头孢噻肟钠高分子聚合物测定法草稿

附件：头孢噻肟钠聚合物测定方法的质量标准（草稿）与研究资料头孢噻肟钠高分子聚合物测定法（草稿）

. 头孢噻肟聚合物照分子排阻色谱法(中国药典2005年版二部附录Ⅴ H)测定。

色谱条件与系统适用性试验用葡聚糖凝胶G-10(40～120μm)为填充剂,玻璃柱（1.0×30cm）,流动相A为pH7.0的0.1mol/L磷酸盐缓冲液(取

0.1mol/L磷酸氢二钠61ml和0.1mol/L磷酸二氢钠39ml,混合均匀，滤过)。

流动相B为水,流速每分钟1.5ml,检测波长为254nm,量取1.0mg/ml蓝色葡聚糖2000溶液100μl, 注入液相色谱仪，分别以流动相A,B进行测定，记录色谱图。按蓝色葡聚糖2000峰计算理论板数均不低于400,拖尾因子均应小于2.0。在两种流动相系统中蓝色葡聚糖2000峰的保留时间比值应在0.93～

1.07之间，对照溶液主峰与供试品溶液中聚合物峰与相应色谱系统中蓝色葡

聚糖2000峰的保留时间的比值均应在0.93～1.07之间。称取头孢噻肟约

0.2g置10ml量瓶中，用1.0mg/ml的蓝色葡聚糖2000溶液溶解并稀释至刻

度，摇匀。量取100μl注入液相色谱仪，用流动相A进行测定，记录色谱图。

高聚体的峰高与单体与高聚体之间的谷高比应大于2.0。另以流动相B为流动相，精密量取对照溶液100μl,连续进样5次,峰面积的相对标准偏差应不大于5.0%。

对照溶液的制备取头孢噻肟对照品适量，精密称定，加水溶解并定量制成每1ml中约含头孢噻肟100μg的溶液。

测定法取本品约0.2g, 精密称定，置10ml量瓶中，加水适量使溶解后，用水稀释至刻度，摇匀。立即精密量取100μl注入液相色谱仪，以流动相A 为流动相进行测定,记录色谱图。另精密量取对照溶液100μl注入液相色谱仪，以流动相B为流动相进行测定，记录色谱图。按外标法以峰面积计算，含头孢噻肟聚合物以头孢噻肟计不得过0.5%。

方法的研究与验证

1.流动相的选择照2005年版药典头孢噻肟钠高分子聚合物项下;

流动相A: pH7.0的0.1mol/L磷酸盐缓冲液(取0.1mol/L磷酸氢二钠61ml和0.1mol/L磷酸二氢钠39ml,混合均匀，滤过)。

流动相B: 水,

2.检测波长: 254nm,

3.分离度试验根据药典附录ⅤH分子排阻色谱法规定，高分子杂质检查

时，某些药物分子单体与其聚合体不能达到基线分离时，其分离度计算公式为

R=高聚体的峰高/单体与高聚体之间的谷高＞2.0

分离度试验溶液由于高分子聚合物的对照品不易获得，而样品高聚物又极少，在配制分离度溶液时，适当的加入蓝色葡聚糖2000，使聚合物的峰增大，一般蓝色葡聚糖2000的加入量是使聚合物峰面积达到规定限度的1～2倍。

称取头孢噻肟钠约0.3g置10ml量瓶中，用1.0mg/ml的蓝色葡聚糖2000溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，进样100μl，用流动相A进行测定，记录色谱图进行分析，得分离度为2.72.（附图）

Manual Run 0:1_UV Manual Run 0:1_EditedBaseline

mAu

150

100

6.68

50

5.010.015.020.025.0min

附图. 分离度计算色谱图(头孢噻肟钠)

4.样品取样量对聚合物测定结果的相关性考察

同批样品,取样分别为约91mg,240mg和291mg,分别置3个10ml量瓶中,按规定方法测定,结果表明,供试品溶液在9.1mg/ml～29.1mg/ml范围内,溶液浓度与聚合物峰面积呈良好线性关系，相关系数r=1.0000

5.流速的选择

选用1.5ml/min 流速，聚合物的保留时间约在6.68分钟，而主峰流出在10分钟以后，分离度良好，故选用1.5ml/min 流速， 在45分钟内完成一个样品的分析。（附图）

M a n u a l R u n 0:1_U V M a n u a l R u n 0:1_E d i t e d B a s e l i n e

0 200

400

600 8001000mAu 0.0

1

0.020.030.040.050.0m i n 6.68

附图. 头孢噻肟钠样品分析全程色谱图

讨论：本方法除使用色谱柱规格为（1.0×30cm ）不同外，其他条件与原药典方法均相同。现提供已建立的方法，供起草单位参考。