菌属
• 隶属于巴斯德菌科
– 流感嗜血杆菌 – 副流杆嗜血杆菌 – 溶血嗜血杆菌 – 副嗜沫嗜血杆菌 – 杜克雷嗜血杆菌 – 埃及嗜血杆菌 – 副溶血嗜血杆菌 – 嗜沫嗜血杆菌 – 迟缓嗜血杆菌
•应选择在应用抗菌 药物之前采集标本
•革兰氏染色 • 抗酸染色 •墨汁染色
•细菌与真菌培养 •生化鉴定 •仪器自动鉴定
•纸片法 •MIC法
临床标本的分类
临床标本主要包括：无菌体液，有不引起疾病的正常菌群寄居
血液及骨髓标本 尿液标本
穿刺液标本 导管
无菌体液
粪便标本 痰及上呼吸道标本
烧伤标本 生殖道标本
金黄色为葡萄球菌
涂片：革兰阳性球 菌，葡萄状排列
触酶试验阳性
血浆凝固酶阳性
M1
接种于血平皿
有金黄色素 透明溶血环
发酵甘露醇
M2
M4
MRSA
M3
肺炎、伪膜性肠炎、
肾盂肾炎、心包炎、
化脓性感染、败血 症、脓毒血症
凝固酶阴性葡萄球菌
• 广泛存在于皮肤表面、口腔及肠道中 • 菌血症患者占10% • 心内膜炎的主要致病菌 • 重要的院内感染菌 • 耐药性高于凝固酶阳性的葡萄球菌
微生物检验的意义与流程
临床细菌工作者需要从各种标本中分离识别细菌是属 于病原菌、条件致病菌或正常菌群，要正确鉴定分离 出的微生物的归属或种。因为只有明确归属的细菌， 才有可能根据特定的形态、培养和生化特征，确立未 知细菌的分类属相，药敏实验的判断规则，并作为感 染疾病治疗的依据。
标本采集 镜检接种 培养鉴定 药敏实验
人体口腔、鼻咽部的正常菌群，并不会引起疾病。当机体抵抗 力下降时，可引起大叶性肺炎、支气管肺炎，如处理不当可导 致血流播散，导致败血症。
肺炎链球菌
涂片：革兰阳 性球菌，矛头 状尖端相背或 短链排列，有
荚膜 M1
M4
菊糖发酵试验 阳性、 胆汁溶
菌试验阳性
血平板上为灰白 色、扁平光滑、 湿润半透明、草 绿色溶血环。培 养久后，菌落中
敏感性
细菌的生理、 生化表型是由 其所含的遗传
基因所决定
临床细菌的主要分类
A 革兰氏阴性杆菌
氧化酶实验
革兰氏阴性球菌 D
病原菌
B 革兰氏阳性球菌
触酶试验
革兰氏阳性杆菌 C
革兰氏阳性球菌
• 葡萄球菌 • 凝固酶阴性葡萄球菌 • 肠球菌 • 链球菌
A群链球菌 B群链球菌 C群链球菌 草绿色链球菌 肺炎链球菌
又称化脓性链球菌，广泛存在于自然界，正常人的鼻咽部和皮 肤。能产生多种毒素及毒性物质，侵袭力强。其M蛋白抗原， 具有吞噬作用，与毒力有关。
• B群链球菌
又称无乳链球菌，易引起新生儿的败血症
• 草绿色群链球菌
是亚急性心内膜炎的主要病原菌，常定居在扁桃体、鼻咽部或 牙龈肿，可发生局部病灶性感染。
• 肺炎链球菌
组织标本
正常菌群寄居
细菌分类的依据和方法
·细菌的着色性，形
态，芽孢、鞭毛和荚 膜结构等
·细菌的生物化学特
征 如：营养方式、
代谢产物特点和对氧 分子的需求等
细菌分类要综合其细胞学、生理学、 生物化学、免疫学等特征。同时以抗 原结构特点，遗传物质DNA分子的结 构来阐明各种细菌间的亲缘关系。
若对细菌作分 型，常采用的 抗原结构、噬 菌体和细菌素
多糖奈瑟菌
脑膜炎奈瑟菌
奈瑟菌属
在巧克力平皿上培养24~48小时或72小时生长较好。菌 落隆起、光滑、湿润、边缘整齐。易乳化、无色素、生 理盐水不自凝。
脑膜炎奈瑟菌
淋病奈瑟菌
革兰阴性球菌，成双排列，菌体呈 肾形或豆形
只分解葡萄糖、麦芽糖，产少量酸。
氧化酶阴性
• 流行性脑脊髓膜炎 • 脑膜炎球菌菌血症
革兰阴性双球菌，呈卵圆形或 肾形。 只发酵葡萄糖。 氧化酶、触酶阳性
前列腺炎、睾丸炎、 尿道周围脓肿、附件炎、 盆腔炎和关节炎
在5%CO2条件下生长良好.
革兰氏阴性杆菌
• 肠杆菌
伤寒沙门菌、副伤寒沙门菌、大肠埃希菌、气单胞菌、肺 炎克雷伯、变形杆菌、布鲁菌和沙雷菌等。在血平皿、中 国蓝培养基上都能生长。
M2央凹陷脐窝状
M3 引起肺炎链球
菌脑膜炎，支 气管肺炎、心 内膜炎、胸膜 炎、中耳炎和
关节炎
奈瑟菌属
• 奈瑟菌属属于奈瑟菌科，除奈瑟菌属外，还包括 莫拉菌属、不动杆菌属、金氏菌属。奈瑟菌属共 含10个种。
– 淋病奈瑟菌 脑膜炎奈瑟菌 嗜乳糖奈瑟菌 干燥奈瑟菌 浅黄奈瑟菌 金黄奈瑟菌 粘膜奈瑟菌 灰色奈瑟菌 细长奈瑟菌
引起肠道感染的大肠埃希菌
肠致病性大肠埃希菌 肠道聚集-粘附性大肠埃希菌
产肠毒素性大肠埃希菌 肠侵袭性大肠埃希菌 肠出血性大肠埃希菌
鉴定
API，compact进一步鉴定，血清O1，O139
临床表现
发热，呕吐，腹泻，便中多粘液无血痉挛性腹痛等
铜绿假单胞菌
接种血平皿
菌落周围有透明溶血环，金属光泽。 特殊生姜气味 的灰绿色或蓝绿色菌落。多数产生绿脓素或荧光素
• 非发酵革兰阴性杆菌
是指一群不能利用葡萄糖或仅能以氧化形式利用葡萄糖的 革兰阴性杆菌。
包括：铜绿假单胞菌、不动杆菌属、沙麦芽窄食单胞菌、 洋葱克雷伯菌
大肠埃希菌
接种Байду номын сангаас生化
可见中等大小、圆形、凸起的灰白色菌落少数呈 β-溶血 ，发酵乳糖，硝酸盐还原试验阳性
镜检与趋向性试验
革兰氏阴性杆菌，氧化酶试验阴性
肠球菌
涂片：革兰阳性球 菌，呈短链排列
触酶试验阴性 胆汁七叶苷阳性
M1
感染主要为粪 M4 肠球菌，其次 为屎肠球菌和 鸟肠球菌
接种于血平皿5%羊 血平皿生长好
灰白色、湿润、光 滑中等大小 有γ –溶血或β-溶血
M2
尿路感染：
M3
尿道炎、膀胱炎、 肾盂肾炎
糖尿病、恶性肿瘤 并发
链球菌
• A群链球菌
金葡菌的菌落小
生长因子
把可疑菌密涂于脑心浸液琼脂平 皿上，把X、V和X+V因子纸片贴 在平皿上，细菌只在X+V因子周 围生长，不在X因子或V因子周围
流感嗜血杆菌
接种与镜检
接种于巧克力平皿上
5%CO2,35°培养
菌落为细小，灰白，光滑， 湿润，半透明菌落 ， 革兰阴性小杆菌，呈多形性
临床
致病物质主要为内毒素和 荚膜的抗吞噬作用
主要引起呼吸道感染，脑 膜炎，关节脓肿和其他化
脓感染
卫星现象
把可疑菌株涂在平皿上， 将金黄色葡萄球菌点种于 培养基划线区，在葡萄球 菌落周围的菌落大，远离
革兰阴性杆菌，菌体呈多形体，球杆状 和长丝状，成对或成链排列，有鞭毛
鉴定
氧化酶、触酶试验阳性，有动力精氨酸水 解酶阳性，氧化分解葡萄糖，但不发酵
临床
术后伤口感染、褥疮、脓肿、烧伤后感染、化脓性 中耳炎，菌血症和院感的主要致病菌
嗜血杆菌属
• 隶属于巴斯德菌科
– 流感嗜血杆菌 – 副流杆嗜血杆菌 – 溶血嗜血杆菌 – 副嗜沫嗜血杆菌 – 杜克雷嗜血杆菌 – 埃及嗜血杆菌 – 副溶血嗜血杆菌 – 嗜沫嗜血杆菌 – 迟缓嗜血杆菌
•应选择在应用抗菌 药物之前采集标本
•革兰氏染色 • 抗酸染色 •墨汁染色
•细菌与真菌培养 •生化鉴定 •仪器自动鉴定
•纸片法 •MIC法
临床标本的分类
临床标本主要包括：无菌体液，有不引起疾病的正常菌群寄居
血液及骨髓标本 尿液标本
穿刺液标本 导管
无菌体液
粪便标本 痰及上呼吸道标本
烧伤标本 生殖道标本
金黄色为葡萄球菌
涂片：革兰阳性球 菌，葡萄状排列
触酶试验阳性
血浆凝固酶阳性
M1
接种于血平皿
有金黄色素 透明溶血环
发酵甘露醇
M2
M4
MRSA
M3
肺炎、伪膜性肠炎、
肾盂肾炎、心包炎、
化脓性感染、败血 症、脓毒血症
凝固酶阴性葡萄球菌
• 广泛存在于皮肤表面、口腔及肠道中 • 菌血症患者占10% • 心内膜炎的主要致病菌 • 重要的院内感染菌 • 耐药性高于凝固酶阳性的葡萄球菌
微生物检验的意义与流程
临床细菌工作者需要从各种标本中分离识别细菌是属 于病原菌、条件致病菌或正常菌群，要正确鉴定分离 出的微生物的归属或种。因为只有明确归属的细菌， 才有可能根据特定的形态、培养和生化特征，确立未 知细菌的分类属相，药敏实验的判断规则，并作为感 染疾病治疗的依据。
标本采集 镜检接种 培养鉴定 药敏实验
人体口腔、鼻咽部的正常菌群，并不会引起疾病。当机体抵抗 力下降时，可引起大叶性肺炎、支气管肺炎，如处理不当可导 致血流播散，导致败血症。
肺炎链球菌
涂片：革兰阳 性球菌，矛头 状尖端相背或 短链排列，有
荚膜 M1
M4
菊糖发酵试验 阳性、 胆汁溶
菌试验阳性
血平板上为灰白 色、扁平光滑、 湿润半透明、草 绿色溶血环。培 养久后，菌落中
敏感性
细菌的生理、 生化表型是由 其所含的遗传
基因所决定
临床细菌的主要分类
A 革兰氏阴性杆菌
氧化酶实验
革兰氏阴性球菌 D
病原菌
B 革兰氏阳性球菌
触酶试验
革兰氏阳性杆菌 C
革兰氏阳性球菌
• 葡萄球菌 • 凝固酶阴性葡萄球菌 • 肠球菌 • 链球菌
A群链球菌 B群链球菌 C群链球菌 草绿色链球菌 肺炎链球菌
又称化脓性链球菌，广泛存在于自然界，正常人的鼻咽部和皮 肤。能产生多种毒素及毒性物质，侵袭力强。其M蛋白抗原， 具有吞噬作用，与毒力有关。
• B群链球菌
又称无乳链球菌，易引起新生儿的败血症
• 草绿色群链球菌
是亚急性心内膜炎的主要病原菌，常定居在扁桃体、鼻咽部或 牙龈肿，可发生局部病灶性感染。
• 肺炎链球菌
组织标本
正常菌群寄居
细菌分类的依据和方法
·细菌的着色性，形
态，芽孢、鞭毛和荚 膜结构等
·细菌的生物化学特
征 如：营养方式、
代谢产物特点和对氧 分子的需求等
细菌分类要综合其细胞学、生理学、 生物化学、免疫学等特征。同时以抗 原结构特点，遗传物质DNA分子的结 构来阐明各种细菌间的亲缘关系。
若对细菌作分 型，常采用的 抗原结构、噬 菌体和细菌素
多糖奈瑟菌
脑膜炎奈瑟菌
奈瑟菌属
在巧克力平皿上培养24~48小时或72小时生长较好。菌 落隆起、光滑、湿润、边缘整齐。易乳化、无色素、生 理盐水不自凝。
脑膜炎奈瑟菌
淋病奈瑟菌
革兰阴性球菌，成双排列，菌体呈 肾形或豆形
只分解葡萄糖、麦芽糖，产少量酸。
氧化酶阴性
• 流行性脑脊髓膜炎 • 脑膜炎球菌菌血症
革兰阴性双球菌，呈卵圆形或 肾形。 只发酵葡萄糖。 氧化酶、触酶阳性
前列腺炎、睾丸炎、 尿道周围脓肿、附件炎、 盆腔炎和关节炎
在5%CO2条件下生长良好.
革兰氏阴性杆菌
• 肠杆菌
伤寒沙门菌、副伤寒沙门菌、大肠埃希菌、气单胞菌、肺 炎克雷伯、变形杆菌、布鲁菌和沙雷菌等。在血平皿、中 国蓝培养基上都能生长。
M2央凹陷脐窝状
M3 引起肺炎链球
菌脑膜炎，支 气管肺炎、心 内膜炎、胸膜 炎、中耳炎和
关节炎
奈瑟菌属
• 奈瑟菌属属于奈瑟菌科，除奈瑟菌属外，还包括 莫拉菌属、不动杆菌属、金氏菌属。奈瑟菌属共 含10个种。
– 淋病奈瑟菌 脑膜炎奈瑟菌 嗜乳糖奈瑟菌 干燥奈瑟菌 浅黄奈瑟菌 金黄奈瑟菌 粘膜奈瑟菌 灰色奈瑟菌 细长奈瑟菌
引起肠道感染的大肠埃希菌
肠致病性大肠埃希菌 肠道聚集-粘附性大肠埃希菌
产肠毒素性大肠埃希菌 肠侵袭性大肠埃希菌 肠出血性大肠埃希菌
鉴定
API，compact进一步鉴定，血清O1，O139
临床表现
发热，呕吐，腹泻，便中多粘液无血痉挛性腹痛等
铜绿假单胞菌
接种血平皿
菌落周围有透明溶血环，金属光泽。 特殊生姜气味 的灰绿色或蓝绿色菌落。多数产生绿脓素或荧光素
• 非发酵革兰阴性杆菌
是指一群不能利用葡萄糖或仅能以氧化形式利用葡萄糖的 革兰阴性杆菌。
包括：铜绿假单胞菌、不动杆菌属、沙麦芽窄食单胞菌、 洋葱克雷伯菌
大肠埃希菌
接种Байду номын сангаас生化
可见中等大小、圆形、凸起的灰白色菌落少数呈 β-溶血 ，发酵乳糖，硝酸盐还原试验阳性
镜检与趋向性试验
革兰氏阴性杆菌，氧化酶试验阴性
肠球菌
涂片：革兰阳性球 菌，呈短链排列
触酶试验阴性 胆汁七叶苷阳性
M1
感染主要为粪 M4 肠球菌，其次 为屎肠球菌和 鸟肠球菌
接种于血平皿5%羊 血平皿生长好
灰白色、湿润、光 滑中等大小 有γ –溶血或β-溶血
M2
尿路感染：
M3
尿道炎、膀胱炎、 肾盂肾炎
糖尿病、恶性肿瘤 并发
链球菌
• A群链球菌
金葡菌的菌落小
生长因子
把可疑菌密涂于脑心浸液琼脂平 皿上，把X、V和X+V因子纸片贴 在平皿上，细菌只在X+V因子周 围生长，不在X因子或V因子周围
流感嗜血杆菌
接种与镜检
接种于巧克力平皿上
5%CO2,35°培养
菌落为细小，灰白，光滑， 湿润，半透明菌落 ， 革兰阴性小杆菌，呈多形性
临床
致病物质主要为内毒素和 荚膜的抗吞噬作用
主要引起呼吸道感染，脑 膜炎，关节脓肿和其他化
脓感染
卫星现象
把可疑菌株涂在平皿上， 将金黄色葡萄球菌点种于 培养基划线区，在葡萄球 菌落周围的菌落大，远离