2020版江苏高中生物专题复习课件 专题六 第2讲

2.PCR技术扩增 (1)原理：DNA双链复制。 (2) 条 件 ： 模 板 DNA 、 引 物 、 游 离 的 dNTP(dCTP 、 dATP 、 dGTP 、 dTTP) 、 热 稳 定 DNA聚合酶。
变性：90～95 ℃，DNA解链, ↓ (3)过程 复性：55～60 ℃，引物与单链DNA结合, ↓ 延伸：70～75 ℃，在热稳定DNA聚合酶(Taq酶)作用下合成子链
3.限制酶的选择方法
(1)选择的限制酶的切点不能位于目的基因内部，也不能位于标记基因内部，否则会 破坏目的基因或标记基因，上图中不能选择SmaⅠ。 (2)应选择切点位于目的基因两端的限制酶，同时质粒上也有其切点，如上图中可选 择PstⅠ。 (3)为避免目的基因和质粒的自身环化和随意连接，也可使用不同的限制酶切割目的 基因和质粒，如上图也可选择用PstⅠ和EcoRⅠ两种限制酶。
(4)将目的基因导入受体细胞 ①植物：体细胞或受精卵——常用农杆菌转化法(双子叶植物和裸子植物)、花粉管通 道法、基因枪法(单子叶植物)。 ②动物：受精卵——显微注射技术。 ③微生物：细菌(常用大肠杆菌)——感受态细胞法(钙离子处理法)。 (5)目的基因的检测与鉴定方法 ①检测目的基因是否插入转基因生物的DNA上：DNA分子杂交技术。 ②检测目的基因是否转录出mRNA：分子杂交技术。 ③检测目的基因是否翻译成蛋白质：抗原—抗体杂交技术。 ④个体生物学水平鉴定：根据表达性状判断。
2.细胞工程 (1)植物组织培养 ①培养基的组成：大量元素、微量元素、有机物、蔗糖及植物激素、琼脂等。添加 蔗糖的目的是提供营养和调节渗透压。 ②若生产人工种子，则培养到胚状体阶段；若提取细胞产物，则一般培养到愈伤组 织阶段；若培育新个体，则应培养到试管苗阶段。 (2)植物体细胞杂交的关键 ①酶解法——用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁。 ②促融剂——常用聚乙二醇。 ③杂种细胞的形成标志——新细胞壁的形成。 ④培养杂种植株的技术——植物组织培养。 ⑤杂种植株培育成功的原理——离体的植物细胞具有全能性。
长句默写
1.基因表达载体的构建过程中，使用两种识别序列不同的限制酶切割目的基因和质粒 的目的是_避__免__目__的__基__因__和__质__粒__的__自__身__环__化__和__随__意__连__接__。 2.核移植获得的克隆动物与提供细胞核的亲本性状可能不同的三个原因：_卵__母___细__胞__ _的__细__胞__质__中__含__有__少__量__的__遗__传__物__质__；__发__育__过__程__中__可__能__发__生__基__因__突__变__或__染__色__体__变__异__；__外__ _界__环__境__可__能__引__起__不__遗__传__的__变__异___。
易错辨析
1.借助抗生素抗性基因可将含胰岛素基因的受体细胞筛选出来( √ ) 2.启动子和终止密码子均在胰岛素基因的转录中起作用( × ) 3.转基因抗虫棉植株抗虫效果的鉴定必须通过分子检测( × ) 4.重组质粒与探针能进行分子杂交是因为DNA分子脱氧核糖和磷酸交替连接( × ) 5.细胞核移植主要在同种动物、同种组织的细胞之间进行( × ) 6.乳腺细胞比乳腺癌细胞更容易进行离体培养( × ) 7.PEG是促细胞融合剂，可直接诱导植物细胞融合( × ) 8.用原生质体制备人工种子，要防止细胞破裂( × )
专题六 生物技术与工程
第2讲 基因工程和细胞工程
考纲要求
1.基因工程的诞生(A)。 2.基因工程的原理及技术(含PCR技术)(B)。 3.基因工程的应用(B)。 4.蛋白质工程(A)。 5.植物的组织培养(B)。 6.动物的细胞培养与体细胞克隆(A)。 7.细胞融合与单克隆抗体(B)。
内容索引
主干知识梳理 核心考点突破 备考技能提升
易错辨析 (1)限制酶≠DNA酶≠解旋酶 限制酶的作用是识别双链DNA分子上某种特定的核苷酸序列，并使两条链在特定的 位置断开；DNA酶的作用是将DNA水解为基本组成单位；解旋酶的作用是将DNA两 条链间的氢键打开形成两条单链。 (2)DNA连接酶≠DNA聚合酶 DNA连接酶能连接两个DNA片段，而DNA聚合酶只能将单个脱氧核苷酸添加到脱氧 核苷酸链上。 (3)启动子(DNA片段)≠起始密码子(位于mRNA上)； 终止子(DNA片段)≠终止密码子(位于mRNA上)。
核心考点突破
HE XIN KAO DIAN TU PO
02
考点一 基因工程 考点二 细胞工程
考点一 基因工程
要点整合1.真核生物的cDNA与基因组类型 基因中启动
某种生物的部分基因 某种生物的全部基因
可以
部分基因可以
主干知识梳理
ZHU GAN ZHI SHI SHU LI
01
网络构建
DNA连接酶 基因表达载体的构建
基因
细胞的全能性、细胞膜的流动性
细胞增殖 动物细胞核的全能性
给小鼠注射抗原 产生专一抗体的杂交瘤细胞
基础必备
1.基因工程 (1)基因工程的3种基本工具 ①限制性核酸内切酶：识别特定核苷酸序列，并在特定位点上切割DNA分子。 ②DNA连接酶：a.E·coli DNA连接酶只能连接黏性末端；b.T4 DNA连接酶能连接黏 性末端和平末端。 ③载体：需具备的条件包括：a.能在宿主细胞内稳定存在并大量复制；b.有一胞进行筛 直接人工合成。 (3)基因表达载体的组成：启动子、目的基因、终止子及标记基因等。
(3)动物细胞培养中两次使用胰蛋白酶的作用不同 第一次：处理剪碎的组织，使其分散成单个细胞； 第二次：使贴壁生长的细胞从瓶壁上脱落下来。 (4)原代培养与传代培养的区别 区分原代培养和传代培养的关键是是否分瓶培养。细胞贴壁生长到一定程度需要用 胰蛋白酶处理，然后再分瓶培养，让细胞继续增殖，这样的培养过程通常称为传代 培养。 (5)克隆动物时选择受体细胞为去核卵母细胞的原因 ①营养丰富；②体积大，易操作；③含有激发细胞核全能性表达的物质。