金线莲总黄酮测定

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研究现状
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龚秀会等人检测出野生金线莲、台湾金线莲、福建林 下金线莲的化学成分组成及含量非常相似，其中总黄酮和 游离氨基酸的含量均与文献报道的野生金线莲相当或略高。 何春年等人运用现代技术分析出福建金线莲氯仿萃取 分得 对羟基苯甲醛（Ⅰ），阿魏酸（Ⅱ），槲皮素 （Ⅲ），胡萝卜苷（Ⅳ），5，4‘-二羟基-6，7，3’-三 甲氧基黄酮（cirsilineol ）均为首次从该植物中分得物。 刘青等人分析认为金线莲乙酸乙酯提取物有降血糖作 用。 关碌等人研究指出福建金线莲总黄酮最佳提取工艺为： 体积分数95％乙醇浸泡过夜，加热回流提取3次，每次 1．5 h，溶剂用量均为12倍量。 黄瑞平研究分析金线莲总黄酮含量则随着金线莲的栽 培月龄的增加而上升。
波长的选择
图4 对照品零阶（A）、一阶（B）、二阶（C）导数光谱图
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图5 供试品零阶（A）、一阶（B）、二阶（C）导数光谱图
单因素考察 不同提取方法对含量的影响
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溶剂类型和溶剂含量对吸光度影响的考察
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料液比对含量影响的考察
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提取温度对含量的影响
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提取时间对含量的影响
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标准曲线
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正交试验方差分析表
方差来源
偏差平方和Si 自由度fi
方差Vi
F值
Fa
显著性
提取温度 料液比 提取时间 乙醇比例 误差e
9.414 3.213 1.644 83.077 3.759
3 3 3 3 3
3.138 1.071 0.548 27.692 1.253
2.505 0.855 0.437 22.101
芦丁
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从结构来看，两者相似，但槲皮素不能产生该反应的原因是因为 槲皮素与糖苷结合而无法反应，还是生产了其他物质不得而知。
2、含量测定的准确性
金线莲中含有槲皮素、山奈酚、异鼠李素等黄酮类化合物，但采 用了紫外直接测定法测定，存在一定的干扰，误差可能性大。
谢谢
1210.03 1984.79 294.51
440.47±8.40 109.35±0.85 109.20±2.73 232.89±6.21 17.73±0.54 33.67±1.42
634.22
金线莲正交试验表
提取温度 /° C A 1(70) 1(70) 1(70) 1(70) 2(80) 2(80) 2(80) 2(80) 3(90) 3(90) 3(90) 3(90) 4(100) 4(100) 4(100) 4(100) 料液比 /mL B 1(30) 2(40) 3(50) 4(60) 1(30) 2(40) 3(50) 4(60) 1(30) 2(40) 3(50) 4(60) 1(30) 2(40) 3(50) 4(60) 提取时间 /h C 1(1.0) 2(1.5) 3(2.0) 4(2.5) 2(1.5) 1(1.0) 4(2.5) 3(2.0) 3(2.0) 4(2.5) 1(1.0) 2(1.5) 4(2.5) 3(2.0) 2(1.5) 1(1.0) 乙醇比例 /% D 1(60) 2(70) 3(80) 4(90) 3(80) 4(90) 1(60) 2(70) 4(90) 3(80) 2(70) 1(60) 2(70) 1(60) 4(90) 3(80) 误差e E 1 2 3 4 4 3 2 1 2 1 4 3 3 4 1 2
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目的和意义
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繁殖栽培
生存现状
化学成分
成分分析、多糖类 提取测定、黄酮类 化合物含量测定
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药品方面 我国2010版 药典并未将 金线莲收入 其中 农业角度 2013年农业科学院起 草了包括种苗、栽培 技术规范、质量安全 要求在内的《福建金 线莲行业标准》、 《台湾金线莲行业标 准》。
金线莲黄酮类的测定
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结构安排
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摘要 前言 材料
方法考察
紫外法测定总 黄酮含量
HPLC测定黄 酮苷成分
结果
讨论
参考文献
致谢
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内容简介
HPLC分析黄酮苷的成分
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色谱条件
色谱柱为Grace VisionHT C18 （250mm×4.6mm,5µm）,流动相为甲醇0.04%盐酸（45：55），流速为1mL/min， 检测波长为374nm，结果见图1。
F0.05(3,3)=9.28 F0.01(3,3)=29.46
* *
27
正交试验极差分析表
提取温度A 料液比B 提取时间C 乙醇比例D
wk.baidu.com
k1
k2
8.699
10.336
8.827
9.273
9.931
9.475
6.099
8.799
k3
k4 优水平 Rj 主次顺序
10.128
8.712 A2(80°C) 1.637
9.861
9.915 B4(60mL) 1.088 DABC
9.444
9.025 C1(1h) 0.906
10.855
12.123 D4(90%) 6.024
不足之处
1、对照品选择的深究
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最初对续滤液的NaNO2-Al(NO3)3-NAOH的显色处理后颜色比 未显色续滤液浅，其中的缘由并未深究，而该反应的原理为黄酮类 化合物的3-OH或5-OH与4-羰基一起与铝离子易形成稳定的络合物， 带Ⅱ在碱性条件下会红移，含铝离子的黄酮络合物往往在紫外 505nm左右有一比较明显的吸收带。液相分析存在有槲皮素、山奈 酚、异鼠李素等黄酮类化合物。
金线莲总黄酮测定方法的研究
中国药科大学本科生毕业论文（设计）
1046019 邱国娟
中药资源与开发
背景
1
研究现状
目的和意义 结构安排 内容简介 不足之处
2
背景
金线莲
兰科 开唇兰属
3
Anoectochilus roxburghii(Wall) Lindl.
1.分布在我国福建、广东、云南和台湾等省份 糖尿病 2.金线莲具有很好的药用价值 高血脂 乙型肝炎等疾病 繁殖率低 3.金线莲为珍稀濒危药用植物 生长环境独特 鸟类嗜食等原因
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结果
样品测定
不同生长环境金线莲样品含量
含量（µg/g） 生长环境 槲皮素 林下种植 大棚种植 组织培养 野生 277.12±8.87 山奈酚 73.81±2.23 异鼠李素 859.10±24.74 1434.97±45.40 167.58±0.74 367.66±19.63
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总量（µg/g）
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含量 (mg/g)
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16
5.619 7.608 9.769 11.801 11.532 12.574 6.683 10.556 11.883 11.345 10.758 6.528 6.272 5.567 12.233 10.774
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多采用质谱、核磁共振等现代波谱技术确定其结 构成分，黄酮类的提取大多数研究者仅选用了单一的 条件对其进行分离提取，并未给出选取此单一条件的 理由。 总结
本文对金线莲的黄酮类成分提取进行分析，从提 取溶剂、方法、温度、含量等分析研究，同时采用单 因素法和正交试验设计法对数据进行分析比较，选取 最优提取方法，同时参考其他植物黄酮类成分的测定， 对已有的研究进行完善。
图1 对照品（A）、供试品（B）高效液相色谱图； 1.槲皮素（Quercetin）；2.山柰酚（Kaempferol）；3.异鼠李素（Isorhamnetin） A
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B
检测波长的选择
图2 对照品紫外扫描图谱 1槲皮素；2山奈酚；3异鼠李素；
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线性关系考察
图3 混合对照品标准曲线
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紫外法测定总黄酮含量