3.(新)细菌的生理

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物大多在稳定期产生。 (4)衰退期:该期细菌形态显著改变,出现衰退型 或菌体自溶,难以辨认。
第三节 细菌的新陈代谢
分解代谢产物和细菌的生化反应 合成代谢产物及其在医学上的意义
细菌合成代谢产物及其医学意义
1.热原质,或称致热源。是细菌合成的一种注入 人体或动物体内能引起发热的物质。产生热源质 的细菌大多是G—菌,即细胞壁的脂多糖。 特性:耐高热,高压蒸气灭菌不被破坏。 250℃干烤可以破坏
2%碳酸钠
(3) 流动蒸气消毒法
利用1个大气压下100º C的水蒸气进行消毒
细菌繁殖体15~30min可被杀灭
(4) 间歇蒸气灭菌法
利用反复多次的流动热蒸气间歇加热以达到
灭菌的目的
100º C,15~30min,37º C孵箱过夜×3次。
适用于一些不耐热的含糖、牛奶等培养基。
(5) 高压蒸气灭菌法
(5)生长因子: 维生素、嘌呤、嘧啶、氨基酸。
2.PH:多数病原菌最适PH为7.2~7.6
3.温度:病原菌最适生长温度为人的体温,即37℃。
4.气体:根据细菌代谢时对分子氧的需要与否,
可以分为四类:
(1)需氧菌 —— 结核分枝杆菌
(2)微需氧菌 —— 幽门螺杆菌
(3)兼性厌氧菌 —— 大多数病原菌
1. 干热灭菌法
(1) 焚烧:用于废弃物品或动物尸体等 ( 2 )烧灼:用于微生物学实验室的接种环、 试管口等的灭菌。
无菌区
10-20cm
(3) 干烤
利用干烤箱灭菌
(160~170º C,2h)
适用于高温下
不变质、不损坏、
160℃
2h
不蒸发的物品。
(4) 红外线照射
红外线的杀菌作用是利用其产生的热能杀灭微
四、人工培养细菌的在医学中的应用 1.感染性疾病的病原性诊断与治疗 2.细菌学的研究
3.生物制品的研究
第五节 抑制或杀灭微生物的理化因素 一、消毒灭菌的常用术语 消毒
利用理化因素杀死物体或环境中病原微
生物的措施,并不一定能杀死含芽胞的细菌或 非病原微生物。
灭菌Hale Waihona Puke Baidu
利用理化因素杀死物体上所有微生物的
过程,包括芽胞。
4.抗生素:某些微生物代谢过程中产生的一类能抑 制或杀死某些其他微生物或肿瘤细胞的物质。抗生 素大多由放线菌和真菌产生,细菌产生的少。 5.细菌素:某些菌株产生的一类具有抗菌作用的蛋 白质。细菌素与抗生素的不同作用范围狭窄,仅对
与产生菌有亲缘关系的细菌有杀伤作用。
6.维生素:细菌能合成某些维生素除供自己需要 外,还能分泌至周围环境中。例如人体肠道内的 大肠杆菌,合成的B族维生素和维生素K也可被 人体吸收利用。
生物,与干热相似。
这种热能不经空气传导,以辐射方式向外传播
故无明火、不怕风。但红外线光源越强、光源距消 毒物品越近,温度越高,其热效应只能在照射到的 表面产生,不能使一个物体的前后左右均匀加热。
2. 湿热灭菌法
最常用,效果优于干热灭菌法。 理由: ①湿热中细菌菌体蛋白质较易凝固变性
②湿热的穿透力比干热大
培养基按营养组成与用途分类
普通琼脂培养基
(1)基础培养基
含有一般细菌生长繁殖需要的基本营养物质。
此培养基可作为一些特殊培养基的基础成分。
(2)增菌培养基:又称营养培养基、加富培
养基,是在基础培养基中加入某些特殊营养物质, 如血液、血清、酵母浸膏或生长因子等。用以培 养对营养要求高的微生物。
血 平 板
两个嘧啶形成二聚体,干扰DNA的复制与转录,
导致细菌的变异或死亡。
特点:紫外线穿透力较弱;对人体皮肤、眼睛有
损伤作用。
用途:一般只用于手术室等的空气消毒,或用于
不耐热物品的表面消毒。
2. 电离辐射(包括高速电子、χ射线和γ射线)
具有较高的能量和穿透力,对微生物有致死
作用。
常用于一次性医用塑料制品的消毒;亦可用 于食品、药品和生物制品的消毒或灭菌。
③湿热的蒸气有潜热效应存在
(1)巴氏消毒法
用较低温度杀灭液体中的少数病原菌(结核 杆菌)或特定微生物(乳酸杆菌)、保持物品中 所需不耐热成分不被破坏的消毒方法。 用于消毒牛乳、酒类(61.1~62.8º C,30min或 71.7º C,15~30s)。
(2) 煮沸法
100º C,5min 杀死细菌繁殖体。 100º C,1~2h 杀灭细菌芽胞。 加入2%碳酸钠,沸点为105℃,可促进杀灭 细菌芽胞、防金属物品生锈。
用清水冲洗干净即可。
石炭酸:3~5%浸泡或喷雾
酚类
来苏尔
刺激性小 效力比苯酚强4倍 3%~5%喷雾、擦洗 2%消毒手
新洁尔灭
0.25%消毒皮肤、浸泡器具。 0.5%喷雾
常用的化学消毒剂
药名 碘酊 (碘酒) 过氧乙酸
效 力
使用范围 1.过敏禁用 3.腐蚀金属
注意事项 2.禁用粘膜 4.加盖保存
高 2%:皮肤(脱碘) 0.2%:手泡2’物表擦泡10’ 0.5%:餐具泡30-60’ 高 1-2%:空气 1%:体温表浸泡30’ 2%碱性戊二醛+0.3%NaHO3 高 器械,内镜消毒 :30-60’ 灭菌:10h 40%甲醛熏蒸空气、物品 高 4-10%浸泡器械、内镜
(4)专性厌氧菌 —— 破伤风梭菌 5.渗透压:一般培养基的盐浓度(0.5%)和渗透 压对大多数细菌是安全的。
三、细菌的生长繁殖
1. 繁殖的方式 二分裂方式进行无性繁殖
2. 繁殖的速度
多数细菌繁殖一代只需20~30min,
个别细菌较慢,如结核杆菌繁殖一代需要18~20h。
3.细菌群体的生长繁殖
(1)迟缓期:细菌进入新环境的 1 ~ 4h,是一 个适应过程。 (2)对数期:细菌在该期生长迅速,达到顶峰
状态。此期细菌的形态、染色性、生理活性等都
较典型;该期的病原菌致病力最强,对抗菌药物
等的作用较为敏感;一般在培养后的 8~18h。
(3)稳定期:该期细菌繁殖速度渐减,死亡数逐渐
增加。一些细菌的芽胞、外毒素和抗生素等代谢产
吸咐剂/特殊石棉滤板可除去
蒸馏法可除去
2.毒素与侵袭性酶:细菌产生外毒素和内毒素两
类毒素,在细菌致病作用中甚为重要。某些细菌
可产生具有侵袭性的酶,能损伤机体组织,促使 细菌的侵袭扩散,是细菌的重要致病物质。 G-菌LPS,菌体死亡 内毒素 游离出来。 毒素 多数G+菌,少数G-菌 外毒素 分泌产生的蛋白质。
1.自养型:以简单的无机化合物为原料合成菌体成分 2.异养型:必须以多种有机物为原料合成菌体成分并
获取能量。异养菌包括寄生菌和腐生菌,所有的病
原菌都是异养菌,大部分属寄生菌。
二、影响细菌生长的因素
1.营养物质: (1)水:70~90% (2)无机盐:如Nacl (3)碳源 (4)氮源 如糖类 如蛋白胨、氨基酸。
(三) 滤过除菌法
滤膜
用物理阻流的方法除去液体或空 气中的细菌,达到无菌的目的。
主要用于一些不耐高温灭菌的血 清、抗生素以及空气等的除菌。
送风 排风
(四)干燥与低温抑菌法
细菌在干燥的环境中失去大量水分,使新陈
代谢发生障碍而抑制其生长繁殖,甚至引起菌体
蛋白质变性和由于盐浓度增高而逐渐导致死亡。
低温可使细菌新陈代谢减慢,故常用于保存
细菌的生理
第一节 细菌的理化性状
一、细菌的化学组成
细菌和其他生物细胞相似,含有水、无机盐、 蛋白质、糖类、脂质和核酸等。 细菌所特有的化学组成:肽聚糖、胞壁酸、磷 壁酸、D型氨基酸、二氨基庚二酸、吡啶二羧酸等。
二、细菌的物理性状
1.光学性质:细菌为半透明体,故细菌悬液呈混
浊状态。
2.表面积:细菌体积微小,相对表面积大。
3.色素:有助于鉴别细菌。细菌的色素有两种,一
类为水溶性,能弥散到培养基或周围组织,如铜绿
假单胞菌产生的色素。
铜绿假单胞菌的绿脓素
3.色素:另一类为脂溶性,不溶于水,只存在于菌
体,使菌落着色而培养基颜色不变,如金黄色葡萄
球菌的色素。
A
B
A.白色葡萄球菌在普通琼脂平板上的菌落特征 B.金黄色葡萄球菌在普通琼脂平板上的菌落特征
常用的化学消毒剂
脱水剂 脂溶剂 蛋白质变性剂
乙醇
浓 度
70~75%效果最好 皮肤、器皿擦拭或浸泡。 高浓度效果差 无水的无杀菌作用
过氧化氢
无色液体,属环保型消毒剂。
3%皮肤、伤口消毒。
6%浸泡器皿30min
过氧乙酸 无色至微黄色液体, 有刺激性、腐蚀性、挥发性。
0.5% 喷雾 1.5%熏蒸 7ml/m3 0.5% 浸泡
药名 效 力 使用范围 注意事项
(5)厌氧培养基
疱肉培养基
厌氧缸
厌氧手套箱
培养基按物理性状分类
(1)液体培养基
(2)固体培养基:在液体培养基中加入1.5~2.5% 的琼脂粉。琼脂在培养基中起赋形剂作用,对病 原菌不具营养作用。 (3)半固体培养基:在液体培养基中加入0.3 ~
0.5%的琼脂粉。
三、细菌在培养基中的生长情况
1.在液体培养基中的生长情况:混浊生长、沉淀生 长、表面生长。
使用
0.2% 洗手
漂白粉
使 用
2~5%浓度 洗刷、喷雾、浸泡 湿处可干撒 作用约30min 原品密封 随配随用 对衣物有退色和腐蚀性
注 意
高锰酸钾
0.1%的高锰酸钾溶液可用来浸泡手、洗涤 伤口;当然也可以用来消毒茶具和水果。使用 高锰酸钾消毒水果、餐具等物品时,先将欲消 毒物品放入高锰酸钾溶液中浸泡数分钟,然后
3.带电现象:G+菌PI为2~3,G-菌PI为4 ~ 5,
故在近中性或弱碱性环境中,细菌均带负电荷, 尤以前者所带负电荷更多。
4.半透性:细菌的细胞壁和细胞膜都有半透性。
5.渗透压:细菌体内含有高浓度的营养物质和无
机盐,一般G+菌的渗透压高达20 ~ 25个大气压,
G-菌为5 ~ 6个大气压。
第二节 细菌的营养与生长繁殖 一、细菌的营养类型
1.对金属有腐蚀性 2.易氧化,需现配 3.高浓度有刺激性及腐蚀性 4.高温易爆,置阴凉处. 1.过滤/周,更换1次/2-3周 2.酸性戊二醛加亚硝酸钠防锈 3.碱化后稳定性降低,应现配
戊二醛
甲醛 福尔马林
1.穿透性差:悬挂、抖散 2.室温>18C,湿度70-90% 3.对呼吸道和眼有刺激,需防护
常用的化学消毒剂
第四节
细菌的人工培养
一、培养细菌的方法:人工培养细菌,除需要提 供充足的营养物质使细菌获得生长繁殖所需的原
料和能量外,尚要有适宜的环境条件,如酸碱度、
渗透压、温度和必要的气体等。
二、培养基:是由人工配制而成的,专供微生物
生长繁殖使用的混合营养物制品。
培养基的分类:
1. 按其成分分类:天然培养基、合成培养基、半合 成培养基。 2. 按其营养组成和用途分类:基础培养基、营养培 养基、选择培养基、鉴别培养基、厌氧培养基。 3. 按其物理状态分类:固体培养基、液体培养基、 半固体培养基。
菌膜 对照
沉淀
混浊
2.在固体培养基中的生长情况:
(1)菌落:单个细菌生长后形成的肉眼可见的细
菌集团,包括光滑型菌落(S型菌落)、粗糙型菌
落(R型菌落)、粘液型菌落(M型菌落)。
(2)菌苔:菌落融合成片
3.在半固体培养基中的生长情况:沿穿刺线生长或
呈羽毛状或云雾状混浊生长。用于检测细菌的动力
和保存菌种。
细菌菌种。
三、化学消毒灭菌法
定义:是用化学药品进行消毒的方法 作用机制 ①使菌体蛋白质变性或凝固 ②破坏细菌的酶系统 ③改变细菌细胞壁或胞浆膜的通透性, 导致细菌死亡。
化学消毒剂的使用方法:

浸泡法(immersion) 擦拭法(rubbing) 喷雾法(nebulization)

熏蒸法(fumigation)
基 础 培 养 基
(3)选择培养基:在培养基中加入某种化学物
质,使之抑制某些细菌生长,而有利于另一些细菌
的生长,从而将后者从混杂的标本中分离出来。
(4)鉴别培养基:利用各种细菌分解糖类和蛋
白质的能力及其代谢产物不同,在培养基中加入特
定的作用底物和指示剂,观察细菌在其中生长后对 底物的作用如何,从而鉴别细菌。
无菌
不存在任何活菌,是灭菌的结果。
无菌操作 防止细菌进入人体或物品的操作技术 防腐
防止或抑制细菌生长繁殖的方法
清洁
通过除去尘埃和污秽减少微生物数量
消毒、灭菌的方法
热力灭菌法 物理学方法
辐射杀菌法
滤过除菌法 干燥和低温抑菌法等
化学方法
二、物理消毒灭菌法
(一)热力灭菌法
高温对细菌具有明显的致死作用,因此最常 用于消毒和灭菌。 分为干热灭菌和湿热灭菌两大类。
高压蒸气灭菌器是一个密闭、耐高压蒸锅。 103.4kPa(1.05kg/cm2)——温度可达121.3º C, 15~20min,可杀灭包括芽胞在内的所有微生物。
(二)辐射杀菌法
1. 紫外线 波长240~300nm的紫外线具有杀菌
作用,其中以260~266nm最强。
原理:主要作用于DNA,一条链上相邻的
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