总黄酮、多酚含量的测定

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菊花总黄酮_多酚及水浸出物含量分析

（3）总黄酮含量的测定：取供试品溶液 0.5 mL，按（1）步骤处理后，于 510 nm 处测定吸光值，再由标准曲
线计算出总黄酮含量。 1.2.3 菊花多酚含量检测方法
（1）供试液制备：精确称取菊花样品 2.50 g，移入 250 mL 三角锥瓶中，250 mL 沸水浸提 10 min，每隔 3 min 摇晃 1 次，中途搅拌 2 次，减压过滤，蒸馏水洗涤滤渣数次，滤液定容至 250 mL 容量瓶中，即为供试液。
酮含量和怀菊总黄酮含量的 RSD 值都小于 5%，且前者比后者高；二者占水浸出物的含量，分别是 10.21% 、13.74% 。段崇霞报道的杭菊总黄酮含量为 30.17 mg/g，而笔者测得的杭菊含量为 51.76 mg/g，可能由分析检测的原料不同所致。另外，与段崇霞、 [7] 汪民海[8]、芦金清[9]、杨铭[10]等报道的贡菊、滁菊、亳菊、
有治疗心血管疾病、抗氧化以及抗肿瘤等多种药理功效[1-3]。多酚类物质是总黄酮类化合物中的一类主要功能活性物质，在自然界分布非常广泛，具有抗氧化、抗衰老、抗肿瘤、防治心脑血管疾病等多种药理功能，但菊花中多酚物质的含量测定未见报道。此文选取杭菊和怀菊两类有代表性的菊花，对其总黄酮含量、多酚含量及水浸出物总量进行测定与分析，可为菊花功能活
出物含量分别为(506.90±2.56) mg/g、(493.80±2.63) mg/g，RSD 分别为 0.51%、0.53%，该研究结论可为菊
花功能活性成分的提取及综合利用提供理论依据。
关键词：菊花；总黄酮；多酚；水浸出物；含量
中图分类号：S3
文献标志码：A
论文编号：2009-2483
Content Analysis of the Flavonoids, Polyphenols and Water-extracts in Chrysanthemum Zhang Jianyong1, Jiang Heyuan1, Yuan Xinyue2, Yao Yu2, Liu Hongyun1, Cui Hongchun2

总黄酮含量测定

1 总黄酮含量测定1．1 紫外可见分光光度法严赞开［1］综述了紫外分光光度法测定植物中黄酮含量的方法．重点介绍了单波长法、差示法、双波长法、三波长法、导数法等紫外分光光度法测定黄酮类化合物含量的原理及分析特性。

1．1．1 紫外可见分光光度法: 是以分子吸收光谱为基础的紫外－可见分光光度法，利用某些物质的分子在峰带I( 300 ～400 nm) 和峰带Ⅱ( 220 ～280 nm) 光谱区的吸光度来进行分析测定的方法。

具有简便、适用性广、准确度、精密度和重现性较好等特点，在总黄酮含量分析中发挥着重要作用。

1．1．2 比色法: 是一些药典最常用的总黄酮含量检测方法，它主要以Al( NO3 ) 3 为显色剂，在碱性条件下，利用其与总黄酮形成红色螯合物为特征。

常用于总黄酮类化合物含量测定的金属盐试剂有Al( NO3 ) 3、AlCl3 等。

1．1．3 差示分光光度法简称ΔA 法: 使用稍高于样品或稍低于样品的标准作参比，测量样品和参比间的相对吸光度。

而此相对吸光度又与样品和参比间的浓度差成比例关系，借差示工作曲线而求出样品的含量。

1．1．4 双波长和导数分光光度法: 用于测定吸收光谱曲线重达的混合物的含量而不须用解联立方程，还可分析高浓度及混浊样品，其灵敏度和准确度比普通分光光度法好。

在选择波长时，原则上除了要干扰物有相等吸光度外，还要求两波长比较接近，被测组分在该两波长处的摩尔吸收系数相差大些，这样方法的灵敏度会更高。

如果将上述双波长分光光度计上两个波长尽可能指近，使只相差1 ～2 nm，并且同时进行扫瞄，能得到试样一阶导数吸收光谱-吸光度对波长的变化率曲线，即导数分光光度法。

2 药理作用2．1 镇痛作用赵铁华等［4］研究结果显示灌胃、腹腔注射、皮下注射适宜剂量的黄芩茎叶总黄酮，对实验动物经化学和热刺激导致的疼痛反应皆有一定的抑制作用，其镇痛作用机制与中枢作用相关。

银杏总黄酮( TFG) 腹腔内注射可显著抑制甲醛致小鼠疼痛反应，延长小鼠舔足潜伏期并减少小鼠扭体反应数。

总黄酮含量测定-比色法

总黄酮（Flavonoid）含量(铝盐显色法酶标仪96样)（一）检测原理：总黄酮，即黄酮类化合物，包括黄酮，黄酮醇，黄烷酮，橙酮，异黄酮，黄烷醇，花青素等，是植物重要的一类次生代谢产物，具有有较强的抗氧化活性，可捕捉活性氧自由基，降低氧化伤害，在果实中影响其色泽和风味；对植物的抗逆性（比如抗紫外）和抗病虫害方面有重要作用。

实验采用NaNO2-Al(NO3)3-NaOH显色法测定黄酮总含量，即在碱性亚硝酸盐溶液中，黄酮类化合物与铝离子形成在510nm处有特征吸收峰的红色络合物，测定反应产物在510nm处的吸光值，即可计算样品中总黄酮含量。

（二）试剂组分与配制：试剂名称规格保存要求备注试剂一液体1.6m L×1支4℃保存试剂二液体3m L×1瓶4℃保存试剂三液体12m L×1瓶4℃保存标准品粉剂mg×1支4℃保存做标曲，则用到该试剂（三）所需的仪器和用品：酶标仪、96孔板、粉碎仪、筛子、60%乙醇、离心机、蒸馏水。

（四）总黄酮测定：建议正式实验前选取2个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验样本和试剂浪费！1、样本制备：①组织样本：称取约0.1g新鲜样本(若水分充足，可增加样本取样质量)；或者称取约0.03g烘干样本（将样本在105℃下杀青3min，然后60℃烘干至恒重，粉碎，过40-60目筛，得到烘干样本），加入1.5mL的60%乙醇（若鲜样需研磨均质），60℃振荡提取2h（若蒸发用60%乙醇定容至1.5mL），25℃×12000rpm，离心10min，取上清待测。

【注】：若样本量较少，可同比例缩减样本量，如取0.02g干样，加入1mL60%乙醇，60℃振荡提取2h。

25℃×12000rpm，离心10min，取上清，用60%乙醇定容至1mL待测。

②液体样本：直接检测；若浑浊，离心后取上清检测。

2、上机检测：①酶标仪预热30min，调节波长至510nm。

20种牡丹叶中总黄酮、总酚和芍药苷的含量测定及抗氧化活性研究

20种牡丹叶中总黄酮、总酚和芍药苷的含量测定及抗氧化活性研究一、本文概述本文旨在全面研究20种牡丹叶中总黄酮、总酚和芍药苷的含量，并评估其抗氧化活性。

牡丹，作为中国传统名花，不仅具有观赏价值，其叶和根也广泛用于中药制剂。

近年来，随着人们对天然产物的深入研究，牡丹叶中的活性成分及其生物活性引起了广泛关注。

特别是总黄酮、总酚和芍药苷，这些成分在抗氧化、抗炎、抗疲劳等方面展现出显著的生物活性。

本文将通过高效液相色谱法（HPLC）、紫外-可见光谱法（UV-Vis）等分析方法，对20种不同品种的牡丹叶进行定量分析，比较各品种中总黄酮、总酚和芍药苷的含量差异。

本文还将采用多种体外抗氧化实验，如DPPH自由基清除实验、ABTS自由基清除实验等，评估牡丹叶提取物的抗氧化能力，以期为其在食品、保健品和化妆品等领域的应用提供科学依据。

通过本文的研究，我们期望能够深入了解牡丹叶中活性成分的含量及其抗氧化活性，为牡丹叶资源的合理开发利用提供理论支持和实践指导。

本文的研究结果也将为其他天然产物的活性成分研究和应用开发提供参考和借鉴。

二、材料与方法本研究采用了20种不同品种的牡丹叶作为实验材料。

所有牡丹叶样本均采自健康的、无病虫害的植株，并在相同的环境条件下进行养护。

采样后，叶片立即进行处理并保存在适当的条件下，以避免任何可能影响其化学成分的变化。

实验所用的试剂包括乙醇、甲醇、丙酮等有机溶剂，以及用于测定总黄酮、总酚和芍药苷的标准品和试剂。

所有试剂均为分析纯级别。

实验仪器包括高效液相色谱仪（HPLC）、紫外可见分光光度计、电子天平、旋转蒸发仪、离心机等。

将牡丹叶样本进行粉碎后，采用乙醇-水混合溶液进行索氏提取。

提取液经过旋转蒸发仪浓缩后，得到牡丹叶提取物。

采用亚硝酸钠-硝酸铝-氢氧化钠比色法测定牡丹叶提取物中的总黄酮含量。

将提取物与试剂混合后，在特定波长下测定吸光度，并与标准曲线进行比较，从而计算出总黄酮的含量。

采用福林酚试剂法测定牡丹叶提取物中的总酚含量。

总黄酮的含量测定方法

总黄酮的含量测定方法
总黄酮的含量测定方法主要包括以下几种：
1. 酸性条件下的比色法：将样品与酸反应生成有色化合物，测定其吸光度。

如盐酸或硫酸与总黄酮反应生成有色化合物，可通过紫外可见光谱测定吸光度，进而计算总黄酮的含量。

2. 高效液相色谱法(HPLC)：使用高效液相色谱仪进行分离和测定。

通过采用特定的色谱柱和流动相，分离出总黄酮，并通过检测器测定其峰面积或峰高值，并与已知标准品进行比较，计算样品中总黄酮的含量。

3. 薄层色谱法：将总黄酮的样品与色谱载体共同涂布在薄层板上，通过色谱柱法进行有效分离。

然后，利用染色剂，如硼酸或铝酸盐等，在紫外或可见光下观察或测定样品斑点的强度，从而计算总黄酮的含量。

4. 毛细管电泳法：通过毛细管电泳仪将总黄酮进行分离，并通过测定峰面积或峰高值，配合已知标准曲线，计算总黄酮的含量。

需要注意的是，不同样品中总黄酮的化学结构和含量可能存在差异，因此在选择测定方法时应根据具体的样品特性和仪器设备的可用性做出选择。

黄酮、多酚的测定

多酚精确称取没食子酸标准品25mg，用水溶解并定容至250ml，得对照品标准溶液。

精密吸取对照品溶液0.0，0.1，0.2，0.3，0.4，0.5ml于25m比色瓶中，再加入1ml福林酚显色剂，摇匀后再加入2ml 10% Na2CO3溶液，定容至10ml，室温下反应20min后测定A760.取一定量的香椿加蒸馏水碾碎，测其上清液测定。

（根据吸光值自己调整量）称取剪碎的香椿0.5g（按需称取），加入5 mL 80%乙醇研磨过滤，将滤液放置20 min。

取0.1 mL滤液，加入5 mL水及0.5 mL福林酚反应8 min，再加1.5 mL 10%的碳酸钠溶液，于760 nm处测定吸光度值。

根据标准曲线算出总酚含量。

黄酮精确称取芦丁标准品10mg，加入几滴无水乙醇溶解，然后用60%乙醇定容至100ml，得对照品标准溶液。

取芦丁标准液0.00、0.20、0.40、0.60、0.80 和1.00 mL 分别放入1～6号25ml比色管中，然后分别加入5ml蒸馏水，加入0.2mL 5%NaNO2，摇匀,静置6min ;再分别加入0.2mL 10%Al(NO3)3，摇匀，静置6min，再分别加入1mL 4%NaOH，用60%乙醇定容至刻度10ml处,摇匀，静置15min，然后于510nm下测吸光度。

取一定量的香椿加60%乙醇碾碎，测其上清液测定。

（根据吸光值自己调整量）DPPH法测定沙棘籽原花青素清除自由基的能力首页> 期刊> 过刊浏览> 大学学报> 《宁夏医科大学学报》> 2009年2月31卷1期>论著> 文章详情【摘要】目的研究沙棘籽原花青素体外抗氧化活性。

方法DPPH法测定沙棘籽原花青素抗氧化、清除自由基能力。

结果沙棘籽原花青素抗氧化、清除自由基能力略低于抗坏血酸，清除DPPH 自由基的半数有效量分别为93.0g/kg和70.3g/kg，自由基清除能力分别为0.0107和0.0142。

红河州13种食用花卉的总黄酮、总多酚含量测定

红河州13种食用花卉的总黄酮、总多酚含量测定严和平;洪亮;徐进诺;罗玉芹;陈雅顺;许春;欧朝凤;张举成【摘要】采用乙醇热提法对红河州13种食用花卉进行总黄酮和总多酚的提取.以NaNO2-Al(NO3)3-NaOH为显色体系,利用双波长分光光度法,测定总黄酮含量;以Folin-phenol试剂为显色剂,测定总多酚含量.结果表明:13种食用花卉中均含有黄酮和多酚类化合物.总黄酮含量顺序是:桂花(23.93 %)>黄饭花(6.51 %)>棠梨花(3.93 %)>猫屎花(3.43 %)>玉荷花(2.08 %)>鸡屎臭药花(2.04 %)>帘子藤花(1.77 %)>芭蕉花(1.75 %)>石榴花(1.63 %)>马桑花(0.81 %)>菊花(0.64 %)>金雀花(0.52 %)>苦刺花(0.22 %).总多酚含量顺序是:石榴花(13.16 %)>桂花(10.83 %)>棠梨花(5.34 %)>猫屎花(4.94 %)>黄饭花(3.81 %)>鸡屎臭药花(3.23 %)>玉荷花(3.13 %)>帘子藤花(2.61 %)>芭蕉花(2.34 %)>菊花(1.31 %)>金雀花(1.11 %)>马桑花(1.08 %)>苦刺花(0.83 %).桂花的总黄酮含量最高,石榴花的总多酚含量最高,苦刺花的黄酮和多酚含量均最低.%13 types dietary flowers from Honghe Prefecture were extracted by hot extraction.The total flavones contents of the 13 types dietary flowers were detected by dual wavelength spectrophotometry, using the color system of NaNO2-Al(NO3)3-NaOH. The concentration of total polyphenols were detected by Folin-phenol reagent colorimetric method. The results indicated all of the flowers had polyphenols and flavones, the total flavonoids contents sequnce was Osmanthus fragrans(23.93 %)>Buddleja officinalis(6.51 %)>Pyrus pashia (3.93 %)>Gnaphalium affine(3.43 %)>Bauhinia purpurea(2.08 %)>Valeriana officinalis(2.04 %)>Clematis chinensis Osbeck(1.77 %)>Musasapientum(1.75 %)>Punica granatum(1.63 %)>Morus alba(0.81 %)>Chrysanthemum morifolium(0.64 %)>Caraganasinica(0.52 %)>Sophora davidii(0.22 %).The total polyphenols contents sequnce wasP.granatum(13.16 %)>O.fragrans(10.83 %)>P.pashia(5.34 %)>G.affine(4.94 %)>B.officinalis(3.81 %)>V.officinalis(3.23 %)>B.purpurea(3.13 %)>C.chinen sis Os-beck(2.61 %)>M.sapientum(2.34 %)>C.morifolium(1.31 %)>C.sinica(1.11 %) >M.alba(1.08 %)>S. davidii(0.83 %).The content of total flavones inO.fragrans was the highest and the total polyphenols in P. granatum was the highest,but the flavones and polyphenols in S.davidii were the lowest.【期刊名称】《食品研究与开发》【年(卷),期】2018(039)009【总页数】6页(P142-147)【关键词】食用花卉;总黄酮;总多酚;含量测定;红河州【作者】严和平;洪亮;徐进诺;罗玉芹;陈雅顺;许春;欧朝凤;张举成【作者单位】红河学院理学院,云南蒙自661199;云南省天然药物与化学生物学重点实验室,云南蒙自661199;红河学院生命科学与技术学院,云南蒙自661199;红河学院理学院,云南蒙自661199;红河学院理学院,云南蒙自661199;红河学院理学院,云南蒙自661199;云南省天然药物与化学生物学重点实验室,云南蒙自661199;红河学院理学院,云南蒙自661199;云南省天然药物与化学生物学重点实验室,云南蒙自661199;浙江环茂自控科技有限公司,浙江杭州310051;红河学院理学院,云南蒙自661199;云南省天然药物与化学生物学重点实验室,云南蒙自661199【正文语种】中文云南拥有中国二分之一的植物资源，是植物资源极为丰富的“天然花园”。

亚贡叶中总黄酮及总酚酸的含量测定

亚贡叶中总黄酮及总酚酸的含量测定田芳窦德强迟玉新吴阳朱红丘鹰昆康廷国董锋【摘要】目的成立亚贡叶总黄酮、总酚酸的含量测定方式。

方式利用分光光度计通过测定吸光度计算总黄酮、总酚酸的含量。

结果实验成立了总黄酮、总酚酸的标准曲线，测得亚贡叶中总黄酮平均含量为%, RSD=%（n=6）；总酚酸平均含量为%, RSD=%（n=6）。

结论成立了亚贡叶的总黄酮、总酚酸含量测定方式，该法简单、快捷，重现性好，可用于亚贡叶的质量操纵和定量分析。

【关键词】亚贡总黄酮总酚酸Abstract：ObjectiveTo establish the determination methods of total flavonoids and total phenolic acid from leaf of Yacon. MethodsThe content of total flavonoids and total phenolic acid were determined by spectrophotometry. ResultsCalibration graphs were constructed for total flavonoids and total phenolic acid. The content of total flavonoids was % and the total phenolic acid was %. ConclusionThe methods are rapid, reliable, accurate and suitable for analysis of total flavonoids and total phenolic acid and quality control in Smallanthus sonchifolius.Key words：Yacon; Total flavonoids; Total phenolic acid亚贡Smallanthus sonchifolius (Poepp．et End1．)H．Robinson为菊科向日葵属连年生草本植物，俗称“雪莲果”“雅龙果”，英文名为“YACON”。

不同花期野葛花总黄酮、花青素和总多酚含量的研究

不同花期野葛花总黄酮、花青素和总多酚含量的研究谭娟;刘良科;谢梦涵;陈思娴【摘要】采用紫外-分光光度法测定了野葛花中的总黄酮、花青素和总多酚的含量,为野葛花深入开发利用提供理论依据.研究结果表明,野葛花在花蕾期、盛花期和终花期时总黄酮、花青素和总多酚含量存在显著差异,在盛花期时均达到最大值,分别是1.61％、2.12％和4.11％.提取野葛花的总黄酮、花青素和总多酚时,适宜在盛花期采收.【期刊名称】《怀化学院学报》【年(卷),期】2015(034)011【总页数】3页(P12-14)【关键词】野葛花;花期;总黄酮;花青素;总多酚【作者】谭娟;刘良科;谢梦涵;陈思娴【作者单位】怀化学院,生物与食品工程学院, 湖南怀化418008;怀化学院,民族药用植物资源研究与利用湖南省重点实验室, 湖南怀化418008;怀化学院,湘西药用植物与民族植物学湖南省高校重点实验室, 湖南怀化418008;怀化学院,生物与食品工程学院, 湖南怀化418008;怀化学院,民族药用植物资源研究与利用湖南省重点实验室, 湖南怀化418008;怀化学院,湘西药用植物与民族植物学湖南省高校重点实验室, 湖南怀化418008;怀化学院,生物与食品工程学院, 湖南怀化418008;怀化学院,生物与食品工程学院, 湖南怀化418008【正文语种】中文【中图分类】R282野葛花为豆科植物野葛（Pueraria Lobate（Willd.）ohwi）的花，异名葛条花.在我国葛花用于解酒已有愈千年历史，《神农本草经》、《本草纲目》等均有记载，其性甘、凉，用于解酒醒脾，治伤酒发热，烦渴，吐血，肠风下血等症状［1］.近年来随着人们生活水平的提高，饮酒成为部分人生活的一种方式，大量或长期饮酒，则易导致急、慢性酒精中毒.葛花解酒具有简、便、效、廉的特点，备受人们关注［2］.不仅如此，大量研究表明葛花具有保肝护肝作用，野葛花能够在乙醇的肠胃吸收及代谢两个环节发挥作用，其水提取物通过激活乙醇脱氢酶活性来降低乙醇的浓度，从而有效地降低血液中乙醇浓度，对酒精引起的肝细胞损害有保护作用［3，4］.同时，野葛花还具有保护心肌、扩张脑血管、心血管和外周血管以及抗氧化、降血糖等作用［5，6］.已有研究表明，葛花主要化学成分为黄酮类化合物，还包括皂苷类化合物、花青素、总多酚、挥发油等，并分离得到葛花苷、鸢尾异黄酮等多种有效成分化合物［7，8］.但植物的花有一定的生长周期，不同时期的花中化学成分及含量不尽相同.为获得药效成分含量较高的野葛花，也为促进药材原材料使用规范化，本文通过比较测定不同花期的野葛花的主要成分总黄酮、花青素以及总多酚的含量，为野葛花这一药用资源的进一步规范化开发与应用提供科学依据. 1.1 实验材料野葛材料属怀化学院生物园人工栽培品种.于2014年7～8月采摘花蕾期（花被未张开）、盛花期（花朵绽放，花被片张开角度最大）和终花期（花朵凋零，凋落在地）的野葛花，并及时将各花期样品洗净后，40－50℃干燥至恒重，粉碎，过60目筛得葛花粉末，备用.1.2 方法1.2.1 总黄酮含量的测定1.2.1.1 对照液及标准曲线的制备准确称取芦丁对照品20 mg，加85%乙醇30 ml，微热溶解，加乙醇稀释至100 ml，摇匀，即0.2 mg/ml的芦丁对照液.吸取对照液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 ml 分别置于25ml试管中，加5%亚硝酸钠溶液1.0ml，6 min后，加10%氯化铝溶液1.0 ml，6 min后，加1.0 mol/LNaOH 10 ml，85%乙醇稀释至刻度.用蒸馏水作空白，在510 nm处测吸光度，绘制标准曲线（图1），回归方程为y＝0.4331x－0.0039，R2＝0.9996，其中x为提取液中总黄酮含量（mg/ml），y为吸光值.1.2.1.2 待测品溶液制备及总黄酮含量测定参考李胜华等［9］的方法，采用硝酸铝－亚硝钠，此色法测定总黄酮含量.准确称取不同花期5 g干葛花各3份，加125 ml分析纯甲醇，索氏提取法萃取，旋转蒸发，85%乙醇溶液溶解过滤，定容至100ml，即得待测品溶液.量取1ml待测品溶液至25ml试管中，加入5%亚硝酸钠1 ml，混匀，6 min后加5%氯化铝1ml，混匀，6 min后加1 mol/LNaOH 10 ml，加85%乙醇至刻度，摇匀，15min后用分光光度法在510 nm波长处测定吸光值，根据芦丁标准曲线中的回归方程计算样品中总黄酮的含量.式中：c代表样品中总黄酮的浓度（mg/ml），n代表样品的稀释倍数，w代表干样品的质量（g）.1.2.2 总多酚含量的测定1.2.2.1 对照液及标准曲线的制备称取10 mg没食子酸，定容至100 ml，摇匀作为没食子酸对照液（0.1 mg/ml）.取1 ml不同浓度没食子酸对照液，分别加入5ml福林酚试剂，摇匀.反应3～8 min，加4 ml7.5%碳酸钠，加水定容，摇匀.室温下放置60 min.以蒸馏水作空白，在765 nm处测吸光度，绘制标准曲线（图2），回归方程为y＝3.8998x＋0.0081，R2＝0.9992，其中x为提取液中总多酚含量（mg/ml），y为吸光值.1.2.2.2 待测品溶液制备及总多酚含量测定参考欧阳玉祝等［10］的方法，采用福林－酚（Folin－ciocalteu）法测定野葛花提取液中的总多酚含量.取样品1 ml于25 ml试管内，加入5 ml福林酚试剂，摇匀，按上述方法测定吸光值.根据没食子酸标准曲线的回归方程计算样品中总多酚的含量.设置3次重复，取平均值.1.2.3 花青素含量的测定1.2.3.1 对照液及标准曲线的制备称取儿茶素对照品20mg，70%乙醇定容至100ml，摇匀，即为0.2 mg/ml的儿茶素对照液.吸取对照液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 ml分别置于25 ml试管中，依次加入6 ml 4%的香草醛－甲醇溶液和3 ml浓盐酸，摇匀，30±1℃避光条件下反应15 min后，70%的乙醇定容至25 ml，以70%乙醇代替样品溶液作空白对照，500 nm处测吸光度，绘制标准曲线（图3），回归方程为y＝0.0323x－0.0001，R2＝0.9995，其中x为提取液中花青素含量（mg/ml），y为吸光值.1.2.3.2 待测品溶液制备及花青素含量测定参考鲍俊竹［11］的方法，使用香草醛－甲醇溶液和盐酸等试剂，采用分光光度法测定花青素的含量.量取1 ml样品液稀释，同上方法依次加入同样药品处理，测定吸光度，根据儿茶素标准曲线的回归方程计算样品中花青素的含量.设置3次重复，取平均值.野葛花3个不同时期包括花蕾期、盛花期和终花期的总黄酮、花青素和总多酚含量如图4所示.本实验结果表明，野葛花中总黄酮、花青素和总多酚含量在不同的花期差异较大，从花蕾期到终花期，总黄酮、花青素和总多酚的含量均呈现出先升高后降低的趋势.在盛花期野葛花中总黄酮、花青素和总多酚含量均达到最高，分别为1.61%、2.12%和4.11%，显著高于花蕾期和终花期（P＜0.05），花蕾期和终花期时总黄酮含量和花青素含量没有显著性差异（P＞0.05），而总多酚含量在花蕾期时显著高于终花期（P＜0.05）.野葛花主要成分为黄酮类化合物，还含有皂苷类化合物、花青素、总多酚、挥发油、无机元素等.黄酮类化合物不仅数量种类繁多，而且结构类型复杂多样，对哺乳动物和其它类型的细胞具有许多重要的生理、生化作用，是许多中草药的有效成分.研究表明，不同植物种类在不同花期时体内有效成分含量存在显著差异［12－14］.本研究表明，野葛花的总黄酮、花青素和总多酚含量在不同花期存在一定差异，其中盛花期时这三种成分含量都达到最高值.与不同花期状态下的金银花（Lonicera japonica Thunb）［12］、白玉兰（Michelia alba DC）［13］、玉兰（Magnolia denudata Desr.）［14］等中的总黄酮含量和总多酚含量测定的结果基本一致，这可能与生物合成过程中酶的含量有关.也有研究表明，植物液泡中的花青素合成受外部环境因素的刺激，包括光照、低温、紫外线A、紫外线B、缺水、蔗糖等，外部因素诱导转录因子表达，进而激活花青素合成途径中结构基因的表达［15］.因而推测野葛花在不同花期，它的状态不一，盛花期的花朵张开的最大，即表面积最大，接受外界环境的刺激最大，盛花期的花青素含量最高.本实验结果表明，不同花期野葛花的总黄酮、花青素和总多酚的含量存在一定差异，其中盛花期时其有效成分含量较高.在用野葛花加工饮料、保健品、药品等时，建议在盛花期采收，使其总黄酮、花青素和总多酚等有效成分含量达到最大，提高资源利用率.?【相关文献】［1］国家中医药管理局《中华本草》编委会.中华本草（4）［M］.上海：上海科学技术出版社，1999.［2］王东坡，谭学林.葛花解醒汤对酒精性肝病防治作用研究［J］.贵阳中医学院学报，2002，24（2）：55.［3］江俊珊，张忠德.葛花治疗急性酒精中毒观察［J］.中国实用乡村医生杂志，2004，11（10）：36.［4］芦洁，李文哲，倪亚明.中药水提取物对乙醇脱氢酶活性影响的初步研究［J］.同济大学学报医学版，2002，23（1）：23.［5］李文，贺殿，王晓，等.葛花中总黄酮的含量测定［J］.西北药学杂志，2005，20（1）：14－15.［6］彭常安，李媛媛.葛花总黄酮的抗氧化作用研究［J］.安徽师范大学学报（自然科学版），2012，35（2）：163－166.［7］贺云，张尊听，李鹤.野葛花中葛花苷的测定方法研究［J］.西北植物学报，2005，25（4）：791－793.［8］张淑萍，贺云，刘柏涛.RP－HPLC测定野葛花中3种异黄酮［J］.分析试验室，2006，25（2）：74－76.［9］李胜华，伍贤进，郁建平，等.多穗柯总黄酮提取工艺及其含量动态变化研究［J］.食品科学，2008，29（6）：139－142.［10］欧阳玉祝，陈小东，唐红玉，等.路边青中总多酚的提取与分离研究［J］.食品科学，2009，30（16）：44－47.［11］鲍俊竹，陈月坤，徐桂花，等.测定葡萄籽提取物中原花青素含量的方法［J］.农业科学研究，2005，26（1）：44.［12］王晋.金银花不同花期总黄酮含量的测定［J］.现代农业科技，2010，21：116－117. ［13］叶青，魏尚曦，李燕红，等.白玉兰叶及不同花期的花中总黄酮的测定［J］.食品科技，2011，36（2）：277－279.［14］吴子龙，赵昕，刘学远，等.不同花期玉兰与广玉兰花中总黄酮和总多酚含量的研究［J］.中草药，2014（03）：147－148.［15］张宁，胡宗利，陈绪清，等.植物花青素代谢途径分析及调控模型建立［J］.中国生物工程杂志，2008，28（1）：97－105.。

亚贡叶中总黄酮及总酚酸的含量测定

亚贡叶中总黄酮及总酚酸的含量测定背景作为食品和药品等领域的常用添加剂，总黄酮和总酚酸广受关注。

亚洲人民喜欢饮用茶水，茶叶中富含黄酮类和酚酸类物质。

亚贡叶是一种茶树的近亲，也含有丰富的总黄酮和总酚酸。

因此，对于亚贡叶中总黄酮及总酚酸的含量测定具有一定的研究意义。

实验方法实验器材•分析天平•恒温器•恒温槽•磨粉器•容量瓶•离心管•手动振荡器实验试剂•甲醇•乙酸乙酯•乙醇•硫酸实验步骤1.用磨粉器将亚贡叶制成细粉末，称取一定量置于离心管中。

2.加入甲醇，并振荡30分钟，放置15分钟静置。

3.经离心制成沉淀，加入乙酸乙酯，并振荡，再静置15分钟。

4.取上层液体移到新的烧杯中。

5.将离心管里的沉淀放到容量瓶内，加入乙酸乙酯，振荡10分钟，用乙酸乙酯补充至刻度线。

6.将乙酸乙酯提取液过滤，取一部分蒸干。

7.取一定量蒸干物质加入乙醇，振荡，放置15分钟。

8.将液体放到新的烧杯中。

9.取一部分乙醇液体移动到离心管中，加入硫酸，振荡2分钟，放置15分钟静置。

10.取上层液体移到新的离心管中，弃去底部混浊物质。

11.将液体移动到新的烧杯中并蒸干。

12.用甲醇溶解蒸干的物质。

13.用分析天平，分别对总黄酮和总酚酸量进行测定。

结论根据实验结果，亚贡叶中总黄酮的含量为 X 毫克/克，总酚酸的含量为 Y 毫克/克。

实验过程中，需要注意样品的制备和测量方法。

由于各种因素的干扰，需要重复多次实验，取平均值来得出较为准确的数据。

山西老陈醋中总多酚和总黄酮测定方法研究

山西老陈醋中总多酚和总黄酮测定方法研究翟淑红;雷霄宇;陈涛【摘要】分析了Folin-Ciocalteu法测定山西老陈醋中总多酚含量、Al(NO3)3-NaNO2-NaOH体系比色法测定山西老陈醋中总黄酮含量的条件。

通过单因素试验得到了总多酚和总黄酮的优化试验条件，并根据稳定性、重现性、精密度、加标回收率试验对方法进行评价。

结果表明2种测定方法简便、快速、准确、可靠，可用于山西老陈醋及其他食醋产品中多酚和黄酮的测定。

%The suitable conditions of determination of the content of total polyphenols in Shanxi aged vinegar using Folin-Ciocalteu method, the content of total flavonoids in the Shanxi aged vinegar using Al (NO3)3-NaNO2-NaOH colorimetric method were studied. The optimum experimental conditions were obtained by single factor experiment. The stability, repro-ducibility, precision, recovery rate test were employed to evaluate the experimental method. The results showed that two kinds of method were simple, rapid, accurate and reliable, which could be used for determination of polyphenols and flavonoids Shanxi aged vinegar and other vinegar products.【期刊名称】《湖北农业科学》【年(卷),期】2015(000)024【总页数】4页(P6372-6375)【关键词】山西老陈醋;总多酚;总黄酮;检测【作者】翟淑红;雷霄宇;陈涛【作者单位】华中农业大学楚天学院，武汉430205;华中农业大学食品科技学院，武汉 430070;华中农业大学食品科技学院，武汉 430070【正文语种】中文【中图分类】TS264.22食醋是人们生活中不可缺少的日常用品，也是一种国际性的重要调味品。

茅台酱香型酒糟中总黄酮及总多酚含量的测定

茅台酱香型酒糟中总黄酮及总多酚含量的测定王兴东;牟明月;任雅奇;许志玲;张前军;周清娣【期刊名称】《中国酿造》【年(卷),期】2015(034)010【摘要】建立酱香型酒糟中总黄酮及总多酚含量测定方法.以槲皮素为对照品,采用紫外分光光度法测定酱香型酒糟中总黄酮含量;以没食子酸为对照品,用Folin-Ciocateu比色法测定酒糟中总多酚含量,并对其测定条件进行了优化.结果表明,Folin-Ciocalteu比色法最优的测定条件为:加入Folin-Ciocalteu试剂2.5mL、10％ Na2CO3溶液4mL,在室温下显色80 min.槲皮素和没食子酸质量浓度分别在0.021 0～0.105 0 g/L(R2=0.997 6)和0.000 5～0.005 7 g/L(R2=0.999 7)范围内与吸光度值线性关系良好,平均回收率分别为99.12％、99.82％,相对标准偏差(RSD)分别为0.61％、0.33％;茅台酱香型酒糟中总黄酮及总多酚含量分别为20.40 mg/g和4.78 mg/g.此方法操作简单,稳定性以及重复性良好,结果准确可靠,适用于酱香型酒糟总黄酮和总多酚含量的测定.【总页数】5页(P86-90)【作者】王兴东;牟明月;任雅奇;许志玲;张前军;周清娣【作者单位】贵州大学精细化工研究开发中心,贵州贵阳550025;贵州大学化学与化工学院,贵州贵阳550025;贵州茅台酒股份有限公司,贵州仁怀564501;贵州大学化学与化工学院,贵州贵阳550025;贵州大学精细化工研究开发中心,贵州贵阳550025;贵州大学化学与化工学院,贵州贵阳550025;澳大利亚悉尼大学化学学院,澳大利亚悉尼1797【正文语种】中文【中图分类】O623.54【相关文献】1.凯氏定氮法测定茅台酱香型酒酒糟蛋白质含量 [J], 张世仙;余永华;金茜;曾启华;李庆秀2.茅台酱香型酒曲中黄酮、多酚含量的测定 [J], 王兴东;牟明月;杨毓溥;杨承月;李梦洁;张前军;周清娣;卫钢3.复方罗欧咳祖帕中总多酚总黄酮的含量测定与抗氧化活性研究 [J], 李玮;李莉;王晓梅;刁娟娟;王新玲4.不同产地沙棘中总黄酮、总多酚含量测定及其抗氧化活性研究 [J], 李娜;胡月月;葛亮5.酒糟总氨基酸、总多酚、多糖含量测定及抗氧化活性研究 [J], 许世浩;刘宏炳;何晨露;黎玲玲;燕雪花因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

总黄酮、多酚含量的测定

总黄酮、多酚含量的测定燕麦总黄酮含量的测定一、仪器紫外-可见分光光度计、分析天平、低速离心机、超声波提取器、恒温水浴锅、粉碎机、pH计、10mL容量瓶15个、10mL具塞试管、100mL烧瓶、10mL离心管10个、试管架2个二、药品芦丁标准品40mg、无水乙醇1000mL、亚硝酸钠500g、硝酸铝500g、NaOH 500g 三、实验步骤（一）、样品处理及总黄酮的提取1. 将样品籽粒分别称取2.5 g置于小信封里，80℃烘干24 h。

2. 研成粉末，称取500±2 mg样品于10 mL离心管中，使样品位于试管底部（重复3次）。

3. 每管加4 mL 60％乙醇，放水浴锅60℃浸提2 h。

6000 r/min 离心10 min，离心后取上清液于10 mL容量瓶中。

4. 再向离心管中加4 mL的60％乙醇，放水浴锅60℃浸提1 h。

6000 r/min离心10 min，离心后取上清液于相应的10 mL容量瓶中。

60％乙醇定容至10 mL，待测。

（二）、标准曲线绘制1. 精确量取浓度200 μg/mL芦丁标准溶液0、0.2、0.4、0.8、1.2、1.6、2.0 mL 分别置于10 mL容量瓶中。

2. 向容量瓶中分别加60％乙醇5、4.8、4.6、4.2、3.8、3.4、3.0 mL。

3. 然后加5％亚硝酸钠0.3 mL，摇匀，静置6 min。

4. 再加10％硝酸铝0.3 mL，摇匀，静置6 min。

5. 加4％氢氧化钠4.0 mL，用60%的乙醇定容至刻度，摇匀，静置12 min。

6. 于510 nm波长下测定吸光度，并以芦丁标准浓度值为纵坐标，以吸光度为横坐标，绘制标准曲线。

（三）、样品提取液总黄酮含量的测定准确吸取总黄酮提取液2.0 mL于10 mL容量瓶中，按二的方法测定吸光度，将吸光度代入标准曲线计算样液的总黄酮含量。

燕麦总酚含量的测定一、仪器紫外-可见分光光度计、分析天平、低速离心机、恒温水浴锅、粉碎机、pH计、微波炉、回流装置、25mL容量瓶、25mL具塞试管、250mL烧瓶二、药品没食子酸标准品100mg、无水乙醇1000mL、无水碳酸钠500g、盐酸500mL、福林酚试剂100 mL三、实验步骤（一）、样品总酚的提取称取2.0g粉碎的燕麦粉于250 mL烧瓶中，加入40 mL体积分数60%的乙醇溶液，提取液中盐酸含量0.024%，搅拌均匀，在恒温水浴锅中安置好回流装置，水浴温度75℃，提取50 min。

药典中总黄酮测定方法

药典中总黄酮测定方法
总黄酮是一类具有类黄酮结构和作用的化合物，广泛存在于植物中。

药典中常用的总黄酮测定方法包括以下几种：
1. 显色法：将含总黄酮样品与乙醇-水混合溶液及磷酸钠溶液混合后，加入硼酸试液，产生紫色或蓝色显色反应，通过比色法测定总黄酮含量。

2. 二苯基丙烯酸法：将含总黄酮样品与二苯基丙烯酸溶液混合后，利用紫外可见光谱法测定吸光度，通过标准曲线计算总黄酮含量。

3. 铝试剂法：将含总黄酮样品与铝试剂溶液混合后，加入氢氧化钠溶液，经酸化处理后用紫外可见光谱法测定吸光度，计算总黄酮含量。

4. 比色法：将含总黄酮样品与乙醇-氢氧化钾溶液混合后加入稀硫酸溶液，以黄烷酮为对照品，经比色法测定吸光度，计算总黄酮含量。

以上是比较常用的药典中总黄酮测定方法，选择不同的方法需考虑到样品类型、检测精度等实际问题。

黄酮、多酚和抗氧化

1、总黄酮含量(硝酸铝～亚硝酸钠比色法，以芦丁计)芦丁标准标准溶液的配制：准确称取经105 ℃干燥至恒重的芦丁标准品15.0 mg（精确至0.0001g），用甲醇溶解并定容至100 mL，配成150 μg/mL 的芦丁标准溶液，制备标准曲线。

精密称取一定量的测定样品，用30 %的乙醇溶液溶解定容至100 mL，取1 mL的待测液，加入30 %乙醇溶液至5 mL，加入5%亚硝酸钠溶液0.3 mL，混匀后放置5 min，加入10 %硝酸铝溶液0.3 mL，混匀后放置6 min，加入1.0 mol/L氢氧化钠溶液4 mL，用30 %乙醇定容至10 mL，静置10分钟，以零管为空白，摇匀后用1 cm的比色杯，在510 nm的波长处测定吸光度，并根据芦丁的标准曲线计算试样的总黄酮含量。

2、酚酸含量（福林试剂还原比色法，以没食子酸计）没食子酸标准溶液的配制：称取经真空干燥至恒重的没食子酸对照品25.0 mg，用30 %的乙醇溶液溶解并定容至100 mL，配成0.250 mg/mL的没食子酸标准溶液，制备标准曲线。

精密称取一定量的测定样品，用30 %的乙醇溶液溶解、定容，并稀释至适宜浓度，记录总体积。

取0.1 mL样品，并用水稀释至5.0 mL，各加入0.5 mL 未稀释的福林试剂，混匀后静置8 min，加入1.5mL 20%Na2CO3水溶液，室温暗处静置2 h，以零管为空白，用1cm的比色杯，在765 nm的波长处测定吸光度，并根据没食子酸的标准曲线计算试样的总酚含量。

抗氧化方法ABTS˙+法先配制140 mmol/L过硫酸钾（K2S2O8）溶液和7 mmol/L ABTS储备液，然后取176 µL 140 mmol/L过硫酸钾溶液和10 mL 7 mmol/L ABTS储备液混合，在室温条件下避光储备12-16 h。

测定之前加入乙醇将ABTS˙+溶液稀释至吸光值为0.700±0.02（734 nm）下将3.9 mL 的ABTS˙+溶液与0.1 mL待测样溶液（所用测试样品均溶解在50 %的甲醇中）混合摇匀，在室温下反应6 min，在734 nm 波长下测定吸光值，以50 %的甲醇为空白对照(Re, Pellegrini, Proteggente, et al, 1999)。

总黄酮含量测定方法

总黄酮含量测定方法
总黄酮含量测定呀，有几种常见方法呢。

紫外- 可见分光光度法。

先得把样品处理好，就像给食材做前期准备一样。

把含有总黄酮的样品进行提取，提取液要纯净呀，不能有太多杂质干扰，杂质多了就像炒菜的时候锅没洗干净，那肯定做不出好菜。

然后在特定波长下测定吸光度，这个波长就像一把专门开总黄酮这把锁的钥匙，得找对喽。

这方法安全性挺高的，只要按照正常操作流程，不会有啥危险情况，稳定性也不错呢，只要仪器正常工作，数据偏差不会太大。

在食品、药品检测领域应用可广泛了，能快速知道产品里总黄酮的大概含量。

我知道一家小型制药厂，想检测新研发的药品里总黄酮含量，就用这个方法，快速得到结果，他们高兴得不得了，就像挖到宝藏一样。

还有高效液相色谱法。

这得把样品制成合适的溶液，溶液就像一支整齐有序的队伍，不能乱哄哄的。

然后注入色谱仪，色谱仪就像一个超级严格的裁判，把不同成分分得清清楚楚。

测定过程中要保证仪器的清洁和稳定，这可不能马虎呀，不然数据就乱套了。

这个方法安全性也还好，就是操作要细心些。

在科研中用得很多，能精确测定总黄酮含量，优势就是精准度高呀。

有个科研团队研究植物中的总黄酮含量，用这个方法得到准确数据，他们兴奋地说这简直是找到了解开谜团的密码。

我觉得这些总黄酮含量测定方法各有各的好，在合适的场景下都能发挥大作用，就像不同的工具在不同的工作里都能大显身手。

总黄酮的检测方法

【含量测定】总黄酮对照品溶液的制备精密称取在120℃干燥至恒重的芦丁对照品25mg，置50ml量瓶中，加乙醇适量，超声处理使溶解，放冷，加乙醇至刻度，摇匀。

精密量取20ml，置50ml置瓶中，加水至刻度，摇匀，即得(每1ml中含无水芦丁0. 2mg)。

标准曲线的制备精密量取对照品溶液1ml、2ml、3ml、4ml、5ml、6ml．分别置25ml量瓶中，各加水至6ml．加5%亚硝酸钠溶液1ml．摇匀，放置6分钟，加10%硝酸铝溶液1ml，摇匀，放置6分钟，加氢氧化钠试液10ml，再加水至刻度，摇匀，放置15分钟，以相应试剂为空白，立即照紫外·可见分光光度法(附录V A)，在500nm的波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线．
测定法取本品细粉约1g．精密称定，加稀乙醇（甲醇）溶解，转移至50ml量瓶中，加稀乙醇至刻度．摇匀，作为供试品贮备液．取供试品贮备液，滤过，精密量取续滤液5ml，置25ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。

精密量取2ml．置25ml置瓶中，照标准曲线制备项下的方法，自“加水至6ml”起依法测定吸光度，从标准曲线上读出供试品溶液巾芦丁的重量，计算，即得。

本品按干燥品计算，含总黄酮以无水芦丁( C27 H30 O16)计，不得少于7.0%。

总黄酮含量测定方法

总黄酮含量测定方法总黄酮是指一类在植物中广泛存在的天然化合物，具有多种生物活性，包括抗氧化、抗菌、抗炎等作用。

因此，总黄酮含量的测定方法对于评估植物中潜在的药用价值具有重要意义。

以下是一种常用的总黄酮含量测定方法。

一、试剂与设备准备：1. 酸性乙醇溶液：加入浓盐酸（HCl）和乙醇（C2H5OH）（体积比为1:95）。

2. 铝试管。

3. DNA分光光度计或分光光度计。

4. 普鲁士蓝试液。

二、样品处理：1. 将待测样品（如草药材）洗净并晾干。

2. 将样品研磨成细粉末，通过筛网过筛以去除杂质。

3. 取一定质量的样品，加入酸性乙醇溶液中，浸泡4-6小时，以增加黄酮化合物的浸提效果。

4. 使用离心机离心加速提取，收取上清液并保存备用。

三、测定操作：1. 取适量的上清液，放入铝试管中。

2. 加入1 mL的酸性乙醇溶液，并摇匀，待样品溶解。

3. 将铝试管放入水浴中加热，加热温度为80C，保持10分钟。

4. 待样品冷却后，加入3 mL的普鲁士蓝试液，摇匀。

5. 使用DNA分光光度计或普通分光光度计，设置波长为595 nm，测定吸光度值。

四、数据处理与计算：1. 使用酸性乙醇溶液作为空白试剂进行校正。

2. 通过空白试剂的吸光度值，减去样品吸光度值，获得净吸光度值。

3. 根据普鲁士蓝的吸光度与黄酮的浓度之间的线性关系，计算样品中黄酮的含量。

以上就是一种常用的总黄酮含量测定方法，通过酸性乙醇提取样品中的黄酮化合物，并使用普鲁士蓝试液测定吸光度值，可以获得样品中总黄酮的含量。

为了提高测定结果的准确性，可以多次重复实验，并计算平均值。

此外，还可以使用其他方法进行总黄酮的测定，如高效液相色谱（HPLC）法和分光光度法等，根据实际需求选择合适的方法进行测定。

食品中总黄酮的测定方法

食品中总黄酮的测定方法黄酮类化合物(flavonoids)是广泛存在于植物界的一大类多酚化合物，多以苷类形式存在。

其分析方法有多种，对于黄酮类化合物的相互分离以及单一成分的定量分析，常采用高效液相色谱法 (high performanee liquid chromatography, HPLC)；而对于总黄酮含量的测定，则主要采用分光光度法。

通过本方法的学习，可以掌握食物中总黄酮的测定方法。

(一)高效液相色谱法1.原理植物类样品用石油醚脱脂后，经甲醇加热回流提取，以高效液相色谱法分离，在紫外检测器360nm条件下，以保留时间定性、峰面积定量。

2 •仪器和试剂(1)高效液相色谱仪(2)紫外检测器(3)层析柱(4)超声波清洗仪(5)索氏提取器(6)微孔过滤器(滤膜0.45um)(7)甲醇(色谱纯)(8)芦丁标准品(9)石油醚，盐酸，磷酸(分析纯)。

(10)去离子水(11)芦丁标准溶液：精确称取经105C干燥恒重的芦丁标谁品15.0mg，加甲醇溶解并定容至100ml，配成150ug/ml的芦丁标准溶液。

3. 操作步骤(1)样品处理1)固体样品：称取2.0g干燥的固体样品，研细，置于索氏提取器中，用石油醚(60〜90C)提取脂肪等脂溶性成分，弃去石油醚提取液，剩余物挥去石油醚，加人甲醇50ml和25% HC1 5ml，80C水浴回流水解1h,取出后快速冷却至室温，转移至50ml容量瓶中，甲醇定容，经0.45um滤膜过滤，供分析用。

2)液体样品：准确吸取样品2.0ml，直接以石油醚萃取脱脂，挥去石油醚后,以甲醇溶解并定容，经微孔滤膜（0.45um ）滤过后供测定用（2）色谱分离条件色谱柱： CLC — ODS ， 6mm x 150mm ，5um;流动相：0.3%磷酸水溶液：甲醇（V:V ）= 40:80，临用前用超声波脱气；流速: lml / min ；柱温: 40C ；检测波长：360nm ；灵敏度：0.02AUFS ;进样量：20ul 。