脂质体分析技术探讨

体外释放度（in vitro release）
• Draft guidance for industry Liposome Drug Products, Chemistry,Manufacturing, and Controls; Human Pharmacokinetics and Bioavailability; and Labeling Documentation，published in October 2015. • 中国药典 9013 缓释、控释、迟释制剂指导原则
脂质体体内作用过程
血液循环（20秒）
血管壁（）
穿透至组织细胞 通过细胞膜 脂质体释放 到达细胞核
Drug Name
Dosage Form
Medium
Develop a method to characterize in vitro release Develop a method to characterize in vitro release, starting at pH 6.00 ± 0.05 and at 47º C ±0.5º C. Replicate for 12 dosage vials.
Bupivacaine/Exparel 布比卡因 Verteporfin/VISUDYNE 维替泊芬 Vincrisitine 长春新碱
2˚ to 8˚C 2˚ to 8˚C ？
？ between 20°C and 25°C
X-GEN Pharmaceuticals , Inc.
4
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Paci来自百度文库a
游离药物
1. 凝胶柱层析法 2. 超速离心法
包裹的药物
3. 微柱离心法
4. 透析法
方法前提条件是脂质体在考察中不会破
陈召红 脂质体包封率测定方法研究进展 解放军药学学报 2011 27（1）
包封率分离方法-游离药物
1. 超滤管离心法 2. 荧光染色法
包裹的药物 游离药物
凝胶电泳法及荧光光度法测定siRNA阳离子脂质体的含量和包封率[J]．沈雁等．药学学报，2009， 44(4)：430-435
脂质体药物质量研究分析方法介绍
分析研发部：王兴辉
主要内容
1 脂质体药物概况
2
3
脂质体药物的质量指标和分析方法 HBV008 分析方法研究内容
序号
1
药品名称
Doxorubicin HCl/Doxil 盐酸多柔比星 Janssen
公司
储藏条件 2˚ to 8˚C
2 3
DaunorubicinCitrate/DaunoXome GileadSciences,Inc. 柠檬酸柔红霉素 Amphotericin B/AmBisome 两性霉素B Cytarabine/Depocyt 阿糖胞苷
游离药物
包裹的药物
包封率计算方法（encapsulation efficiency Cal）
计算方法1：
包封的药量／系统中包封与 游离的总药量×100％ 计算方法2： （1-(游离的药量／系统中包 封与游离的总药量）） ×100％
游离药物
包裹的药物
包封率分离方法-包裹的药物
方法的关键是将游离组分与脂质体球分离
体外释放度和包封率、突释效应、渗透率的有效指标
HBV008制剂质量研究内容
主要方法 SiRNA 含量方法 包封率方法 LC8含量方法 体外释放度 无菌和内毒素方法 SiRNA有关物质方法 LC8有关物质方法 方法归属 脂质体组分 脂质体组分特性 脂质体组分 脂质体特性 脂质体分散体系 脂质体组分 脂质体组分 脂质体组分
Pacira Parkedale Pharmaceuticals, Inc.
脂质体产品的三大技术问题
包封率和体外释放度——分析方法问题 稳定性——处方和制剂工艺问题
商业化放大——产品工艺问题
包封率（encapsulation efficiency）
依据： 《中国药典》9014 微粒制剂指导原则 • Draft guidance for industry Liposome Drug Products, Chemistry,Manufacturing, and Controls; Human Pharmacokinetics and Bioavailability; and Labeling Documentation，published in October 2015.
Drug Name
Amphotericin B
Injectable (Liposomal)
Amphotericin B
Doxorubicin HCl
Injectable (Liposomal)
Doxorubicin HCl
以上的内容为仿制药的IVIVC相关的。 但针对我们新药研究现阶段，体外释放度研究的目的： 集中在评估不同批次的重现性。 体外释放度是评估脂质体结构的一种方式。
包封率定义（encapsulation efficiency define）
percentage of drug contained inside liposomes compared with total amount of drug 脂质体内包裹的药物量与药 物中包封与未包封的总药量 的百分比 通常要求不得小于80%
• 其他部门想了解或要交流的问题？
参考资料
• 1. Draft guidance for industry Liposome Drug Products, Chemistry,Manufacturing, and Controls; Human Pharmacokinetics and Bioavailability; and Labeling Documentation，published in October 2015. • 2.脂质体包封率测定方法研究进展 陈召红等 解放军药学学报 2011 第27卷第1期 2007年1O月第2O卷第1O期
• 3.脂质体包封率测定方法及影响因素 叶兆伟等 中国生物制品学杂志
• 4.凝胶电泳法及荧光光度法测定siRNA阳离子脂质体的含量和包封率[J]．沈雁等．药学学报，2009， • 44(4)：430-435
• 3. 同写意50期复杂注射剂培训-之赵孝斌博士、甘勇博士、叶常菁博士等幻灯内容
溶血卵磷脂和总磷
谢谢大家
If you only do what you can do you'll never be more than you are now.
交流的问题
• 1.关于HBV008脂质体 结构早期开发是否确认， • HBV008 API 分子量为1万3，脂质体球大小0.1um，分子量是否完全包裹在脂 质体中，有没有可能因为HBV008 分子大，而镶嵌或夹在脂质体球表面？