阿莫西林合成酶标准

Q/ABVK

阿莫西林合成酶（IPA-SA）

湖南福来格生物技术有限公司发布

前言

本标准依据GB/T1.1-2000《标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写规则》编写。本标准化由湖南福来格生物技术有限公司提出。

本标准化由湖南福来格生物技术有限公司起草。

本标准主要起草人：柳杏辉、陈梅。

本标准的复审周期为三年。

本标准2010年10月制定并实施，现用标准为2010年版。

阿莫西林合成酶（IPA-SA）

1 范围

本标准规定了阿莫西林合成酶（IPA-SA）的技术要求，试验方法，检验规则、包装、运输、贮存。

本标准适应于合成阿莫西林等其他相关产品的生物催化剂（酶）。

2 规范性引用文件

下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，但鼓励根据本标准达成协议的各方研究使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。

GB 191 包装储运图示标志

QB/T 1803-1993 工业酶制剂通用试验方法

QB/T 1804-1993 工业制剂通用检验规则和标志

QB/T 1805.3-1993 工业用蛋白酶制剂

JJF 1070-2005 定量包装商品净含量计量检验规则

国家技术监督局172号（1997）《产品标识标注规定》

国家质量监督检验检疫总局令（2005）第75号《定量包装商品计量监督管理办法》

中国药典2005年版二部。

3 定义

阿莫西林合成酶（IPA-SA）：即本标准中的阿莫西林合成酶（IPA-SA）。

4 技术要求

4.1 理化指标

4.1.1 外观：本品为黄色或棕色球形颗粒

4.1.2 粒径(250~450μm)：≥ 95 %

4.1.3 活力(28℃、湿品)：≥ 80 u/g

4.1.4 ß-内酰胺酶：不得检出(开环值≤0.5ml)

4.1.5 含水率≤ 60 %

4.2 净含量偏差

应符合《定量包装商品计量监督管理办法》规定

5 检验方法

检测样品的准备

不含保护溶液的成品酶：直接取样品进行检测。

含保护溶液的成品酶:

取样品约30g，置50～100ml的2#砂芯漏斗中，用去离子水洗涤三次，抽干至无水滴流出后备用（若暂不进行检测应用干净干燥的容器密封保存以防水份蒸发）。

5.1 外观检测

取样品1g左右置透明玻璃容器中，室内自然光下目测。

5.2粒径检测

取样品少量，在微钠粒度仪（winner 99）下，按《微钠粒度仪（winner 99）操作规程》对样品进行检测。

5.3 活力(28℃、湿品)检测

5.3.1原理

青霉素(Pen G)在阿莫西林合成酶（IPA-SA）作用下转化成6-APA和苯乙酸，用NaOH滴定苯乙酸，根据NaOH的消耗量计算阿莫西林合成酶（IPA-SA）的活力。

5.3.2酶活力定义

在一定反应条件下，每克阿莫西林合成酶（IPA-SA）每分钟转化Pen G生成6-APA的微摩尔数。

5.3.3溶液配制

（1）0.02mol/L、pH8.0的磷酸盐缓冲液

称取4.76g K2HPO4·3H2O、0.55g KH2PO4溶解于950ml去离子水中，用0.1mol/L的NaOH溶液调pH至8.0，再用去离子水定容至1000ml。

（2）5%青霉素钾溶液

称取青霉素钾盐10.00g，用0.02mol/L、pH8.0的磷酸盐缓冲液溶解（加150ml 左右），再定

容至200ml，溶液现配现用。

（3）0.1mol/L NaOH （参照中华人民共和国药典）

5.3.4 仪器

自动滴定装置（浆式搅拌，恒温，pH自动滴定仪）。

5.3.5 检测

精确称取样品 200mg 于 50ml 的烧杯中，加入预热到28℃的 40ml 5%的青霉素钾溶液，开启搅拌，控制反应温度28℃，反应中用 0.1 mol/L NaOH溶液调pH至8.0，控制反应pH8.0，记录约10分钟左右NaOH 的消耗体积（ml）。

5.3.6 活力(28℃、湿品)计算

活力(28℃、湿品)＝

()()

()()

min

1000

/

T

g

W

L

mol

C

ml

V NaOH

NaOH

⨯

⨯

⨯

（u/g）

V NaOH：滴定中消耗的NaOH体积（ml）

C NaOH：NaOH溶液的摩尔浓度（mol/L）

W：样品的重量（g）

T：滴定时间（min）

5.4ß-内酰胺酶检测

5.4.1 溶液配制

（1）磷酸盐缓冲液（pH7.0）

取磷酸氢二钾 9.64g与磷酸二氢钾 3.14g，加去离子水至1000ml。

（2）6-APA溶液配制

称取0.627g6-APA，用100ml磷酸盐缓冲液（pH7.0）溶解。

（3）醋酸钠缓冲液（pH4.5）

取冰醋酸69.3 ml，加水至1250 ml,另取结晶醋酸钠136.5g，加去离子水至1000 ml,再将两溶液混合均匀。

（4）0.005mol/L碘滴定液（参照中华人民共和国药典）