UF-1000i原理、参数解释及病例1

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报警信号*
小红细胞? (非均一性红细胞?)
正细胞? (均一性红细胞?)
未分类? (混合性?)
报警信号的意义 红细胞Fsc直方图显示小红细胞的特征,提示红细胞可能来源于肾小球。 红细胞Fsc直方图显示正红细胞的特征,提示红细胞可能不是来源于肾小球。 红细胞Fsc直方图显示两种来源的出血或因中等大小而不能明确图像。
举例)含有红细胞和草酸钙结晶的标本。
多面体形
双凹形
! 在相互重叠区域显示红点和蓝点。 UF-1000i鉴别X'TAL和RBC。
草酸钙结晶 SSC反映了表面和内部的复杂性。UF-1000i根 据其复杂性分类X'TAL。
复杂的模型结构
侧向散射光强度 UF-100可能将红细胞计数为X'TAL,显示 REVIEW报警信号。

Others Ǫ2-MG: Ǫ2-微球蛋白 ǫ-GT: ǫ-谷氨酰基转移酶
目录
测量原理和流程 脉冲信号处理 信号波形成 染色液组成 细菌染色 散点图图像1 散点图图像2 管型方面 红细胞和结晶的区分 白细胞和上皮细胞的区分 关于总计数值和测定值的问题 红细胞信息 复核 数据浏览屏幕的显示 线性 重复性 显微镜检查和UF-1000i相关性 参考范围 临床病例研究-结果解释 参考文献
宽度
侧向散射光信号 高度
宽度 前向散射光脉冲宽度
表面内部复合信息 侧向散射光强度
荧光信号 高度
荧光强度
染色性
宽度
染色部分的宽度
荧光脉冲宽度

信号波形成
下列波形来自尿液中颗粒所产生的前向散射光,侧向荧光和侧向散射光信号。
红细胞 白细胞 细菌
前向散射光波形 高度 脉冲宽度
侧向荧光波形
侧向散射光波形
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
上皮细胞
N NAG:N-乙酰-Ǫ-D-氨基葡萄糖苷酶


Path. CAST:病理性管型

R RBC:红细胞 RBC-Info.:红细胞信息
S SRC:小圆细胞 Ssc:侧向散射光强度
T T-CHO:总胆固醇
U UTI-Info.:尿路感染信息

W WBC:白细胞
X X'TAL:结晶
Y YLC:酵母菌样细胞
复核术语 DEBRIS增高
RBC/X'TAL异常群体
RBC/BACT异常群体
厂商定义复 核报警信号
RBC/YLC异常群体
异常DC灵敏度 交叉污染?
标记
内容
表示细菌通道内颗粒计数增高,大多数判断为DEBRIS。 怀疑细菌计数收到影响。
如果红细胞≧20/μL和出现许多X'TAL,X'TAL群体采 用SSC测定。有时,在散点图上RBC和X'TAL相互重 叠,使两个群体鉴别困难。
采用SSC参数信息区分WBC和EC。
! 散点图上蓝点区域为上皮细胞。在UF-1000i上, 蓝色提示正确的将白细胞团块分类为WBC。在 UF-100上,所见黑点为EC。
标本中含有许多WBC,UF-100分析显示高EC计 数。WBC团块可能分类为EC。但是,UF-1000i 提高了对尿液中这些颗粒分类的精确度。
供了表面和内部复杂性信息,Fl提供了每个颗粒 染色性信息。 UFⅡPACK SED是用于颗粒计数的稀释液。与UFⅡ SEARCH SED一起作为中和试剂,防止溶血和维持 红细胞形态。 UFⅡPACK BAC是阳离子表面活性剂,能增强UFⅡ SEARCH BAC染细菌核酸的功能。
●红细胞(RBC)
大小不同
红细胞群体显示大小不一。
大小一致 小
红细胞群体显示大小一致。 正常大小
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复核
在仪器中贮存了厂商定义的复核报警信号和用户定义的复核报警信号。厂商定义的复核报警信号表示因分析局限性 得到的结果可信度低。厂商定义复核标准中,下面相关的项目显示 和 REVIEW ,默认的*显示在左上方区域中。 用户定义复核标准中,如果单个项目结果超出复核限,在相关结果显示 + 和 REVIEW 。 除用户定义复核限以外,也可设定异常报警信号的参考范围(显示 )。
管型(有包涵物)
管型(没有包涵物)
* 信号波形的纵轴显示颗粒的大小,横轴显示颗粒的染色强度。

染色液组成
UF-1000i有两种染色试剂分别染色尿液颗粒和细 菌:UFⅡSEARCH SED和UFⅡSEARCH BAC。两种染 色试剂均含有多次甲基荧光染料,能对尿液标本 中出现的颗粒进行染色。当红色半导体激光光源 照射到流动室颗粒时,产生3种类型信号:前向 散射光信号(Fsc),侧向散射光信号(Ssc)和 荧光信号(Fl)。Fsc提供了大小的信息,Ssc提

E EC:上皮细胞
F FBS:空腹血糖 Fl:荧光强度 Flw:荧光脉冲宽度 Fsc:前向散射光强度 Fscw:前向散射光脉冲宽度

H Hgb:血红蛋白 Hct:红细胞比积
IJK
L LD:乳酸脱氢酶(LDH)
M MCH:红细胞平均血红蛋白量 MCHC:红细胞平均血红蛋白浓度 MCV:红细胞平均体积
(灰色)
* 散点图随版本修订而不断更新。

散点图图像 2
研究屏幕 1
研究屏幕 2
●沉渣通道
(红色) (蓝色) (橘黄色) (淡橘黄色) (绿色) (黄绿色) (蓝色)
(淡黄色) (棕色)
(紫色) (灰色)
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●细菌通道
(紫色) (质控物)(蓝色)
(灰色)
管型方面
检出包涵物管型提示为肾脏相关的疾病。采用荧光信号基于两种不同的放大水平(FLLW和FLLW2)提高 了病理性管型(Path.CAST)的鉴别能力。
手工显微镜检查结果
* 在UF-1000i上,由于无定形磷酸盐和尿酸盐会干扰分析,因而在稀释和35℃染色期间溶解这些结晶以减少干扰。 UF-1000i对大多数有形结晶的分类特异性高。
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白细胞和上皮细胞的区分
UF-1000i基于光学信号带宽进行尿液颗粒的分类。在UF-1000i上,SSC(侧向散射光信号)和其它附 加信号能提供EC和WBC的最佳分类。白细胞团块也能正确分类为WBC。
●鳞状上皮细胞(团块)
●白细胞(WBC)
●管型(WBC管型)
●细菌(BACT) 在显微镜下,很难观察到染色细菌的红色荧光。细菌 较其它成分体积小,荧光强度也较低。UF-1000i具有 高灵敏度检测器,能够检出弱荧光。

细菌染色
细菌的特殊染色
细菌特殊试剂系统(UFⅡPACK BAC和UFⅡSEARCH BAC)能确保UF-1000i更准确地检出和定量细菌。
第2检测器水平 FLLW2提示内容物的宽度。
第1检测器水平 FLLW提示整个颗粒的宽度。
荧光强度
管型长度
显微镜下的Path.CAST影像 颗粒管型
内容物的多少
没有任何包涵物的管型或黏 液丝
透明管型 黏液丝
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红细胞和结晶的区分
UF-1000i使用侧向散射光(SSC)新信号。改进了EC/WBC的分类,减少了结晶(X'TAL)和红细胞 (RBC)的干扰。

测量原理和流程
检测器
原理 检测信号 测量信号
信息
红色半导体激光
前向散射光信号放大器 荧光信号放大器
鞘流试剂 细菌分析的稀释和染色
侧向散射光信号放大器 电导率感受器 沉渣分析的稀释和染色
尿液标本 流式细胞术
前向散射光信号
侧向散射光信号
荧光信号
电导率检测
大小
长度
表面内部复合信息 散点图
染色性
染色部分宽度
细菌
(酵母样细胞)
尿液电导率
(精子)
(结晶)
(小圆细胞)
(粘液丝) (病理性管型)

脉冲信号处理
检测器
红色半导体激光
前向散射光信号放大器 荧光信号放大器
鞘流试剂 细菌分析的稀释和染色
侧向散射光信号放大器 电导率感受器 沉渣分析的稀释和染色
尿液标本
脉冲信号处理单元
前向散射光信号 高度
大小
总颗粒数 前向散射光强度
手工显微镜检查结果
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关于总计数值和测定值的问题
总RBC,WBC,EC和CAST计数值为181.58/μL。当加入 OTHERS(46.4/μL)计数值时,总计数值为227.98/ μL。 分析标本量为7.8μL。227.98×7.8=1778。 沉渣通道总计数值为4104。其差异是因计数粘多糖而 没有检出细菌或黏液丝造成的。
2007年4月 伊藤机一,医学博士,哲学博士 东大大学 运动和卫生系
本临床病例研究手册所用缩写
A ALP:碱性磷酸酶ALP ASO:抗链球菌溶血素O ASK: 抗链激酶 AST:天门冬氨酸氨基转移酶 ALT:丙氨酸氨基转移酶
B BACT:细菌
C ch:通道 CH50:血清补体滴度 Cond.:导电率 Cond-Info:导电率信息 CRP:C-反应蛋白
前言
11年前,我们出版了全自动尿液颗粒分析仪(UF-100)的第1版“临床病例研究”手册,并 期望该手册能提供尿液显微镜筛查和诊断的重要信息,能用于大多数医疗机构的尿液分析 室,门诊检验室,儿科,泌尿科病房和商业实验室。随着尿液荧光流式细胞术的发展,尿 液颗粒分析仪应用更广。但是,传统手工尿液显微镜检查方法仍是标准方法,具有很高的 临床可信度和良好的性能,为此,JCCLS(日本临床实验室标准化委员会)出版了尿液沉渣 检验指南(GP1-P3)(2000年出版),随后日本医学技师学会(JAMT)形态学组对检验人 员进行了培训。 在今年4月的新分类中,采用了尿液荧光流式细胞术颗粒分析和手工显微镜尿液沉渣分析分 开的建议,单独列为一个项目(D002-2)。该技术是对新鲜尿液标本进行分析,将对尿液 分析产生积极影响。根据CLSI(临床和检验标准化研究所),ECLM(欧洲检验医学委员 会)2),3)和UTI(日本尿路感染研究所)所述尿液分析仪指南的格式,报告尿液沉渣定量结 果,并考虑了对医疗工作的影响。同时,日本的4个学会和2个专业组共同建立了血尿指 南。这些指南包括尿液沉渣的定量测定。为了满足各种情况,包括尿液沉渣分析,出版了 “UF-1000i”4)新手册。本手册包括了临床病例研究,正常群体参考值和UF-1000i基本性能 等重要数据。适用于医生,医学技师和相关从事尿液筛查的人员。本手册是金泽红十字医 院检验室的真实病例在该新技术上的应用情况。 我期望本病例研究手册能够为临床和实验室提供有用的信息或参考。我们欢迎对本手册提 出任何问题和/或建议。
总BACT(134/ǴL)和DEBRIS(79/ǴL)计数 值为213/ǴL。在正常情况下,细菌通道中分 析量为1ǴL。213×1=213。 细菌通道总计数值为1187,差异达974,可能 是尿液中出现了细胞和其它细菌,如UFⅡ SEARCH-BAC破坏细胞。
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红细胞信息
●红细胞信息
UF系列提供红细胞信息(RBC info)作为报警信号,如“'Microcytic?”,“Normocytic?”或 “Non-classified?”。RBC info通过红细胞前向散射光(Fsc)直方图获得(红细胞Fsc分布图)。红细胞主 要群体的大小(代表RBC-P70Fsc)和红细胞大小分布宽度(RBC-Fsc-DW)用于生成红细胞信息,并显示出来。 * 报警信号能改为“Dysmorphic?”,“Isomorphic?”或“Mixed?”。
染色溶液 - 细菌核酸能特异与多次甲基染料结合。
稀释液
- 适当pH值的稀释液能防止非特异对细菌以外的其他颗粒 着色。
- 尿液中存在亚硝酸盐会很快分解,不会干扰荧光染色。
红色半导体激光
BACT线性
下图显示UF-1000i的细菌计数和培养之间存在很好的相关性。培养的细菌进行稀释,并定量检查。
培养
培养

散点图图像 1
●RBC-P70Fsc(非溶解红细胞的主要大小)
●RBC-Fsc-DW(非溶解红细胞的大小分布)
频率 频率
Fsc通道在低FSC区域包括70%非溶解红细胞。
非溶解红细胞分布的Fsc宽度包括曲线的上限和下限 20%。
●报警信号定义
RBC info是根据下图中RBC-P70Fsc和RBC-Fsc-DW信息得到的。*如果红细胞参数的报警信号可信度低,或红细胞数量20/μL 或低于RBC info,就不判断结果。
主屏幕
散点图颜色
每个参数会显示各自参数特点的颜色。
●沉渣通道
(红色) (蓝色) (橘黄色) (淡橘黄色) (绿色) (黄绿色) (蓝色)
(淡黄色) (棕色)
(紫色) (灰色)
沉渣通道 细菌通道
前向散射光强度 前向散射光脉冲宽度 侧向散射光强度 荧光强度 荧光脉冲宽度
●细菌通道
(紫色) (质控物)(蓝色)
可报告参数 报警信号参数
红细胞
白细胞
上皮细胞
管型
前向散射光强度 前向散射光脉冲宽度 侧向散射光强度 荧光强度 荧光脉冲宽度
CAST提示含有细胞成分的管型。CAST报告数量包括Path.CAST。 在散点图上,CAST与Path.CAST是分开的。 Mucus提示透明管型和粘液丝。 Path.CAST提示病理性管型,包括3或多个细胞成分。
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