【CN109845516A】一种繁育蓝莓专一性共生菌根真菌的装置及方法【专利】

(10)申请公布号 CN 109845516 A (43)申请公布日 2019.06.07 A01G 31/02(2006 .01)
权利要求书1页 说明书3页 附图1页
CN 109845516 A
CN 109845516 A
权 利 要 求 书
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1 .一种繁育蓝莓专一性共生菌根真菌的装置，其特征在于，包括壳体(1) ，所述的壳体 (1)内底部铺设有珍珠岩(4) ，所述的珍珠岩(4)上设置有脱脂棉(3) ，所述的脱脂棉(3)内设 置有定植小穴 ，所述的 定植小穴内放置有蓝莓组培苗或苔藓苗 ，在蓝莓组培苗或苔藓苗的 侧方，设置有孢子转接液(2)。
及方法 ( 57 )摘要
本发明公开了一种繁育蓝莓专一性共生菌 根真菌的 装置及方法 ，包括壳体 ，所述的壳体内 底部铺设有珍珠岩，所述的珍珠岩上设置有脱脂 棉 ，所述的 脱脂棉内设置有定植小穴 ，所述的 定 植小穴内放置有蓝莓组培苗或苔藓苗，在蓝莓组 培苗或苔藓苗的 侧方 ，设置有孢子转接液。大田 中作为菌肥接种使 用时 ，将脱脂棉小碎团直接埋 入蓝莓根系周边即可 ；研究使 用时 ，取1个脱脂棉 小碎团 ，用无菌水冲洗，滤纸过滤即可得到菌根 真菌孢子。
( 19 )中华人民 共和国国家知识产权局
( 12 )发明专利申请
(21)申请号 201910082637 .2
(22)申请日 2019 .01 .28
(71)申请人 陕西理工大学 地址 723000 陕西省汉中市汉台区陕西理 工大学陕西省资源生物重点实验室
(72)发明人 陈志远 秦公伟
(74)专利代理机构 北京众合诚成知识产权代理 有限公司 11246
代理人 苗艳荣
(51)Int .Cl . A01G 7/06(2006 .01) A01G 24/15(2018 .01) A01G 24/30(2018 .01) A01G 24/40(2018 .01) A01G 31/00(2018 .01)
( 54 )发明 名称 一种繁育蓝莓专一性共生菌根真菌的装置
4 .根据权利要求1所述的一种繁育蓝莓专一性共生菌根真菌的装置，其特征在于，所述 的组培苗直接移入定植小穴中，所述的苔藓苗经灭菌处理后移入定植小穴中。
5 .一种繁育蓝莓专一性共生菌根真菌的方法，其特征在于，包括以下步骤： 1)培养瓶底部预先装入珍珠岩，高压灭菌处理后，将pH为5 .0的WPM液体培养基倒入培 养瓶中，覆盖珍珠岩层； 2) 在无菌操作环境下 ，取经过高 压灭菌处理过的 松散脱脂棉 ，在中间部位抠出定植小 穴，将蓝莓组培苗或苔藓苗在萘乙酸与吲哚丁酸混合液中浸泡1min后，植入定植小穴并压 紧脱脂棉； 3) 将包裹有脱脂棉的 蓝莓苗移入培养瓶 ，在蓝莓苗毛细根 系 周边等距滴 加5-8滴共生 菌根孢子转接液； 4) 封闭 培养瓶 ，光 照温室中培养2 周 ，待菌根真菌随 蓝莓根 系长满脱脂棉后 ，无菌条件 下取出培养瓶中脱脂棉 ，用剪刀剪成小碎团 ，无菌袋中密封。 6 .根据权利要求5所述的方法，其特征在于，步骤(1)中装入5-10mm厚粒径为0 .5-1mm的 珍珠岩。 7 .根据权利要求5所述的方法，其特征在于，步骤(2)中所述的萘乙酸和吲哚丁酸的浓 度为300μg/L。 8 .根据权利要求5所述的方法，其特征在于，步骤(3)中所述的孢子转接液为：将质量百 分比为95％的植物食用油、3％的吐温80、2％的吐温20混匀并灭菌处理后备后，加入共生菌 根的孢子并混匀，每滴孢子转接液中混入的孢子数量不低于50个。 9 .根据权利要求5所述的方法，其特征在于，步骤(4)中大田中作为菌肥接种使用时，将 脱脂棉小碎团直接埋入蓝莓根系周边即可 ；研究使 用时 ，取1个脱脂棉小碎团 ，用无菌水冲 洗，滤纸过滤即可得到菌根孢子。
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CN 109845516 A
说 明 书
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一种繁育蓝莓专一性共生菌根真菌的装置及方法
技术领域 [0001] 本发明属于植物菌根繁育技术领域，具体涉及一种繁育蓝莓专一性共生菌根真菌 的装置及方法。
背景技术 [0002] 蓝莓(Vaccinium Linn .)属杜鹃花科越桔属，是该属中果实呈蓝色的多个种的商 品名，多年生落叶或常绿灌木小浆果果树，从北半球到热带高山地区均有分布，全世界越桔 属植物约400个种，我国约有91个种、28个变种。蓝莓果实富含花青素等多种营养成分，具有 独特的生理保健作用，被联合国粮食及农业组织列为五大健康食品之一。蓝莓果实风味独 特、营养保健价值高 ，其果实及产品风靡世界 、供不应求。美国自1906年开始野生蓝莓选种 以 来已 有112年的 历史 ，而蓝莓的 价格一直处于高位 ，主要原因是蓝莓的 种植技术较难。我 国20世纪80年代开始引种种植蓝莓，2000年才初步实现规模化种植。到2015年全国蓝莓种 植面积为8000hm2，为柑橘种植面积的3 .1‰，苹果种植面积的3 .4‰，猕猴桃种植面积的 3 .0％。蓝莓种植的技术要点中，土壤改良技术是导致蓝莓难种活，难种好的最关键技术。 [0003] 蓝莓种植技术难是由其根系特点所决定的。蓝莓是典型的无根毛作物，为浅根系， 主要分布在浅土层，向外扩展至行间中部。蓝莓根系呈纤维状，没有根毛，但在自然状态下， 蓝莓根 系与菌根真菌共生形成菌根。几乎所有蓝莓的 细根都有内生菌根真菌的 寄生 ，从而 解决 蓝莓根 系由 于没有根毛造成的 对水分及养分吸收能 力下降的问 题。近年来 ，众多的 研 究已证明，菌根真菌的侵染对蓝莓的生长发育及养分吸收起着重要作用。 [0004] 现 有 技 术 ：1 .一 种 利 用无 菌 蓝 莓 组 培 苗 采 集 菌 根 真 菌的 方 法 ，专 利申 请 号 CN106434349A。该专利提供了一种利 用无菌蓝莓组培苗采集菌根真菌的 方法 ，其技术方案 是将蓝莓组培苗移栽至大田中 ，培育一段时间 后 ，将根 切成段 ，在平皿中培养分离共生菌 根。该方法存在的 技术问 题是1) 蓝莓组培苗在实验室中完成 ，菌根真菌侵染 则需 在田间环 境下完成，没能实现实验室完成全部工作。2)需要将蓝莓幼苗的根系切断后，在平皿中分离 培养菌根真菌。蓝莓幼苗不可以反复使 用，造成组培苗浪费 ；3) 分离过程复杂 ，分离 周期长 ； 4)农业生产中接种应用不方便。
2 .根据权利要求1所述的一种繁育蓝莓专一性共生为5-10mm，珍珠岩(4)在使用前需高压灭菌处理。
3 .根据权利要求2所述的一种繁育蓝莓专一性共生菌根真菌的装置，其特征在于，所述 的珍珠岩(4)浸泡在pH为5 .0的WPM液体培养基内，所述的WPM液体培养基高出珍珠岩(4)覆 盖层10mm。