LAMP简介

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lamp

3、GPL(General Public License)
我们很熟悉的Linux就是采用了GPL。GPL协议和BSD, 我们很熟悉的Linux就是采用了GPL。GPL协议和BSD, Apache Licence等鼓励代码重用的许可很不一样。GPL的出发点是代码开源的 Licence等鼓励代码重用的许可很不一样。GPL的出发点是代码开源的传递。它允许代码免费使用，但不允许修改/ 传递。它允许代码免费使用，但不允许修改/衍生的代码做为闭源的商业软件发布和销售。 GPL协议的主要内容是只要在一个软件中使用(“使用”指类库引 GPL协议的主要内容是只要在一个软件中使用(“使用”指类库引用，修改后的代码或者衍生代码)GPL协议的产品，则该软件产品必须用，修改后的代码或者衍生代码)GPL协议的产品，则该软件产品必须也采用GPL协议，这就是所谓的“传染性”。因此，商业软件或对原也采用GPL协议，这就是所谓的“传染性”。因此，商业软件或对原代码有保密要求的产品不适合使用GPL协议的代码。代码有保密要求的产品不适合使用GPL协议的代码。 GPL是针对软件源代码的版权，而不是针对软件编译后二进制版 GPL是针对软件源代码的版权，而不是针对软件编译后二进制版本的版权。你有权免费获得软件的源代码，但是你没有权力免费获得软件的二进制发行版本。GP对软件发行版本唯一的限制就是：你的发软件的二进制发行版本。GP对软件发行版本唯一的限制就是：你的发行版本必须把完整的源代码一同提供。
2、Apache Licence
Apache Licence是著名的非盈利开源组织Apache采用的协议。该 Licence是著名的非盈利开源组织Apache采用的协议。该协议和BSD类似，同样鼓励代码共享和尊重原作者的著作权，同样允协议和BSD类似，同样鼓励代码共享和尊重原作者的著作权，同样允许代码修改和再发布（作为开源或商业软件）。需要满足的条件也和 BSD类似： BSD类似： • 需要给代码的用户一份Apache Licence。需要给代码的用户一份Apache Licence。 • 如果你修改了代码，需要再被修改的文件中说明。 • 在延伸的代码中需要带有原来代码中的协议、商标、专利声明和其他原来作者规定需要包含的说明。 • 如果再发布的产品中包含一个Notice文件，则在Notice文件中需如果再发布的产品中包含一个Notice文件，则在Notice文件中需要带有Apache Licence。你可以在Notice中增加自己的许可，但要带有Apache Licence。你可以在Notice中增加自己的许可，但不可以表现为对Apache Licence构成更改。不可以表现为对Apache Licence构成更改。 Apache Licence也是对商业应用友好的许可。使用者也可以在需 Licence也是对商业应用友好的许可。使用者也可以在需要的时候修改代码来满足需要并作为开源或商业产品发布/ 要的时候修改代码来满足需要并作为开源或商业产品发布/销售。

LAMP架构简介

5
LAMP的组成体系：Server
Server
A: Apache，一种占有全球72%市场的开源的Web Server，官方网站最近Pingdom的统计表明，Apache仍然主导全美100大网站（Alexa的排名），占据了49%的市场份额
6
LAMP的组成体系：Server
Server
4% 1% 1% 22%
72%
Apache IIS SunONE Zeus Others
Web Server软件的使用比例分布
7
LAMP的组成体系：Storage
Storage M: MySQL，一种开源的关系型数据库，被下载上千万次， 2008年2月26日为Sun收购。 M: 可以将M的概念扩展到Memcached: Memcached是一个高性能的分布式的内存对象缓存系统，通过在内存里维护一个统一的巨大的hash表，它能够用来存储各种格式的数据，包括图像、视频、文件以及数据库检索的结果等。 M: 从Memcache扩展到，还有一系列产品，包括MySQL的 memcache_engine/memcachedb_engine、MemcacheQ、 Sharedance()
16
PHP: 运行环境
关于PHP的运行环境，主要有以下五种Web Server，包括Apache、IIS、Lighttpd、Zeus、Nginx Apache
Apache 2.x版本下提供了Prefork模式和Worker模式，鉴于PHP的第三方扩展函数库很多都是不支持多线程的，所以PHP官方和Zend官方强烈推荐不要使用Worker模式，而是要么继续使用Apache 1.3.x，要么使用 Apache 2.x的Prefork模式在Apache下，可以使用CGI方式、Apache模块方式（mod_php）、 FastCGI方式（mod_fastcgi和mod_fcgd）三种方式来运行PHP，其中 mod_php最稳定，mod_fcgd性能最高，需要说明的是FastCGI方式运行 PHP存在一定风险，经常性会宕掉，无论是mod_fcgd还是 mod_fastcgi。目前Linux/FreeBSD/Solaris绝大部分PHP网站使用 Apache+Prefork+Mod_PHP方式，包括Qzone和QQ会员的所有PHP项目。

基于LAMP技术的微生物病原诊断研究进展

立的 LAMP 检测结果，在检出率以及检测时限上，后者更加具备优势［2］。在植物病毒的应用上，各大研究机构陆续建立 LAMP 检测。汤等通过建立辣椒黄脉病毒ＲT － LAMP［3］，证明其与ＲT － PCＲ相比，在使用成本、检出率上性能更优，操作简便，更适应基层检测需求，该点也被多家实验机构所证实。在细菌的检测方面，LAMP 技术在副溶血弧菌［4］，大肠埃希菌，猪链球菌等多类菌种的检测应用上体现较好的发展潜力，具备较高的研究价值。LAMP 技术在检测时间，人力耗费以及相关准确度上，与 PCＲ，ＲT － PCＲ相比表现出较好的效果，对多菌种的三重 LAMP 技术构建实验，有结果显示检出率可高达 PCＲ检测的 1 000 倍。在虫媒螺旋体等地区病原大面积普查上，LAMP 技术操作简单，却有着重要的指示价值。
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Industrial & Science Tribune 2018 （17） 1
产业与科技论坛 2018 年第 17 卷第 1 期
基于因子分析的河北省公共服务均等化水平评价研究
一、引言临床常见微生物病原主要为细菌，病毒和寄生虫三大类。鉴于社会发展过程中，各类病原变异株的出现，现代医学诊治技术已将诊疗目标延伸至分子诊疗层次。传统检测技术多见 ELISA、PCＲ、ＲT － PCＲ。在实际的临床应用中，上述三项技术表现出较多弊端： ELISA 的使用需基于单克隆抗体，灵敏度较低，诊断误差较大； PCＲ法，易因交叉感染而造成假阳性，影响诊疗效果；误差较小，灵敏度较为准确的ＲT － PCＲ则因为其较高的使用成本，难以适用于基层检测。相较三者，LAMP 技术具有干扰性强，具有较高特异性，且突破了传统技术在仪器昂贵等成本上的限制，适用于野外采样等快速检测，其应用普及在疫病防控，病原检测研究等方面具有重要意义。二、技术简介 LAMP，全名为环介导等温扩增技术，是一项基于核酸扩增原理的分子技术。目前除了原有 LAMP 技术，还有双重 LAMP，三重 LAMP，ＲT － LAMP 等应用，现易广泛应用于生命科学的 DNA 与ＲNA 领域。传统检测技术多见 ELISA、PCＲ和ＲT － PCＲ，但在实际的临床应用中，传统三项技术表现出诸多弊端： ELISA 的使用需基于单克隆抗体，灵敏度较低，诊断误差较大； PCＲ法，易因交叉感染而造成假阳性，影响诊疗效果；误差较小，灵敏度较为准确的ＲT － PCＲ则因为其较高的使用成本，难以适用于基层检测。相较三者，LAMP 技术具有干扰性强，具有较高特异性，且突破了传统技术在仪器昂贵成本上的限制，适用于野外采样等快速检测，其应用普及在疫病防控，病原检测研究等方面具有重要意义。三、LAMP 技术在病毒，细菌检测中的应用国内赵等应用 LAMP 技术，建立了肠道腺病毒的肉眼可视化检测［1］，广西大学梁等比对家蚕 BmNPV 常规 PCＲ与建

《LAMP程序设计》教学大纲

《LAMP程序设计》教学大纲LAMP（Linux + Apache + MySQL + PHP）是一种常用的Web开发平台，其中PHP是一种基于服务器端的脚本语言，用于动态网页的开发。

本文将介绍一份LAMP（PHP）程序设计的教学大纲。

一、课程简介1.课程名称：LAMP（PHP）程序设计2.课程学时：40学时，分为理论课和实验课3. 课程目标：培养学生使用LAMP平台进行Web开发的能力，掌握PHP语言的基本语法和常用技术，能够设计、开发和维护PHP网站。

二、课程内容1. Linux操作系统介绍（4学时）- Linux简介及发行版本- Linux基本命令和常用工具- Linux文件系统和权限管理2. Apache服务器配置和运维（8学时）- Apache服务器的安装和配置-虚拟主机的配置和管理- Apache日志分析和性能优化3.MySQL数据库设计和管理（12学时）-MySQL数据库的安装和配置-数据库设计和表结构设计-基本SQL语句和数据操作-MySQL性能优化和数据备份4.PHP语言基础（8学时）-PHP语言的基本语法和数据类型-PHP的流程控制和循环结构-PHP的函数和数组操作5. PHP的数据库操作和Web开发（8学时）-PHP连接MySQL数据库-使用PHP进行数据库的增删改查操作-PHP的会话管理和表单处理- PHP与HTML、CSS、JavaScript的交互6.PHP的面向对象编程（8学时）-PHP的面向对象编程概念和特点-PHP的类和对象的定义-PHP的继承和多态-PHP的异常处理和错误调试三、教学方法1.理论课程采用讲授和讨论相结合的方式，重点介绍相关知识点和技术原理。

2. 实验课程通过实践操作，让学生掌握Linux、Apache、MySQL和PHP的安装、配置和使用方法，并进行相关的编程练习和项目开发。

3.教师鼓励学生自主学习和研究，提供实例和案例分析，引导学生进行综合实践和创新。

LAMP名称简介

对于大流量、大并发量的网站系统架构来说，除了硬件上使用高性能的服务器、负载均衡、CDN等之外，在软件架构上需要重点关注下面几个环节：使用高性能的操作系统（OS）、高性能的网页服务器（Web Server）、高性能的数据库（Database）、高效率的编程语言等。下面我将从这几点对其一一讨论。
使用nginx或Apache负载PHP，PHP使用fastcgi方式运行，效率较高。
3、nginx + Apache + PHP + eAccelerator
此方案综合了nginx和Apache的优点，使用Apache负载PHP，nginx负责解析其他Web请求，使用nginx的rewrite模块，Apache端口不对外开放。
LAMP包的脚本组件中包括了CGIweb接口，它在90年代初期变得流行。这个技术允许网页浏览器的用户在服务器上执行一个程序，并且和接受静态的内容一样接受动态的内容。程序员使用脚本语言来创建这些程序因为它们能很容易有效的操作文本流，甚至当这些文本流并非源自程序自身时也是。正是由于这个原因系统设计者经常称这些脚本语言为胶水语言。
PHP，Perl 或 Python
PHP 是一种编程语言最初设计生产动态网站。PHP 是主要用于服务器端的应用程序软件。Perl 和 Python 类似。
来源历史
Michael Kunze在一篇为德国电脑杂志c't（1998，第12期，230页）而写的文章中使用了缩略语LAMP。这篇文章意在展示一系列的自由软件成为了商业包的替换物。由于IT世界众所周知的对缩写的爱好，Kunze提出LAMP这一容易被市场接受的术语来普及自由软件的使用。
LAMP是指（Linux+Apache+Mysql/MariaDB+Perl/PHP/Python）一组通常一起使用来运行动态网站或者服务器的自由软件，本身都是各自独立的程序，但是因为常被放在一起使用，拥有了越来越高的兼容度，共同组成了一个强大的Web应用程序平台。随着开源潮流的蓬勃发展，开放源代码的LAMP已经与J2EE和.Net商业软件形成三足鼎立之势，并且该软件开发的项目在软件方面的投资成本较低，因此受到整个IT界的关注。从网站的流量上来说，70%以上的访问流量是LAMP来提供的，LAMP是最强大的网站解决方案。

LAMP 环介导等温扩散英文简介

1.Requirements for primers in the LAMP reaction
2.The effect of the presence of genomic DNA on sensitivity
The final products are a mixture of stem–loop DNAs with various stem lengths and cauliflower-like structures with multiple loops formed by annealing between alternately inverted repeats of the target sequence in the same strand.
0bp
250bp 100bp
M: DNA Marker DL2000 1 : 65℃ 2：63℃ 5: 无模板 3 : 61℃ 4: 59℃ 左：对照右：LAMP 3号管
Materials and Methods
• Primer
Reaction mixture for LAMP
• LAMP was carried out in a total 25 µ reaction l mixture containing:
0.8 µ each FIP and BIP, 0.2 µ each F3 and B3, 400 µ each dNTP, M M M 1 M betaine (Sigma), 20 mM Tris–HCl (pH 8.8), 10 mM KCl, 10 mM (NH4)2SO4, 4 mM MgSO4, 0.1% Triton X-100 and the specified amounts of double-stranded target DNA.

LAMP方法及其在病原微生物检测中的应用_吴禹熹

Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ａｓａｎｅｗｍｏｌｅｃｕｌａｒｂｉｏｌｏｇｙｔｅｃｈｎｉｑｕｅ，ｔｈｅｌｏｏｐ－ｍｅｄｉａｔｅｄｉｓｏｔｈｅｒｍａｌａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ（ＬＡＭＰ）ｈａｓｔｈｅａｄｖａｎｔａｇｅｓｏｆｅａｓｙｔｏｏｐｅｒａｔｅ，ｎｏｎｅｅｄｏｆｓｐｅｃｉａｌｉｚｅｄｄｅｖｉｃｅｓ，ｌｏｗｃｏｓｔ，ｓｈｏｒｔｒｅ－ａｃｔｉｏｎｔｉｍｅａｎｄｓｏｏｎ．Ｉｔｈａｓｈｉｇｈｅｒｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙａｎｄｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙｔｈａｎｔｈｅｃｏｍｍｏｎｍｏｌｅｃｕｌａｒｂｉｏｌｏｇｙｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ．Ｉｔｈａｓｂｅｅｎｗｉｄｅｌｙｕｓｅｄｉｎｒａｐｉｄａｎｄｅａｒｌｙｉｎｆｅｃｔｉｏｎｂｙｖａｒｉｅｔｙｏｆｐａｔｈｏｇｅｎｓｉｎｃｌｕｄｉｎｇｂａｃｔｅｒｉａ，ｖｉｒｕｓａｎｄｍｙｃｏｐｌａｓｍａｓ．ＷｅｒｅｖｉｅｗｅｄｔｈｅｒｅｓｅａｒｃｈｐｒｏｇｒｅｓｓｏｎＬＡＭＰｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓａｎｄｔｈｅｄｉａｇｎｏｓｔｉｃａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓｉｎｔｈｅｂａｃｔｅｒｉａ，ｖｉｒｕｓｅｓ，Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａａｎｄｏｔｈｅｒｐａｔｈｏｇｅｎｓａｔｈｏｍｅａｎｄａ－ｂｒｏａｄ，ｓｏａｓｔｏｕｎｄｅｒｓｔａｎｄｔｈｅａｄｖａｎｔａｇｅｓａｎｄｄｉｓａｄｖａｎｔａｇｅｓｏｆＬＡＭＰａｎｄａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓｉｔｕａｔｉｏｎ，ａｎｄｐｒｏｖｉｄｅａｒｅｆｅｒｅｎｃｅｆｏｒｉｔｓｗｉｄｅｓｐｒｅａｄａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｉｎｔｈｅｆｕｔｕｒｅ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｌｏｏｐ－ｍｅｄｉａｔｅｄｉｓｏｔｈｅｒｍａｌａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ（ＬＡＭＰ）；ｐａｔｈｏｇｅｎ；ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ

实验丨LAMP荧光探针方案最佳伴侣,非FEN1莫属!

LAMP荧光探针方案最佳伴侣，非FEN1莫属!环介导等温扩增(LAMP) 技术是一种在恒温条件下进行的DNA扩增技术之一，具有高灵敏度、扩增快速等优点，结合微流控技术和多种终点检测手段方案，在医学诊断、生物安全、农业和环境监测等领域都有广泛的应用前景。

但基于LAMP扩增技术需要精准检测，还是荧光探针法更为合适，目前市面产品，某些厂商推出的主要基于Taqman探针法，而殊不知Bst DNA Polymerase具有极强的链置换功能，即便是具有5’端外切功能的Bst DNA Polymerase,LF也是会先推起退火上去的探针，而先非切割，导致荧光信号曲线不能真实反映扩增过程，所以导致LAMP扩增跑胶结果与荧光曲线表现大相径庭。

那么我们思考发现探针退火模板后，被Bst DNA Polymerase遇到推起，但在那一瞬间会形成一个瓣状结构flap，另一方面FEN1正好具有切割5’flap的酶学功能，这两者之间似乎可以联系在一起。

接下来的一些实验和理论依据更加佐证了这两者具有极高的匹配度。

1.热稳定性实验结果表明，FEN1在65℃下具有最高活性(Table 1)Table 1. 不同温度下FEN1活性TEMPERATURE ACTIVITY%25°C< 1 %37°C< 5 %45°C20 %50°C50 %60°C90 %65°C100 %70℃95 %2.我们再基于扩增引物设计探针，后续扩增过程中Bst DNA Polymerase就会遇到已形成二级结构的引物型探针，将其推起形成5’flap结构不就可以被FEN1直接切割，从而发出荧光(Fig. 1)。

Fig. 1 LAMP结合FEN1荧光探针检测原理示意图FEN1 催化分叉双链DNA 底物位点5' DNA flaps的切割，形成5'磷酸末端，其切割产物，可以通过DNA 连接酶连接，以产生双链DNA。

Web应用开发的黄金组合—LAMP

Zigbee是一种新兴的短距离、低速率无线网络技术，它是一种介于无线标记技术和蓝牙之间的技术方案。它有自己的无线电标准，在数千个微小的传感
器之间相互协调实现通信。这些传感器只需要很少的能量以接力的方式通过无线电波将数据从个传感器传到另一个传感器，所以它们的通信效率非常高。
第五章
5.1ZigBee介绍
第五章
5.1ZigBee介绍
5.1.2 ZigBee的应用
1. 智能家居
家里可能都有很多电器和电子设备，如电
灯、电视机、冰箱、洗衣机、电脑、空调等等，可能还有烟雾感应、报警器和摄像头等设备，以前我们最多可能就做到点对点的控制，但如果使用了ZigBee技术，可以把这些电子电器设备都联系起来，组成一个网络，甚至可以通过网关连接到Internet，这样用户就可以方便的在任何地方监控自己家里的情况，并且省却了在家里布线的烦恼。工业控制：工厂环境当中有大量的传感器和控制器，可以利用ZigBee技术把它们连接成一个网络
送，发送的每个数据分组都必须等待接收方的确认消息，并进行确认信息
回复。若没有得到确认信息的回复就表示发生了冲突，将重传一次。采用
这种方法可以提高系统信息传送的可靠性。ZigBee为需要固定带宽的通信
业务预留了专用时隙，避免了发送数据时竞争和冲突。同时，ZigBee针对
时延敏感的应用做了优化，通信时延和休眠状态激活的时延都非常短。
PART 02
Apache服务器
第五章
5.1ZigBee介绍
5.1.1 什么是ZigBee
1. ZigBee简介
其特点是近距离、低复杂度、自组织、低功耗、低数据速率。主要适合
用于自动控制和远程控制领域，可以嵌入各种设备。简而言之，ZigBee就是一种便宜的，低功耗的近距离无线组网通讯技术。ZigBee是一种低速短距离传输的无线网络协议。ZigBee协议从下到上分别为物理层(PHY)、媒体访问控制层(MAC)、传输层(TL)、网络层(NWK)、应用层(APL)等。其中物理层和媒体访问控制层遵循IEEE 802.15.4标准的规定。

lamp原理

lamp原理
气体放电灯（Lamp）原理是利用气体放电产生光的现象。

该原理基于气体分子在电场作用下的激发跃迁和复合过程。

当电压施加到灯的两个电极上时，形成了一个电场。

在普通的气体放电灯中，灯内充满了惰性气体（如氩气、氖气等）。

气体分子在电场的作用下，被激发到高能级态。

当分子从高能级态退回到低能级态时，会释放出光子。

这些光子具有特定的能量和频率，从而产生可见光或紫外光的辐射。

在灯内部的一个电极上覆盖有电子发射物质（如石墨），这个电极称为阴极。

当电压升高到一定程度时，阴极表面的电子被电场加速并发射出来，形成电流。

这些发射出的电子被称为自由电子。

自由电子沿着电场方向移动，通过碰撞或电场的作用，会将气体分子激发到高能级态。

激发态的分子非常不稳定，会迅速退回到低能级态，释放出光子。

这些光子会沿着各个方向散射，并最终通过灯体外壳发出光线。

普通气体放电灯中的光谱是由气体分子的能级结构决定的。

不同的气体和气体混合物的能级结构不同，因此其辐射的光谱也不同。

例如，氖气灯产生的是黄光，而氩气灯则发出紫色光。

总结来说，气体放电灯原理是利用气体分子在电场作用下被激发和复合过程中释放出的光子产生光。

通过控制电压和气体类型，可以改变光源的颜色和亮度。

LAMP实验简介

通过LAMP实现DNA的线性扩增一、LAMP 原理60-65℃是双链DNA复性及延伸的中间温度，DNA在65℃左右处于动态平衡状态。

因此，DNA在此温度下合成是可能的。

利用4种特异引物依靠一种高活性链置换DNA聚合酶。

使得链置换DNA合成在不停地自我循环。

扩增分两个阶段。

第1阶段为起始阶段，任何一个引物向双链DNA的互补部位进行碱基配对延伸时，另一条链就会解离，变成单链。

上游内部引物FIP的F2序列首先与模板F2c结合，在链置换型DNA聚合酶的作用下向前延伸启动链置换合成。

外部引物F3与模板F3c结合并延伸，置换出完整的FIP连接的互补单链。

FIP上的F1c与此单链上的Fl为互补结构。

自我碱基配对形成环状结构。

以此链为模板。

下游引物BIP与B3先后启动类似于FIP和F3的合成，形成哑铃状结构的单链。

迅速以3' 末端的Fl区段为起点。

以自身为模板，进行DNA合成延伸形成茎环状结构。

该结构是LAMP基因扩增循环的起始结构。

第2阶段是扩增循环阶段。

以茎环状结构为模板，FIP与茎环的F2c区结合。

开始链置换合成，解离出的单链核酸上也会形成环状结构。

迅速以3’末端的B1区段为起点，以自身为模板。

进行DNA合成延伸及链置换．形成长短不一的2条新茎环状结构的DNA，BIP引物上的B2与其杂交。

启动新一轮扩增。

且产物DNA长度增加一倍。

在反应体系中添加2条环状引物LF 和LB，它们也分别与茎环状结构结合启动链置换合成，周而复始。

扩增的最后产物是具有不同个数茎环结构、不同长度DNA的混合物。

且产物DNA为扩增靶序列的交替反向重复序列。

二、实验流程二、阶段实验及需要解决的问题(一) 实验准备阶段1、引物设计2、模板中引入合适的酶切位点3、不同梯度拷贝数模板的准备4、反应仪器的准备5、具有链置换活性的DNA聚合酶的选择6、扩增产物的检测方法7、扩增产物量的检测(二) 实验阶段1、反应体系的确定2、模板浓度的优化3、反应时间的优化4、扩增产物的检测5、以PCR的扩增作为对照三、具体实验方案(一) 引物的设计LAMP引物设计的在线网站(http://primerexplorer.jp/e/)，只要导入靶基因就能自动生成成组引物。

LAMP技术及应用

琼脂糖凝胶电泳法
由LAMP原理可知，LAMP反应的最终扩增产物是茎环DNA组成的混合物，即有若干倍茎长度的茎环结构和类似花椰菜的结构。因此，LAMP扩增产物在2％的琼脂糖凝胶糖上呈现的是典型的梯状条带。（图A）
肉眼观察法
在LAMP反应过程中，可以通过产生的副产物焦磷酸镁白色沉淀的产生来肉眼直接判断扩增反应是否进行。（图B）

LAMP法使用的酶
链置换型DNA聚合酶: Bst DNA Polymerase
扩增对象为双链DNA时，其中一条链解离的同时进行链延长。 LAMP法使用最适温度65℃的聚合酶。
LAMP法的引物设计
LAMP法的原理
LAMP法的原理
LAMP法所需的试剂
LAMP法常规操作步骤
LAMP法的检测方法
LAMP法在结核菌检测中的应用靶标限定: 结核分枝杆菌复合群
临床上感染人类的是结核分枝杆菌复合群，包括结核分枝杆菌、牛分枝杆菌、田鼠分枝杆菌、非洲分枝杆菌、卡氏分枝杆菌。对检测对象的准确限定能避免假阳性过高而增加治疗成本，长远来说，更有利于避免耐药性的产生。 gyrB基因作为结核分枝杆菌重要的功能基因，在复合群进化过程中非常保守，LAMP法检测即以gyrB基因作为靶标。
比传统PCR大大节省了时间和实验操作步骤。
LAMP法和其他PCR法的比较
LAMP法和其他PCR法的比较
技术特点
特异性高 4条引物靶向目标基因6个区段，特异性高于PCR和qPCR 灵敏度高扩增模板可低至每测试10拷贝或更少。检测时间短恒温扩增，省却温度循环，扩增时间60min。设备简易，可同时检测多批样本不需特定或高端检测仪器，恒温设备即可，例如水浴锅，可以随时放入后续批次样本。

LAMP检测综述戴婷婷

L A M P检测综述戴婷婷集团标准化办公室：[VV986T-J682P28-JP266L8-68PNN]环介导等温扩增技术的应用研究进展戴婷婷1，陆辰晨2，郑小波2（1南方现代林业协同创新中心，南京林业大学林学院，江苏南京210037；2南京农业大学植物保护学院，江苏南京210095；）摘要：环介导等温扩增技术（Loop–mediated isothermal amplification，LAMP）采用特异识别靶序列上6个位点的4条引物及一种具有链置换活性的DNA聚合酶，在等温条件（60℃~65℃）下60 min左右进行核酸扩增，其扩增效率可达到109~1010个数量级，具有特异性强、灵敏度高、等温、操作简单和检测结果快速等优点，已广泛应用于病毒、细菌、寄生虫、菌物等病原物的检测中。

本文对LAMP技术原理及其在病原物检测中的应用做了简要综述。

关键词：环介导等温扩增技术；应用；检测；病原物中图分类号：文献标志码：文章编号：Application Research Progress Of Loop-Mediated IsothermalAmplificationDAI Ting-ting1; LU Chen-chen2; ZHENG Xiao-bo2(1Southern China Collaborative Innovation Center of Sustainable Forestry, College of Forestry, Nanjing Forestry University, Nanjing, Jiangsu 210037, China；2College of Plant Protection, Nanjing Agricultural University, Nanjing 210095, China)Abstract：A new method of gene amplification called Loop-mediated isothermal amplification (LAMP) has been developed in recent years. LAMP assay possess characteristic of simpleness, fleetness and high specificity. The whole procedure is very simple and rapid which can be completed in less than 80 min under isothermal conditions employing a set of six specially designed primers of a target gene, by incubating all the reagents in a single tube. LAMP does not require a thermal cycler and can be performed simply with a heating block or water bath. Considering the advantags of rapid amplication, simple operation and easy detection, LAMP has potential applications for diagnosis as well as surveillance of infectious diseases in developing countries without requiring sophisticated equipment or skilled personnel. LAMP has been widely applied to the detection of such pathogens as virus，bacteria, parasite, fungi etc. This article summarized the principle of LAMP，and the application in detection of pathogenic microorganisms.KEY WORDS：Loop-mediated isothermal amplification; application; detection; pathogenic microorganisms核酸扩增技术是分子生物学领域的一项重要的研究手段，核酸扩增技术主要包括常规PCR 为基础的变温扩增技术以及等温扩增技术两大类。

LAMP、DISPLAY制程简介

※波長(Wave Length,WL) ※順向電壓(Forward Voltage,Vf) ※原Open,Short,Vf,Ir電性項目一並測試
晶片擴晶框晶固晶固檢推力檢查
銀膠解凍攪拌
支架
金線
TPX模裝模清模噴離模劑預熱灌膠
離模劑
膠配膠攪拌抽氣
電鍍液/錫粒
入庫
烘烤
拉力檢查銲線插支架烤短
烘烤
推力檢查鋁線
銲線
拉力檢查
●測試
依PCB腳位進行電性測試與光學特性檢驗。
18 17 16 15 14 13 12 11 10
1
2
3
4
5
6
7
8
9
測試
●電性測試項目
※開路(Open)
※短路(Short) ※順向電壓(Forward Voltage,Vf) ※漏電流(Reverse Current,Ir )
壓蓋
烘烤
後測
蓋印碼
簡介結束
晶片
●框晶
將晶片膠帶繃緊於框晶環上，以利固晶。
框晶環黏晶膠帶
晶片
擴晶
框晶
●固晶(點銀膠)
膠量控制塊銀膠(Silver Conductve Epoxy) 點膠頭銀膠
支架銀膠轉軸
支架
點銀膠
銀膠
解凍
攪拌
●固晶
吸嘴晶片
頂針 (Ejector)
晶片
固晶
固檢
烘烤
推力檢查
●銲線(Ball Bond)
1E 1D 1C 1DP 2E
2D 2G 2C 2DP
後測
●電性測試項目

环介导等温扩增技术(LAMP)在肉源性检测中的应用及前景展望

中国牛业科学2019,45(1) $3-38,00China Cattle Science综述环介导等温扩增技术(L A M P)在肉源性检测中的应用及前景展望娄宇飞，魏昌盛，胡瑞芳，王洪宝，昝林森"(西北农林科技大学动物科技学院，陕西杨凌712100)摘要：近年来，肉类掺假事件时有发生，给消费者和相关食品安全监督部门造成一定的困扰，同时威胁着消费者的身体健康。

传统意义上的检测方法如酶联检测法及P C R法均存在一定的局限性，限制其在市场上进行快速的肉类鉴别。

环介导等温扩增（LAM P)是一种新型核酸扩增技术，其灵敏度高、特异性强，不依赖专业仪器设备，操作简单，已开始被广泛应用于食源性微生物的检验。

本文从L A M P原理出发，阐述了 L A M P技术在肉源性检测中的应用，对LA M P技术的发展前景进行了展望。

关键词：环介导等温扩增（LAM P);肉源检测；应用；展望中图分类号：S823.8+5 文献标识码：A文章编号#001-9111(2019)01-0033-06从2013年初欧盟的“马肉风波”开始，国内相继爆出了“牛肉香精假牛肉”、“鸭肉冒充羊肉”等一系列肉类制品原材料掺假案件。

仅2013年3月，内蒙古包头腾达食品有限公司制售假劣食品案，案值便达600余万元，其生产的假劣牛肉干、羊肉干销往全国15个省区市，足可见掺假肉在全国乃至全世界的 “盛行”。

现阶段，肉类鉴别技术依旧以普通P C R和荧光P C R为主，但是由于实验仪器昂贵且体积较大，这些方法只能局限于实验室中，无法满足市场上对于快速、简便鉴别的要求。

2000年，日本荣研株式会Notomi等人[1]提出了一种名为L A M P的新型核酸扩增技术，由于其灵敏度高，特异性强，时效快，操作简单等优势迅速应用于食源性微生物的检验。

之后经过Nagamine等人[]的改进，迅速受到了广泛的关注，目前被广泛应用于病原微生物[35]、胚胎性别鉴定[7]等方面。

光学元件简介

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2.日光燈(螢光燈)
發光原理:電流經過水銀蒸汽放電產生紫外光,紫外光被塗於管內之磷吸收再發射出白光
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3.綠光
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3-1.綠光
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6.UV 燈 (紫外燈)Ultra Violet 紫外線燈的製造均採用低壓水銀(汞)蒸氣的填充再加上電弧照射而
激發產生260nm左右的波長作殺菌用紫外線波長:近 380 ~ 315nm中 315 ~ 280nm 遠紫外線 280 ~ 100nm
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四、Laser.( Light Amplification by the Stimulated
Emission of Radiation 的縮寫 )
雷射條件
1.活性介質
產生雷射的基礎物質，也是各種雷射命名的由來，形式上可以是固體、氣體、或液體，如雅各雷射、二氧化碳雷射、染料雷射等等。活性介質不同，發出的光譜也不同，從紫外線、紅外線到各種可見光都有，
a.機器視覺 b.用途:定位
檢測,量測,監視 c.特點
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D Camera 依 CCD chip 大小可分1/3′， 1/2′ ， 2/3′ 。黑白 CCD Camera 又分EIA型 (768hX494v)，CCIR型 (752X582) 。彩色 CCD Camera 又分NTSC型 (768hX494v)，PAL型 (752X582) 。 D Camera 輸出不正常(或無影像)故障排除 a.訊號線不正常(毀損斷線，脫落或未接在 PC 內部之影像截取卡或Video

lamp技术综述

LAMP简介环介导等温扩增法(1oop—mediated isothermal amplification，LAMP)，是由日本的荣研株式会社的Notomi日等人2000年开发出来的一种新型的核酸扩增方法，其特点是针对靶基因的6个区域设计4种特异引物，在链置换DNA聚合酶(Bst DNA polymerasc)的作用下，60--65℃恒温扩增，15-60rain左右即可核酸扩增，效率可达109～10m个数量级，具有操作简单、特异性强、产物易检测等特点。

在DNA合成时，从脱氧核酸三磷酸基质(dNTPs)中析出的焦磷酸根离子与反应溶液中的镁离子反应，产生大量焦磷酸镁沉淀，呈现白色。

因此，可以把浑浊度作为反应的指标，只用肉眼观察白色浑浊沉淀，就能鉴定扩增与否，而不需要繁琐的电泳和紫外观察。

由于LAMP反应不需要PCR仪和昂贵的试剂，有着广泛的应用前景。

LAMP原理利用Bst大片段DNA聚合酶和根据不同靶序列设计的两对特殊的内引物(FIP由F1C和F2组成；BIP由BIC和B2组成)、外引物(F3和B3)，特异地识别靶序列上的6个独立区域。

FIP引物的F2序列与靶DNA上互补序列配对，启动循环链置换反应。

F3引物与模板上的F3C区域互补，引起合成与模板DNA 互补的双链，从而挤掉FIP引起的DNA单链。

与此同时，BIP引物与被挤掉的这条单链杂交结合，形成的环状结构被打开，接着，B3引物在BIP外侧进行碱基配对，在聚合酶的作用下形成新的互补链。

被置换的单链DNA两端均存在互补序列，从而发生自我碱基配对，形成类似哑铃状的DNA结构。

LAMP反应以此DNA结构为起始结构，进行再循环和延伸，靶DNA序列大量交替重复产生，形成的扩增产物是有许多环的花椰菜形状的茎一环结构的DNA，在恒温条件65℃左右进行扩增，在45～60min的时间里扩增可达到109～1010数量级。

LAMP优缺点LAMP方法优点：灵敏度高（比传统的PCR方法高2～5个数量级）；反应时间短（30～60min就能完成反应）；临床使用不需要特殊的仪器（试剂盒研发阶段推荐用实时浑浊仪）；操作简单（不论是DNA还是RNA，检测步骤都是需将反应液、酶和模板混合于PCR管中，置于水浴锅或恒温箱中63℃左右保温30～60min，肉眼观察结果）。