实验二 药物敏感性试验

实验二药物敏感性试验

实验目的与意义：

各种病原菌对抗菌药物的敏感性不同，同种细菌的不同菌株对同一药物的敏感性也有差异，检测细菌对抗菌药物的敏感性，可筛选出最有疗效的药物，用于临床，对控制细菌性传染病的流行至关重要。

学会检测细菌对抗菌药物敏感性的操作程序和结果判定的方法，能更科学地确定临床治疗方案。

实验原理：

通过培养基培养的细菌用药后，药物的扩散，使一定距离内的细菌在培养基上停止生长并且死亡，由此来判定一种药物对细菌的杀菌或抑菌作用的强度。受到抑制形成抑菌圈越大，说明该菌对此药敏感性越大，反之越小，若无抑菌圈，则说明该菌对此药具有耐药性。

实验材料

菌种(大肠杆菌)、牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、琼脂、三角瓶、烧杯、量筒、天平、高压灭菌器、PH试纸、棉花、牛皮纸、记号笔、棉绳、纱布、培养皿、微量移液器、涂布棒、药敏片、小镊子、酒精灯、尺子。

实验步骤：

（一）制备琼脂培养基：（略）

（二）抗菌药物圆纸片（药敏片）扩散试验：倾倒琼脂培养基，倾注平板时，厚度合适（约5-6mm），不可太薄，待培养基凝固时，取一菌种，均匀涂布于琼脂培养基表面，用无菌镊子将各种药敏片，分别贴于平板内并压实，各片距离要相等，每个平板上可放4－6片左右。然后标号，于37℃培养箱中放置18－24h。（三）实验结果观察：过夜培养后在纸片周围形成一个抑菌圈，测定抑菌环的直径，记录该菌对某一抗生素的敏感性。

实验结果与讨论：

请简要写出细菌药敏试验的临床意义？

注意事项：

应注意影响试验结果的因素：要在无菌条件下操作，培养基应根据试验菌的营养需要来配制，此外药物浓度、细菌浓度也对试验结果有一定的影响。

附：琼脂培养基的制备：

用牛肉膏5克，蛋白胨10克、氯化钠5克，磷酸氢二钾1克，蒸馏水1000ML，加热溶解用0.1N氢氧化钠校PH至7.4－7.6，再加入10－15克琼脂加热溶解，装入三角瓶中，高压灭菌20分钟。即可得到。