T淋巴细胞及其亚群检测的临床意义

Lymphocytes
外周血中占总淋巴细胞的60-80%
二、 T淋巴细胞的分化发育
T细胞在胸腺中的发育
The development of TCR Positive selection Negative selection
T细胞在外周淋巴器官中的分化发育
Extrathymic T-cell development
常见疾病与T细胞免疫检测关系
疾病 肿瘤 再生障碍性贫 血 粒细胞减少症 过敏性皮炎 类风湿 红斑狼疮 膜性肾小球肾 炎 胰岛素依赖性 糖尿病 乙型肝炎急性/ 慢性 ↓ ↓ ↓ ↑（活动期） ↓（活动期） ↑ ↓ ↓ ↑↓ ↓ ↑ ↑ ↑ ↑ ↑ ↓ ↓ CD3+ ↓↓ CD4+ ↓↓ CD8+ ↑↑ CD4/CD8 ↓↓ ↑ ↓
T淋巴细胞及其亚群检测的 临床意义
太原中心 郭学林
主要内容
• T淋巴细胞的概念
• T淋巴细胞的分化发育
• T淋巴细胞亚群
• T淋巴细胞亚群检测的临床意义
一、概念
• 来源于骨髓的淋巴样干细胞，在胸腺中成 熟的淋巴细胞，故称胸腺依赖性淋巴细胞 （thymus-dependentlymphocyte），简称T 细胞。 • 负责细胞免疫功能，参与抗肿瘤、抗细胞 内感染微生物、移植排斥、迟发型超敏反 应；对部分体液免疫发挥辅助功能。 • 外周血：约占淋巴细胞总数的60%～80%；
辅助体液免疫 抗寄生虫感染
抑制性T细胞（Ts）
主要表面标志：CD8+CD28功能：对免疫应答有重要的负调节功能，抑制性T细胞功能 的异常，常与T自身免疫性疾病、第I型超敏反应等疾病发 生有关。
调节性T细胞（Treg）
主要表面标记：CD4+CD25+ 功能：抑制免疫应答 可能的机制有： 直接接触； 分泌抑制性CKs； 此外，抑制CKs分泌，抑制APC等。
CD4/CD8比值与肿瘤
• 恶性肿瘤患者术前CD4/CD8比值低与术后比 值恢复正常。 • 当发生癌转移时,CD3 、CD4 细胞数明显减 少的同时CD8 细胞数明显增多,CD4/ CD8 比 值明显降低,提示恶性肿瘤患者晚期细胞免 疫功能更低,预后更差。 • 肿瘤终未期患者CD4/CD8比值异常，可预测 患者存活期。
2、TCRαβT细胞和TCRγδT细胞
• TCRγδT细胞 – 数量少，占5％ – 多为CD4―CD8―（DN细胞）；少数为CD8+ – 分布于皮肤、粘膜参与固有免疫，是抗感染的第一线 细胞 • TCRαβT细胞 – 数量多，CD4+或CD8+（SP细胞） – TCR识别谱广，是参与免疫应答的主要细胞群
TH1 分泌 CKs CKs作 用 IL-2、IFN-γ、TNF
TH2 IL-4、5、6、10
生物学 功能
介导细胞毒和局 部炎症有关的免 疫应答, 辅助抗 体生成,参与细 胞免疫及迟发型 超敏性炎症的发 生 介导细胞免疫 引起迟发型超敏 反应(TDTH)
促进B细胞增殖、成熟 和促进抗体生成，与体 液免疫有关
记忆性T细胞（memory T cell）
按TCR的表型分类 TCR + T细胞
TCR + T细胞
1、初始T细胞、效应T细胞和记忆T细胞
• 初始T细胞 – 表型：CD45RA+、 CD62L+、CD25-（IL-2R） – 特点：未接触抗原的成熟T细胞，有分化潜能 • 效应T细胞 – 迁往炎症部位，执行细胞免疫效应 • 记忆性T细胞 – 表型：CD45RO+、CD25+（IL-2R）
1、T细胞在胸腺中的发育
三个阶段 双阴性阶段 (DN) 双阳性阶段 (DP) 单阳性阶段 (SP)
TCR基因重排 阳性选择 阴性选择 获得功能性TCR 获得MHC限制性 获得自身耐受
三个重要事件
三个重要结果
T细胞受体（TCR）的发育
、、、四种肽链基因的重排与表达，形成TCR 和 TCR，将T细胞分为 TCR 和 TCR 两种类型。
CD3+CD4-CD8+SP CD3+CD4+CD8-SP
结果：单阳性细胞（SP）、获得自身MHC限制性。
T细胞发育过程中的阴性选择 (negative selection)
部位：胸腺皮髓质交界处及髓质区。 过程： SP细胞 胸腺树突状细胞、巨噬细胞
（TCR、CD4+/CD8+） （自身抗原肽-MHC分子）
小结
Th 表面标记 CD3+CD4＋ 主要功能
介导细胞 免疫 引起迟发 型超敏反 应、 辅助体液 免疫
CTL CD8+CD28+ 特异性直接 杀伤靶细胞
Ts CD8+CD28对免疫应答 有重要的负 调节功能
Treg CD4+CD25+ 抑制免疫应 答
抗寄生虫 感染
四、T淋巴细胞亚群检测的临床意义
CD3分子的低度表达
结果：获得功能性TCR
T细胞发育过程中的阳性选择 (positive selection)
部位：胸腺皮质。 过程： DP细胞
(TCR、CD4+CD8+)
胸腺上皮细胞
(抗原肽-自身MHC分子复合物)
适当亲和力发生结合 SP细胞 不能发生有效结合 或结合亲和力过高 凋亡
结合MHC-Ⅰ类分子 结合MHC-Ⅱ类分子
• 通过T淋巴细胞亚群的检测可了解在不同情 况下体内免疫功能状态，辅助临床疾病的 诊断，探索疾病的发病机理、病程、预后 ，监测、指导临床治疗方案。
目前主要可以做以下项目的检测
1）T淋巴细胞（CD3+） 2）CD4+细胞 3）CD8+细胞 4）CD4+/CD8+的比值
• 总T淋巴细胞可以结合总B淋巴细胞来判断某些免 疫缺陷和自身免疫性疾病。 • CD4+和CD8+T细胞有助于监测患有免疫缺陷疾病 （如SCID、AIDS的病人体内CD4+细胞亚群的百分 率相对降低，而CD8+群体的百分率相对升高）， 自身免疫性疾病（如在SLE病人中，CD8+淋巴细胞 的相对百分比往往会降低，但当使用类固醇药物 治疗时，也可能上升。在急性GVHD和移植排斥中 ，CD8+淋巴细胞所占的比例有可能在正常人的范 围之外）
3、 CD4+T细胞和CD8+T细胞
两者通常是针对TCRαβT细胞而言 • CD4+T细胞 – 约占60～65％ – 受MHCⅡ类分子限制 – 主要分化为Th • CD8+T细胞 – 约占30～35％ – 受MHCⅠ类分子限制 – 主要分化为CTL
4、Th、CTL、Ts和Treg细胞
辅助性T细胞（Th） 主要表面标记：CD4＋CD8主要种类：TH1，TH2 功能：具有辅助其他免疫细胞分化和调节免疫应答（促进 和抑制）的作用。 细胞毒性T细胞（CTL） 主要表面标记：CD8+CD28+ 功能：特异性直接杀伤靶细胞 杀伤机制： 释放穿孔素，颗粒酶杀伤靶细胞 通过Fasl介导靶细胞的凋亡
疾病
自身溶血性贫 血 上呼吸道感染 传染性单核细 胞增多症 巨细胞病毒感 染 乙肝
CD3+
↑ ↓
CD4+
CD8+
CD4/CD8
↑ ↑（急性期）
↑ ↓ ↓
↓
↑ ↑
结核病
疟疾 血吸虫病 获得性免疫缺 陷综合症 ↓
↑
↓ ↓ ↓
T淋巴细胞亚群的正常参考值 百分含量（%淋巴 细胞） Total T lymphocyte (CD3+) 50-84% T helper/inducer cell (CD3+/CD4+) T supressor/cytotoxic cell (CD3+/CD8+) CD4/CD8 27-51% 15-44% 项 目
高亲和力结合 不结合或低亲和力结合 凋亡删除 存活
结果：成熟的SP、获得自身（中枢）免疫耐受。
2、T细胞在外周淋巴器官中的分化发育
• 初始T细胞主要定居于外周淋巴器官的胸腺依赖区 • T细胞在外周淋巴器官与抗原接触后，最终分化为 具有不同效应功能的T细胞亚群，效应T细胞和记 忆T细胞。
ห้องสมุดไป่ตู้
三、 T淋巴细胞亚群
CD4+/CD8+的比值
• 评价那些自身免疫失调或被怀疑是免疫失 调或已知患有免疫缺陷的病人的免疫状态 ，此外，这一比值还可用来监测骨髓移植 病人以免受到急性GVHD的攻击 CD4/CD8 升高：自身免疫性疾病，如类风 湿性关节炎、SLE。 CD4/CD8 降低：病毒感染、恶性肿瘤、再 生障碍性贫血等。
1.4-2.5
请各位批评指正
按T细胞所处的活化阶段
初始T细胞（naive T cell） 效应T细胞（effector T cell） 按T细胞的CD4和CD8分子表型
CD4+ T细胞
CD8+ T细胞 按T细胞的功能分类 Th（help T cell） Tc/C TL（cytotoxic T cell） Tr（regulatory T cell）
– 特点：存活期长，再次接受抗原刺激后可迅速 活化
T细胞表面CD分子表达不同
• 1、根据CD4 和CD8 分子表达， 可将成熟T 细胞分为CD4+CD8或CD4-CD8+ 细胞； • 2、根据CD4+细胞所表达CD45 分子异构体，可分为CD45RA+ 和CD45RO+T细胞，两者分别 是初始T 细胞(naive T cell, Tn) 和记忆性T 细胞(memory T cell, Tm)的重要表型。