交叉配血试验课件

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器材 小试管、滴管、试管架、记号笔、 显微镜、离心机。 试剂 凝聚胺试剂盒。
标本 静脉血。
操 作
1. 标记试管:取试管两支,分别标明主侧次侧, 2. 加样: 主侧管:供血者3~5%悬红1滴+受血者血清2滴 次侧管:受血者3~5%悬红1滴+供血者血清2滴。 3.离心15秒,观察是否凝集 4.各加LIM溶液0.65ml,混匀后,再各加Polybrene溶液2 滴,混匀。 5. 3000r/min离心15秒,然后把上清液倒掉,不要沥干,让 管底残留约0.1ml液体。 6. 轻轻摇动试管,目测红细胞有无凝集,如无凝集,则必 须重作。 7. 最后加入Resuspending2滴,轻轻转动试管混匀1min内观 察结果,看凝集是否散开。
实验二 交叉配血试验
一、凝聚胺配血法
目的 掌握凝聚胺交叉配血法的原理、方法。 原理 红细胞表面带有大量的负电荷,凝聚胺 溶解后能产生很多正电荷,可以中和红细胞 表面的负电荷,缩短红细胞之间的距离,使 红细胞产生非特异性的集聚。悬浮液具有中 和凝聚胺的作用,使正常的红细胞非特异性 凝集散开,试验结果为阴性;如果红细胞被 相应的抗体致敏,则凝集就不会散开,试验 结果为阳性。
Байду номын сангаас
注 意 事 项
1.洗涤要迅速,中途不能停,洗彻底。 2.严格把握离心速度和时间。 3.观察结果时,须轻摇。 4.冷凝集素、脐血有网织红细胞、洗涤不充分、抗人球 蛋白血清中含有抗运铁蛋白,可使红细胞凝集。 5.先盐水观察,有溶血标本弃用。 6.加阳性、阴性对照。主侧次侧交叉结束后,加1滴阳性 对照细胞,离心后应有红细胞凝集,若不凝需重做。 7.抗人球试验费时、繁琐,但灵敏度好、特异性强。
镜、离心机、37℃水浴箱。
试剂 抗人球试剂(多抗)、生理盐水。 标本 静脉血。
操 作
1.标记试管,标明主侧、次侧 2.加样 主侧管:供血者3~5%悬红1滴+受血者血清2滴 次侧管:受血者3~5%悬红1滴+供血者血清2滴 3.离心15秒,观察是否凝集 4.混匀,37℃水浴30min,盐水洗涤3次(快), 扣干。 5.加抗人球蛋白试剂1滴,混匀,离心15秒。 6.轻摇,观察结果。
思考题


1、哪些因素可影响抗人球蛋白交叉 配血试验结果。 2、比较抗人球蛋白和凝聚胺交叉配 血试验的原理、方法和异同点。
注意事项
1.肝素治疗患者,多加几滴聚凝胺以中 和肝素。 2.试剂使用前请放置至室温平衡后再行 操作。
3.天冷时,冷凝集素会干扰交叉配血。 4.按说明书操作。 5.先盐水观察,再做聚凝胺法。
二、抗人球蛋白法配血试验
目的 掌握抗人球法原理、方法 原理 检查有无IgG抗体 器材 小试管、滴管、试管架、记号笔、显微
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