荧光分光光度计验收细则
荧光分光光度计使用操作注意事项 光度计操作规程
荧光分光光度计使用操作注意事项光度计操
作规程
荧光分光光度计也被称作（荧光光谱仪），是一款利用惰性气体氩气作载气，将气态氢化物和过量氢气与载气混合后，导入加热的原子装扮置。原子荧光光谱分析法具有设备简单、灵敏度高、光谱干扰少、工作曲线线性范围宽、可以进行多元素测定等优点。在地质、冶金、石油、生物医学、地球化学、材料和环境科学等各个领域内获得了广泛的应用。
作为一款专业测量分析物质的设备，为避开荧光光谱仪在使用过程中显现分析误差，需要注意以下几点：
1.在打开荧光光谱仪的主机之前，需要调整其设备各性能数值，比如需要先开氩气钢瓶总阀并将出口压力调至规范区域内，否则会导致仪器欠压报警并对荧光光谱仪的正常工作造成影响。
2.需要安装需测的元素灯，再打开仪器，开启设备后等仪器自检结束，再检查看元素灯有没有亮，然后取下排风罩，将调光器放在原子化器上，旋转元素灯座的可调螺钉，调整元素灯光斑中心至对光器横线与竖线的交叉点，便完成对元素灯的安装调整。
3.在使用荧光光谱仪的过程中应保持试验室通风情形良好，并对废液桶进行适时处理，以保持废液排放正常。
4.在荧光光谱仪完成测试后，需要对其进行适时清理，避开因残留异物导致下次检测显现错误。
5.在对荧光光谱仪清洁完后，依照规定操作对各开关进行关闭，并进行相应的存放操作。
6.定期对荧光光谱仪进行检修保养，适时清洁荧光光谱仪中的异物，避开其对设备造成损坏。
由于资料有限，因而上述（荧光光谱仪）操作注意事项并不全面，在实际进行操作的过程中，建议咨询相关专业技术人员，并查阅相应使用说明书。
荧光分光光度计(分子荧光)安全操作保养规程
荧光分光光度计(分子荧光)安全操作保养规程
荧光分光光度计是一种用于分析、检测分子荧光的仪器。在使用荧
光分光光度计时，必须严格遵守安全操作规程，以保证实验人员和设
备的安全，确保实验结果准确可靠。
安全操作规程
1.严格遵守操作规程并保持警觉。在使用荧光分光光度计时，
实验人员必须集中注意力，遵守所有安全操作规程，保持非常警
觉。
2.正确操作荧光分光光度计。在操作荧光分光光度计前，必
须认真阅读设备说明书，并了解仪器操作流程和强度控制问题。
3.谨慎选取和处理荧光物质。实验人员必须谨慎选取和处理
荧光物质，以确保实验结果的准确性和安全性。
4.注意使用、清洁和维护设备。实验人员必须正确使用荧光
分光光度计，负责仪器的清洁和维护，并注意安全建设。
5.采取预防措施。在任何时间，实验人员必须采取有效的预
防措施，例如佩戴手套、口罩、护目镜等。
6.确保实验室安全。实验操作结束后，必须清理和驳回所有
荧光物质并锁好荧光分光光度计以确保实验室的安全性，并将荧
光物质储存在安全的储存区。
设备保养规程
1.荧光分光光度计在使用前应进行仪器检查和仪器校准，以
确保设备正常工作。检测仪器的所有部件是否正常，确保数码显
示、控制器以及采集器、荧光法检测器等工作正常是仪器检查的
重点。
2.调整荧光分光光度计的坐标机构，以确保样品放置在荧光
检测器上时水平位置良好。
3.在检测前，荧光分光光度计的荧光光源应进行预热，并保
持荧光光源的恰当发射条件。
4.检测后要及时关闭荧光分光光度计并关闭控制器。关闭前，
如果仪器有多个工作函数，应首先选择关闭荧光分光光度计工作
仪器操作规程-原子荧光分光光度计仪器设备使用说明书
原子荧光分光光度计仪器设备使用
说明书
1、气体安全检查
（1）检查气体钢瓶是否漏气；
（2）气体管路气密性是否良好；
2、检查、清洁仪器外观
（1）清洁仪器外壳；
（2）检查仪器电源线是否完好，各数据连接线是否完好；
（3）检查仪器外部各旋钮指示灯。
3、检查、清洗进样系统
（1）检查各泵管是否有泄漏，定期向泵管和压块间滴加硅油；
（2）检查气液分离器中是否有积液，以防溶液进入荧光器；
（3）检查自动进样器导轨轴是否活动自如，不便时应加润滑油，以保护进样器导轨轴不受腐蚀；
（4）检查废液桶内液面，需要时清理废液；
（5）检查水封系统；
4、气体流量检查
（1）检查空气、氮气流量；
（2）检查气体管路清洁程度；
（3）检查气体管路是否堵塞，需要时处理。
2020版《中国药典》荧光分光光度法检验操作规程
一、目的：
二、范围：
本操作规程适用于荧光分光光度法的检验操作。
三、职责：
1、检验员：严格按操作规程操作，认真、及时、准确地填写检验记录；
2、化验室负责人：监督检查检验员执行本操作规程。
四、内容：
1、对仪器的一般要求：
1.1所用仪器为荧光计或荧光分光光度计，荧光分光光度计的激发波长扫描范围一般是190～650nm，发射波长扫描范围是200～800nm。可用于液体、固体样品(如凝胶条)的光谱扫描。
1.2仪器基本组成：
1.2.1光源：为高压汞蒸气灯或氙弧灯，后者能发射出强度较大的连续光谱，且在300nm～
400nm 范围内强度几乎相等，故较常用。
1.2.2激发单色器：置于光源和样品室之间的为激发单色器或第一单色器，筛选出特定的激发光谱。
1.2.3发射单色器：置于样品室和检测器之间的为发射单色器或第二单色器，常采用光栅为单色器。筛选出特定的发射光谱。
1.2.4样品室：通常由石英池(液体样品用)或固体样品架(粉末或片状样品)组成。测量液体时，光源与检测器成直角安排；测量固体时，光源与检测器成锐角安排。
1.2.5检测器：一般用光电管或光电倍增管作检测器。可将光信号放大并转为电信号。
2、基本原理：
某些物质受紫外光或可见光照射激发后能发射出比激发光波长较长的荧光。物质的激发光谱和荧光发射光谱，可用于该物质的定性分析。当激发光强度、波长、所用溶剂及温度等条件固定时，物质在一定浓度范围内，其发射光强度与溶液中该物质的浓度成正比关系，可以用于该物质的含量测定。荧光分光光度法的灵敏度一般较紫外-可见分光光度法高，但浓度太高的溶液会发生“自熄灭”现象，而且在液面附近溶液会吸收激发光，使发射光强度下降，导致发射光强度与浓度不成正比，故荧光分光光度法应在低浓度溶液中进行。
荧光分光光度计的操作流程
荧光分光光度计操作流程
荧光分光光度计是一种用于测量物质荧光发射和吸收的仪器。它通过激发样品中的分子发生电子跃迁，然后测量这些分子返回基态时所发射的荧光强度，从而确定样品中特定物质的含量。以下是荧光分光光度计的操作流程步骤：
步骤一：准备工作
1.打开荧光分光光度计电源，并确保仪器正常启动。
2.检查仪器是否连接到电脑或其他数据采集设备，以便记录和保存实验数据。
3.清洁测量室并检查样品池是否干净，如果有杂质应先清洗。
步骤二：校准仪器
1.进行荧光分光光度计的校准，以确保仪器测量结果的准确性和可靠性。
2.根据仪器使用说明书选择适当的参考物质（例如标准溶液）进行校准。
3.将参考物质放入样品池中，并在仪器上设置相应参数（例如激发波长、发射
波长和积分时间）。
4.进行校准测量，并记录校准曲线。
步骤三：设置实验参数
1.根据实验需要，确定激发波长和发射波长，并在仪器上进行设置。
2.设置积分时间，以确保荧光信号能够充分积累并获得准确的测量结果。
步骤四：样品处理
1.准备样品溶液，并将其转移到荧光透明的样品池中。
2.确保样品池中无气泡或杂质，以避免对测量结果产生干扰。
3.根据实验需要，可以对样品进行稀释或前处理，以提高测量灵敏度和准确性。
步骤五：测量荧光信号
1.将样品池放入仪器的样品室中，并关闭仪器的盖子以避免外界干扰。
2.启动荧光分光光度计并开始测量。
3.仪器会自动激发样品并记录返回的荧光信号。
4.测量完成后，仪器会显示荧光强度值或荧光曲线图。
步骤六：数据分析和处理
1.将测量得到的荧光强度值或荧光曲线导出到电脑或其他数据处理软件中。
荧光分光光度计技术需求
荧光分光光度计技术需求
1 .设备名称：荧光分光光度计
2 .主要用途：用于有机物和无机物的定性定量分析。
3 .工件条件：
3.1 环境温度：15℃〜35℃；
3.2湿度：40%〜80%（气温30℃以上时为70%以下）；
3.3电源需求：AC100∕120∕220∕240V,50∕60Hz o
4.技术指标
4.1本仪器同时具备固定波长功能、数据处理功能、时间扫描功能、
重复扫描功能、视频显示功能和谱图、测定参数及结果的打印
功能。
4.2灵敏度
4.2.1信噪比150:1以上蒸储水的喇曼峰；
激发光波长：350nm；
狭缝：5.Onm；
响应：2秒；
4.2.2灵敏度选择:High,Low二档（约差50倍）；
4.3光源：150W债灯，自动去臭氧；
4.4 激发光单色器和荧光单色器
4.4.1★光栅闪耀式全息光栅，F2.5刻线数1300条/mm；
4.4.2狭缝1.5,3,5,10,15,20nm共6段转换，只有激发光是
6nmHalfHeight；
4.4.3波长范围
4.4.4.1波长测定范围：220~900nm;
4.4.4.2波长扫描范围：220~750nm及0次（标准检测器）；220-
900nm及。次（使用R928时）；
4.4.4波长移动速度：约2000nm∕min;
4.4.5波长准确度：±L5nm;
4.5分辨率
4.6响应时间0~98%的响应，0.02,0.03,0.1,0.25,0.5,2,4,8秒八段
转换；
4.7★扫描速度：Survey,super,VeryFast,Medium,Slow,VerySlow七
段转换；
荧光分光光度计检定规程
荧光分光光度计检定规程
荧光分光光度计是一种专业的分析仪器，用于测量荧光发射和吸收光谱。为确保荧光分光光度计的准确性和可靠性，需要进行定期的检定操作。
一、检定前的准备
1. 根据荧光分光光度计的型号和规格，准备相应的检定器具和标准物质。
2. 关闭荧光分光光度计的电源，并等待其冷却至室温状态。
3. 检查荧光分光光度计的光路是否畅通，清洁光路和样品室。
4. 根据荧光分光光度计的使用说明书，对荧光分光光度计进行正确的操作设置。
二、检定步骤
1. 确定荧光分光光度计的检定范围，选择相应的标准物质进行检定。一般情况下，选择荧光强度、波长准确度、分辨率和灵敏度等指标进行检定。
2. 将标准物质分别加入荧光分光光度计中，根据操作要求设置检定参数。
3. 在荧光分光光度计上测量标准物质的荧光强度、波长准确度、分辨率和灵敏度等指标，并记录检定结果。
4. 根据检定结果，评估荧光分光光度计的准确性和可靠性。如果检定结果不符合要求，需要进行维修或校正操作。
三、检定后的处理
1. 对荧光分光光度计进行清洁和保养，确保其正常使用和长期稳定运行。
2. 将检定结果记录在荧光分光光度计检定证书上，并在荧光分光光度计上贴上检定标志。
3. 按照荧光分光光度计的使用说明书，进行正确的存放和保管。
本规程适用于荧光分光光度计的定期检定操作，旨在提高荧光分光光度计的检定质量和准确性，为科研和工业应用提供可靠的分析数据。
荧光分光光度计验收细则
岛津RF-5301PC 荧光分光光度计的验收方案
一、荧光分光光度计的方法原理
某些物质由于受到光照射而被激发之后，会发射出比照射波长稍长的光（荧光），荧光强度与该物质的浓度有如下关系：
0(1)Lc F k I e εφ'-=-
式中：
F —荧光强度；
'k —仪器常数；
φ—荧光量子效率 0I —激发光强 度
ε—荧光物质的摩尔吸收系数
L —荧光物质液层的厚度 c —荧光物质的浓度
对于某个给定物质，激发光波长和强度固定，液层厚度固定，溶液浓度较低时，荧光强度和荧光物质的浓度有如下关系：F kc = 二、试剂
1、试剂及标准物质：
2、标准溶液的配制：
1）0.05mol/L硫酸标准溶液
将1000mL的容量瓶中加入适量的二次蒸馏水，用滴定管取浓硫酸2.7mL，注入容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，并混合均匀后放置备用。
2）500mL1×10-5g/mL的硫酸奎宁标准溶液
将硫酸奎宁固体在干燥器中放置24h以上。在分析天平上称准至5.00mg的硫酸奎宁标准物质至于500mL容量瓶中，用适量的0.05mol/L硫酸标准溶液溶解，然后再用0.05mol/L 硫酸标准溶液稀释至刻度，摇匀即可。
注：用深色玻璃瓶储存高浓度的标准液。溶液应低温、避光、密封储存。稀标准溶液应该现配现用。浓溶液有效期为半年。
3、设备及器材
三、验收标准及验收方法（仅对于色散型单色器（光栅））
一）、波长示值误差及重复性
1、标准：波长示值最大误差±2.0nm；波长重复性≤1.0nm。
2、验证方法：
氙灯亮线法
1)激发侧单色器波长示值误差和重复性
将发色侧单色器置零级位置，将漫反射板（或无荧光的白色滤纸条）放入样品室，仪器的响应时间设置为：“快”，扫描速度设置为“中”，狭缝宽度为1.5nm ，对激发侧单色器在（350~550nm ）的波长范围内进行扫描，在谱图上找到450.1nm 处的光谱峰，并确定其峰值位置。连续测量三次，按照式（1）和式（2）分别计算波长示值误差和重复性。
原子荧光分光光度计期间核查规程
NHHB/ZY--YQ-18-1 第1 页共3 页原子荧光分光光度计期间核查规程
1. 目的
在仪器设备两次检定之间，进行期间核查，验证设备是否保持校准时的状态，确保检验结果的准确性和有效性。
2. 核查项目
标准曲线相关系数、精密度RSD、检出限（DL）
3. 使用的标准物质（核查标准）
As砷标准溶液（1000μg/ml）
4. 核查依据
JJG 939-2009 《原子荧光光度计检定规程》
5. 核查方法
5.1测定条件：室温20℃-25℃，相对湿度70%-85%。
5.2外观：要求仪器清洁、完整，没有影响仪器正常使用的缺陷。
5.3标准曲线：取砷标准溶液，配制标准系列，浓度分别为：0.0，1.0，2.0，4.0，8.0，10.0（ng/ml）。依次进样测定后绘出标准曲线。
5.4检出限（DL）、精密度（RS D）：调试仪器处于最佳工作状态，待仪器稳定后，相同的条件连续测量空白溶液11次、连续测量10个标准溶液浓度11次，仪器自动进行统计测量，并用上述系列溶液的标准曲线，微机自动计算出仪器的精密度RSD，检出限DL。RS D≤2％，DL≤3ng/ml，仪器合格。
6. 结果处理
对仪器核查结果，应填写“仪器设备期间核查记录”。如果该仪器已经偏离校准状态，应查找原因，并采取维修、重新检定或停用、报废等相应措施，维修后的仪器经检定或核查达到技术性能要求后方能投入使用。
7. 核查周期
在仪器设备两次检定之间，一般每隔六个月核查一次。如仪器有搬动、维修或测量结果有疑问时应进行核查。
NHHB/ZY--YQ-18-1 第2 页共3 页8. 相关记录
RF-5301PC荧光分光光度计验证方案
RF-5301PC荧光分光光度计验证方案
（编号：）
起草人：
部门：
起草日期：年月日
审核人：、、
（验证领导小组）
部门：、、
审核日期：年月日
批准人：
部门：
批准日期：年月日
**公司
2012年03月
验证目录
01.验证项目
02.概述
03.验证目的
04.验证条件
05.验证合格标准
06.验证范围
07.验证人员
08.验证内容与方法
09.验证数据分析
10.验证结论与偏差说明
11.再验证
12.验证时间安排
13.附件
1.验证项目
RF-5301PC荧光分光光度计验证方案
2.概述：
2.1 RF-5301PC荧光分光光度计：设备编号：QC-016
某些物质受到光照射而被激发之后，会发射出比照射波长稍长的光，这种光称为荧光。对于给定物质来说，当激发光的波长和强度固定、液层的厚度固定、溶液的浓度较低时，荧光强度与荧光物质的浓度c有如下关系：F=kc
荧光分光光度计就是根据上述原理，对可发射荧光的物质进行定性、定量测量的分析仪器。
我公司的荧光分光光度计是于2010年7月购置，其生产厂为日本岛津公司，主要用于铝的检测。
2.3技术参数：
型号：RF-5301PC
电源电压：220V，50HZ
体积：长667×宽530×高270mm
工作时间：连续
工作环境条件：环境温度：15～35℃
相对温度：40%～80%
电压波动：220V±10%
无影响仪器使用的振动和电磁干扰
生产厂家：日本岛津公司。
3.验证目的
按照GMP的要求，需要对该仪器进行安装确认、运行确认、性能确认，以确定目前的实验室环境能否满足该仪器的正常操作和使用，仪器是否具有良好的检测性能，能否满足验证可接受标准和日常分析测试工作的需要。
原子荧光光度计检定规程
原子荧光光度计检定规程
近日，国务院发布中华人民共和国国务院令（第666号），《国务院关于修改部分行政法规的决定》已经2016年1月13日国务院第119次常务会议通过，自公布之日（2016年2月6日）起施行。
本次修改的行政法规内容中，对《中华人民共和国进口计量器具监督管理办法》中的第四章规定作了整章删除。该《办法》第四章内容为对进口计量器具的检定相关要求。
原《中华人民共和国进口计量器具监督管理办法》第四章内容：
第四章
进口计量器具的检定
第十五条
进口以销售为目的的列入《中华人民共和国依法管理的计量器具目录》内的计量器具，在海关验放后，订货单位必须向所在的省、自治区、直辖市人民政府计量行政部门申请检定。当地不能检定的，向国务院计量行政部门申请检定。
第十六条
接受进口计量器具检定申请的政府计量行政部门，应指定计量检定机构及时进行检定。对检定合格的，应由政府计量行政部门出具检定证书、检定合格证或加盖检定合格印，并准予销售。
第十七条
订货单位应将计量行政部门对进口计量器具的检定结果报告所
在地区的商检机构。检定不合格，需要向外索赔的，订货单位应及时向所在地区商检机构申请复验出证。
第十八条
进口不以销售为目的的计量器具，按照国家关于一般进口商品检验工作的管理办法办理。
对于《中华人民共和国计量法实施细则》中，删除了该《细则》原第五十条，该条款是对进口计量器具检定的相关要求。
原《中华人民共和国计量法实施细则》第五十条：
第五十条进口计量器具，未经省级以上人民政府计量行政部门检定合格而销售的，责令其停止销售，封存计量器具，没收全部违法所得，可并处其销售额百分之十至百分之五十的罚款。
操作指南荧光分光光度计使用方法说明书
操作指南荧光分光光度计使用方法说明书
一、简介
荧光分光光度计是一种用于测量荧光物质的仪器，可用于快速、准
确地分析和检测样品中的荧光强度。本说明书将详细介绍荧光分光光
度计的使用方法，以及操作步骤和注意事项。
二、仪器准备
1. 根据实验需要，选择适当的荧光分光光度计，并确保其完好无损。
2. 将荧光分光光度计放置在平稳的台面上，并接通电源。
3. 检查仪器的各个部件是否干净，如有污物或尘埃应及时清理。
三、样品制备
1. 根据实验要求，选择合适的样品进行测量。
2. 准备样品溶液，确保其浓度适中，以免超出荧光分光光度计的检
测范围。
3. 将样品置于透明的石英或玻璃样品池中，并确保其表面光滑，无
气泡和杂质。
四、仪器设置
1. 打开荧光分光光度计，并启动相关软件。
2. 选择适当的检测波长范围，并设置荧光激发波长和荧光发射波长。
3. 对于荧光强度的测量，可以选择适当的增益和积分时间。
4. 确保荧光分光光度计的设置与所需测量结果一致。
五、测量操作
1. 将样品池放置在仪器的样品舱中，并确保其固定。
2. 启动测量程序，等待荧光分光光度计自动调零，并进行基线校准。
3. 点击“开始测量”按钮，荧光分光光度计将开始对样品进行荧光强
度的测量。
4. 在测量过程中，避免移动或震动荧光分光光度计，以免影响测量
结果的准确性。
5. 测量完成后，保存并导出测量结果，同时进行数据分析和处理。
六、注意事项
1. 使用荧光分光光度计时，应注意仪器的安全操作规范，避免误操
作和事故发生。
2. 在进行测量前，确保仪器已经预热至稳定状态，并检查仪器的各
荧光分光光度计检定装置技术报告
计量标准技术报告
计量标准名称荧光分光光度计检定装置计量标准负责人
建标单位名称（公章）
填写日期
目录
一、建立计量标准的目的 (1)
二、计量标准的工作原理及其组成 (1)
三、计量标准器及主要配套设备 (2)
四、计量标准的主要技术指标 (3)
五、环境条件 (3)
六、计量标准的量值溯源和传递框图 (4)
七、计量标准的重复性试验 (5)
八、计量标准的稳定性考核 (6)
九、检定或校准结果的测量不确定度评定 (7)
十、检定或校准结果的验证 (9)
十一、结论 (10)
十二、附加说明 (10)
原子荧光分光光度计期间核查操作规程
原子荧光分光光度计期间核查操作规程
1.仪器的日常检查
-在使用前，需检查仪器的电源和仪器的连接线是否正常。
-检查仪器的冷却系统和样品的供气系统是否正常工作。
-检查仪器的荧光管和灯丝是否处于正常状态。
-检查仪器的光谱仪和接收系统是否正常。
2.清洁操作
-在使用前，需要将仪器的工作台面和配件清洁干净，以确保没有杂质和灰尘。
-在每次使用后，需将仪器的工作面、光谱仪和接收系统进行清洁，避免杂质的干扰。
3.校准操作
-在使用仪器前，需要先进行校准操作。校准操作包括调整仪器的波长范围和波长刻度，以及灵敏度和背景噪声的检查。
4.样品的处理
-样品的处理需要按照仪器的使用说明进行。一般情况下，需要将样品溶解在适当的溶剂中，并进行必要的稀释操作。
-样品的输入和输出需要使用专门的样品架或样品管。
5.测量操作
-在进行测量前，需要确保仪器已经预热至稳定的工作温度。
-在测量期间，需要保持仪器的工作环境稳定，避免温度和湿度的变
化对测量结果的影响。
-在进行每次测量前，都需要进行仪器的初始背景测量，以减少背景
干扰的影响。
6.数据处理
-在测量完成后，需要对得到的数据进行相应的处理。一般情况下，
可以使用专门的数据处理软件进行处理和分析。
-在进行数据处理时，需要根据实际情况选择适当的处理方法和参数。
7.维护和保养
-在使用完仪器后，需要对仪器进行适当的维护和保养。如更换荧光管、灯丝等易损件，清洗仪器的内部和外部，以及定期校准仪器的波长范
围等。
-在长时间不使用的情况下，需要将仪器进行合理的存储和保养，避
免对仪器造成损害。
以上是原子荧光分光光度计期间的核查操作规程。通过严格按照操作
荧光分光光度计对样品的要求
荧光分光光度计对样品的要求
荧光分光光度计是一种常用的分析仪器，用于测量样品在荧光区域的吸收和发射光谱。它具有高灵敏度、高分辨率和广泛的应用范围。在使用荧光分光光度计时，对样品的要求十分重要，下面将详细介绍。
样品的纯度是使用荧光分光光度计的前提条件之一。样品应具有较高的纯度，以避免其他杂质对测量结果的干扰。在实验前，可以通过其他分析方法对样品进行初步检测，确保其纯度达到要求。
样品的浓度也是使用荧光分光光度计时需要考虑的因素之一。样品的浓度应在荧光分光光度计的检测范围内，以保证测量结果的准确性和可靠性。如果样品浓度过高或过低，可能会导致信号过强或过弱，影响测量结果的精确度。
样品的溶剂选择也需要注意。不同的样品可能需要不同的溶剂来溶解，以保证样品的稳定性和溶解度。在选择溶剂时，应考虑到样品的化学性质和荧光特性，选择合适的溶剂进行溶解。
在进行荧光分光光度计测量时，样品的容器也需要特别注意。常用的容器有石英比色皿、玻璃比色皿等。选择合适的容器可以减少光的散射和吸收，提高测量的准确性。
样品的温度和pH值也会对荧光分光光度计的测量结果产生影响。
在测量前，应控制好样品的温度和pH值，以保证测量结果的稳定性和可比性。
样品的处理和预处理也是使用荧光分光光度计时需要注意的环节。对于复杂的样品，可能需要进行前处理步骤，如稀释、过滤、萃取等，以提高测量的准确性和可靠性。
荧光分光光度计对样品的要求包括样品的纯度、浓度、溶剂选择、容器选择、温度和pH值控制，以及样品的处理和预处理等。只有满足这些要求，才能保证荧光分光光度计测量结果的准确性和可靠性。在实际应用中，我们应根据具体的实验目的和样品特性，合理选择和处理样品，以获得准确的荧光分光光度计测量结果。
荧光分光光度计计量标准技术报告
计量标准技术报告
计量标准名称荧光分光光度计检定装置
计量标准负责人 xxx 建标单位名称（公章） xxx
填写日期 20xx年x月x日
目录
一、建立计量标准的目的……………………………………. ( 3 )
二、计量标准的工作原理….…………………………………….( 3 )
三、计量标准器及主要配套设备……………………………….( 4 )
四、计量标准的主要技术指标…….…………………………….( 5 )
五、环境条件…..………….…………………………………….( 5 )
六、计量标准的量值溯源和传递框图…….....…………………( 6 )
七、计量标准的重复性试验…….………………………………( 7 )
八、计量标准的稳定性考核…….………………………………( 8 )
九、检定或校准结果的测量不确定度评定…….………………( 9 )
十、检定或校准结果的验证……………………………………( 10 ) 十一、结论........………….…………………………………….( 11 ) 十二、附加说明….………...…………………………………….( 11 )
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岛津RF-5301PC 荧光分光光度计的验收方案
一、荧光分光光度计的方法原理
某些物质由于受到光照射而被激发之后，会发射出比照射波长稍长的光（荧光），荧光强度与该物质的浓度有如下关系：
0(1)Lc F k I e εφ'-=-
式中：
F —荧光强度；
'k —仪器常数；
φ—荧光量子效率 0I —激发光强 度
ε—荧光物质的摩尔吸收系数
L —荧光物质液层的厚度 c —荧光物质的浓度
对于某个给定物质，激发光波长和强度固定，液层厚度固定，溶液浓度较低时，荧光强度和荧光物质的浓度有如下关系：F kc = 二、试剂
1、试剂及标准物质：
2、标准溶液的配制：
1）0.05mol/L硫酸标准溶液
将1000mL的容量瓶中加入适量的二次蒸馏水，用滴定管取浓硫酸2.7mL，注入容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，并混合均匀后放置备用。
2）500mL1×10-5g/mL的硫酸奎宁标准溶液
将硫酸奎宁固体在干燥器中放置24h以上。在分析天平上称准至5.00mg的硫酸奎宁标准物质至于500mL容量瓶中，用适量的0.05mol/L硫酸标准溶液溶解，然后再用0.05mol/L 硫酸标准溶液稀释至刻度，摇匀即可。
注：用深色玻璃瓶储存高浓度的标准液。溶液应低温、避光、密封储存。稀标准溶液应该现配现用。浓溶液有效期为半年。
3、设备及器材
三、验收标准及验收方法（仅对于色散型单色器（光栅））
一）、波长示值误差及重复性
1、标准：波长示值最大误差±2.0nm；波长重复性≤1.0nm。
2、验证方法：
氙灯亮线法
1)激发侧单色器波长示值误差和重复性
将发色侧单色器置零级位置，将漫反射板（或无荧光的白色滤纸条）放入样品室，仪器的响应时间设置为：“快”，扫描速度设置为“中”，狭缝宽度为1.5nm ，对激发侧单色器在（350~550nm ）的波长范围内进行扫描，在谱图上找到450.1nm 处的光谱峰，并确定其峰值位置。连续测量三次，按照式（1）和式（2）分别计算波长示值误差和重复性。
波长示值误差：3
1
13i n i λλλ=∆=-∑ (1)
式中：i λ—波长测量值（nm ）
n λ—参考波长测量值（氙灯亮线参考波长测量值为：450.1nm ）
波长重复性：3
1
1max 3i i i λδλλ==⎢-⎪∑（nm ） (2)
2）发射侧单色器波长示值误差和重复性
将激发侧单色器置零级位置，将漫反射板（或无荧光的白色滤纸条）放入样品室，仪器的响应时间设置为：“快”，扫描速度设置为“中”，狭缝宽度为1.5nm ，对激发侧单色器在（350~550nm ）的波长范围内进行扫描，在谱图上找到450.1nm 处的光谱峰，并确定其峰值位置。连续测量三次，按照式（1）和式（2）分别计算波长示值误差和重复性。 二）、检出极限
1、标准：用硫酸奎宁标准溶液的检出极限为5×10-10g/mL 。
2、验收方法：用0.05mol/L 硫酸溶液做空白样，选取质量浓度为1×10-9g/mL 硫酸奎宁标准溶液，灵敏度至最高档，狭缝宽度为1.5nm ，激发波长350nm ，发射波长为450nm ，对空白液和标准液进行连续交替测量11次。如果测量中，有1次数据是由于外界干扰或是操作失误造成的误差，应该将此数据删除。 每次测量的荧光强度：10i i i F F F =- 式中：1i F —标准溶液的荧光强度
0i F —空白溶液的荧光强度
荧光强度测量的平均值：11
1
1i i F F n ==∑（n —测量次数）
检测限是指二倍于标准偏差读数的物质的浓度。用符号DL 表示；
2c
DL s F
=
⨯ 式中：
F —11次测量的平均荧光强度
c —标准溶液的质量浓度 s —单次测量的标准偏差；
s =
三）、测量线性
1、标准：仪器测量结果的线性γ值≥0.995。
2、验收方法：用0.05mol/L 硫酸溶液做空白样，将灵敏度至于高档，狭缝宽度为1.5nm ，激发波长350nm ，发射波长450nm ，依此测量下表4中各浓度硫酸奎宁标准溶液。
表4硫酸奎宁标准溶液(g/L)
标准溶液号
1 2 3 4
分别对4中质量浓度工作标准溶液与空白溶液连续交替3次测量，计算每次测量的荧光强度的平均值。用最小二乘法对4中标准溶液的质量浓度和荧光强度测量平均值进行处理，得到线性相关系数γ，几位测量线性的检定结果。 最小二乘法的计算公式：
Y a bX =+
xx
xy
S b S =
a Y bX =-
S γ=
()
2
2xx X S X n
=-
∑∑
()
2
2yy Y S Y n
=-∑∑
()2
xy X Y S XY n
=-
∑∑∑
注：c j 作为X ，F 作为Y 即可进行计算。 四)荧光光谱峰值强度的重复性
1、标准：仪器测量荧光光谱峰值强度的重复性≤1.5%。
2、验证方法：用0.05mol/L 硫酸溶液做空白样，将灵敏度至于高档，狭缝宽度为1.5nm ，激发波长350nm ，发射波长450nm ，用1×10-7g/mL 的硫酸奎宁标准溶液，见光3min 后，对发射波长从365~500nm 重复扫描三次。光谱强度的重复性由下式计算：
3
1
3
1
1max 313i i
i F i i F F F δ==⎢-⎥=∑∑
式中：i F —为光谱峰值强度的读数。 五）稳定度
1、标准：在10min 中内基线漂移≤0.5%；荧光强度示值上限在10min 内的漂移≤1.5%。
2、验证方法
调节灵敏度为中等强度，关闭光闸门，记录10min 内的漂移；至激发波长和发射波长为450nm ，至激发狭缝和发射狭缝的宽度为10nm ，漫反射板置入样品室，调节灵敏度，使示值为90%，见光3min 后，观察10min 中示值的变化。