色谱分析法复习题

色谱分析综合体

填空：

1. 氢火焰离子化检测器和热导池检测器分别属于_质量型__和___浓度__型检测器。气相色谱仪的心脏是_色谱柱___。

2. 固定液一般是按照__相似相溶___原理选择；在用极性固定液分离极性组分时，分子间作用力主要是__诱导力____，极性愈大，保留时间就愈___长__。

3. 固定液通常是高沸点的有机化合物，这主要是为了保证固定液在使用温度下有____较好的热稳定性____，防止___发生不可逆的化学反应____。

4. 用于气液色谱的担体主要分为____白色担体___、___红色担体___两类。

5. 与填充柱相比，毛细管色谱柱的相比β较大，有利于实现快速分析。但其柱容量_较小_。

6. 在HPLC仪中，为了克服流动相流经色谱柱时受到的阻力，要安装_耐高压的六通阀___。

7. 气相色谱分析中，载气仅起输送作用；而液相色谱分析中，流动相还要直接参加__实际的分配过程__，要想提高高效液相色谱的柱效，最有效的途径是__使用小粒径填料_。

8. 欲分离位置异构体化合物，宜采用的高效液相色谱的分离模式是__梯度洗脱___。

9、色谱法中，将填入玻璃管内静止不动的一相称为固定相，自上而下运动的

一相称为流动相，装有固定相的柱子称为色谱柱。

10、液相色谱检测器一般可用紫外可见分光光度检测器，荧光检测器；气相色谱检测器可用热导检测器，氢火焰离子检测器，电子俘获检测器等。

色谱学分析基础：

1、色谱定性的方法都有哪些？

答、(1) 用保留时间定性(2) 用相对值保留定性(3) 用保留指数定性(4)用化学反应配合色谱定性 (5)用不同类型的检测器定性⑹色谱和各种光谱或波谱联用

2、内标法定量分析时，内标物选择应满足那些条件？

答：①试样中不含有该物质②与被测组分性质比较接近③不与试样发生化学反应④出峰位置应位于被测组分接近，且无组分峰影响

气相色谱

6. 对载体和固定液的要求分别是什么?

答：载体要求:①具有化学惰性②好的热稳定性③有一定的机械强度④有适当的比表面，表面无深沟，以便是固定液成为均匀的薄膜，要有较大的空隙率，以便减小柱压降。对固定液的要求：应对被分离试样中的各组分具有不同的溶解能力，较好的热稳定性，并且不与被分离组分发生不可逆的化学反应。

固定液的选择原则：①“相似相容”原则，②固定液和被分离物分子之间的特殊作用力，③利用混合物固定液④利用协同效应选择固定液

10．假设一个未知油剂样品，请设计一种气象色谱分析方法，并概述分析过程。

液相色谱：

11、正相HPLC与反相HPLC的主要不同之处什么？各适合分离什么物质？

答：正相HPLC是指以亲水性的填料做固定相，以疏水性溶剂或混合物做流

动相的液相色谱，主要用于分离 醇类，类脂代化合物、磷脂类化合物，脂肪酸以及其他化合物。

反相HPLC 是指以强疏水性的填料作固定相，以可以和水混合的有机溶

剂做流动相的液相色谱，主要用于分离生物大分子、卤化物和肽及蛋白质，含卢芳烃，小分子的核酸、核苷酸、多环芳烃等；

12、何为梯度洗脱？什么情况下采用梯度洗脱？

答：梯度洗脱就是有两种（或两种以上）不同极性的溶剂，在分离过程中按一定程度连续的改变，以改变流动相的配比和极性。

适合:①具有较宽K 范围的样品，及所有的组分的色谱峰的K 值不能在0.5-20之间②大分子样品，相对分子质量大于1000的，尤其是生物样品③样品中含有高保留时间的干扰成分，在一次分析中如不把他洗脱出去，就会污染色谱柱，并影响下一次分析。④即使在使用等度时也可以使用梯度洗脱选择流动相的比例。

3、液相色谱中最常用的检测器是什么检测器，它适合那些物质的检测？

答：最常用的是紫外可见分光光度检测器，适合在可见或紫外光区有吸收物质的检测；

4、某组分在ODS 柱上,以80％甲醇作流动相时的保留时间为10min,如果用60％甲醇作流动相，组分的保留时间是增加，还是减小？如果将80％甲醇换成80％异丙醇后，又会怎样变化呢？并请作出解释。

5、高效液相色谱法的特点 答:特点在于高分离性能、高灵敏度、高分析速度、可以自动化运行

6、在一定条件下，两个组分的保留时间分别为12.2s 和12.8s ，计算分离度。要达到完全分离，即R=1.5，所需要的柱长。(已知n=3600) 解：

分离度：

7、在一定条件下，两个组分的调整保留时间分别为85秒和100秒，要达到完全分离，即R =1.5 。计算需要多少块有效塔板。若填充柱的塔板高度为0.1 cm ，柱长是多少？

解： r 21= 100 / 85 = 1.18

n 有效 = 16R 2 [r 21 / (r 21 —1) ]2 = 16×1.52 ×(1.18 / 0.18 ) 2

= 1547（块）

L 有效 = n 有效·H 有效 = 1547×0.1 = 155 cm

即柱长为1.55米时，两组分可以得到完全分离。

色谱法是一种分离技术，试样混合物的分离过程也就是试样中各组分在称之为色谱分离柱中的两相间不断进行着的分配过程。其中的一相固定不动，称为固定相；8533.03600

8.12448133.036002.12442

211=⨯===⨯==n t W n t W R b R b 72.08133.08533.0)2.128.12(2=+-⨯=R m L R R L 34.4172.05.1212122=⨯⎪⎪⎭⎫ ⎝⎛=⨯⎪⎪⎭⎫ ⎝⎛=

另一相是携带试样混合物流过此固定相的流体（气体或液体），称为流动相。

色谱法：当流动相中携带的混合物流经固定相时，其与固定相发生相互作用。由于混合物中各组分在性质和结构上的差异，与固定相之间产生的作用力的大小、强弱不同，随着流动相的移动，混合物在两相间经过反复多次的分配平衡，使得各组分被固定相保留的时间不同，从而按一定次序由固定相中流出。

一、单项选择题

1. 在液相色谱法中，按分离原理分类，液固色谱法属于（）。

A、分配色谱法

B、排阻色谱法

C、离子交换色谱法

D、吸附色谱法

2. 在高效液相色谱流程中，试样混合物在（）中被分离。

A、检测器

B、记录器

C、色谱柱

D、进样器

3. 液相色谱流动相过滤必须使用何种粒径的过滤膜？

A、0.5μm

B、0.45μm

C、0.6μm

D、0.55μm

4. 在液相色谱中，为了改变色谱柱的选择性，可以进行如下哪些操作？

A、改变流动相的种类或柱子

B、改变固定相的种类或柱长

C、改变固定相的种类和流动相的种类

D、改变填料的粒度和柱长

5. 一般评价烷基键合相色谱柱时所用的流动相为（）

A、甲醇/水（83/17）

B、甲醇/水（57/43）

C、正庚烷/异丙醇（93/7）

D、乙腈/水（1.5/98.5）

6. 下列用于高效液相色谱的检测器，（）检测器不能使用梯度洗脱。

A、紫外检测器

B、荧光检测器

C、蒸发光散射检测器

D、示差折光检测器

7. 在高效液相色谱中，色谱柱的长度一般在（）范围内。

A 、10～30cm B、 20～50m C 、1～2m D、2～5m

8. 在液相色谱中, 某组分的保留值大小实际反映了哪些部分的分子间作用力（）

A、组分与流动相

B、组分与固定相

C、组分与流动相和固定相

D、组分与组分

9. 在液相色谱中，为了改变柱子的选择性，可以进行（）的操作

A、改变柱长

B、改变填料粒度

C、改变流动相或固定相种类

D、改变流动相的流速

10. 液相色谱中通用型检测器是（）

A、紫外吸收检测器

B、示差折光检测器

C、热导池检测器

D、氢焰检测器

11. 在环保分析中，常常要监测水中多环芳烃，如用高效液相色谱分析，应选用下述哪种检波器

A、荧光检测器

B、示差折光检测器

C、电导检测器

D、吸收检测器

12. 在液相色谱法中，提高柱效最有效的途径是（）

A、提高柱温

B、降低板高

C、降低流动相流速

D、减小填料粒度

13. 在液相色谱中，不会显著影响分离效果的是（ b ）

A、改变固定相种类

B、改变流动相流速

C、改变流动相配比

D、改变流动相种类

14. 不是高液相色谱仪中的检测器是（）

A、紫外吸收检测器

B、红外检测器

C、差示折光检测

D、电导检测