呕吐毒素在粮食及农副产品中的检测方法
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呕吐毒素在小麦及面粉等农副产品中的检测方法呕吐毒素又称脱氧雪腐镰刀菌烯醇,是单端孢菌素烯烃中的一种。作为一种常见的真菌毒素,呕吐毒素在自然界中广泛存在于小麦等粮谷类农作物中,在世界范围内存在着较高的污染率。小麦一旦被呕吐毒素产毒霉菌株污染,在适宜生长环境(水分活度Aw>0.87)中,产毒菌株会迅速生长,产生呕吐毒素,而小麦中的呕吐毒素又会随小麦粉的生产过程带入到面粉中,严重威胁人体健康。
呕吐毒素属于剧毒或中等毒物,对人有很强的毒性,当人摄入了被呕吐毒素污染的食物后,会导致厌食、呕吐、腹泻、发烧、站立不稳、反应迟钝等急性中毒症状,严重时损害造血系统造成死亡。
由于DON的严重影响引起了各国的普遍重视。美国食品药物管理局规定食品中呕吐毒素安全标准是1000ug/kg,而欧盟制定的限量标准相对较严,谷粉及玉米粉中允许限量750ug/kg 。我国2013年国家风险监测计划已将小麦和面粉中呕吐毒素含量的检测列为重点。
呕吐毒素的检测标准
1、大麦、小麦、麦片、小麦粉≤1000ug/kg
2、玉米、玉米面(渣、片)≤1000ug/kg
3、大米、小米、高粱米、大麦米、黍米≤1000ug/kg
4、米粉、汤圆粉、面条、饺子皮、馄钝皮、烧麦皮、面糊、面筋、八宝粥罐头≤1000ug/kg
呕吐毒素检测方法的国标
(1)GB/T23503-2009《食品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的测定免疫亲和层析净化高效液相色谱法》
(2)GB/T5009.111-2003《谷物及其制品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的测定》第二法免疫测定法(ELISA)
呕吐毒素检测方法的行标
LS/T6113-2015《粮油检测粮食中脱氧雪腐镰刀菌烯醇测定胶体金快速定量法》
呕吐毒素商检推荐行业标准
SN/T《1571-2005进出口粮谷中呕吐毒素检验方法液相色谱法》
测定呕吐毒素的常用方法如:济南痕量生物提供的胶体金定性卡法、酶联免疫吸附测定法、免疫亲和柱高效液相色谱法、胶体金定量卡法。
下面分述一下各个方法的优缺点。
1、胶体金定性卡法:是呕吐毒素最简便的检测方法,检测不需要配套仪器,样品处理简单,五到十分钟就可以看到检测结果。可以根据G、T线,初步确定所测样本毒素含量范围,但不能给出具体数值。价格最低、没有国标支持,适合企业初检使用。
2、酶联免疫吸附测定法:依据该方法开发出来的呕吐毒素检测试剂盒,可以半定量的检测样品中呕吐毒素的含量,目前国产试剂盒大量上市,价格适中,有国标支持,适合中小型企业质量控制,或者作为产品初步质量控制。
3、免疫亲和柱为分离手段:用高效液相色谱仪作为检测工具的分析方法。该项技术灵敏度高,测定范围广泛,采用单克隆免疫技术,可以特效性地将呕吐毒素和其他真菌毒素分离出来,分离效率和回收率高,正确性和可靠性强,有国标支持。检测成本高,仪器维护成本高。一般作为检测机构终端判定方法,也有大型企业作为产品质量卫生指标控制方法。
4、胶体金定量卡法:是美国CHARM公司推出的方法,灵敏度高、结果可靠,可以和亲和柱方法相媲美,检测价格适中;有行业标准支持。适合中大型企业作为产品质量卫生指标控制。
5、液相或气相串联质谱法:一般作为高端实验室实验检验方法,主要作为研究或者国家部门对毒素情况监测、风险评估。