甾体激素类药物的分析

甾体激素类药物的分析

掌握醋酸地塞米松及其制剂、丙酸睾酮、黄体酮、炔雌醇及其制剂的鉴别、杂质检查和含量测

定方法。

第一节基本结构与分类

一、结构特点

天然和人工合成品的甾体激素，均具有环戊烷骈多氢菲母核。

结构特点：A环，多为脂环，且C

4/C

5

间有双键，并与C

3

酮基共轭，称为α，β-不饱和酮，标

记为Δ4-3-酮；少数为苯环；C

3，可能有酮基或羟基；C

10

、C

13

，多数为角甲基，少数C

10

无角甲基；

C 11，可能有酮基或羟基；C

17

，可能有羟基、酮基、甲酮基、α-醇酮基、甲基、乙炔基等；人工合

成的甾体激素，有些在C

6或C

9

上引入卤素，C

16

上引入甲基、羟基，以及具有C

1

/C

2

双键等；有些取

代基是α型（用虚线表示），有些是β型（用实线表示）。

二、分类

肾上腺皮质激素和性激素两大类。性激素又分雄性激素及蛋白同化激素、孕激素、雌激素等。

(二)肾上腺皮质激素

天然和合成的肾上腺皮质激素（皮质激素）均可视为皮质酮的衍生物。

C

21

-羟基所形成的酯类（醋酸、磷酸、戊酸、己酸等的酯），肌注有长效作用。成钠盐水溶性增加，如氢化可的松磷酸钠、氢化可的松琥珀酸钠等。

结构特点：有21个C原子；A环，具有Δ4-3-酮； C

17

，有α-醇酮基，并多数为α-羟基；

C 10、C

13

，有角甲基；C

11

，有羟基或酮基；其它，有些皮质激素具有Δ1，6α、9α卤素，16α羟基，

6α、12α、16α、16β甲基等。

（二）雄性激素及蛋白同化激素

临床常用睾酮的衍生物，如甲睾酮、丙酸睾酮、十一酸睾酮等；蛋白同化激素有苯丙酸诺龙。

结构特点：雄性激素母核具有19个C原子；蛋白同化激素母核具有18个C原子（C

10

上无角

甲基）；A环，具有Δ4-3-酮；C

17

，无侧链，多数是一个β-羟基，有些是它形成的酯，有些具有α-甲基。

（三）孕激素

也称黄体酮或孕酮，典型药物为黄体酮。

中国药典有：黄体酮、醋酸甲羟孕酮、己酸羟孕酮、醋酸甲地孕酮原料及制剂；醋酸氯地孕酮原料等。

结构特点：有21个C原子；A环，具有Δ4-3-酮； C

17

，有甲酮基，有些具有α-羟基，与醋酸、己酸等形成酯（如：醋酸甲地孕酮、醋酸氯地孕酮、己酸羟孕酮等）；其它，有些具有Δ6，6β-甲基、6α-甲基、6β-氯。

（四）雌激素

又称卵泡激素。收载有：雌二醇、炔雌醚原料，苯甲酸雌二醇、戊酸雌二醇、炔雌醇原料及制剂等。

结构特点：具有18个C原子； A环，为苯环；C

3有酚羟基，有些形成酯或醚；C

10

，无角甲基；

C

17

，有β-羟基或酮基，有些羟基形成了酯，有些具有乙炔基。

除此以外，中国药典95版收载口服避孕药物：炔诺酮、炔诺孕酮、炔孕酮等，具有上述结构

的特点，多数在A环上具有Δ4-3-酮，于黄体酮和睾酮一致；有的在C

17

上具有β-羟基、α-乙炔

基或甲酮基；有的在C

10

上无角甲基，与雌激素相同。

第二节鉴别实验

母核和结构的呈色反应、沉淀反应、制备衍生物测定熔点、水解产物的反应、薄层色谱法、紫外分光光度法、红外分光光度法等都是鉴别甾体激素药物常用的方法。

一、呈色反应

（一）与强酸的呈色反应

硫酸、磷酸、高氯酸、盐酸等呈色，硫酸为主。可能机制为浓硫酸与甾体的酮基质子化反应，

形成正碳离子，然后与HSO

4

-作用。

列表

特点：操作简便，反应灵敏，通过形成的颜色或荧光的不同而互相区别，但操作条件不易掌握。

（二）官能团的呈色反应

1.C

17

-α-醇酮基有还原性，能与氧化剂四氮唑盐反应显色。（可做薄层的显色剂）；

2.酮基 C

3-、C

20

-能与2，4-二硝基苯肼、异烟肼、硫酸苯肼等羰基试剂反应呈色。

3.甲酮基以及活泼亚甲基能与亚硝铁氰化钠、间二硝基酚、芳香醛类反应呈色。

4.有机氟经氧瓶燃烧后生成无机氟化物，在与茜素蓝及硝酸亚铈呈色；

5.酚羟基能与重氮磺酸反应生成红色偶氮染料。

二、沉淀反应

1.与斐林试剂 C

17

-α-醇酮基具有还原性，生成橙红色氧化亚铜沉淀。

2.氨基硝酸银 C

17

-α-醇酮基，黑色金属银沉淀

3.硝酸银炔雌醇、炔诺酮，白色沉淀。

4.硝酸-硝酸银有机氯破坏在酸性条件下，白色沉淀。

三、制备衍生物测定其熔点

生成酯、肟、缩氨基脲，或利用醇制碱液水解甾体酯类生成相应的母体，然后测定其熔点。

1.酯的生成

2.酮肟的生成

3.缩氨基脲的生成

4.酯的水解

四、水解产物的反应

醋酸、戊酸和己酸酯水解后鉴别酸。

五、紫外分光光度法

C=C-C=O和C=C-C=C共轭系统，可用规定波长和吸收度比值法鉴别。

六、红外分光光度法

结构复杂，各国药典几乎均采用红外分光光度法鉴别，中国药典95版。36种原料，其中33种采用该法。

七、薄层色谱法

简便、快速、分离效能高等特点。

方法：

供试品溶液和对照品溶液的制备供试品通常需做前处理（如有机溶剂提取），消除注射液、片剂及软膏剂等辅料的干扰。将处理好的供试品和对照品用规定溶剂配成一定浓度的溶液备用。

展开与检出将供试品与对照品在同一块薄层板上分别点样，用规定的展开剂展开，取出晾干，用规定的显色剂显色，立即检视。供试品溶液所显斑点与对照品溶液所显斑点的Rf值相同。

部分甾体类药物的薄层色谱条件归纳见表

八、高效液相色谱法

保留时间一致鉴别。

第三节特殊杂质检查

多由结构改造来，可能带来原料、中间体、异构体、降解产物以及试剂溶剂等，是一重要项目。此外，有些甾体药物还规定其他检查项目。

一、游离磷酸

示例中国药典收载地塞米松磷酸钠的检查，方法为：

称取供试品20mg，置25ml量瓶中，加水15ml溶解；另取标准磷酸盐溶液[精密称取经105℃干燥2h的磷酸二氢钾0.35g，置1000ml量瓶中，加硫酸溶液（3→10）10ml与水适量使溶解，并稀释至刻度，摇匀；临用时再稀释10倍]4.0ml，置另一25ml量瓶中，加水11ml；各精密加钼酸铵硫酸试液2.5ml与1-氨基-2萘酚-4-磺酸溶液（另取无水亚硫酸钠5g，亚硫酸氢钠94.3G与1-氨基-萘酚-4-磺酸0.7g，充分混合，临用时取此混合物1.5g加水10ml使溶解，必要时过滤）1ml，加水至刻度，摇匀，在20℃放置30~50min，在740nm的波长处测定吸收度。供试品溶液的吸收度不得大于对照溶液的吸收度。