畜产品中瘦肉精、氯霉素等残留的胶体金检测技术

中国畜牧兽 医文摘 ２ ０ １ ５ 年
３ １ 卷
第１ Ｏ 期
畜 产 品 加 工
畜产 品 中瘦 肉精 、氯霉素等残 留的胶体 金检 测技术
姜在清 陈 明生
２ ６ ２ ２ ０ ０ ） （ 山东省诸 城市畜牧兽医管理局 ，山东诸城
诸 城 市畜 牧 局 坚持 以人 为本 的 理念 ，始终 把 畜 禽产 品质量 安 全 Ｔ 作放 在 全 局 作 的首 要 任 务 。严格 贯 彻 执行 《 食 品安 全 法 》 《 动 物 防疫 法 》 《 农 产 品质 量安 全 法 》 《国务 院关 于加 强 食 品及 产品 监督 管 理 特 别规 定 》 《 动 物性 食 品 中兽 药 最高 残 留 限量 》等 法 律 法规 及 有 关配 套 规 定 ，加 强畜 禽 产业 行 业 管理 ，强化 官 方兽 医监 管 职责 ，定期 不 定期 到畜 禽产 业 各环 节 进 行监 管 ，发 现 问题 依法 处 理 ，同时 充分 发 挥动 物 疫病 预 防控 制 中心 的技 术 优势 ，积 极开 展 对 动物 疫病 、兽 药 饲料 、畜禽 产 品药 物 残 留进 行 监测 和技 术指 导 ，发现 问题 由动 物卫 生 监督 机 构 依法 处 理 。 南于诸 城 市 对 畜禽 产 品 质量 安 全 的高 度 重视 ，加 强 畜 禽产 业 各环 节 的 监管 、兽
诸 城市 场 上采 用 的 “ 瘦 肉精 ”快速 检测 卡 应用 了竞 争抑 制 免疫 层 析 的 原理 ，样 品 中的 “ 瘦 肉精 ”在 流动 过 程 中与胶 体 金 标记 的特 异 性单 克 隆抗 体结 合 ，抑 制 了抗 体 和Ｎ Ｃ 膜检 测 线上 “ 瘦 肉精 ”一 蛋 白偶联 物 的结 合 。如样 品尿液 中 “ 瘦 肉精 ”含量 大 于３ ｐ ｐ ｂ ，肉 类中 “ 瘦 肉精 ”含 量 大 于 Ｉ ｐ ｐ ｂ ，检 测线 不 显 色 ，结果 为 阳性 ；反 之为 阴性 。 “ 瘦 肉精 ”胶 体 金 快速 检 测 卡 检 测 方 法 ： （ １ ） 最 简 单 的方 法 只需要 取一 些 猪 肉 、肝 脏 、肺 脏 、。 肾脏 、瘦 肉样 品 （ 约１ ０ ｇ ）， 将样 品剪 碎装 入 １ ． ５ ｍｌ 离 心管 中 ，盖 紧 管 盖 ，在水 浴 中煮 ５～１ ０ ａ ｒ ｉ ｎ ，使 汁液 浸 ，取 出离 心管 放 至室温 ，将 煮 出的 汁液 加 同样体 积 的配 套缓 冲液混 匀 ，用 吸管 吸入 样本 液 垂 滴加 １ ～２ 滴 于 加样 孑 Ｌ 内 ，用 于检测 即可 ，几个 ｐ ｐ ｂ 的瘦 肉精 就能 被测 出 ，全程 只需 十几 分钟 。注 意脂 肪会 造 成 似 阳性 ，取 样 时请 弃 去 肉 眼可 见 的脂 肪 。 （ ２） 样 品猪 肉组 织 ，称取 ５ ． ０±Ｏ ． ０ ５ ｇ 新 鲜猪 肉 （ 或肝 ） 样 品 ，放 于５ ０ ０ ｍ ｌ 带 盖 离 心 管 中３ ｎ ５ ｇ 无水 硫 酸钠 ，再￣ １ ５ ｍ ｌ 乙氰振 荡 ３ ｍｉ ｎ ， ４ ０ ０ ０ ｒ ／ ｍｉ ｎ 离心 １ ０ ｍ ｉ ｎ ，取４ ｍｌ 上 清 液 于 另 一试 管 中５ ６ 度 空 气 后氮 气 吹 干 ，Ｏ ． ３ ｍｌ 二 三 蒸水 复溶 ，振荡 ３ ａｉ ｒ ｎ 取液 体 检 测 ； （ ３ ）样 品饲 料 ，称 取均 质 的饲 料样 品 １ ． ０ ±Ｏ ． ０ ５ ｇ 加人１ ０ ｍ ｌ 甲醇 ，再 加入 ５ ｇ 无水 硫 酸钠 振荡 ３ ｍ ｉ ｎ ，室 温４ ０ ０ ０ ｇ ｏ ｒ ｉ ｎ 以上 离心 １ ０ ａ ｒ ｉ ｎ ，吸 离 心后 的 上清液１ ｍ ｌ ，于５ ６ 度 氮气 吹 干 ，用 ｌ ｍ ｌ 三蒸 水 复溶 ，再 加 ｌ ｍ ｌ 正 己烷 混合３ ０ ｓ 室温 ４ ０ ０ ０ ｆ ｍｉ ｎ 以上 离心 ，取 下 层液 体检 测 。检 测 ，在 检 测 卡 的 加样 孑 Ｌ 内加 入２ 滴 （ ８ ０ １ ） 待 检样 品溶 液 ，在 室 温下 静 置 ５～ ８ ａ ｒ ｉ ｎ 内判 定结 果 ，超过 ３ ０ ｍ ｉ ｎ 的结果 只能 做参 考 ， 当样 品 溶液 中 的瘦 肉精 含 量大 于 检测 限 时 ，检 测线 不 显 色结 果 为 阳性 ，当样 品溶 液 中瘦 肉精含 量 小 于检 测 限时 ，检 测 线 显紫 红 色 ，结果 为阴 性 。肉类 检测 限为 ｌ ｐ ｐ ｂ 、饲 料５～１ ０ ｐ ｐ ｂ 。 胶体 金 快 速检 测 卡对 生 猪 尿液 中 “ 瘦 肉精 ”的 检测 （ 适 合 于 官方 兽 医搞 产 地检 疫 检 测和 屠 宰检 疫 及屠 宰 厂检 验 检测 时 ）。具 体操 作 与 注意 事项 ：取 出检 测 卡 ，根 据检 测 样 品 的数量 确 定需 要 检 测卡 的数量 ；检 测卡 放 置在 平坦 的台 面上 ；划 的规定 和 操作 规 程 和技 术 要求 进 行兽 药 残 留 的监测 ，至今 无畜 禽及 畜 禽产 品质 量安 全事 故发 生 。 ２ ０ ０ ２ 年３ 月农 牧 发 ［ ２ ０ ０ ２］１ 号 文件 《 食 品动 物禁 用 的兽 药 及 其 化合 物 清单 》、２ ０ ０ ２ 年４ 月 农 牧发 ［ ２ ０ ０ ２ ］２ ３ ５ 号 文件 《 动 物性 食 品 中兽 药 最 高 残 留 限量 》中 “ 瘦 肉精” （ 盐 酸 克 伦 特 罗 及 其 盐 、酯 ）、氯霉 素 及其 盐 、酯是 首 要禁 止 使用 的药 物 ，在 动物 性 食 品 中不 得 检 。盐酸 克 伦 特 罗在 人 的 临床 上用 于 治疗 哮 喘 病 ， 对 心 脏 副作 用 大 ，属 于一 肾 上 腺 类 激 素 ，据 资 料 报 道 人 医用 量
药残 留的 检测 （ 监 测 ），按 照 同家标 准 、 行 业 标 准及 省 、市有 关
原 抗体 反 应 的原 理 上 可把 层析 法 免疫 胶 体 金检 测试 剂 分 为 以下 几 类 ，一 是 双抗 体 夹 心法 金 标 。二 是 双抗 原 夹心 法 。 是捕 获 法 检 测 特异 性 的 人Ｉ ｇ Ｇ 和Ｉ ｇ Ｍ； 四是竞 争 抑制 法 检测 小 分子 物 质 。现 在
０ ． ０ ２ ～０ ． ５ ｄ ｋ ｇ 中毒 一 般含 量肝 脏 １ ０ ０ ～５ ０ ０ ｇ ／ ，一 般 肝脏 的残
留是 肌 肉的２ ０ ０ 倍 ，一餐 食 用 含 “ 瘦 肉精 ” 的猪ｇ Ｔ ｏ ． ２ ５ ｋ ｇ ￣上 者 ， 约１ ５ ｍ ｉ ｎ 至６ ｈ 可 现 中毒症 状 ，长期 食用 含 有一 受体 激 动剂残 留的 食 品 ，将 对 人 体健 康 产 生极 大 的危 害 ，可诱 发 和加 重 心 律失 常病 人 的病情 ，引 起 心室 期 前收 缩 ，四肢 、脸 、颈 部骨 骼 肌 震颤 ，常 见恶 心 、头晕 、四肢 无 力 、手 颤 等 中毒 症状 ，另 外还 能 引起 代谢 紊乱 ，对 糖尿 病人 可 发生 酸 中毒或 酮 中毒 。 随 着人 民生 活水 平 不断 提 高 ，人 们 对动 物 性食 品的 要求 从 数 量 型 已转 变成 质 量 型 ，近年 来 中国 的畜 牧业 迅 速 发展 ，已成 为 世 界 上畜 禽 产 品生 产 大 国 ，也 是消 费 大 国 ，同 时 出现 了不 科 学应 用 动 物疾 病 的 防治 及 促生 长 药 物 ，甚 至受 到 利益 的驱 动 ，冲 破道 德 的 底线 ，使用 或 添 加 国家 明 令禁 止 的兽 药 及有 害 物质 ， 目前诸 城 市 畜牧 局 及 动物 屠 宰企 业 积极 开 展 兽药 残 留 的检 测Ｔ 作 ，认 真 执 行 《 动物 性 食 品 中兽 药最 高 残 留 限量 》规 定 ，确 保 人 民 “ 舌 尖上 的 安全 ” ，让 人 民吃上 “ 放 心 肉” ，净 化畜 产 品市场 。 面 对 大 量 的畜 禽及 其 畜 禽产 品 ，探 讨 研 究快 速 、简 单 、准确 的检测 技 术一 胶体 金快 速 检 测法 筛 查 ，在 实 际 工作 中 是最 现 实 、 最 方便 、最 具 有操 作 性 的方 法 。胶 体 金 快速 检 测 卡是 最快 速 、最 简 单 的 一 种 方 法 ，判 断 依 据 为 农 业 部 《 食 品动 物 禁 用 的兽 药及 其 化 合物 清 单 》 、农 业 部 《 禁 止在 饲 料 和饮 水 中使 用 的药 物 品种 目录 》 、农 部 《 农 业 部 关 于投 入 品使 用 的有 关 规定 》 ；判 断 标 准 以确 证 方法 定 量 限 为判 断值 ，超 过定 量 限 即判 定 为不 合格 。层 析 法 免 疫 胶体 金 检 测试 剂 实 际上 是 免疫 金 标技 术 和抗 原 抗体 反 应 相 结 合 而 形成 的一 种应 用 形式 ，服从 于 抗 原抗 体 反应 的特性 ，从抗