过氧化氢酶 .详解
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2020/9/23
1) 通过菌种筛选，获取高产和能耐受高pH、高温度的过 氧化氢酶的菌株。通过野生菌发酵过程控制与优化，提 高发酵产量。同时对编码耐高温、高碱过氧化氢酶的基 因进行鉴定。
2) 从高温高碱过氧化氢酶基因出发构建工程菌，结合 现代在线控制与分析技术，进行过氧化氢酶发酵过程优 化与控制研究，提高产酶水平。
使用时, 通常要注意H2O2 分解酶对常用表面活性剂和 H2O2 稳定剂的相容性, 实际生产应用pH为6～8 , 温度 20～55 ℃, 酶用量5～10KCLU/ 升,时间10～20min。此技 术已慢慢地被国内所认识和接受, 它对提高活性染料色泽 鲜艳度很有利。
2020/9/23
2020/9/23
2020/9/23
过氧化氢分解酶随pH 值和温度的改变, 其活力随之 变化, 在pH=7左右和30～40 ℃活性最大。过氧化氢浓度 增大, 会加快分解反应速度, 但必须注意当浓度大于一定 量时, 酶的作用将减弱, 这样过多的残留H2O2 对纤维和染 料是不利的。所以不能因为有了H2O2 分解酶, 就能任意地 加大H2O2 的用量。
2020/9/23
1. 分光光度法 2. 荧光测定 3. 同位素标记法 4. 电化学法
2020/9/23
紫外吸收法：
H2O2在240nm波长下有强烈吸收，过氧化氢酶能分解过 氧化氢，使反应溶液吸光度(A240)随反应时间而降低。 根据测量吸光率的变化速度即可测出过氧化氢酶的活性。 HMB法： HMB是一种快速测定过氧化氢酶含量的方法，检测板放置 在白水中一定时间后取出，不要接触检测板的表面，将其 放在检测试管中，试管中装有一定量的稀释液和反应物。 向试管中滴加10滴HMB 50R试剂（HMB 50R是一种强氧化 剂），放置15min，然后将试管放在HMB测定仪中读取数据。 该方法可用于工厂中直接测量过氧化氢酶的含量。
医学上，也可作为工具酶，用于检验尿糖和血糖。现代医学上 认为机体衰老与氧化有关，例如染色体、酶等的氧化。所以， 一些有还原性功能的物质可以在某种程度上抗衰老，如过氧化 物酶体，维生素C、E也有抗衰老作用。
食品工业中被用于除去用于制造奶酪的牛奶中的过氧化氢。过 氧化氢酶也被用于食品包装，防止食物被氧化。
纺织工业中，过氧化氢酶被用于除去纺织物上的过氧化氢，以 保证成品是不含过氧化物的。
美容业中的使用,一些面部护理中加入了该酶和过氧化氢，目的 是增加表皮上层的细胞氧量。
隐形眼镜的清洁上,眼镜在含有过氧化氢的清洁剂中浸泡后，使 用前再用过氧化氢酶除去残留的过氧化氢。
实验室中还常常被用作了解酶对反应速率影响的工具。
2020/9/23
几乎所有的生物机体都存在过氧化氢酶。其普遍存在于能呼 吸的生物体内，主要存在于植物的叶绿体、线粒体、内质网、 动物的肝和红细胞中，其酶促活性为机体提供了抗氧化防御机 理。
2020/9/23
称取新鲜小麦叶片或其它植物组织0.5g置研 钵中，加入2～3ml 4℃下预冷的PH7.0磷酸缓 冲液和少量石英砂研磨成匀浆后，转入25ml 容量瓶中，并用缓冲液冲洗研钵数次，合并 冲洗液，并定容到刻度。混合均匀将量瓶置 5℃冰箱中静置10min，取上部澄清液在 4000r/min下离心15min，上清液即为过氧化 氢酶粗提液。5℃下保存备用。
2020/9/23
过氧化氢分解酶, 能将过氧化氢分解 成水和氧气, 而对纤维和染料没有影响, 因而漂白后染色前, 通过H2O2分解酶去除 漂白织物上和染缸中残留的过氧化氢, 以 避免纤维的进一步氧化和染色时染料的氧 化。同时能缩短加工时间,减少水洗用水, 降低废水量。尤其对纱线、筒子纱和针织 物更为适用。
3) 通过定点突变、定向进化等分子改造手段，提高过氧 化氢酶的温度、pH 耐受性，提高其应用性能。
2020/9/23
2020/9/23
得到酶粗液后，利用硫酸铵分级沉淀，加入固体硫 酸铵至30%饱和度，4 ℃ 冰箱静置2h后，12000r/min 离心30min，弃沉淀，量上清液。取再加入硫酸铵至 40%饱和度，12000r/m离心30min，弃上清，留沉淀， 沉淀用0.05mol/L的磷酸缓冲液(pH7.2)溶解，4 ℃用 0.05mol/L、pH7.2 的磷酸缓冲液透析过夜，再进行离 子交换层析，凝胶过滤柱层析，最后是过氧化氢酶活 性的测定。
2020/9/23
H202 （过氧化氢）
关系
过氧化氢酶
2020/9/23
2020/9/23
过氧化氢酶的简介及来源 过氧化氢酶的制备 过氧化氢酶活性的测定 过氧化氢酶的应用 过氧化氢酶的展望
过氧化氢酶，是催化过氧化氢分解成氧和水的酶， 存在于细胞的过氧化物体内。过氧化氢酶是过氧化物ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ体 的标志酶, 约占过氧化物酶体酶总量的40%。过氧化氢酶 存在于所有已知的动物的各个组织中，特别在肝脏中以高 浓度存在。
1) 通过菌种筛选，获取高产和能耐受高pH、高温度的过 氧化氢酶的菌株。通过野生菌发酵过程控制与优化，提 高发酵产量。同时对编码耐高温、高碱过氧化氢酶的基 因进行鉴定。
2) 从高温高碱过氧化氢酶基因出发构建工程菌，结合 现代在线控制与分析技术，进行过氧化氢酶发酵过程优 化与控制研究，提高产酶水平。
使用时, 通常要注意H2O2 分解酶对常用表面活性剂和 H2O2 稳定剂的相容性, 实际生产应用pH为6～8 , 温度 20～55 ℃, 酶用量5～10KCLU/ 升,时间10～20min。此技 术已慢慢地被国内所认识和接受, 它对提高活性染料色泽 鲜艳度很有利。
2020/9/23
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过氧化氢分解酶随pH 值和温度的改变, 其活力随之 变化, 在pH=7左右和30～40 ℃活性最大。过氧化氢浓度 增大, 会加快分解反应速度, 但必须注意当浓度大于一定 量时, 酶的作用将减弱, 这样过多的残留H2O2 对纤维和染 料是不利的。所以不能因为有了H2O2 分解酶, 就能任意地 加大H2O2 的用量。
2020/9/23
1. 分光光度法 2. 荧光测定 3. 同位素标记法 4. 电化学法
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紫外吸收法：
H2O2在240nm波长下有强烈吸收，过氧化氢酶能分解过 氧化氢，使反应溶液吸光度(A240)随反应时间而降低。 根据测量吸光率的变化速度即可测出过氧化氢酶的活性。 HMB法： HMB是一种快速测定过氧化氢酶含量的方法，检测板放置 在白水中一定时间后取出，不要接触检测板的表面，将其 放在检测试管中，试管中装有一定量的稀释液和反应物。 向试管中滴加10滴HMB 50R试剂（HMB 50R是一种强氧化 剂），放置15min，然后将试管放在HMB测定仪中读取数据。 该方法可用于工厂中直接测量过氧化氢酶的含量。
医学上，也可作为工具酶，用于检验尿糖和血糖。现代医学上 认为机体衰老与氧化有关，例如染色体、酶等的氧化。所以， 一些有还原性功能的物质可以在某种程度上抗衰老，如过氧化 物酶体，维生素C、E也有抗衰老作用。
食品工业中被用于除去用于制造奶酪的牛奶中的过氧化氢。过 氧化氢酶也被用于食品包装，防止食物被氧化。
纺织工业中，过氧化氢酶被用于除去纺织物上的过氧化氢，以 保证成品是不含过氧化物的。
美容业中的使用,一些面部护理中加入了该酶和过氧化氢，目的 是增加表皮上层的细胞氧量。
隐形眼镜的清洁上,眼镜在含有过氧化氢的清洁剂中浸泡后，使 用前再用过氧化氢酶除去残留的过氧化氢。
实验室中还常常被用作了解酶对反应速率影响的工具。
2020/9/23
几乎所有的生物机体都存在过氧化氢酶。其普遍存在于能呼 吸的生物体内，主要存在于植物的叶绿体、线粒体、内质网、 动物的肝和红细胞中，其酶促活性为机体提供了抗氧化防御机 理。
2020/9/23
称取新鲜小麦叶片或其它植物组织0.5g置研 钵中，加入2～3ml 4℃下预冷的PH7.0磷酸缓 冲液和少量石英砂研磨成匀浆后，转入25ml 容量瓶中，并用缓冲液冲洗研钵数次，合并 冲洗液，并定容到刻度。混合均匀将量瓶置 5℃冰箱中静置10min，取上部澄清液在 4000r/min下离心15min，上清液即为过氧化 氢酶粗提液。5℃下保存备用。
2020/9/23
过氧化氢分解酶, 能将过氧化氢分解 成水和氧气, 而对纤维和染料没有影响, 因而漂白后染色前, 通过H2O2分解酶去除 漂白织物上和染缸中残留的过氧化氢, 以 避免纤维的进一步氧化和染色时染料的氧 化。同时能缩短加工时间,减少水洗用水, 降低废水量。尤其对纱线、筒子纱和针织 物更为适用。
3) 通过定点突变、定向进化等分子改造手段，提高过氧 化氢酶的温度、pH 耐受性，提高其应用性能。
2020/9/23
2020/9/23
得到酶粗液后，利用硫酸铵分级沉淀，加入固体硫 酸铵至30%饱和度，4 ℃ 冰箱静置2h后，12000r/min 离心30min，弃沉淀，量上清液。取再加入硫酸铵至 40%饱和度，12000r/m离心30min，弃上清，留沉淀， 沉淀用0.05mol/L的磷酸缓冲液(pH7.2)溶解，4 ℃用 0.05mol/L、pH7.2 的磷酸缓冲液透析过夜，再进行离 子交换层析，凝胶过滤柱层析，最后是过氧化氢酶活 性的测定。
2020/9/23
H202 （过氧化氢）
关系
过氧化氢酶
2020/9/23
2020/9/23
过氧化氢酶的简介及来源 过氧化氢酶的制备 过氧化氢酶活性的测定 过氧化氢酶的应用 过氧化氢酶的展望
过氧化氢酶，是催化过氧化氢分解成氧和水的酶， 存在于细胞的过氧化物体内。过氧化氢酶是过氧化物ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ体 的标志酶, 约占过氧化物酶体酶总量的40%。过氧化氢酶 存在于所有已知的动物的各个组织中，特别在肝脏中以高 浓度存在。