氨基酸转运载体2(ASCT2)对胃癌细胞增殖的影响及其潜在机制

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氨基酸转运蛋白的功能-概述说明以及解释

氨基酸转运蛋白的功能-概述说明以及解释1.引言1.1 概述氨基酸转运蛋白是一类位于细胞膜上的蛋白质，其主要功能是调节细胞内和细胞间的氨基酸运输。

氨基酸是构成蛋白质的基本组成单元，对细胞的正常生理功能和代谢过程至关重要。

氨基酸的运输是维持细胞内氨基酸浓度平衡的关键过程。

细胞内外的氨基酸浓度差异对于细胞生长、分化、蛋白质合成等生物学过程具有重要影响。

通过氨基酸转运蛋白，细胞可以主动调节细胞内外氨基酸的平衡，以满足细胞对不同氨基酸的需求。

氨基酸转运蛋白可根据其功能特点分为不同类型，如主动转运、被动运输等。

主动转运是指氨基酸转运蛋白能够与能量耗费相结合，对氨基酸进行主动运输；而被动运输是指氨基酸转运蛋白依靠氨基酸浓度梯度进行转运，无需能量消耗。

这些不同类型的氨基酸转运蛋白协同作用，确保了细胞内外氨基酸的平衡及正常代谢。

氨基酸转运蛋白在细胞生物学、生物化学、营养学等领域具有重要意义。

它们的功能不仅仅限于将氨基酸输送到细胞内用于蛋白质合成，同时也参与了多种生化途径，如氨基酸代谢调节、细胞能量平衡等。

在人体内，氨基酸转运蛋白也扮演着重要的角色。

它们参与了人体机能的调控，如免疫系统的功能调节、骨骼肌的代谢调节等。

总之，氨基酸转运蛋白不仅是细胞内外氨基酸平衡的调节者，还参与了多种生物学过程的调节。

对于深入了解氨基酸的运输与代谢机制、细胞内外氨基酸浓度的平衡以及相关疾病的发生发展等方面具有重要意义。

未来的研究应进一步探索氨基酸转运蛋白的结构与功能，并开展更多的实验和临床研究，为氨基酸转运蛋白的应用提供更多的理论依据。

1.2 文章结构文章结构部分的内容如下:文章结构部分为了帮助读者更好地理解本篇文章的内容和逻辑，以下是本文的结构：第一部分是引言。

在引言中，我们会概述本文的主题——氨基酸转运蛋白的功能，并介绍本文的结构和目的。

这部分的目标是让读者对文章的主题有一个整体的了解，从而更好地理解后面的内容。

接下来是正文部分。

LY294002对胃癌细胞株生长增殖及侵袭能力的影响

１．细胞周期及凋亡检测试验分三组：对照．３２
组、０ｍｏＬＬ２４０、０ｍｏＬＬ２４０，２１ｌＹ９０２４１ｌＹ９０２分ｘ／ｚ／
１材料胃癌ＡＳ细胞株购自中国科学院上．１Ｇ
４、０ｍｌ，０８１ｏＬ每个浓度梯度设６个复孑，别在ｘ／Ｌ分
加药后的２、８７ｈ取出培养板，每孔加入ＭＴ４４、２Ｔ溶液（ｍ／）０ｌ３ ℃孵育４５ｇ２１，７ｍ１ｘｈ后，去孔内培养弃
胞周期阻滞于Ｇ期，期细胞比例上升，细胞比例下降，细胞有明显凋亡，并呈现浓度依赖性（＜Ｇ。ｓ期ｐ
０５。Ｔａｓｅｌ．）ｒｗｌ试验和划痕试验显示ＡＧ０ｎｓ细胞经Ｌ２４０作用后，Ｙ９０其侵袭和转移的能力受到抑制。结论
Ａｔｋ信号转导的研究较少。本实验采用Ｌ２４０Ｙ９０２作用于胃癌ＡＳ细胞，观察其对胃癌细胞的生长Ｇ
增殖、凋亡、袭转移的影响。侵
１材料与方法
间为横坐标，组细胞的生存率为纵坐标绘制细胞各生长曲线。以上试验均重复３次，取平均值计算。
胃癌是世界范围内最常见的恶性肿瘤之一【１】，
牛血清的１４６０培养基中，置于３ ℃含有５０７％Ｃ：
位居癌症死因的第二位。Hale Waihona Puke 来越多的研究表明，信

Na^+-依赖性谷氨酰胺载体ASCT2的生物学功能及表皮生长因子的调控作用

Na^+-依赖性谷氨酰胺载体ASCT2的生物学功能及表皮生长因子的调控作用黄骞;李宁;朱维铭;李秋荣;王斌;石斌;黎介寿【期刊名称】《肠外与肠内营养》【年(卷),期】2006(13)6【摘要】目的:Na+-依赖性中性氨基酸载体ASCT2,是一种广谱的氨基酸载体,它的生理功能主要是转运肠腔内谷氨酰胺、丙氨酸、丝氨酸和半胱氨酸等中性氨基酸。

本研究拟对ASCT2载体转运特性及表皮生长因子对其的调控机制作一探讨。

方法:体外培养Caco-2细胞,观察ASCT2对核素标记谷氨酰胺的转运特性、动力学特征及底物特异性;利用ASCT2多克隆抗体及TaqMan实时定量PCR方法,研究表皮生长因子对ASCT2功能的调控作用。

结果:Caco-2细胞中Na+-依赖性3H-L-谷氨酰胺(50μmol)的转运速率为(635±80.1)pmol/(mgprotein·min),大部分中性氨基酸如丙氨酸、丝氨酸、半胱氨酸等可对其产生竞争性抑制;在表皮生长因子(100μg/L)孵育下,可以提高其转运活性约100%(P<0.01),Western-blot及real-timePCR显示其蛋白及mRNA表达增高。

结论:谷氨酰胺载体ASCT2对核素标记谷氨酰胺具有强大的转运活性,对中性氨基酸底物具有亲和特异性;表皮生长因子对其转运活性、蛋白表达、mRNA丰度具有上调作用。

【总页数】7页(P329-334)【关键词】肠上皮细胞;谷氨酰胺载体;ASCT2;表皮生艮因子【作者】黄骞;李宁;朱维铭;李秋荣;王斌;石斌;黎介寿【作者单位】第二军医大学南京临床学院(南京军区南京总医院)解放军普通外科研究所【正文语种】中文【中图分类】Q735【相关文献】1.缺氧复氧损伤后小肠上皮细胞刷状缘二肽转运载体生物学功能的改变及生长激素的调控作用 [J], 孙炳伟;赵小辰;王广基;李宁;黎介寿2.Leptin的生物学功能及其对脂肪沉积的调控作用 [J], 刘光富;刘明启3.N-氨甲酰谷氨酸、脯氨酸及腐胺对仔猪空肠和回肠Na+依赖性中性氨基酸转运载体2表达及营养感应信号的调控作用 [J], 王婧;李光燃;肖玉欣;邓远坤;唐宇龙;谭碧娥4.谷氨酰胺转运载体ASCT2在肿瘤中的研究进展 [J], 王雅乐;黄承浩5.间充质干细胞来源外泌体生物学功能及对肿瘤调控作用研究现状 [J], 杨紫恩;赵继凯;于卉影因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

谷氨酰胺代谢在胃癌能量代谢中的研究进展　

· 综述·谷氨酰胺代谢在胃癌能量代谢中的研究进展吴欣荣　王运荣　孙文琦　陈　敏*南京大学医学院附属鼓楼医院消化科（210008）摘要　胃癌是消化系统常见恶性肿瘤之一，由于目前临床缺乏早期诊断方法，死亡率较高。

为满足自身需求，肿瘤细胞可对新陈代谢进行重编程，而谷氨酰胺代谢对肿瘤细胞的生长和增殖起着重要作用。

因此需迫切阐明胃癌新的潜在分子机制，并发现与谷氨酰胺代谢相关的潜在生物学标志物，为胃癌的诊断和治疗提供全新的靶点和方案。

本文就谷氨酰胺代谢在胃癌能量代谢中的研究进展作一综述。

关键词　胃肿瘤；　谷氨酰胺；　氨基酸转运子；　非编码RNA ；　谷氨酰胺酶；　能量代谢Progress in Research on Glutamine Metabolism in Energy Metabolism of Gastric Cancer WU Xinrong, WANG Yunrong, SUN Wenqi, CHEN Min. Department of Gastroenterology, Nanjing Drum Tower Hospital, the Affiliated Hospital of Nanjing University Medical School, Nanjing (210008)Correspondence to: CHENMin,Email:********************.cnAbstract Gastric cancer is one of the most common malignant tumors of digestive system. Due to lack of earlydiagnosis methods, the mortality rate of gastric cancer is relatively high. For meeting their own needs, the tumor cells can reprogram their metabolism, and glutamine metabolism plays an important role in tumor cell growth and proliferation.Therefore, it needs to elucidate the new potential molecular mechanisms of gastric cancer and to discover the potential biomarkers related to glutamine metabolism, so as to provide new targets and schemes for the diagnosis and treatment ofgastric cancer. This article reviewed the progress in research on glutamine metabolism in energy metabolism of gastric cancer.Key words Stomach Neoplasms;　Glutamine;　Amino Acid Transporters;　Non⁃Coding RNAs;　Glutaminase;　Energy MetabolismDOI ： 10.3969/j.issn.1008⁃7125.2022.06.005*本文通信作者，Email:********************.cn胃癌是消化系统常见恶性肿瘤之一，发病率在全世界恶性肿瘤中位居第5位，由于目前临床缺乏早期诊断方法，死亡率较高，是第3大常见癌症的死亡原因[1]。

氨基酸转运体在肿瘤代谢中的研究进展

生物技术进展2022年第12卷第1期50~56Current BiotechnologyISSN 2095‑2341进展评述Reviews氨基酸转运体在肿瘤代谢中的研究进展王林琳1，孙振亮2*1.上海理工大学健康科学与工程学院，上海200093；2.上海健康医学院附属第六人民医院南院中心实验室，上海201499摘要：代谢重编程是肿瘤的重要特征，是指肿瘤细胞为满足其快速增殖的生物合成与能量需求，对其糖代谢、脂代谢以及氨基酸代谢等代谢路径进行的重编程，以维持增长速度以及补偿能量代谢所造成的氧化还原压力。

虽然不同的癌症代谢变化不同，但有些特征是所有癌症共有的，氨基酸代谢重编程是其中一个重要的特征。

氨基酸进出细胞需要氨基酸转运体的协助，因而在肿瘤细胞中多种特定的氨基酸转运体均过表达。

靶向氨基酸转运体通过影响肿瘤细胞的氨基酸代谢从而达到抗肿瘤的目的，是目前抗肿瘤药物的研究热点之一。

主要介绍了几种在肿瘤代谢中发挥重要作用的氨基酸转运体以及靶向氨基酸转运体抗肿瘤治疗的研究进展及相关作用机制，旨在了解氨基酸转运体在抗肿瘤研究中的作用，以期促进靶向氨基酸转运体抗肿瘤药物的发展。

关键词：氨基酸代谢；氨基酸转运体；肿瘤；靶向治疗DOI ：10.19586/j.2095‑2341.2021.0016中图分类号：R730文献标志码：AResearch Progress of Amino Acid Transporters in Tumor MetabolismWANG Linlin 1，SUN Zhenliang 2*1.School of Health Science and Engineering ，University of Shanghai for Science and Technology ，Shanghai 200093，China ；2.Central Laboratory ，the South Campus of Shanghai No.6People ，Hospital Affiliated to Shanghai University of Medicine &Health Sciences ，Shanghai 201499，ChinaAbstract ：Metabolic reprogramming is an important feature of tumors.It refers to the reprogramming of metabolic pathways suchas carbohydrate metabolism ，lipid metabolism and amino acid metabolism by tumor cells to meet their rapid proliferation biosynthesis and energy requirements to maintain their growth rate and compensate for the redox stress caused by its energy metabolism.Although different cancers have different metabolic changes ，some features are common to all cancers ，and amino acid metabolism reprogramming is one of the important features.The transfer of amino acids into and out of cells require the assistance of amino acid transporters ，so many specific amino acid transporters are overexpressed in tumor cells.Targeted amino acid transporter achieves the purpose of antitumor by affecting the amino acid metabolism of tumor cells ，which is also one of the current research hotspots of antitumor drugs.This paper mainly introduced several amino acid transporter that play important roles in tumor metabolism and the research progress of antitumor therapy and related mechanism ，so as to understand the function ofamino acid transporters in antitumor research ，and promote the development of targeted amino acid transporter antitumor drugs.Key words ：amino acid metabolism ；amino acid transporter ；tumor ；target therapy大量的研究表明，与正常细胞相比，肿瘤细胞的代谢发生了明显的变化[1-3]，并称为肿瘤细胞的代谢重编程，产生原因主要有以下两个方面：一是为了满足肿瘤细胞自身的增殖需要；二是为了补偿肿瘤细胞能量需求增加造成的氧化还原压力以避免氧化应激反应的发生[1]。

lncRNACCAT2在胃癌中的表达及其临床意义

lncRNA CCAT2在胃癌中的表达及其临床意义【摘要】目的：探讨lncRNA CCAT2在胃癌中的表达水平及其临床应用价值。

方法：选取2019年10月-2021年1月在我院确诊为胃癌的37例患者为研究对象，设为胃癌组，选取同期来我院检查的健康人员40例，设为健康组。

抽取两组人员的血清，采用实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）定量检测血清CCAT2的相对表达量，并分析CCAT2表达量与胃癌患者临床病理特征的相关性。

结果：胃癌组患者lncRNA CCAT2表达水平（1.07±0.36）显著高于健康组（0.71±0.28），P＜0.01；相关性分析显示，胃癌患者lncRNA CCAT2表达水平与性别、年龄无关，P＞0.05；胃癌患者lncRNA CCAT2表达水平与肿瘤大小、淋巴结转移、TNM分期具有显著相关性，P＜0.05。

结论：lncRNA CCAT2在胃癌患者中呈高表达，且与患者肿瘤大小、淋巴结转移、TNM分期等密切相关。

对胃癌患者进行lncRNA CCAT2检测既有助于胃癌早期诊断，也可反映患者病情严重程度，从而为患者的精准治疗提供理论依据。

【关键词】lncRNA CCAT2；胃癌；临床病理特征；临床意义胃癌是消化系统常见的恶性肿瘤之一，常隐匿发病，无特异性症状，患者通常以恶心、呕吐等消化不良症状就诊，少部分患者可以出现上消化道出血导致的黑便。

因此，胃癌确诊时一般都为中晚期。

目前，临床多采用上消化道钡餐、胃镜活检、血清标志物检测等手段进行胃癌筛查。

由于常规检查手段无法发现早期胃癌，而血清标志物虽然能有助于早期胃癌诊断，但敏感性和特异性较低，容易造成漏诊、误诊等情况，贻误患者治疗时机[1]。

因此，为了提高胃癌患者早期诊断的准确率，寻找特异性和敏感度高的早期诊断标志物显得尤为关键。

近年来有研究发现，血清中长链非编码RNA（long noncoding RNA，lncRNA）结直肠癌相关转录本2（colon cancer-associated transcript 2，CCAT2）在早期胃癌的诊断中具有较好的效果。

胃癌组织ANGPTL2表达水平及其对胃癌细胞增殖侵袭的影响

胃癌组织ANGPTL2表达水平及其对胃癌细胞增殖侵袭的影响刘展;唐艳;李云涛;李世红;刘雁军;庞宇;古建辉;成柠【摘要】目的探究血管生成样蛋白2(ANGPTL2)水平变化对胃癌细胞增殖与侵袭的影响.方法选择2015年12月至2017年12月于我院住院的胃癌患者60例为研究对象,以其癌组织及癌旁组织作为此次研究的实验组与对照组.Western blot检测ANGPTL2表达水平,分析ANGPTL2含量与临床参数的关系,同时,分析GES-1、N87、SGC7901、BGC823、PAMC82胃细胞株中ANGPTL2的表达情况.过表达/沉默ANGPTL2后,MTT与Transwell试验检测ANGPTL2对细胞增殖率的影响.结果肿瘤恶性程度越高,ANGPTL2的表达水平也越高;Western Blot结果提示与GES-1相比,N87、SGC7901、BGC823、PAMC82胃癌细胞株中ANGPTL2的蛋白水平均呈较高水平(P<0.05);过表达ANGPTL2后,PAMC82胃癌细胞增殖能力及侵袭能力增强,而沉默ANGPTL2,其增值、侵袭能力减弱,差异有统计学意义(P<0.05).结论 ANGPTL2在胃癌组织的表达水平较癌旁组织更高,且恶性程度越高ANGPTL2表达越高.其能加速胃癌细胞的增殖与侵袭,可作为临床治疗靶点之一.【期刊名称】《实用医学杂志》【年(卷),期】2018(034)022【总页数】5页(P3718-3722)【关键词】胃癌;ANGPTL2;增殖侵袭;过表达【作者】刘展;唐艳;李云涛;李世红;刘雁军;庞宇;古建辉;成柠【作者单位】成都市第三人民医院普外科成都 610031;成都市第三人民医院病理科成都 610031;成都市第三人民医院普外科成都 610031;成都市第三人民医院普外科成都 610031;成都市第三人民医院普外科成都 610031;成都市第三人民医院信息管理部成都 610031;成都市第三人民医院普外科成都 610031;成都市第三人民医院信息管理部成都 610031【正文语种】中文胃癌是我国常见的恶性肿瘤之一，其发病率较高，一度占据各类恶性肿瘤榜首。

胃癌组织中干细胞标志物Sox2的表达及临床意义

胃癌组织中干细胞标志物Sox2的表达及临床意义陈忠;谢峰;钟丰云;杜鸿;严永敏;钱晖【摘要】Objective To detect the expression of stem cell marker Sox2 in gastric cancer (GC). Methods The mRNA and protein expressions of Sox2 in paired primary tumor tissues and their matching, adjacent non-cancerous tissues in a series of 60 cases of human GC were examined by reverse transcription-PCR (RT-PCR) and immunohistochemistry (IHC). χ2 test was used to analyze the correlation of Sox2 expression with clinicopathological parameters of GC tissues including age, gender, tumor size, histological type, TNM stage, differentiation degree, depth of invasion and lymph node metastasis. Results RT-PCR results showed that the positive rate of Sox2 expression was significantly increased in gastric tumor tissues (53.3%, 32/60) compared with that of matching, adjacent non-cancerous tissues (20.0%, 12/60, P<0.01). Semi-quantitative analysis showed that the relative intensity of Sox2 mRNA expression was significantly higher in gastric cancer tissues (0.724±0.209) t han that in tissues adjacent to carcinoma (0.256±0.065,P<0.01). The positive expression of Sox2 was significantly higher in gastric tumor tissues (50.0%, 30/60) than that of matching, adjacent non-cancerous tissues (16.7%,10/60,P<0.01). The positive expression of Sox2 was significantly higher in gastric tumor patients with TNM stage (Ⅲ+Ⅳ) than that of TNM stage (Ⅰ+Ⅱ). The positive expression of Sox2 was significantly higher in gastric tumor patients with low differentiation and undifferentiated tumor cellsthan that of patients with middle and high differented cells. The positive expression of Sox2 was also significantly higher in gastric tumor patients with the depth of invasion T3-T4 than that of patients with T1-T2. The positive expression of Sox2 was significantly higher in gastric tumor patients with lymph node metastasis than that of patients without lymph node metastasis (P<0.05 or P<0.01). Conclusion The elevated expression of Sox2 is associated with the initiation, invasion, progression, and metastasis of GC. Sox2 may serve as a novel diagnostic and therapeutic marker for human GC.%目的：探讨胃癌组织中干细胞标志物Sox2的表达及临床意义。

谷氨酰胺转运蛋白asct2的研究进展

［南京中医药大学１．江苏省中药药效与安全性评价重点实验室、２．江苏省中药功效物质重点实验室、３．中药品质与效能国家重点实验室（培育），江苏南京２１００２３］
ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００１－１９７８．２０２０．０１．００６文献标志码：Ａ文章编号：１００１－１９７８（２０２０）０１－００２２－０４中国图书分类号：Ｒ３４１；Ｒ３４１７；Ｒ７３０２２；Ｒ９７７４；Ｒ９７７６摘要：谷氨酰胺在细胞蛋白质和能量代谢中起着核心作用。谷氨酰胺必需通过细胞膜上特异性载体的转运才能进入细胞内发挥作用，其中Ｎａ＋依赖性谷氨酰胺载体２（ａｌａｎｉｎｅｓｅｒｉｎｅｃｙｓｔｅｉｎｅｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ２，ＡＳＣＴ２）最为重要。ＡＳＣＴ２不仅在正常组织器官中广泛表达，而且在肿瘤中的表达明显增加，以满足肿瘤急剧增加的谷氨酰胺需求。ＡＳＣＴ２生物学功能的调控与人类健康密切相关。ＡＳＣＴ２的Ｎ糖基化位点是Ｎ１６３和Ｎ２１２，对ＡＳＣＴ２转运到膜上至关重要，但对ＡＳＣＴ２的内在转运功能影响不大。ＡＳＣＴ２与其他蛋白间的相互作用和翻译后修饰对ＡＳＣＴ２的稳定性、转运活性具有重要调节作用。该文主要总结ＡＳＣＴ２生物学功能调控及其对疾病治疗的意义。
网络出版时间：２０１９－１２－３１１７：２５网络出版地址：ｈｔｔｐ：／／ｋｎｓ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ／ｋｃｍｓ／ｄｅｔａｉｌ／３４．１０８６．ｒ．２０１９１２３１．０８３４．０１２．ｈｔｍｌ
谷氨酰胺转运蛋白ＡＳＣＴ２的研究进展
梁宝瑜１，金春１，高俪原１，李余佳１，王?屹１，张峰１，２，３，郑仕中１，２，３
关键词：谷氨酰胺；ＡＳＣＴ２；转运蛋白；代谢；调控；抑制剂
开放科学（资源服务）标识码（ＯＳＩＤ）：
谷氨酰胺是人体内含量最丰富的一种非必需氨基酸。而在高增殖率细胞（如炎症细胞、干细胞、肺癌细胞）中，谷氨酰胺代谢明显增加。谷氨酰胺进入胞质后，在谷氨酰胺酶的作用下，转变为谷氨酸，再进一步在谷氨酸脱氢酶等的作用下变为 α酮戊二酸（αＫＧ），回补三羧酸循环，为线粒体氧化磷酸化提供碳源，保障细胞的能量供应，因为能量代谢稳态是维持心肌细胞等机体细胞形态稳定和功能的正常的

氨基酸转运载体ASCT2和LAT1在胃癌组织的表达及其临床价值

现代生物医学进展 Progress in Modern Biomedicine VoL20NO»23DEC2020・4515・doi:10.13241/ki.pmb.2020.23.025氨基酸转运载体ASCT2和LAT1在胃癌组织的表达及其临床价值*陆健朱颖炜△龚镭王小云张丽莉(南京医科大学附属无锡市第二人民医院消化内科江苏无锡214000)摘要目的:研究ASC型氨基酸转运体2(ASCT2)和L型氨基酸转运体KLAT1)在胃癌组织中的表达情况，并探讨其临床价值。

方法:收集70例进展期胃癌组织以及相对应的肿瘤旁组织，采用免疫组化方法检测ASCT2和LAT1在相应组织中的表达水平，并研究其表达与患者临床病理参数和预后的相关性:结果：与癌旁组织相比，胃癌组织中ASCT2或LAT1的高表达率均有统计学差异,但其各自的表达率与癌旁组织相比无明显差异。

LAT1和ASCT2在胃癌组织中的共表达率与癌旁组织相比有明显统计学差异。

胃癌组织中ASCT2高表达与肿瘤体积、T分期、N分期、TNM分期和Ki-67指数显著相关:LAT1的高表达与肿瘤体积、N 分期和TNM分期相关。

胃癌组织中ASCT2与LAT1共表达与肿瘤体积、T分期、N分期、TNM分期和Ki-67指数显著相关。

胃癌组织中ASCT2和LAT1的高表达呈正相关。

胃癌组织中ASCT2高表达、LAT1高表达及ASCT2与LAT1共表达与患者不良预后有关°结论：胃癌组织中ASCT2高表达、LAT1高表达以及ASCT2与LAT1共表达提示患者预后不良，有一定临床价值。

关键词：胃癌；ASCT2；LAT1；诊断;预后中图分类号:R735.2文献标识码:A文章编号:1673-6273(2020)23-4515-07The Clinical Value of Amino Acid Transporters ASCT2and LAT1in Gastric Cancer*LUJian,ZHU Ying-weP,GONG Lei,WANG Xiao-yun,ZHANG Li-li(Department of G astroenterology,The Affiliated Wuxi No.2People's Hospital of N anjing Medical University,Wuxi,Jiangsu,214000,China)ABSTRACT Objective:To observe the expression of ASCT2and LAT1protein in gastric cancer tissues and analyze its clinical value.Methods:The expression of ASCT2and LAT1in70cases of advanced gastric cancer tissues and its adjacent tissues were detected by immunohistochemistry,and the relationship between the expression and the clinical characteristics and prognosis of patients with gastric cancer was analyzed.Results:Compared with the paracancerous tissues,the high expression rates of ASCT2or LAT1in gastric cancer tissues were statistically different,but there was no significant difference in their respective expression rates in gastric cancer tissues compared with the paracancerous tissues.The coexpression rate of LAT1and ASCT2in gastric cancer tissues was significantly different from that in adjacent tissues.The high expression of ASCT2was significantly correlated with tumor size,depth of invasion, lymph node metastasis,TNM stage and Ki-67index,while the high expression of LAT1was only correlated with tumor size,lymph node metastasis and TNM stage.The coexpression of ASCT2and LAT1was significantly correlated with tumor size,depth of invasion,lymph node metastasis,TNM stage and Ki-67index.The high expression of ASCT2in gastric cancer tissues was significantly correlated with the high expression of LAT1in gastric cancer tissues.The high expression of ASCT2or LAT1in gastric cancer tissues and the coexpression of ASCT2and LAT1in gastric cancer tissues were related to the poor prognosis.Conclusion:The high expression of ASCT2or LAT1and the coexpression of ASCT2and LAT1in gastric cancer tissues were associated with poor prognosis in patients with gastric cancer,which has some practical value.Key words:Gastric cancer;ASCT2;LAT1;Diagnosis;PrognosisChinese Library Classification(CLC):R735.2Document code:AArticle ID:1673-6273(2020)23-4515-07亠亠胃癌是导致癌症相关死亡的主要原因，在我国，胃癌的发病率刖S排在所有恶性肿瘤的第二位21。

胃液氨基酸谱作为胃癌标志物的潜在价值

胃液氨基酸谱作为胃癌标志物的潜在价值
刘金哲;周丽雅
【期刊名称】《世界华人消化杂志》
【年(卷),期】2016(0)13
【摘要】早期胃癌的预后显著优于进展期胃癌,积极开展早期胃癌的筛查可以大大降低胃癌死亡率.然而传统胃癌生物学标志物癌胚抗原、糖链抗原199等灵敏度和特异性较差,准确性较高的胃镜或影像学检查不适合大规模的筛查.正常生理条件下胃液氨基酸含量极少,需要使用高效液相色谱分析才能分离和检测,而胃癌早期甚至癌前病变期的胃液多种氨基酸浓度异常升高,以丙氨酸升高最为显著.胃液色氨酸荧光检测已经被证实为可靠的早期胃癌诊断方法.随着色谱和质谱等氨基酸检测技术的进步,胃液氨基酸谱有可能成为诊断监测胃癌发生发展的新型标志物.本文就胃癌组织及体液氨基酸变化特点及其可能机制作一综述.
【总页数】9页(P1984-1992)
【关键词】肿瘤代谢;胃液氨基酸谱;胃癌标志物
【作者】刘金哲;周丽雅
【作者单位】北京大学第三医院消化科
【正文语种】中文
【中图分类】R735.2
【相关文献】
1.胃癌前疾病患者血清胃液中三种肿瘤标志物的临床研究 [J], 焦鑫;何思春;王利君
2.血清和胃液中多种肿瘤标志物检测在胃癌中的临床价值 [J], 苟兰琼;陈艳才;宋高平;何平;郑连喜;江英强
3.MMP-2/9和Ⅳ型胶原蛋白与胃癌患者胃液芳香族氨基酸浓度变化的关系 [J], 刘健;李松茹;周丽雅;崔荣丽;金珠;林三仁;张贺军;韩亚京;张颖;尚惠茹
4.胃液蛋白质定量分析对胃癌的诊断价值：与胃液CEA的联合研究 [J], 李成刚;王润田
5.胃液肿瘤标志物对胃癌前病变的临床价值 [J], 陈海水;郭德明;黄庆
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重组人ASCT2胞外结构域ECL2在大肠杆菌中的表达及其鉴定

重组人ASCT2胞外结构域ECL2在大肠杆菌中的表达及其鉴定欧阳东云;徐丽慧;高琦;郭贺;陈清;何贤辉【摘要】中性氨基酸转运蛋白(ASCT2)是人类内源性病毒的包膜蛋白合胞素在细胞膜上的主要受体,ECL2是该受体的其中一个较大的胞外结构域.通过RT-PCR方法从人乳腺癌MCF-7细胞中克隆ASCT2基因编码区全长序列,再从中扩增ASCT2的胞外区ECL2序列,与pET-41b连接构建原核表达载体,重组质粒在大肠杆菌中获得高效表达,重组蛋白在N-和C-端分别融合谷胱甘肽转移酶(GST)和His6标签,融合蛋白在上清液和包涵体中均有表达,可溶性部分经亲和层析纯化获得高纯度的重组蛋白,该蛋白可结合在表达合胞素的MCF-7细胞表面,具有结合合胞素的潜在活性,这些结果为进一步研究ASCT2与合胞素的相互作用奠定了基础.【期刊名称】《生命科学研究》【年(卷),期】2010(014)003【总页数】6页(P213-218)【关键词】合胞素;中性氨基酸转运蛋白;胞外结构域;原核表达【作者】欧阳东云;徐丽慧;高琦;郭贺;陈清;何贤辉【作者单位】暨南大学组织移植与免疫实验中心,中国广东,广州,510632;暨南大学再生医学教育部重点实验室,中国广东,广州,510632;暨南大学生物工程研究所,中国广东,广州,510632;暨南大学组织移植与免疫实验中心,中国广东,广州,510632;暨南大学再生医学教育部重点实验室,中国广东,广州,510632;暨南大学组织移植与免疫实验中心,中国广东,广州,510632;暨南大学再生医学教育部重点实验室,中国广东,广州,510632;暨南大学组织移植与免疫实验中心,中国广东,广州,510632;暨南大学再生医学教育部重点实验室,中国广东,广州,510632;暨南大学组织移植与免疫实验中心,中国广东,广州,510632;暨南大学再生医学教育部重点实验室,中国广东,广州,510632【正文语种】中文【中图分类】Q786人类内源性病毒（human endogenous retroviruses，HERV）是远古逆转录病毒在人类基因组中的遗迹，约占人类基因组总量的8%.与今天仍然活跃的逆转录病毒一样，一个典型的人类内源性病毒也有必需的gag，pol和env 3个基因.这3个基因的两端被长末端重复序列（LTRs）分隔［1］.合胞素（syncytin）是HERV-W家族的包膜蛋白，主要表达于滋养层和合胞滋养层界面，一般认为由它介导单核的滋养层细胞融合，形成合胞滋养层，因此与胎盘形成和维持有关［2，3］.但近年亦发现该基因表达于乳腺癌［4］和结肠直肠癌［5］等细胞表面.尽管合胞素的表达与肿瘤形成的关系尚不清楚，至少人们相信合胞素可能具有潜在的早期诊断价值.现推测其可能的作用为：1）协助肿瘤细胞免疫逃逸.人免疫缺陷病毒（HIV-1）的gp41存在一个17肽，与C型病毒和D型病毒中的一段保守序列有同源性，具有免疫抑制功能［6］.有意思的是，相似的序列也存在于合胞素中（氨基酸残基373-397）［3］.表达HERV-H包膜蛋白的转基因小鼠细胞，能够在同种异基因小鼠体内成瘤，逃避宿主的免疫排斥［7］；2）与相邻的正常细胞表面受体相互作用，有利于肿瘤细胞的迁移.现已发现，合胞素的受体为D型逆转录病毒受体，即中性氨基酸转运蛋白ASCT2和ASCT1［2］.合胞素包裹的假HIV病毒颗粒，可以通过其受体，进入CD4阴性细胞，可能是造成母婴传播的部分原因.此外，表达合胞素的癌变细胞，也可以通过其受体与相邻的正常细胞（如内皮细胞）［8］相互融合.但是，癌变细胞与正常细胞通过合胞素及其受体而相互融合，对于肿瘤发生的影响，也还存在争论.一种观点认为癌变细胞可以籍此获得p53和Rb等肿瘤抑制因子，抑制癌变细胞向恶性肿瘤发展，或走向凋亡；另一种观点则刚好相反，毕竟大家熟知的单克隆抗体的制备就是将产生抗体的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，由此产生的杂交瘤细胞仍然具有永生能力.研究表明合胞素抗体、合胞素CHR肽段以及合胞素基因的反义核苷酸都可抑制细胞通过合胞素及其受体相互融合［9］.深入研究合胞素的表达及其与受体的相互作用，在临床上具有重要的意义.合胞素有可能成为抑制乳腺癌和结肠直肠癌的药物靶点，可能的途径包括通过受体或单克隆抗体封闭细胞表面合胞素，通过受体/抗体介导抗肿瘤药物或者通过受体/抗体介导细胞毒淋巴细胞对癌变细胞的杀伤作用.蛋白质分析表明，由541个氨基酸组成的合胞素受体ASCT2，有9个跨膜结构域.我们在大肠杆菌中表达和纯化了ASCT2其中一个主要的胞外结构域ECL2蛋白，为研究ASCT2与合胞素之间的相互作用奠定了基础.大肠肝菌DH5α、BL21（DE3）pLysS菌株和质粒pET-41b购自Novagen.小鼠抗His6抗体、TRIzol试剂购自Invitrogen公司.第一链cDNA的合成试剂盒（PrimeScript 1stStrand cDNA Synthesis Kit，D6110）、蛋白质分子质量标准、DNA分子质量标准以及EcoRⅠ和XhoⅠ等内切酶为Takara公司（大连）产品.GSH-Agarose及二氨基联苯胺（DAB）为Sigma公司产品.辣根过氧化物酶（HRP）标记的羊抗鼠 IgG为 Jackson Immune Research产品（北京中山分装）.pEGFPN1为CLONTECH公司产品，本实验室保存.1.2.1 细胞培养及总RNA的提取人乳腺癌细胞MCF-7用RPMI-1640加10%胎牛血清常规培养，每周传代2次，至对数生长期时，收集1×107个细胞，按厂商说明书，用TRIzol试剂提取总RNA，电泳检测后，立即用于第一链cDNA的合成.1.2.2 pET-41b/ECL2表达载体的构建首先从MCF-7第一链cDNA中扩增包含ASCT2基因编码区全序列的DNA片段.上游引物为5′-GTG CTG TTA CTC AAC TCA GTC CT-3′，下游引物为5′-TCC ATT CCT CAT AAT CCA GTG T-3′.PCR反应条件为：94℃，1 min；98℃，10 s，68℃，2.5 min，35个循环；68℃，10 min；4℃保存.扩增产物理论大小为1 794 bp.然后用上游引物5′-T ATA CTC GAG GCC Acc ATG GTG GCC GAT CCT CCA CGA GAC TCC AAG GGG CTC G-3′，下游引物5′-G CCG AAT TCG CAT GAC TGA TTC CTT CTC AGA GG-3′，同样PCR条件扩增ASCT2基因全序列，扩增产物为1 649 bp.然后将扩增的DNA，经XhoⅠ和EcoRⅠ双酶切后，用T4DNA连接酶，克隆至pEGFP-N1真核表达载体（pEGFP/ASCT2）.ASCT2胞外结构域ECL2，采用下列引物，直接从pEGFP/ASCT2中进行扩增，上游引物为5′-TAT GAA TTC TCT GCA GCC GGG CGC CGC CT-3′，下游引物为5′-TAT TCT CGA GGC TAC CCT CCA CCT CCT GCC CCA CGG GCA-3′，PCR反应条件为：94℃，1 min；98℃，10 s，68℃，1 min，35个循环；68℃，10 min；4℃保存.产物理论大小为251 bp.1.2.3 重组ECL2在大肠杆菌中表达PCR产物经EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切，与同样酶切的pET-41b连接（pET-41b/ECL2），转化E.coli DH5α感受态细胞，提取质粒，酶切鉴定接入预期大小外源基因的转化子，送Invitrogen公司测序确认.测序正确的pET-41b/ECL2质粒，转化感受态BL21（DE3）pLysS细菌，挑取单菌落接种于LB液体培养基，37℃摇菌，并以0.2 mmol/L IPTG诱导外源基因表达.1.2.4 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳参照文献［10］方法，收集处理菌液.超声破菌处理后得到的全菌、上清和沉淀样品（上样量为80 μg），经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（浓缩胶50 g/L，分离胶120 g/L SDS-PAGE），分别以考马斯亮蓝R-250染色和硝酸纤维素膜免疫印迹方法，分析目的蛋白条带.免疫印迹分析所用一抗为抗His6抗体（1∶3 300），二抗为羊抗鼠IgG（1∶3 000），二氨基联苯胺显色.1.2.5 蛋白质纯化融合表达GST标签的 ECL2蛋白以GSHAgarose柱（1 mL）进行纯化.超声破菌处理后得到的上清液，直接上PBS平衡的柱，以PBS-1% Triton X-100充分洗涤后，特异性结合的蛋白以3 mL含10 mmol/L还原型谷胱甘肽的PBS洗脱下来，经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定后超滤浓缩，并将缓冲液置换为PBS，快速冷冻后置-70℃保存备用.1.2.6 结合活性测定MCF-7细胞按每孔7 500个细胞接种于96孔板，培养48 h后，PBS-1%FCS洗2次，加入200 μL 0.1%NaN3的PBS孵育30 min，同上洗后加入50 μL不同浓度的ECL2或GST蛋白（带His6标签，每个浓度做3个复孔），于室温孵育3 h 后4℃过夜，洗后加入100 μL抗His6抗体（1∶3 000），二抗为HRP-羊抗鼠IgG（1∶3 000），邻苯二胺显色，以酶标仪（Bio-Rad Microplate Reader 680）读取490 nm光吸收值.数据以非配对t检验进行分析，以P＜0.05为差异有统计学意义.用RT-PCR的方法克隆ASCT2基因分两步进行.首先设计引物，分别对应ASCT2基因上游和下游的一段cDNA序列，并以从MCF-7细胞总RNA逆转录获得的第一链cDNA为模板，扩增出预计大小（1 794 bp）的DNA片段（图1，泳道1）.然后以此为模板，扩增ASCT2基因自起始密码子至终止密码子（不含）的DNA片段，电泳检测显示，扩增片段大小与预计大小相符（1 649 bp，含引物两端附加的酶切位点）.产物经XhoⅠ和EcoRⅠ双酶切后，与pEGFP-N1载体连接，转化DH5α大肠杆菌，卡那霉素筛选多个抗性单克隆，提取质粒后经双酶切鉴定，证明已插入预计大小的外源基因（图1，泳道2、3、4）.测序分析显示，这3个克隆插入的外源基因序列完全相同，表明已成功获得ASCT2基因的cDNA编码区全长序列，该序列已在GenBank登录，登录号为GQ919058.利用跨膜结构蛋白分析工具（http：//www.cbs. dtu.dk/services/TMHMM/，http：//phobius.sbc.su.se）分析表明，ASCT2为9次跨膜蛋白，其中153～227位氨基酸为其中一个较大的胞外结构域（ECL2）.以克隆的 ASCT2全长序列（pEGFP/ ASCT2）为模板，设计特异性引物，扩增ECL2序列.电泳分析表明，扩增片段大小与预期相符（251 bp）（图2，泳道1）.产物经EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切后，与pET-41b载体（图2，泳道2）连接.筛选接入目的片段的阳性克隆（图2，泳道4），经测序验证插入序列为ECL2目的片段，其5′端融合谷胱甘肽-S-转移酶（GST）编码序列，3′端含编码甘氨酸-丝氨酸接头（引物来源）和编码6个组氨酸（质粒来源）序列，由此获得原核表达载体pET-41b/ECL2.将构建的pET-41b/ECL2原核表达载体转化E.coli BL21（DE3）pLysS，得到含重组质粒的基因工程菌.细菌在37℃条件下摇菌培养，至OD值约0.6时，加IPTG诱导5 h后，超声破菌，分别制备全菌、上清、沉淀样品.各样品经SDSPAGE和考马斯亮蓝染色表明，未经IPTG诱导的工程菌不表达外源蛋白；经IPTG诱导后，分别在全菌、上清和沉淀样品中，均可检出分子质量约为45 kD的外源蛋白，与ECL2融合蛋白（含上游GST和下游His6标签）理论值相符（图3a）.对比诱导前后蛋白条带（全菌）的变化，并经法国VL公司PhotoCapt Ver11.01软件分析，外源蛋白表达仅占细菌总蛋白量的3.5%.免疫印迹分析进一步证明上述45 kD蛋白条带为带有His6标签的ECL2（图3b）.表达的外源蛋白同时存在于上清和沉淀样品中，说明该融合蛋白能可溶性表达，但有较大部分以包涵体的形式存在.将表达可溶性ECL2融合蛋白的上清液部分上GSH-Agarose柱，充分洗柱后，以10 mmol/L还原型谷胱甘肽将结合的蛋白从柱上洗脱下来，SDS-PAGE分析显示，获得的蛋白分子质量与ECL2融合蛋白相符，纯度为95%（图4，泳道1）.进一步以免疫印迹分析，显示蛋白含有His6标签（图4，泳道3）.利用表达合胞素的MCF-7细胞分析ECL2融合蛋白与合胞素的结合活性.文献报道［8］，合胞素蛋白表达于MCF-7细胞表面.我们通过RTPCR的方法也检出该细胞转录较高水平的mRNA（数据略）.ECL2蛋白与MCF-7结合活性见图5，结果显示ECL2能与MCF-7特异性结合，其活性明显高于GST蛋白.人类内源性病毒（HERV）是古代逆转录病毒感染，进入人类基因组，并通过生殖细胞遗传至今.由于突变产生的序列缺失或提前终止，大多数人类内源性病毒的基因已失去了翻译活性［11］.但是，也有些基因，如HERV-W家族的包膜蛋白基因（env），仍然保留了完整的开放读码框，其编码的蛋白，具有细胞融合功能，故称为合胞素（syncytin）.合胞素主要表达于胎盘组织，少量表达于睾丸，前者可能与合胞滋养层的形成有关，后者可能与精卵结合有关.通过体外诱导（如毛喉素（forskolin）刺激BeWo细胞）［12］或转染（如中国仓鼠细胞）［13］而表达合胞素基因的细胞，都可以与受体细胞融合.在缺氧环境下，合胞素基因的表达下降，细胞滋养层不能正常融合发育成合胞体滋养层，引起先兆子痫（pre-eclampsia）［14］.因此，人们推测合胞素的主要生理功能可能有两个，一是促使细胞滋养层融合，形成合胞滋养层，为胎儿提供一个发育的环境，二是抑制母体免疫系统的排斥，因为合胞素蛋白中含有一个具有免疫抑制功能的多肽片段.合胞素在人体中的表达受到严格的调控，是一个有高度组织特异性的表达基因.该基因十分保守.HERV-W家族作为内源性病毒固定于人类基因组的时间大概是2 500万年到4 000万年前，早于新大陆猴与旧大陆猴的分化［15］，但该基因的转录仅限于人类，而不在旧大陆猴体内表达［16］.我们分别从正常胎盘组织和乳腺癌MCF-7细胞中克隆的合胞素基因序列，均与GenBank报道的序列完全相同.目前也尚未见到有该基因序列突变的报道.人们有理由相信，该基因的异常表达，可能会引起灾难性的后果.现已发现，合胞素高表达于绒癌、乳腺癌、直肠癌等癌细胞［4，5］.转基因表达合胞素的仓鼠CHO-52细胞，可以抵御药物诱导的凋亡［13］.可以预见，合胞素基因在癌症发病机制中的作用，将成为研究的热点.我们以前的研究表明，CD40的胞外区即具有与其天然配体CD40L的结合活性［10］.有研究发现，在小鼠移植模型中，可溶性的CD40-Ig对移植物抗宿主病的发生具有明显的保护作用［17］，而转基因表达的CD40-Ig的胰岛异种移植物的存活时间大大延长［18］，说明可溶性CD40-Ig能有效阻断CD40-CD40L的相互作用而发挥抑制对移植物的排斥反应.利用膜蛋白的天然配体的胞外区，阻断配体的细胞信号传导，其突出优点是不会因为诱导抗体而削弱两者之间的相互结合. 合胞素介导细胞之间的相互融合，可能是与其受体ASCT2（以及ASCT1）之间相互作用的结果.通过膜蛋白分析，ECL2和C-末端是ASCT2的两个较大的胞外区.克隆这两个片段，可用于研究合胞素和受体之间的相互作用.由于ECL2仅有75个氨基酸，为尽量保持其天然构象，同时有利于分离纯化，我们将它的氨基端与谷胱甘肽转移酶偶联，在羧基端与6个组氨酸（His6）偶联.用His6抗体检测重组蛋白，分别在细菌裂解液上清和沉淀检出45 kD的清晰条带，说明重组蛋白在一定条件下可以可溶性表达.重组蛋白的可溶性表达，有利于保持蛋白的天然构象，也有利于后期重组蛋白的活性和功能检测.乳腺癌细胞MCF-7组成性表达合胞素［8］，因此可用于检测ECL2蛋白与合胞素的结合活性.我们的结果显示，ECL2蛋白与MCF-7具有明显的结合活性，提示ASCT2主要胞外区ECL2可能是与合胞素结合的主要部位.进一步的研究将通过定点突变等技术阐明ASCT2上参与结合的具体位点和氨基酸残基.总之，我们从人乳腺癌细胞中成功克隆了ASCT2的cDNA编码区全长序列，构建了该蛋白的ECL2胞外区原核表达载体，并在大肠杆菌中获得表达，纯化产物具有与合胞素结合的潜在活性.这些结果为进一步研究该胞外区的活性和功能提供了条件.【相关文献】[1] BANNERT N，KURTH R.Retroelements and the human genome：new perspectives on an old relation[J].Proc Natl Acad Sci USA，2004，101（Suppl 2）：14572-14579.[2] BLOND J L，LAVILLETTE D，CHEYNET V，et al.An envelope glycoprotein of the human endogenous retrovirus HERV-W is expressed in the human placenta and fuses cells expressing the type D mammalian retrovirus receptor[J].J Virol，2000，74（7）：3321-3329.[3] MI S，LEE X，LI X，et al.Syncytin is a captive retroviral envelope protein involved in human placental morphogenesis [J].Nature，2000，403（6771）：785-789.[4] LARSSON L I，HOLCK S，CHRISTENSEN I J.Prognostic role of syncytin expression in breast cancer[J].Hum Pathol，2007，38（5）：726-731.[5] LARSEN J M，CHRISTENSEN I J，NIELSEN H J，et al. Syncytin immunoreactivity in colorectal cancer：potential prognostic impact[J].Cancer Lett，2009，280（1）：44-49.[6]DENNER J，NORLEY S，KURTH R.The immunosuppressive peptide of HIV-1：functional domains and immune response in AIDS patients[J].AIDS，1994，8（8）：1063-1072.[7] MANGENEY M，de PARSEVAL N，THOMAS G，et al.The full-length envelopeofanHERV-H humanendogenous retrovirus has immunosuppressive properties[J].J Gen Virol，2001，82（Pt 10）：2515-2518.[8] BJERREGAARD B，HOLCK S，CHRISTENSEN I J，et al. Syncytin is involved in breast cancer-endothelial cell fusions [J].Cell Mol Life Sci，2006，63（16）：1906-1911.[9] LARSSON L I，BJERREGAARD B，TALTS J F.Cell fusions in mammals[J].Histochem Cell Biol，2008，129（5）：551-561.[10]何贤辉，徐丽慧，刘毅，等.重组人CD40胞外结构域在大肠杆菌中的表达和纯化鉴定[J].免疫学杂志（HE Xian-hui，XU Li-hui，Liu Yi，et al.Purification and identification of human CD40 extracellular domain expressed in Escherichia coli[J].Immunol J），2006，22（2）：195-198.[11]LÖWER R，LÖWER J，KURTH R.The viruses in all of us：characteristics and biologicalsignificance of human endogenous retrovirus sequences[J].Proc Natl Acad Sci USA，1996，93（11）：5177-5184.[12]KUDO Y，BOYD C A.Changes in expression and function of syncytin and its receptor，amino acid transport system B（0）（ASCT2），in human placental choriocarcinoma BeWo cells during syncytialization[J].Placenta，2002，23（7）：536-541.[13]KNERR I，SCHNARE M，HERMANN K，et al.Fusiogenic endogenous-retroviral syncytin-1 exerts anti-apoptotic functions in staurosporine-challenged CHOcells[J].Apoptosis，2007，12（1）：37-43.[14]LEE X，KEITH J C Jr，STUMM N，et al.Downregulation of placental syncytin expression and abnormal protein localization in pre-eclampsia[J].Placenta，2001，22（10）：808-812.[15]VOISSET C，BLANCHER A，PERRON H，et al.Phylogeny of a novel family of human endogenous retrovirus sequences，HERV-W，in humans and other primates[J].AIDS Res Hum Retroviruses，1999，15（17）：1529-1533.[16]CÁCERES M，NISC ComparativeSequencingProgram，THOMAS J W.The gene of retroviral origin Syncytin 1 is specific to hominoids and is inactive in Old World monkeys [J].J Hered，2006，97（2）：100-106.[17]LIU H，MAO N，HOU C，et al.Protective effect of human CD402Ig fusion protein in a murine model of acute graftversus-host disease[J].Chin Med J（Engl），2001，114（7）：685-689.[18]JIN Y Z，XIE S S.Bicistronic adenovirus-mediated gene transfer of CTLA4Ig gene and CD40Ig gene result in indefinite survival of islet xenograft[J].Transplant Proc，2003，35（8）：3165-3166.。

BAG2通过影响细胞凋亡调控胃癌生长的研究

BAG2通过影响细胞凋亡调控胃癌生长的探究胃癌是目前全球范围内最常见的恶性肿瘤之一，其发病率和死亡率一直居高不下。

致病的背后通常涉及多个复杂的分子机制，其中细胞凋亡的异常调控在胃癌的进步中扮演着重要角色。

最近的探究表明，BAG2（Bcl-2相关抑止蛋白2）在调控胃癌细胞的生长和凋亡过程中起到了关键作用。

BAG2是BAG家族中的一员，属于保守性的调控因子，在细胞的凋亡过程中具有多重功能。

从前的探究已经发现BAG家族在多种癌症中表达异常，并与肿瘤进步和治疗反抗等过程相关。

因此，对于BAG2在胃癌中的作用进行深度探究对于揭示胃癌进步的分子机制具有重大意义。

最新的探究通过使用胃癌细胞株和动物模型，探究了BAG2在胃癌中的功能和调控机制。

探究发现，BAG2在胃癌细胞中高表达，并且与肿瘤的进展和恶性程度呈正相关。

进一步的功能试验表明，BAG2的过表达能够显著增进胃癌细胞的增殖和侵略，并抑止凋亡过程。

进一步的机制探究揭示了BAG2通过多个途径调控细胞凋亡进程。

起首，BAG2通过抑止胃癌细胞内凋亡相关蛋白Bax 的表达，遏制了细胞的凋亡过程。

此外，BAG2还影响了细胞凋亡信号通路中的Bcl-2蛋白家族的表达和活性，进一步增强了细胞的凋亡抑止能力。

另外，BAG2还与线粒体功能紊乱相关，抑止线粒体的释放和凋亡信号的传导。

虽然BAG2调控胃癌细胞凋亡的功能已被确认，但其详尽的作用机制依旧需要进一步探究。

此外，还需要思量到其他调控因子在胃癌进步中的复杂互相作用。

然而，这项探究为我们深度理解胃癌生长的分子机制提供了关键线索。

基于以上的探究效果，BAG2被认为是一个具有潜在治疗靶点的因子。

抑止BAG2的表达或阻断其相关的信号通路可能成为胃癌治疗的新策略。

然而，在将这一探究效果扩展到临床实践之前，还需要更多的试验验证和临床探究。

综上所述，BAG2通过影响细胞凋亡调整胃癌的生长，其过表达增进了胃癌细胞的生长和侵略，并抑止了细胞的凋亡过程。

氨基酸转运载体slc3a2在恶性肿瘤中的研究进展

氨基酸转运载体SLC3A2在肿瘤中的研究进展（综述）摘要：SLC3A2为溶质载体家族中重要的成员之一，在正常组织中分布仅限于肾脏、睾丸和小脑，主要负责运输氨基酸、调节细胞内的钙离子及对整合素信号转导途径具有调控作用。

众多研究发现，SLC3A2高表达于多种恶性细胞或组织中，并与肿瘤的进展和预后密切相关。

揭示了其作为有效的分子治疗靶点之一。

本文就SLC3A2的结构、生理功能及其与肿瘤的治疗研究进行综述。

关键词：SLC3A2:恶性肿瘤；靶向治疗；文献综述；Abstract: SLC3A2 is one of the important members of the solute carrier family, and the distribution in normal tissue is limited to the kidney, testis and cerebellum, mainly responsible for the transport of amino acids, regulating intracellular calcium ions and regulating the integrin signaling pathways.Numerous studies have found that SLC3A2 is highly expressed in multiple malignant cells or tissues and is closely associated with tumor progression and prognosis.It was revealed as one of the effective molecular therapeutic targets.This review reviews the structural, physiological function of SLC3A2 and its therapeutic studies with tumors.引言：氨基酸作为蛋白质的基本组成单元和人类赖以生存的营养物质。

谷氨酰胺转运载体ASCT2在肿瘤中的研究进展

doi:10.3971/j.issn.1000-8578.2019.18.1149谷氨酰胺转运载体ASCT2在肿瘤中的研究进展王雅乐，黄承浩Research Progress of Glutamine Transporter ASCT2 in CancerWANG Yale, HUANG ChenghaoNational Institute of Diagnostics and Vaccine Development in Infectious Diseases/State Key Laboratory of Molecular Vaccinology and Molecular Diagnostic, Xiamen University, Xiamen 361102, ChinaCorresponding Author: HUANG Chenghao, E-mail: huangchenghao@ Abstract: Tumor cells have unique metabolic demands, and their metabolic processes require large amounts of glutamine. Glutamine is closely related to the growth and proliferation of tumor cells, and it can regulate cell survival, metabolism, signal transduction, autophagy, etc. Alanine-serine-cysteine transporter 2 (ASCT2) is Na+-dependent transmembrane transporter in charge of transporting glutamine and some macromolecular neutral amino acids. ASCT2 is overexpressed in many kinds of tumor cells, and the high expression of ASCT2 is positively correlated with the poor prognosis of tumor patients. Recently, the glutamine metabolism and transporters have been developed as therapeutic targets for treating various cancers. However, the studies on the glutamine transporters in China remain largely unknown. In this paper, we review the recent progress of structure, expression and role of ASCT2 in cancer.Key words: Glutamine transporter; ASCT2; Cancer摘要：肿瘤细胞具有独特的代谢需求，其代谢过程需要消耗大量的谷氨酰胺。

Cdx2对胃癌生物学行为的影响及作用机制的研究的开题报告

Cdx2对胃癌生物学行为的影响及作用机制的研究的开题报
告
胃癌是一种常见的消化系统恶性肿瘤，其发病率和死亡率在全球范围内均居高不下。

因此，深入探究胃癌的生物学行为及其调节机制具有重要的临床意义。

Cdx2基因作为胃肠道上皮细胞分化的关键调控因子，是胃癌发生和发展中的重要参与者。

因此，本研究旨在研究Cdx2对胃癌细胞的生物学行为的影响及其作用机制。

具体研究内容包括以下三个方面：
1. 研究Cdx2在胃癌中的表达水平及其与胃癌分化程度的关系。

使用实时荧光定量PCR和免疫印迹等技术，检测胃癌组织与正常胃粘膜组织中Cdx2 mRNA和蛋白的
表达水平，以及不同分化程度的胃癌组织中Cdx2表达的差异。

2. 探究Cdx2对胃癌细胞增殖和侵袭能力的影响。

构建Cdx2过表达和沉默的胃
癌细胞系，通过MTT实验和Transwell侵袭实验等方法，评估Cdx2对胃癌细胞增殖和侵袭能力的调节作用。

3. 揭示Cdx2对胃癌生物学行为的调控机制。

通过RNA序列分析和Western blot 等技术，筛选出Cdx2调控胃癌生物学行为的相关信号通路及关键蛋白，并进一步验证其在胃癌发生和发展中的作用。

该研究对于进一步认识Cdx2在胃癌中的作用机制，以及探索新的治疗药物的靶
点具有重要意义，有望为胃癌的临床治疗提供新的思路和方法。

氨基酸转运载体的研究

氨基酸转运载体的研究摘要:氨基酸转运载体是介导氨基酸跨膜转运的膜蛋白,在氨基酸营养机体细胞和神经调节过程中起着重要作用;而且,其功能异常会导致严重的氨基酸吸收和代谢障碍性疾病,也具有重要的病理学意义。

本文就近年来关于中性氨基酸、酸性氨基酸和碱性氨基酸转运载体家族成员及其组织分布、分子生物学特征、生理功能和病理学意义等研究进展进行了综述。

关键词:氨基酸转运载体;中性氨基酸;酸性氨基酸;碱性氨基酸早在20世纪60年代,人们就开始通过制备膜泡和培养艾氏(Ｅｈｒｌｉｃｈ)腹水瘤细胞、红细胞等手段陆续发现了Ａ型、Ｌ型和β型等多种氨基酸转运载体[1]。

虽然大多数氨基酸转运系统尚未在分子水平上阐明,但是通过克隆编码特定转运载体蛋白的ｃＤＮＡ,极大地加深了人们对氨基酸转运载体生理功能和病理学意义的了解。

研究表明,氨基酸转运载体既是氨基酸作为营养素从机体胞外进入胞内的通道,也是氨基酸进出胞内完成神经细胞兴奋、抑制等重要细胞功能的通道。

氨基酸转运载体也与胱氨酸尿症、范科尼(Ｆａｎｃｏｎｉ)综合症、哈氏遗传性疾病(Ｈａｒｔｎｕｐｄｉｓｏｒｄｅｒ)和家族性肾原性亚甘氨酸尿症等氨基酸吸收障碍病密切相关[2,3]。

ｃＤＮＡ克隆技术是研究和认识氨基酸转运系统的有效手段,最初用于研究哺乳动物Ｎａ+依赖性高亲和性谷氨酸转运系统,即Ｘ-ＡＧ型酸性氨基酸转运载体[4],并基于与谷氨酸转运蛋白序列相似性,发现了转运丙氨酸、丝氨酸和半胱氨酸的Ｎａ+依赖性转运蛋白,即ＡＳＣ型中性氨基酸转运载体[5]。

最终,发现了中性和酸性氨基酸转运载体家族。

迄今,已经形成了庞大的中性、酸性和碱性氨基酸转运载体家族。

以下就各转运载体系统的研究进展做一综述1 氨基酸转运载体系统分类氨基酸转运载体系统一般以其底物分为中性酸性和碱性氨基酸转运载体系统,或者以对Ｎａ+的依赖性分为Ｎａ+依赖性和Ｎａ+非依赖性转运系统(见表1)[3,6]。

Ｎａ+依赖性转运系统利用质膜上以Ｎａ+电化学势梯度形式储存的自由能逆浓度梯度从胞外转运氨基酸底物进入胞内,因此,这些转运载体具有强大的动力从胞外转运氨基酸至胞内[3]。

钠离子依赖性中性氨基酸转运载体2特性、表达调控及功能

钠离子依赖性中性氨基酸转运载体2特性、表达调控及功能李光燃;谭碧娥;管桂萍;印遇龙【摘要】Sodium-dependent neutral amino acid transporter 2 ( SNAT2 ) , which belongs to transport system A,is the main transporter of nitrogen in vivo. SNAT2 is well known as typical amino acid transceptor founded in recent years, which plays a dual role of amino acid transporter and receptor through regulating the concentra-tion of intracellular amino acids, thereby regulating the downstream signal of intracellular amino acid receptors. Because of its unique features, SNAT2 has become an attractive topic in nutritional induction of amino acids in recent years. In the present review, the new research progresses on the molecular characteristics, biological properties, expression regulation and amino acids sensing signaling of SNAT2 were summarized.%转运系统A载体——钠离子依赖性的中性氨基酸转运载体2 ( SNAT2 )是近年发现的氨基酸转运感受体的典型代表,是体内主要的氮转运载体. SNAT2通过转运过程调节细胞内氨基酸浓度,进而调控细胞内氨基酸感受体的下游信号,发挥氨基酸转运载体和信号受体的双重功能,而成为近年氨基酸营养感应的研究热点. 本文围绕SNAT2的分子特性、生物学特性、表达调控及其介导的氨基酸感应信号的研究进展进行综述.【期刊名称】《动物营养学报》【年(卷),期】2015(027)011【总页数】7页(P3338-3344)【关键词】钠离子依赖性中性氨基酸转运载体;分子特性;生物学特性;表达调控;哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路【作者】李光燃;谭碧娥;管桂萍;印遇龙【作者单位】中国科学院亚热带农业生态研究所,中国科学院亚热带农业生态过程重点实验室,湖南省畜禽健康养殖工程技术中心,农业部中南动物营养与饲料科学观测实验站,长沙 410125;中国科学院大学,北京 100049;中国科学院亚热带农业生态研究所,中国科学院亚热带农业生态过程重点实验室,湖南省畜禽健康养殖工程技术中心,农业部中南动物营养与饲料科学观测实验站,长沙 410125;中国科学院亚热带农业生态研究所,中国科学院亚热带农业生态过程重点实验室,湖南省畜禽健康养殖工程技术中心,农业部中南动物营养与饲料科学观测实验站,长沙 410125;湖南农业大学生物科学技术学院,长沙 410128;中国科学院亚热带农业生态研究所,中国科学院亚热带农业生态过程重点实验室,湖南省畜禽健康养殖工程技术中心,农业部中南动物营养与饲料科学观测实验站,长沙 410125【正文语种】中文【中图分类】S852.2氨基酸是机体重要功能物质合成的必需前体物，在维持机体正常的生长、发育和繁殖方面发挥重要作用。

人类表皮生长因子受体2对胃癌细胞增殖、迁移侵袭和凋亡的影响

安徽医药Anhui Medical and Pharmaceutical Journal 2021Feb ，25（2）［5］张恒伟，李军涛，吕民豪，等.数字乳腺三维断层摄影技术在乳腺癌诊断中的价值［J ］.中华医学杂志，2017，97（18）：1387-1390.［6］边甜甜，林青.数字乳腺断层摄影新技术的临床应用价值及发展前景［J ］.中华放射学杂志，2013，47（8）：761‑763.［7］HAAS BM ．Comparison of tomosynthesis plus digital mammog‑raphy and digital mammography alone for breast cancer screening ［J ］．Radiology ，2013，269（3）：694-700．［8］MERCADO C.BI -RADS update ［J ］.RadiolClin NorthAm ，2014，52（3）：481-487.［9］张恒伟，李军涛，田沛琦，等.数字乳腺三维断层摄影与全数字化乳腺摄影在乳房肿块型疾病中的诊断价值［J ］.中华普通外科杂志，2017，32（6）：493-496.［10］SECHOPOULOS I ，BLIZNAKOVA K ，FEI B ，et al.Power spec‑trum analysis of the x -ray scatter signal in mammography and breast tomosynthesis projections ［J ］.Med Phys ，2013，40（10）：101905.［11］魏瑶，芦春花，李岩，等.全视野数字化乳腺摄影及数字乳腺断层摄影诊断致密型乳腺内病变［J ］.中国医学影像技术，2018，34（12）：1815-1819.［12］李军涛，郭旭辉，田沛琦，等.数字乳腺三维断层摄影技术在乳腺可疑钙化型疾病中的诊断价值［J ］.中华普通外科杂志，2018，33（12）：1042-1045.［13］边甜甜，林青，李丽丽，等.对比数字乳腺断层合成与乳腺X 线摄影对致密型乳腺内肿块的诊断价值［J ］.中华放射学杂志，2015，49（7）：483-487.［14］MICHELL MJ ，BATOHI B.Role of tomosynthesis in breast imag‑ing going forward ［J ］.Clin Radiol ，2018，73（4）：358-371.［15］尤超，顾雅佳，彭卫军，等.采用数字乳腺断层结合合成二维图像对乳腺病变的鉴别诊断价值［J ］.中华放射学杂志，2017，51（11）：828-833.［16］安琪，李晶.超声与数字断层摄影检查致密乳腺进展［J ］.中国介入影像与治疗学，2018，15（4）：251-254.［17］BIAN TT ，LIN Q ，CUI CX ，et a1．Digital breast tomosynthesis ：anew diagnostic method for mass —like 1esions in dense breasts［J ］．Breast J ，2016，22（5）：535-540．（收稿日期：2019-10-17，修回日期：2019-12-08）人类表皮生长因子受体2对胃癌细胞增殖、迁移侵袭和凋亡的影响刘文杰，吴菡，黄建，周武碧作者单位：南京医科大学附属淮安第一医院病理科，江苏淮安223300摘要：目的研究人类表皮生长因子受体2（HER2）对胃癌细胞增殖、迁移侵袭和凋亡的影响，并探讨其机制。