20×SSC缓冲液使用说明

双链DNA变性缓冲液

北京雷根生物技术有限公司
双链DNA 变性缓冲液
简介：
双链DNA 变性缓冲液又称为中性转移缓冲液，由1.5M NaCl 、微量NaOH 等组成，不含蔗糖，可用于核酸杂交等，尤其适用于Southern blot 实验。

本试剂仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。

组成：
操作步骤(仅供参考)：
1、按实验具体要求操作。

注意事项：
1、如果每次的使用量很小，可以适当分装后再使用。

2、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

有效期： 12个月有效。

相关：
编号名称 NH0079 Storage 双链DNA 变性缓冲液 100ml RT 使用说明书 1份编号名称
DG0005 糖原PAS 染色液
NE0011 CTAB 抽提液
NH0043 SSC 缓冲液(20×,pH7.0)
NH0053 变性鲑鱼精DNA(10mg/ml)
NR0001 DEPC 处理水(0.1%)
PW0082 丽春红S 染色液(1×Ponceau S)
TC0699 葡植物总糖和还原糖检测试剂盒(硝基水杨酸法)。

Southern杂交实验

Southern 杂交实验Southern 杂交的原理是将待检测的DNA分子用限制性内切酶消化，通过琼脂糖凝胶电泳进行分离，继而将其变性并按照其在凝胶中的位置转移到硝酸纤维素薄膜或尼龙膜上，固定后再与同位素或其他标记物标记的DNA探针进行反应。

如果待测物中含有与探针互补的序列，则二者通过碱基互补原理进行结合，游离的探针洗涤后用显影或其他合适的技术进行检测，从而显示出待检的片段及其相对大小。

一、溶液配制(1)20 X SSC(1000 mL) :组分浓度 3.0M的Nacl，0.3M的柠檬酸钠NaCl 175.32g柠檬酸钠88.26gNaOH调PH值到7.0，高温高压灭(2)洗涤缓冲液Washing buffer 200ml组分浓度：0.1M Maleic acid, 0.15M Nacl; pH 7.5(20℃); 0.3%(v/v) Tween20.Maleic acid：2.32gNacl： 1.75gTween20 0.6mlNaOH固体约1.7g调Ph值7.5(3)马来酸缓冲液Maleic acid buffer 200ml组分浓度：0.1M Maleic acid, 0.15M Nacl; pH 7.5 (20ºC)Maleic acid：2.32gNacl： 1.75gTween20 0.6mlNaOH固体约1.7g调Ph值7.5(4)检测缓冲液Detection buffer 100ml组分浓度：0.1M Tris-HCl, 0.1M Nacl, pH 9.5(20ºC)Tris 1.21g,NaCl 0.584gMgCl2 1.01g调ph值到9.5(5)变性溶液(500 mL)： 1 mol／L NaCl (43.83 g)， 0.5 mol／L NaOH (10 g)，(6)中和溶液(500 mL)：0.5 mol / L Tris (30.27 g)，3 mol／L NaCl (87.66 g)，用1 mol／L HCl调(7)5 × TBE (250 mL)：13.5g Tris 6.9g硼酸, 0.9 g EDTA-Na2，定容250 mL(8)6 ×溴酚蓝载样液：0.25 ％溴酚蓝，40 ％蔗糖(9)4 mol／L EDTA 100 mL(10)1M Tris-HCl (pH 8.0): 称取12,。

生物化学实验常用缓冲液的配制方法

生物化学实验常用缓冲液的配制方法1、0.2mol/L 磷酸缓冲液 *组份浓度0.2mol/L （pH 6.0）*配制量1L*配置方法 1. 称取磷酸氢二钠.12水8.82 g。

2. 称取磷酸二氢钠.2水27.34g。

3. 用去离子水溶解并定容至1L。

室温保存。

注意：此为母液，使用时稀释40倍使用。

2、洗脱液*组份浓度0.15mol/L （含0.15mol/L 氯化钠的0.005mol/L pH 6.0的磷酸缓冲液）*配制量10L*配置方法 1.称取氯化钠87.66g。

2.用0.2mol/L pH6.0的磷酸缓冲液250mL溶解。

3.用去离子水稀释至10L。

室温保存。

3、0.3mol/L 磷酸缓冲液*组份浓度0.3mol/L （pH7.8）*配制量0.5L*配置方法 1.准确称取磷酸氢二钠.12水49.150g。

2.磷酸二氢钠.2水2.000g。

3.用去离子水溶解并定容至0.5L。

室温保存。

注意：此为母液，使用时稀释10 倍使用。

4、0.2mol/L 乙酸缓冲液*组份浓度0.2mol/L （pH4.6）*配制量2L*配置方法 1.准确称取乙酸钠.3水54.44g。

2.加入23mL冰乙酸，溶解。

3.用去离子水溶解并定容至2L。

4℃保存。

5、0.2mol/L 磷酸-柠檬酸缓冲液（pH 2.6、4.6、6.6）*组份浓度0.2mol/L *配制量各1L*配置方法 1.母液A（0.2mol/L 的Na2HPO4溶液）：称取Na2HPO4.12 水143.256g，用去离子水定容至2L。

2.母液B（0.1mol/L 的柠檬酸溶液）：称取柠檬酸.1水42.028g 用去离子水溶解定容至2L。

3. pH2.6、4.6、6.6的三种缓冲液如下表配制：pH值A（mL）B（mL）2.6 109.0 891.04.6 467.5 532.56.6 727.5 272.54.按上表混匀后，4℃保存。

6、20×SSC 缓冲液*配制量1L（pH7.0）*配置方法 1.准确称取175.2g氯化钠。

各种缓冲液配方

三、核酸电泳相关试剂、缓冲液的配制方法50×TAE Buffer (pH8.5)组份浓度2 M Tris-醋酸，100 mM EDTA 配制量 1 L配制方法1.2.3.加入57.1 ml 的乙酸，充分搅拌。

4.加去离子水将溶液定容至l L 后，室温保存。

10×TBE Buffer (pH8.3)组份浓度890 mM Tris- 硼酸，20 mM EDTA 配制量 1 L配制方法l.2.3.加去离子水将溶液定容至l L 后，室温保存。

10×MOPS(3-吗啉基丙磺酸)Buffer组份浓度200 rnM MOPS，20 mM NaOAc，10 mM EDTA 配制量 1 L配制方法1.称41.8 g MOPS，置于1 L 烧杯中。

2.加约700 ml DEPC 处理水，搅拌溶解。

3.使用2 N NaOH 调节pH 值至7.0。

4.5.用DEPC6.用0.45 m 滤膜过滤除去杂质。

7.室温避光保存。

注：溶液见光或高温灭菌后会变黄。

变黄时也可使用，但变黑时不要使用。

溴乙锭(10 mg/ml) 组份浓度10 mg/ml 溴乙锭配制量100 ml 配制方法 1.称量 1 g 溴乙锭，加入到100 ml 容器中。

2.加入去离子水100 ml ，充分搅拌数h 完全溶解溴乙锭。

3.将溶液转移至棕色瓶中，室温避光保存。

4.溴乙锭的工作浓度为0.5 g/ml 。

注意：溴乙锭是一种致癌物质，必须小心操作。

Agarose 凝胶配制方法1. 配制适量的电泳及制胶用的缓冲液（通常是0.5×TBE 或1×TAE）。

2.根椐制胶量及凝胶浓度，准确称量琼脂糖粉，加入适当的锥形瓶中。

3.加入一定量的电泳缓冲液（总液体量不宜超过锥形瓶的50%容量）。

注：用于电泳的缓冲液和用于制胶的缓冲液必须统一。

4.在锥形瓶的瓶封上保鲜膜，并在膜上扎些小孔，然后在微波炉中加热熔化琼脂糖。

加热过程中，当溶液沸腾后，请戴上防热手套。

southern_杂交实验流程

SOUTHERN BLOTTING实验操作流程A.小麦基因组DNA的提取1)采集5g鲜嫩的小麦幼苗，将其剪成2cm左右的片段，用液氮冷冻后在研钵中将其研成粉末（研磨15min左右）。

2)将研磨好的样品转移到预冷的50ml离心管中，加入20ml预热的S buffer，颠倒混匀。

S Buffer成分100mM Tris.Cl pH8.5100mM NaCl50mM EDTA pH8.02％ SDS3)于65℃水浴锅中温育1-2h，并不时轻柔混匀。

4)加入20ml（等体积的）酚/氯仿，轻柔地颠倒混匀，直至呈乳状（注意：保证混匀。

为有效除去蛋白，此步可以重复）。

5)用水平转子离心机以2000rpm的转速离心20-30min。

6)加入等体积的氯仿，轻柔地颠倒混匀，2000rpm离心20min。

7)转移上清到1个灭菌的50ml离心管中，加入0.6倍体积的异丙醇，颠倒混匀，室温放置一段时间，用玻璃勾将DNA钩出。

8)用70％的乙醇清洗DNA 2-3次后，将其挑在玻璃钩上晾干，然后溶解在5ml 1×TE中。

9)待DNA完全溶解后接入10μl RNase，于37℃恒温箱中温育1h。

10)加入等体积的酚/氯仿，轻柔颠倒混匀，以2000rpm的转速离心15min。

11)转移上清至1个灭菌的离心管中，加入等体积的氯仿，混匀，以2000rpm的转速离心15min。

12)转移上清至1个灭菌的离心管中，加入1/10 体积 3M pH 5.0的乙酸钠（终浓度为0.3M），混匀后再加入2倍体积95％的乙醇，混匀。

13)用玻璃勾将DNA钩出，然后用70％的乙醇清洗2-3次，晾干后加入1.8-2ml 1×TE溶解。

14)待DNA完全溶解后，取1μL DNA电泳，检测DNA的浓度和完整性。

15)DNA样品可以放在4℃保存备用。

B.小麦基因组DNA的酶切1）通常情况下采用下列酶进行谷类作物DNA分析。

识别6碱基序列的酶识别4碱基序列的酶Apa I Hind III Bam HI Alu I Mbo I Hha ISal I Bgl I Sst I Dde I Msp I Taq IDra I Pvu II Eco RV Hae III Rsa I Hinf IEco RI Xba I2）如果一次酶切DNA的量在10μg左右，一般采用30μL反应体系。

实验操作

免疫沉淀（Immunoprecipitation IP ）美国芝加哥大学分子肿瘤实验室提供一、准备试剂：IP裂解液配制方法（100毫升体积）：50mM Tris-HCl pH 7.5 1M 5ml100mM NaCl 5M 2ml0.5% NP-40 (10% stock) 10ml0.3mM NaVO3 5.52mg50mM Na F 210mg20mM Na Pyrphosphate 892mg1mM PMSF 17.42mg加水至总体积达到100 ml二、实验步骤：（本方法适用于从细胞培养来源的蛋白质）1．将细胞培养液移去，加入裂解液-蛋白酶抑制剂混合液（IP-PI buffer）（T25培养瓶中加入1毫升，T75中加入3毫升），充分裂解后，将混合液转入微量离心管中。

2．冰上放置20分钟，偶尔轻微震荡。

3．4℃下，微量离心机最高速离心5分钟。

将上清液转移至另一微量离心管中。

4．加入30ul protein G- Sepharose beads（与IP-PI buffer 1：1混合）至样品中，4℃下充分混合震荡反应1小时。

5．微量离心机最高速离心1分钟，将上清转移至另一微量离心管中。

6．加入抗需要沉淀的蛋白质的抗体（2-5ug/ 样品），4℃下充分混合震荡反应1小时。

7．加入30ul protein G- Sepharose beads，4℃下充分混合震荡反应1小时。

8．微量离心机最高速离心1分钟，将上清吸弃，收集beads沉淀。

9．沉淀中加入2ul 2-巯基乙醇，煮沸10分钟，离心后取上清，行SDS-PAGE胶电泳及Wester-blotting 检测。

Western Blot(NC膜)重庆医科大学感染病分子生物学实验室一、SDS－PAGE胶电泳1. 75％酒精擦洗洁净玻片及加样梳，组装制胶槽；2. 配制分离胶：1）根据分子量选择分离胶的浓度；2）依次加入ddH2O、30％丙烯酰胺（普通滤纸过滤，避光保存）、1.5MTris－Cl（pH8.8）、10％SDS、10％过硫酸胺、TEMED，充分混匀，将混合液加至双层玻片之间；注意：1、TEMED是促凝剂，加了以后应迅速灌胶；2、分离胶的高度为插上加样梳后梳子下缘下1cm；3）以ddH2O封闭，室温放置1h以上；（可以加大促凝剂和催化剂的量，这样可以在短时间内完成分离胶配制；4）当水和分离胶有了可见的明显界限，倒掉上层水，以滤纸吸尽多余的水分（或将制胶器倾斜用加样枪吸去水即可）；注意：手法轻柔一些，不可损伤分离胶；3. 配制积层胶：1）浓度均为5％，只需选择体积，宁多勿少；2）配制方法同上，灌至平低玻片上缘，插上加样梳，小心不能产生气泡；3）室温放置1h以上；（可以加大促凝剂和催化剂的量，节省时间）注意：1、BioRad的两块板需要分离胶7ml，积层胶3ml；2、此时Tris－Cl为1.0M（pH6.8）；3、加样梳不能做平行移动，只能上下移动；4. 样品处理：1）细菌和细胞离心所得沉淀以PBS（也可以直接加入上样buffer）重悬，体积根据细菌量和细胞数调节；2）以等倍体积2×蛋白上样缓冲液混匀；3）沸水煮3－5分钟；注意：时间不宜过长，尤其是Marker；（Marker参看说明书要求，MBI的比较好，Prome ga的较差）4）离心，取上清加样；5. 电泳：1）电泳装置组装完毕后，加入甘氨酸电泳缓冲液，拔出加样梳；2）依次加样；（Marker最好选用预染型，这样在电泳时就可方便的判断目的蛋白的位置）；3）积层胶电压宜小，90－120V，分离胶可增至120－180V。

PBS磷酸盐缓冲液(20×)

北京雷根生物技术有限公司
PBS 磷酸盐缓冲液(20×)
简介：
平衡盐溶液(Balanced Salt Solution ，BSS)与细胞生长状态下的pH 值、渗透压等环境状态一致，具有维持渗透压、控制酸碱平衡、供给细胞生存代谢所必需的能量和无机盐成分等作用，可满足体外实验中细胞生存并维持一定的代谢的基本需要。

Leagene PBS 磷酸盐缓冲液(20×)主要由磷酸氢二盐、磷酸二氢盐组成，含少量氯化钠，不含钙离子和镁离子，，主要用于免疫组化、组织切片或其他常规用途。

该试剂为20×浓缩液，应稀释为1×使用，稀释后pH 值约为7.2～7.4。

组成：
操作步骤(仅供参考)：
1、用去离子水或蒸馏水稀释为1×使用。

注意事项：
1、 PBS 磷酸盐缓冲液由于不含有钙离子，不易产生沉淀，出现该种情况后，一般置于温浴至沉淀溶解即可, 如果产生较多沉淀应弃用。

2、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

有效期： 12个月有效。

编号名称 IH0145 IH0145 Storage PBS 磷酸盐缓冲液(20×) 500ml 2L RT 使用说明书 1份。

常用缓冲剂

（pH5.2） □配制量 100mL
□配置方法 1. 称取40.8gNaOAc?3H2O置于100～200mL烧杯中，加入约40mL的去离子水搅拌溶解。
2. 加入冰乙酸调节pH值至5.2。
3. 加入去离子水将溶液定容至100mL。
8.0 约42mL
4. 将溶解定容至1L。
5. 高温高压灭菌后，室温保存。
2. 加入约800mL的去离子水，充分搅拌溶解。
3. 按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。
pH值浓HCl
2. 向烧杯中加入约800mL的去离子水，均匀混合。
3. 将溶液定至1L后，高温高压灭菌。
4. 室温保存。
4、3 M 醋酸钠 □组份浓度 3 M 醋酸钠
10、2 N NaOH □组份浓度 2N NaOH
□配制量 100mL
□配置方法
1.量取80mL去离子水置于100～200mL塑料烧杯中（NaOH溶解过程中大量放热，有可能使玻璃烧杯炸裂）。
□配制量 100mL
□配置方法 1. 称取20g Glucose置于100～200mL烧杯中，加入约80mL的去离子水后，搅拌溶解。
2. 加去离子水将溶液定容至100mL。
□配置方法 1. 量取下列溶液，置于1L烧杯中。
1 M Tris-HCl Buffer（pH7.4，7.6，8.0） 100mL
500 mM EDTA（pH8.0） 20mL
6、10 M醋酸铵 □组份浓度 10 M醋酸铵
□配制量 100mL
□配置方法 1. 称量77.1g醋酸铵置于100～200 mL烧杯中，加入约30 mL的去离子水搅拌溶解。
2.加去离子水将溶液定容至100mL。

分子生物学常用缓冲液、试剂和贮存液的配制

分子生物学常用缓冲液、试剂和贮存液的配制1、6*Loading Buffer（DNA电泳用，50ml配方）组分浓度：100mM EDTA, 40%(V/V) 蔗糖, 0.05%（W/V）xylene cyanol FF, 0.05%（W/V）溴酚蓝配制方法：称取25mg溴酚蓝，25mg xylene cyanol FF，5ml 0.5MEDTA，加入约20ml去离子水，加热搅拌，充分溶解，加入20g蔗糖，去离子水定容至50ml。

2、10*PBS（pH7.2～7.4，分子克隆推荐配方）组分浓度：NaCl 137 mmol/L，KCl 27 mmol/L，Na2HPO4 100 mmol/L，KH2PO4 20 mmol/L配置方法：用800ml去离子水溶解80 g NaCl, 2 g KCl，14.4 g Na2HPO4和2.4 g KH2PO4。

用盐酸调节pH 至7.4，加水定容至1 L，高温高压灭菌，室温保存。

3、20*SSC （pH约7.0）组分浓度：300 mmol/L 柠檬酸三钠，3 mol/L 氯化钠配制方法：称取柠檬酸三钠·2H2O 88.23 g，氯化钠175.3 g，加入800 ml去离子水充分溶解，用14 N HCl 调pH为7.0，去离子水定容至1 L，高温高压灭菌后室温保存。

4、10*Tris-甘氨酸转膜液（pH约8.3）1 L组分浓度：0.25 M Tris，1.92 M 甘氨酸配制方法：甘氨酸144.13 g，Tris 30.29 g，去离子水溶解定容至1 L。

使用前，100 ml 10*转膜液，加入200 ml甲醇，700 ml去离子水成为1*转膜液5、10*Tris-甘氨酸-SDS 电泳缓冲液（SDS-PAGE电泳缓冲液，pH约8.6）组分浓度：0.25 M Tris，1.92 M 甘氨酸，1%（W/V）SDS配制方法：称取30.29 g Tris，,144.13 g甘氨酸，5 g SDS，加入800 ml去离子水搅拌溶解，定容至1 L，常温保存。

氯化铵缓冲液(0.2molL,pH8.0-10.0)

北京雷根生物技术有限公司
氯化铵缓冲液(0.2mol/L,pH8.0-10.0)
简介：
氯化铵(Ammonium Chloride)分子量为53.49，CAS 号为12125-02-9，化学式为NH 4Cl 。

氯化铵是一种强电解质，溶于水电离出铵根离子和氯离子，可中和酸性内膜成分,抑制神经鞘氨基的合成，具有多种用途。

氯化铵缓冲液(0.2mol/L,pH8.0-10.0)又称氨-氯化铵缓冲液，由氯化铵、氨水等组成，可根据客户需求在8.0-10.0范围内调pH 值。

组成：
操作步骤(仅供参考)：
1、根据具体实验操作。

注意事项：
1、注意密闭保存，否则易导致pH 值发生变化。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

有效期： 12个月有效。

相关：
编号名称 R00940 Storage 氯化铵缓冲液(0.2mol/L,pH8.0-10.0) 500ml RT 使用说明书 1份编号名称
DC0032 Masson 三色染色液
NH0043 SSC 缓冲液(20×,pH7.0)
NH0053 变性鲑鱼精DNA(10mg/ml)
NR0001 DEPC 处理水(0.1%)
NR0042 RNase A(10mg/ml,DNase free)
PT0013 考马斯亮蓝快速染色液
TC0713 葡萄糖检测试剂盒(GOD-POD 比色法)。

SSC缓冲液的工作原理详解

SSC缓冲液的工作原理详解文章：SSC缓冲液的工作原理详解1. 引言SSC缓冲液（Saline-Sodium Citrate Buffer）是一种常用于生物实验室中的缓冲液，其工作原理是通过调节溶液的pH值和离子浓度，使其在特定条件下维持稳定。

本文将深入探讨SSC缓冲液的工作原理，并分享对该缓冲液的观点和理解。

2. SSC缓冲液的组成SSC缓冲液由盐酸（HCl）、柠檬酸钠（Na3C6H5O7），以及适量的水构成。

这些成分在一定的配比下混合并稀释至特定体积，使得缓冲液能够保持所需的性质和功能。

3. pH调节在SSC缓冲液中，盐酸和柠檬酸钠的存在起到了调节pH值的作用。

盐酸作为强酸，能够降低溶液的pH值，而柠檬酸钠则能够在一定程度上中和盐酸的酸性。

通过调节这两者的比例，可以控制SSC缓冲液的酸碱度，以适应特定的实验条件。

4. 离子浓度调节SSC缓冲液中的离子浓度对于维持DNA或RNA的结构和性质具有重要影响。

较高的盐浓度能够减小核酸分子间的静电斥力，有助于更紧密地结合核酸链。

而较低的离子浓度则有利于酶的活性，从而在某些实验中能够提高反应效率。

通过调节盐酸和柠檬酸钠的浓度，可以实现对SSC缓冲液中离子浓度的调节。

5. 缓冲能力SSC缓冲液还具有良好的缓冲能力，能够在加入其他试剂或发生小幅度酸碱改变时，保持溶液的pH值相对稳定。

这种缓冲能力是由盐酸和柠檬酸钠的混合作用所决定的。

具体而言，盐酸和柠檬酸钠之间的化学平衡能使SSC缓冲液在一定程度上吸收外界的酸碱负荷，从而维持溶液的稳定性。

6. 观点和理解对于SSC缓冲液的工作原理，我认为其重要性在于为实验提供了一个稳定的环境。

通过调节pH值和离子浓度，SSC缓冲液能够提供适宜的条件，使DNA或RNA的提取、杂交或其他分子生物学技术得以顺利进行。

其缓冲能力也起到了保护实验样品的作用，使其不受外界酸碱的影响。

在实际应用中，我发现使用SSC缓冲液能够有效降低实验误差，并提高实验的可重复性。

实验常用试剂缓冲液的配制方法

实验常用试剂、缓冲液的配制方法1、1M Tris-HCl□组份浓度1 M Tris-HCl（pH7.4，7.6，8.0）□配制量1L□配置方法1. 称量121.1gTris置于1L烧杯中。

2. 加入约800mL的去离子水，充分搅拌溶解。

3. 按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。

pH值浓HCl7.4 约70mL7.6 约60mL8.0 约42mL4. 将溶解定容至1L。

5. 高温高压灭菌后，室温保存。

注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH 值随温度的变化差很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。

2、1.5 M Tris-HCl□组份浓度1.5 M Tris-HCl（pH8.8）□配制量1L□配置方法1.称取181.7gTris置于1L烧杯中。

2. 加入约800mL的去离子水，充分搅拌溶解。

3. 用浓盐酸调pH值至8.8。

4. 将溶液定容至1L。

5. 高温高压灭菌后，室温保存。

注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。

3、10×TE Buffer□组份浓度100 mM Tris-HCl，10 mM EDTA （pH 7.4，7.6，8.0）□配制量1L□配置方法1. 量取下列溶液，置于1L烧杯中。

1 M Tris-HCl Buffer（pH7.4，7.6，8.0）100mL500 mM EDTA（pH8.0）20mL2. 向烧杯中加入约800mL的去离子水，均匀混合。

3. 将溶液定至1L后，高温高压灭菌。

4. 室温保存。

4、3 M 醋酸钠□组份浓度3 M 醋酸钠（pH5.2）□配制量100mL□配置方法1. 称取40.8gNaOAc•3H2O置于100～200mL烧杯中，加入约40mL的去离子水搅拌溶解。

2. 加入冰乙酸调节pH值至5.2。

3. 加入去离子水将溶液定容至100mL。

ssc缓冲液的原理

SSC缓冲液的原理什么是SSC缓冲液？SSC缓冲液是一种常用的分子生物学实验缓冲液，全称为Sodium Saline Citrate缓冲液。

它由氯化钠、柠檬酸和柠檬酸钠组成，可以通过调整pH值和离子浓度等因素，为许多分子生物学实验提供合适的环境。

SSC缓冲液在核酸杂交、蛋白质电泳和膜杂交等实验中广泛应用，具有重要的作用。

SSC缓冲液的组成SSC缓冲液主要由以下三种化学物质组成：1.氯化钠（NaCl）：氯化钠是SSC缓冲液中的主要成分，它提供了缓冲液的离子强度和环境稳定性。

适当的离子强度可以促进靶标分子和探针的相互结合，从而提高实验的敏感性和特异性。

2.柠檬酸（Citric acid）：柠檬酸是SSC缓冲液的缓冲剂，它可以调节溶液的pH值，使其维持在合适的范围内。

柠檬酸的酸性可以中和NaCl的碱性，从而抑制杂交反应的非特异性背景信号。

3.柠檬酸钠（Sodium citrate）：柠檬酸钠是SSC缓冲液中的盐类，它提供了额外的离子和缓冲能力。

柠檬酸钠还可以帮助稳定pH值，并促进杂交效率的提高。

SSC缓冲液的工作原理SSC缓冲液通过调节离子浓度和pH值，为分子生物学实验提供了适宜的条件。

它的工作原理主要包括以下几个方面：1. 维持稳定的离子强度SSC缓冲液中的氯化钠提供了维持合适的离子强度的功能。

离子强度的增加可以促进靶标分子和探针之间的结合，从而提高杂交反应的敏感性和特异性。

适当的离子强度还可以帮助稳定靶标分子的二级结构和保持基因表达的稳定性。

2. 调节溶液的pH值柠檬酸作为缓冲剂具有调节溶液pH值的功能。

适宜的pH值可以提供一个合适的环境，使靶标分子和探针之间的杂交反应更为稳定和快速。

柠檬酸的酸性可以中和NaCl的碱性，从而减少非特异性背景信号的产生。

3. 促进杂交效率SSC缓冲液中的柠檬酸钠提供了额外的盐类和缓冲功能。

这些盐类可以增加溶液的离子浓度，从而促进靶标分子和探针的结合。

柠檬酸钠的存在还可以帮助稳定pH 值，并且提高杂交效率。

20×SSC缓冲液使用说明

20×SSC缓冲液使用说明
货号：S1030
规格：100ml、500ml
保存：室温储存，有效期至少18个月。

产品说明：
组分浓度
NaCl3M
柠檬酸钠0.3M
HCl调节pH值至7.0
SSC（saline sodium citrate）缓冲溶液是分子生物学中最标准的印迹和杂交处理溶液，旨在用于各种杂交实验达到变性和清洗的目的，主要成分为氯化钠和柠檬酸钠。

SSC缓冲液中柠檬酸钠起缓冲作用，盐离子（Na）中和核酸主链上的负电荷，使其呈电中性，这样可以使探针和靶序列的结合比较容易进行。

也用于SDS-PAGE电泳分离胶配制。

用于核酸杂交，不同浓度作用不同：常用2×，及0.5×
2×SSC：高盐洗膜，洗去部分非特异性结合的探针。

0.5×SSC：低盐洗膜，增加核酸链的严紧性，使得RNA/DNA之间的排斥力增加。

本产品为20×浓缩液，经过滤高压除菌处理，可根据实验要求使用去离子水直接稀释使用。

注意事项：
1.使用过程中要注意避免溶液被微生物污染。

2.室温条件下保存，如果低温保存溶液，可能会产生沉淀，可摇晃或加热溶解。

相关试剂：
D108050×Denhardt溶液
F8120Formamide甲酰胺
H1060鲑鱼精DNA10mg/ml S103520×SSC PH5.3
S109020×SSC PH7.4
S116020×SSPE PH7.4
D2810DNA退火缓冲液(5×)。

快速电泳缓冲液(20×)使用说明书

特点快速：在高电压条件下，可使您的实验时间缩短；高分辨率：用快速电泳缓冲液配制的 0.8%琼脂糖凝胶的分辨率与用普通电泳缓冲液配制的 2% 琼脂糖凝胶的分辨率相同；高回收率：与 TAE、TBE 琼脂糖凝胶电泳相比，快速电泳缓冲液配制的琼脂糖凝胶电泳中 DNA 的回收率是前者的 2~3 倍。
准备 20×快速电泳缓冲液稀释 20 倍后，得到 1×工作液。
杭州昊鑫生物科技股份有限公司
htpp://www.hzhxபைடு நூலகம்
20×快速电泳缓冲液
快速电泳缓冲液(20×) 20×快速电泳缓冲液是 DNA 电泳的最佳缓冲液。该缓冲液允许在高电压条件下运行，电泳
速度快，条带之间的分辨率高。对于小电泳槽推荐 120V 电压，而中、大电泳槽推荐 200~250V 电压。与 TAE、TBE 缓冲液相比，其电泳速度快、DNA 回收率高。
应用琼脂糖凝胶电泳。推荐电压：20V/cm。
温馨提示 1. 为了您的自身安全，使用试剂前，请做好防护，如穿实验服，带手套等。 2. 打开包装后，请尽快使用，避免细菌生长。
储存温度室温保存。
包装清单货号
HCY007 /
品名 20×快速电泳缓冲液
说明书
包装 100mL 1份
1

实验常用试剂、缓冲液的配制方法.

实验常用试剂、缓冲液的配制方法1、1M Tris-HCl □组份浓度 1 M Tris-HCl （pH7.4，7.6，8.0）□配制量 1L□配置方法 1. 称量121.1gTris置于1L烧杯中。

2. 加入约800mL的去离子水，充分搅拌溶解。

3. 按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。

pH值浓HCl 7.4 约70mL 7.6 约60mL 8.0 约42mL4. 将溶解定容至1L。

5. 高温高压灭菌后，室温保存。

注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。

2、1.5 M Tris-HCl □组份浓度 1.5 M Tris-HCl （pH8.8）□配制量 1L□配置方法 1.称取181.7gTris置于1L烧杯中。

2. 加入约800mL的去离子水，充分搅拌溶解。

3. 用浓盐酸调pH值至8.8。

4. 将溶液定容至1L。

5. 高温高压灭菌后，室温保存。

注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。

3、10×TE Buffer □组份浓度 100 mM Tris-HCl，10 mM EDTA （pH 7.4，7.6，8.0）□配制量 1L□配置方法 1. 量取下列溶液，置于1L烧杯中。

1 M Tris-HCl Buffer（pH7.4，7.6，8.0） 100mL 500 mM EDTA（pH8.0） 20mL2. 向烧杯中加入约800mL的去离子水，均匀混合。

3. 将溶液定至1L后，高温高压灭菌。

4. 室温保存。

4、3 M 醋酸钠□组份浓度 3 M 醋酸钠（pH5.2）□配制量 100mL□配置方法 1. 称取40.8gNaOAc•3H2O置于100～200mL烧杯中，加入约40mL的去离子水搅拌溶解。

2. 加入冰乙酸调节pH值至5.2。

氯化铵缓冲液(0.2molL,pH8.0-10.0)

北京雷根生物技术有限公司
氯化铵缓冲液(0.2mol/L,pH8.0-10.0)
简介：
氯化铵(Ammonium Chloride)分子量为53.49，CAS 号为12125-02-9，化学式为NH 4Cl 。

氯化铵是一种强电解质，溶于水电离出铵根离子和氯离子，可中和酸性内膜成分,抑制神经鞘氨基的合成，具有多种用途。

氯化铵缓冲液(0.2mol/L,pH8.0-10.0)又称氨-氯化铵缓冲液，由氯化铵、氨水等组成，可根据客户需求在8.0-10.0范围内调pH 值。

组成：
操作步骤(仅供参考)：
1、根据具体实验操作。

注意事项：
1、注意密闭保存，否则易导致pH 值发生变化。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

有效期： 12个月有效。

相关：
编号名称 R00940 Storage 氯化铵缓冲液(0.2mol/L,pH8.0-10.0) 500ml RT 使用说明书 1份编号名称
DC0032 Masson 三色染色液
NH0043 SSC 缓冲液(20×,pH7.0)
NH0053 变性鲑鱼精DNA(10mg/ml)
NR0001 DEPC 处理水(0.1%)
NR0042 RNase A(10mg/ml,DNase free)
PT0013 考马斯亮蓝快速染色液
TC0713 葡萄糖检测试剂盒(GOD-POD 比色法)。

Tween20TBS溶液(20×TBST,pH7.4)

北京雷根生物技术有限公司
Tween20/TBS 溶液(20×TBST,pH7.4)
简介：
Tris 缓冲盐溶液简称TBS, 属于常规pH 缓冲液，常用于清洗Western Blot 中蛋白印迹膜,或者配制封闭液，是常用分子生物学试剂。

在TBS 的基础上加入一定比例的Tween 20，能够大大增强TBS 的洗涤作用。

Leagene Tween20/TBS 溶液(20×TBST,pH7.4)主要成分为Tris-HCl(pH7.4)、氯化钠Tween 20、防腐剂等，主要用于Western Blot 中PVDF 、NC 膜的洗涤，亦可作为封闭液的基础试剂。

组成：
操作步骤(仅供参考)：
1、根据实验具体要求操作。

2、一般稀释，进行下游实验。

3、清洗膜时，重复3次。

注意事项：
1、如果每次的使用量很小，可以适当分装后再使用。

2、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

有效期： 12个月有效。

相关：
编号名称 PW0026 Storage Tween20/TBS 溶液(20×TBST,pH7.4) 500ml 4℃ 使用说明书 1份编号名称 NR0003
Lezol(总RNA 提取试剂) PT0013
考马斯亮蓝快速染色液 PW0034
Western 转移缓冲液(NC,PVDF) PW0040
Western blot 一抗稀释液 PW0084
丽春红S 染色储存液(10×Ponceau S) TO1013 丙二醛(MDA)检测试剂盒(TBA 比色法)。

任氏液

北京雷根生物技术有限公司
任氏液
简介：
Ringer's 液也属于平衡盐溶液的一种，主要由0.65%氯化钠、磷酸盐、氯化钙、葡萄糖等组成，不含HEPES 。

用于两栖类动物离体实验，肌体灌流、清洗组织，并维持离体组织的正常生理功能。

组成：
操作步骤(仅供参考)：
1、根据实验具体要求，保存或清洗离体组织。

注意事项：
1、由于Ringer's 液含钙离子，容易产生沉淀。

如果产生少许沉淀，可以加热溶解或过滤
后使用，产生大量沉淀应弃用。

2、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

相关：
编号名称 CZ0047 Storage Ringer's 液 500ml 4℃ 使用说明书 1份编号名称 CC0005 磷酸缓冲盐溶液(1×PBS,无钙镁) CC0022 D-Hanks 平衡盐溶液(1×,含酚红) CC0032
Hanks 平衡盐溶液(1×HBSS,含酚红) CZ0048
乐氏液 CZ0063
改良台氏液 DH0006
苏木素伊红(HE)染色液 NH0043 SSC 缓冲液(20×,pH7.0)。