尿培养标准

பைடு நூலகம் 《临床微生物学检验操作规范》编写组成员
顾问：王金良 组长：童明庆 副组长：倪安平 刘建栋 成员（按姓氏笔画为序）：马筱玲 王树琴
徐英春 倪语星 孙自镛 李桂琴 任健康 邹伟民 谷海瀛 张远春 桂炳东
四、结果观察和报告
2. 阴性培养结果报告：培养48 h 无菌落生长， 即为阴性。
接种1 μl 尿量者，应报告“ 培养48 h，菌落计 数< 103CFU/ ml”；
接种10 μl 尿量者，应报告“ 培养48 h，菌落 计数< 102 CFU/ ml”。
四、结果观察和报告
3. 阳性培养结果报告：无意义的阳性培养结果 报告：纯培养报告“革兰× 性× 菌生长，菌 落计数：× × CFU/ ml”；混合菌生长报告 “ 革兰× 性× 菌和革兰× 性× 菌混合生 长”。
> 5 × 105
纯培养或混合菌生长，其中某种菌落数≥105 者有意义， 需进行细菌鉴定和药敏试验；4 种及以上细菌生长无意 义，报告标本污染
导尿
> 103
3 种以内细菌生长都有意义，对2 种主要生长菌需进行细 菌鉴定和药敏试验；4 种及以上细菌生长无意义，报告标 本污染
耻骨上膀胱穿刺 任意数目
都有意义，所有细菌均需做细菌鉴定和药敏试验
与临床医师密切合作，根据不同的情况制定不同的解 释标准：尿培养菌落计数可受多种因素的影响，在一 些患者即使菌落数较少，也有明显的临床意义，所以 对菌落数< 5 × 104 CFU/ ml，“规范”中认为无意 义的阳性结果，不应随意丢弃，必要时应根据患者的 具体情况或与临床医师联系后，
附录：
决定是否需要做细菌鉴定和药敏试验。判断结果时应予以 注意：
表2 不同方法采集的尿标本培养结果评价
标本来源
清洁中段尿
菌落数CFU/ ml 结果评价
< 5 × 104
无意义，仅报告菌落数及革兰染色特征，并注明是纯培养 或是混合菌生长
(5~10) × 104
纯培养有意义，报告菌落计数和细菌鉴定、药敏试验结 果；混合菌生长无意义，仅做革兰染色镜检，并报告镜检 结果
三、实验室检查
2. 细菌培养： （1）普通培养：将收集标本的容器轻轻旋转混匀，用
定量接种环分别取尿液1 μl 涂抹接种血平板和麦康凯平 板（或中国蓝平板），35 ～ 37℃培养18 ～ 24 h，观察 结果。对导尿、耻骨上膀胱穿刺和已使用抗生素治疗的 患者标本应增加一个10 μl 接种量。
四、结果观察和报告
1. 结果观察和评价： （1）菌落计数：计数平板上的菌落数，采用1
μl 接种量者，将菌落数乘以103 ；采用10 μl 接种量者，将平板菌落数乘以102 ，即为每ml 尿液中所含有的细菌数（ CFU/ ml）。如菌落 生长过多无法精确计数时，则报告> 105 CFU/ ml。
临床微生物学尿培养操作规范
中华医学会检验医学分会
临床微生物学尿培养操作规范
尿路感染 尿液标本采集和运送 标本验收 实验室检查 结果观察和报告
尿路感染
概念：综合症 分类：上尿路感染（ 如肾盂肾炎）
下尿路感染（如膀胱炎） 男性还可出现前列腺感染，不同部位同 时感染也很常见 感染人群：各个年龄段，好发于女性，男：女 之比为1 : 10。
后，用导尿管直接经尿道插入膀胱，获取膀胱尿 液 可减少尿液标本污染，准确反映膀胱感染情况。 但有可能将下尿道细菌引入膀胱，导致继发感染 不提倡使用
一、尿液标本采集和运送
2. 采集方法： （4）小儿收集包：无自控能力的小儿
很难避免会阴部菌群污染产生假阳性 所以只有在检验结果为阴性时才有意义。 如果检验结果为阳性，应结合临床进行分析 必要时可使用耻骨上膀胱穿刺或导尿法留取
一、尿液标本采集和运送
4. 标本运送：及时送检、及时接种，
室温下保存时间不得超过2 h（夏季保存时间 应适当缩短或冷藏保存），4℃冷藏保存时间 不得超过8 h，但应注意冷藏保存的标本不能 用于淋病奈瑟菌培养。
二、标本验收
1. 申请单验收：要求除患者的基本信息以外还
应包括标本收集时间、收集方式、是否已使用 抗生素等，申请单是否填写完整。
附录：
2. 关于尿培养检验培养基的选择：没有一种平 板可以适合所有尿道病原体的生长，所以应该 根据标本来源及临床对目标菌的要求选择适合 的培养基和培养条件。
普通培养推荐使用血平板和麦康凯（ 或中国 蓝）平板，不能以血平板代替麦康凯或中国蓝 平板。
附录：
3. 关于尿培养结果评价：菌落计数> 105CFU/ ml 只 是诊断尿路感染的一般标准。对一个实验室而言，过 松，滥用与浪费，过严，漏诊。
（1）使用抗生素治疗，细菌生长受到抑制； （2）尿液稀释，尿比重< 1. 003，营养成分减少，细菌生长
迟缓； （3）尿pH < 5. 0 或> 8. 5，细菌生长受阻； （4）尿频时，膀胱内细菌停留时间短，菌落数减少； （5）尿道口消毒液混入标本中，影响细菌繁殖，菌落数少； （6）不同种类的细菌生长速度不同、营养要求不同，菌落计
血行感染 直接感染
葡萄球菌、结核分枝杆菌、沙门 发生于菌血症的患者，血液中的细菌通过
菌
血流进入肾脏引起感染，比较少见
大肠埃希菌、葡萄球菌、链球 菌、肠杆菌
外伤或肾周围器官发生感染时，细菌直接 侵入肾脏引起感染，非常少见
一、尿液标本采集和运送
1. 采集指征：（1）有典型的尿路感染症状；
（2）肉眼脓尿或血尿； （3）尿常规检查表现为白细胞或亚硝酸盐阳性； （4）不明原因的发热，无其他局部症状； （5）留置导尿管的患者出现发热； （6）膀胱排空功能受损； （7）泌尿系统疾病手术前。
三、实验室检查
1.直接涂片检查：无需常规进行涂片检查。
对于临床怀疑淋病奈瑟菌、假丝酵母菌或结核 分枝杆菌感染的标本： 可用无菌吸管吸取尿液5 ～ 10 ml置无菌 试管中，3 000 ～ 4 000 r / min 离心30 min， 倾去上清液，取沉渣涂片，行革兰染色或抗酸 染色后镜检。
一、尿液标本采集和运送
2. 采集方法： （2）耻骨上膀胱穿刺：使用无菌注射器直接
从耻骨上经皮肤消毒穿入膀胱吸取尿液 是评估膀胱内细菌感染的“ 金标准” 有一定的痛苦，患者难以接受 主要用于厌氧菌培养或留取标本困难的婴儿尿
标本的采集
一、尿液标本采集和运送
2. 采集方法： （3）直接导尿：按常规方法对会阴局部进行消毒
数有所不同，有文献推荐：革兰阴性菌以菌落计数> 105CFU/ ml，而革兰阳性菌以菌落计数> 104CFU/ ml 为诊 断尿路感染的标准。
附录：
4. 尿培养检验中常见的错误： （1）将尿液标本接种于增菌液中； （2）将中段尿标本离心后取沉渣进行一般细
菌培养； （3）标本保存时间超时，细菌大量繁殖； （4）直接用导尿管头划线培养； （5）使用中段尿标本做厌氧菌培养。
四、结果观察和报告
1. 结果观察和评价： （2）结果评价：正常情况下从肾脏排泌至膀
胱的尿液是无菌的，但膀胱中的尿液经尿道排 出体外时可受到下尿道中正常菌群的污染，而 出现细菌。因此对不同方法获取的尿液标本培 养结果需正确评价，才能有效指导临床合理治 疗。一般，清洁中段尿标本中单种细菌菌落数 >105 CFU/ ml 可能为感染;<5×104CFU/ ml 可 能为污染，在两者之间需要根据具体情况进行 评估。
2. 标本验收：
（1）标本标识是否与申请单相符； （2）标本容器有无溢漏、渗出，是否加盖； （3）送检时间是否超过规定的标本保存时间。
二、标本验收
3. 不合格标本处理：
（1）对申请单信息不全者应设法与临床医师 取得联系； （2）对标识不符、送检容器不合格、送检时 间超过规定时间的标本应注明原因，退回，要 求重新留取标本，并做记录。
一、尿液标本采集和运送
2. 采集方法：未使用抗生素之前，注意避免污染 （1）清洁中段尿：晨尿最好，睡前少饮水，起床后
用肥皂水清洗会阴部，女性应用手分开大阴唇，男性 应翻上包皮，仔细清洗，再用清水冲洗尿道口周围； 开始排尿，将前段尿排去，中段尿约10 ～ 20 ml 直接 排入专用的无菌容器中，立即送检，2 h 内接种。 简单、易行，最常用 很容易污染，应嘱咐患者正确留取。
（2）特殊培养：对怀疑有苛养菌感染者应采用耻骨上
膀胱穿刺法或导尿法采集样本，加种一块巧克力平板， 置5% CO2环境中培养48 h。检查淋病奈瑟菌、结核分 枝杆菌感染时无需做定量培养，可将标本离心后取尿沉 渣进行培养，以提高阳性率。
三、实验室检查
2. 细菌培养
（3）普通培养18 ～24 h 无菌生长时，应将 所有培养基继续培养24 h。
有意义的阳性培养结果报告：报告菌落计数、 细菌种属名称及标准抗菌药物敏感性试验结果。
附录:
1. 关于尿培养标本的接种： 细菌污染，定量接种、合理评价 定量接种的方法:直接划线法和倾注平板法。 直接划线接种法的关键:是应保证接种量的准确性，可使
用1 μl 或10 μl 的定量接种环，方法是将接种环校准后， 以垂直方向持拿，使环圈刚好浸入尿液表面（不可使尿液 碰到环上方的环柄），取尿液进行接种。 无定量接种环的实验室，可使用无菌的5 μl 微量移液器吸 取尿液加入平板，再用接种环划线接种，将平板菌落数乘 以200，即为每ml 尿液中所含有的细菌数（CFU/ ml）。
主要为肠道菌群或会阴部细菌逆行感染， 多见于女性，多为单一细菌感染，以大肠 埃希菌感染最常见
泌尿系统解剖结构和生 理功能改变引起的感染
大肠埃希菌、克雷伯菌、变形杆 菌、肠杆菌、普罗威登菌、沙雷 菌、不动杆菌、假单胞菌、葡萄 球菌、肠球菌
多见于留置导尿管、肾盂造瘘术、尿路结 石、尿路重建、前列腺肥大、膀胱排空能 力受损的患者，容易发生多种微生物的混 合感染，易被误认为标本污染
尿液进行复检。
一、尿液标本采集和运送
2. 采集方法： （5）留置导尿管:先消毒导尿管外部，按无菌
操作方法用注射器穿刺导尿管吸取尿液 防止混入消毒剂 注意不能从尿液收集袋中采集尿液。
一、尿液标本采集和运送
3. 采集容器：
（1）应由惰性材料制成； （2）洁净、无菌、加盖、封闭、防渗漏； （3）不含防腐剂和抑菌剂； （4）广口、具有较宽的底部、容积应> 50 ml （5）盒盖易于开启。
尿路感染
症状：发热、尿频、尿急、尿痛、排尿困难和 耻骨上压痛，临床表现可因患者的年龄和健康 状况不同而异。
诊断方法：细菌学检查，主要致病菌可因尿路 感染的原因不同而有所不同（表1）
表1 尿路感染的原因及常见病原菌
感染原因
主要致病菌
感染特点
上行感染
大肠埃希菌、克雷伯菌、变形 杆菌、淋病奈瑟菌