1 ×TBST 缓冲液 使用说明
1×TBST缓冲液说明书
加缓冲液的洗脱能力。
本产品为 1×工作液，可直接使用，用后请及时拧紧瓶盖，以防挥发。4℃保存可延长产品保质期，长
期不用建议低温保存。若产品出现结晶析出，请置于 37℃水浴至完全溶解。
组分aCl
150 mM
Tween-20
0.05%（V/V）
HCl
至 PH7.6
北京索莱宝科技有限公司
1×TBST 缓冲液说明书
货号：T1085
规格：500ml
保存：2-8℃，有效期至少 12 个月。
产品说明：
TBST 缓冲液是生物学中常使用的等渗缓冲盐溶液，主要用于 Western Blot 实验中洗去膜上非特异性
结合的抗体等试剂。由 Tris-HCl 构成稳定的 PH 缓冲体系，NaCl 提供等渗条件，Tween-20 作为去污剂可增
tbst洗涤注意事项
tbst洗涤注意事项
使用TBST（TBS Tween）洗涤缓冲液时，以下是一些注意事项：
1. 使用去离子水：在制备TBST缓冲液时，最好使用去离子水，以确保最佳的洗涤效果。
2. 合理稀释：根据具体实验需要，合理稀释TBST缓冲液。
通常情况下，可以将TBST稀释为1X浓度（用去离子水稀释1倍）。
如果需要更高的浓度，则需要相应调整稀释倍数。
3. 保存条件：将未使用的TBST缓冲液保存在4°C的冰箱中，避免暴露在阳光下或高温环境中。
4. 均匀混合：在使用TBST缓冲液前，应将其均匀搅拌混合，确保其中的Tween 20洗涤剂充分溶解。
5. 避免交叉污染：使用TBST缓冲液时，应避免将其接触其他实验室试剂或表面，以防止交叉污染。
6. 足够洗涤时间：根据实验需要，适当延长洗涤时间，以确保彻底去除目标蛋白质的非特异性结合。
7. 彻底清洗：在使用TBST缓冲液进行洗涤后，应彻底清洗实验器具，避免残留的洗涤剂对后续实验结果产生干扰。
请注意，以上仅为一般性的注意事项，具体的使用细节可能会
因实验目的和方法而有所不同。
建议参考相应的文献或相关实验方案，以确保正确使用TBST洗涤缓冲液。
TBST缓冲液配制及使用方法
TBST缓冲液配制及使用方法1.材料准备- 10×TBST缓冲液：10倍浓缩的Tween-TBS缓冲液，可以购买现成的或根据配方自制。
-纯水：去离子水或超纯水。
- Tween-20：一种非离子表面活性剂，用于减小蛋白质与试管内表面的非特异性吸附。
2.计算配制量-计算需要的TBST缓冲液总体积，根据实验需求决定，通常在100mL 到1L之间。
-计算所需的10×TBST缓冲液的体积。
3.配制缓冲液- 按照10×TBST缓冲液中Tween-TBS和纯水的比例来计算Tween-TBS和纯水的体积。
- 将计算得出的所需体积的Tween-TBS缓冲液加入容器中。
-加入等量的纯水，搅拌均匀。
4.调整pH值（如果需要）-使用pH计检测缓冲液的pH值。
-如有必要，可使用盐酸（HCl）或氢氧化钠（NaOH）来调节pH值，直至达到所需的范围。
5.储存缓冲液-将配制好的TBST缓冲液分装到小容器中，标注好日期和成分。
-在4℃储存。
1.实验准备-准备含有蛋白质的样品及所需试管或膜。
-加载样品前，可以使用TBST缓冲液对膜进行预洗。
2.膜的洗涤-将膜置于一个容器中，加入足够的TBST缓冲液来完全浸泡膜。
-建议使用摇床、旋转器或烧杯辊转器进行洗涤，方法可根据实验需求来选择。
-进行洗涤的时间和次数可以根据实验需求进行调整，通常洗涤3次，每次5分钟。
3.洗涤液的丢弃-将洗涤液倒入废液容器中，避免直接排入下水道。
4.试管的洗涤-将试管置于容器中，加入足够的TBST缓冲液来完全浸没试管。
-摇动容器，将TBST缓冲液彻底洗涤试管表面。
5.使用洗涤后的试管-待试管干燥后，可以进行进一步的实验步骤，如添加试剂或继续处理样品。
关于TBST缓冲液的注意事项：1. 在配制TBST缓冲液时，严格按照配方比例来计算Tween-TBS和纯水的体积，以确保溶液浓度的准确性。
2.制备好的缓冲液应避免与污染物接触，如灰尘、细菌等。
(精编资料推荐)TBST缓冲液配制及使用方法
TBST是TBS+Tween的缩写,TBS是Tris-HCl缓冲盐溶液,为等渗盐溶液加Tris-HCl缓冲液用1N HC1调pH至7.4,Tween为一种非离子型去污剂,有复性抗原的作用,可提高特异性的识别能力.如果配置1000ml的TBST：先称量NaCl 40g ，倒入烧杯中，加DDW蒸馏水400ml,再称量NaCl 47.6g，倒入刚才的那个烧杯中,：由于NaCl的量太多，一次称量不方便，所以分两次称量，且易于溶解）。
往烧杯中加入Tris—HCl缓冲液100ml，最后加吐温20， 5ml,转入1000ml 容量瓶中，在定容，转移即可。
TBST缓冲液是以进口粉剂为原材料配制，品质稳定。
•·主要用于免疫组化和原位杂交，酶联免疫等实验中，清洗免疫印•迹膜；•·无色液体，0.22 μm膜过滤纯化；•·室温储存，效期为18个月；•使用说明•·1×TBST缓冲液配制：900 ml去离子水与100 ml 10×TBST缓冲液充分混匀；•友情提示•·室温条件下保存，如果低温保存溶液，可能会产生沉淀，可摇晃•或加热溶解；为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作；用来洗细胞的TBS/PBS最好加KCl，这样比较接近体液的电解质比例其他用途如WB等可以忽略，只要电导和离子浓度符合要求就可以了。
个别去垢剂如SDS 遇到钾会沉淀，所以更不能加KClpH和盐浓度看自己需要而定，不用拘泥于书本，当然一般来说是等渗的150mM NaCl保存条件：1：室温保存，12个月2：如果低温保存溶液，可能会有晶体沉淀产生，可通过摇晃或加热溶解即可使用。
注意事项：1：说明：TBST缓冲液，PH 7.2-7.5；2：颜色为无色透明液体；3：为了您的安全和健康，请穿实验服并戴防护手套操作；使用说明：1：使用前将10 X TBS缓冲液和Tween20按1:39混合，注意需在使用前新鲜配制。
缓冲液的配制方法
缓冲液的配制方法(总14页)--本页仅作为文档封面，使用时请直接删除即可----内页可以根据需求调整合适字体及大小--核酸电泳相关试剂、缓冲液的配制方法50×TAE Buffer组份浓度 2 M Tris-醋酸，100 mM EDTA配制量 1 L配制方法3.加入 ml的乙酸，充分搅拌。
4.加去离子水将溶液定容至l L后，室温保存。
10×TBE Buffer组份浓度 890 mM Tris-硼酸，20 mM EDTA配制量 1 L配制方法3.加去离子水将溶液定容至l L后，室温保存。
10×MOPS(3-吗啉基丙磺酸)Buffer组份浓度 200 rnM MOPS，20 mM NaOAc，10 mM EDTA配制量 1 L配制方法 1.称 g MOPS，置于1 L烧杯中。
2.加约700 ml DEPC处理水，搅拌溶解。
3.使用2 N NaOH调节pH值至。
6.用 m滤膜过滤除去杂质。
7.室温避光保存。
注：溶液见光或高温灭菌后会变黄。
变黄时也可使用，但变黑时不要使用。
溴乙锭 (10 mg/ml)组份浓度 10 mg/ml溴乙锭配制量 100 ml配制方法 1.称量1 g溴乙锭，加入到100 ml容器中。
2.加入去离子水100 ml，充分搅拌数h完全溶解溴乙锭。
3.将溶液转移至棕色瓶中，室温避光保存。
4.溴乙锭的工作浓度为 g/ml。
注意：溴乙锭是一种致癌物质，必须小心操作。
Agarose凝胶配制方法 1.配制适量的电泳及制胶用的缓冲液(通常是×TBE或1×TAE)。
2.根椐制胶量及凝胶浓度，准确称量琼脂糖粉，加入适当的锥形瓶中。
3.加入一定量的电泳缓冲液(总液体量不宜超过锥形瓶的50%容量)。
注：用于电泳的缓冲液和用于制胶的缓冲液必须统一。
4.在锥形瓶的瓶封上保鲜膜，并在膜上扎些小孔，然后在微波炉中加热熔化琼脂糖。
加热过程中，当溶液沸腾后，请戴上防热手套。
1×PBS缓冲液使用说明
1×PBS 缓冲液使用说明
货号：P1020
规格：500ml
保存：室温储存，有效期至少12个月。
产品说明：
PBS（phosphate buffered solution）即磷酸盐缓冲液，能够提供相对稳定的离子环境和pH 缓冲能力，是生物学中经常使用的缓冲盐溶液，用于分子克隆及细胞培养等，pH 为7.2-7.4，与人体血液等渗，主要成分为磷酸二氢钾、磷酸氢二钠、氯化钠以及氯化钾。
本PBS 缓冲液为1×工作液，经过除菌处理，可直接使用。
4℃保存可延长产品保质期，长期不用建议低温保存。
组分
浓度Na 2HPO 4
8mM NaCl
136mM KH 2PO 4
2mM KCL
2.6mM
注意事项：
1.在使用PBS 的过程中要特别注意避免溶液被微生物污染。
2.PBS 在低温情况下可能会产生沉淀。
如果发现有沉淀产生，请置于37℃水浴至完全溶解后再使用。
3.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
相关试剂：
P102210×PBS缓冲液
H10901M Hepes溶液(50×) T10901M Tris-HCl PH7.4 T11501M Tris-HCl PH8.0 T1120TE缓冲液PH8.0 T108110×TBST缓冲液。
SDS-PAGE 蛋白上样缓冲液(1X)
SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(1X)产品简介：SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(SDS-PAGE Sample Loading Buffer，1X)，是一种经过改良的以溴酚蓝为染料的蛋白上样缓冲液。
可以直接用于细胞或组织样品的裂解，并用于后续常规的SDS-PAGE蛋白样品的上样。
使用SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(1X)直接裂解蛋白样品的优点是比较便捷；缺点是裂解好的蛋白样品不能用常规的Bradford法或BCA法测定蛋白浓度。
这样蛋白上样量的均一性就较难控制，需要借助考马斯亮蓝等的染色结果或Western的检测结果，来调整上样量。
当细胞量或组织用量能控制得比较均一时，使用本裂解液直接裂解获取蛋白样品会比较便捷。
本产品也可以用于SDS-PAGE时待上样蛋白样品的稀释等。
保存条件：-20℃保存，至少一年有效。
注意事项：SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(1X)中含少量DTT，有轻微刺激性气味，但不含剧毒的巯基乙醇。
SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(1X)必须完全溶解后再使用。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明：1.在室温或不超过37℃的水浴中溶解SDS-PAGE上样缓冲液(1X)。
水浴溶解后立即室温存放，尽量避免长时间置于水浴中。
2.对于贴壁细胞：去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰，可以不洗)。
按照6孔板每孔加入150-250微升SDS-PAGE上样缓冲液(1X)的比例加入裂解液。
用枪吹打数下，使SDS-PAGE上样缓冲液(1X)和细胞充分接触。
通常SDS-PAGE上样缓冲液(1X)接触细胞1-2秒后，细胞就会被裂解。
裂解后的样品收集到一洁净离心管内。
3. 对于悬浮细胞：离心收集细胞，用手指把细胞用力弹散。
按照6孔板每孔细胞加入150-250微升SDS-PAGE上样缓冲液(1X)的比例加入SDS-PAGE上样缓冲液(1X)。
再用手指轻弹以充分裂解细胞。
Westernblot试剂配制及操作流程
Western-Blot操作流程试剂配制10mM Tris (,)1%NP40%TritonX-100% 兑氧胆酸钠2 mM EDTA1 mM PMSF20%T 油调pH直至。
混匀后4C保存，长期保存于-20 C。
使用时，加入蛋白酶抑制剂cooktail制胶用(1-6):1. L Tris • HCl ()Tris 12.114g蒸储水100ml溶解后，(用浓盐酸调pHS),室温下保存。
2. L Tris • HCl ()Tris 18.671g蒸储水100ml溶解后，(用浓盐酸调pHS),室温下保存。
3. 10% SDSSDS 10g蒸储水至100ml如溶解困难，可在50C水浴下溶解，室温保存。
如在长期保存中出现沉淀，水浴溶化后，仍可使用。
4. 10%过硫酸胺(AP)过硫酸胺（现用现配，可先将过硫酸胺干粉称好分量后放在管中，一次性多装几管，使用时加入蒸储水水即可，溶解后，4C保存，保存时间为1周）5. 四甲基乙二胺原液（TEMED 4C保存。
6. 30灿稀酰胺:4?C保存。
10"层胶，即分离胶（两块胶，15ml）：胶的浓度根据自己所做蛋白的大小确定依次加入去离子水30炳烯酰胺5ml1.5M Tris-HCl ()10%SDS150 卬l10%AP150 卬lTEMED 6 (1 l每加一种成分随即摇匀，为了加快凝胶，可以将过硫酸胺和TEMED；加大，根据实验当时的温度适当调整，加入TEME混匀后应即刻灌胶。
灌胶后加异丙醇（1ml）消泡5毗层胶（两块胶，6ml）:依次加入去离子水30%M烯酰胺1ml1M Tris-HCl ()10%SDS60 卬l10%AP60 卬lTEMED 6 (1 l每加一种成分随即摇匀，为了加快凝胶，可以将过硫酸胺和TEMED;加大，根据实验当时的温度适当调整，加入TEME混匀后应即刻灌胶。
7. 5X电泳液缓冲液Tris （）15.1g甘氨酸0 94gSDS 5.00g蒸储水至1000ml溶解后室温保存，用时稀释5倍，通常取160ml配制成800ml即可。
TBS缓冲液(0.05molL,pH7.4)
北京雷根生物技术有限公司
TBS 缓冲液(0.05mol/L,pH7.4)
简介：
Tris 缓冲盐溶液简称TBS, 属于常规pH 缓冲液，常用于清洗免疫染色的组织或Western Blot 中的蛋白印迹膜等，是常用分子生物学试剂。
Leagene TBS 缓冲液(0.05mol/L,pH7.4)主要由Tris 、氯化钠、BSA 、防腐剂等组成，可用于免疫金银染色中清洗组织，亦可作为封闭液的基础试剂。
组成：
操作步骤(仅供参考)：
1、 石蜡切片脱蜡至水。
2、 胰蛋白酶消化10min 或尿素消化30min 。
3、 蒸馏水冲洗2次，每次5～10min 。
4、 TBS 缓冲液振荡洗涤2次，每次5～10min 。
5、 进行封闭及下游其他实验。
注意事项：
1、 如果每次的使用量很小，可以适当分装后再使用。
2、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期： 12个月有效。
相关：
编号 名称 IH0041 Storage TBS 缓冲液(0.05mol/L,pH7.4) 500ml 4℃ 使用说明书 1份 编号 名称 DC0032
Masson 三色染色液 NR0003
Lezol(总RNA 提取试剂) PT0013
考马斯亮蓝快速染色液 PW0040
Western blot 一抗稀释液 PW0084
丽春红S 染色储存液(10×Ponceau S) TO1013 丙二醛(MDA)检测试剂盒(TBA 比色法)。
20×TBS缓冲液说明书
北京索莱宝科技有限公司
20×TBS缓冲液说明书
货号：T1080
规格：500ml
保存：室温储存，有效期至少12个月。
产品简介：
TBS缓冲液是生物学中常使用的等渗缓冲盐溶液，主要用于免疫组化和原位杂交，酶联免疫等实验中，清洗免疫印迹实验中非特异性结合的抗体等。
由Tris-HCl构成稳定的PH缓冲体系，NaCl提供等渗条件。
本产品为20×浓缩液，稀释后使用。
组分浓度
Tris200mM
NaCl3M
PH7.5-7.6
使用说明：
1×TBS缓冲液配制：量取50ml20×TBS缓冲液，加入950ml去离子水定容至1L，充分混匀。
注意事项：
4℃保存可延长产品保质期，长期不用建议低温保存。
若产品出现结晶析出，请置于37℃水浴至完全溶解。
使用时稀释成1×，可加入0.05%Tween-20，用于免疫印迹膜清洗。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
第1页共1页。
各种缓冲液配方
三、核酸电泳相关试剂、缓冲液的配制方法50×TAE Buffer (pH8.5)组份浓度 2 M Tris-醋酸，100 mM EDTA配制量 1 L配制方法3.加入57.1 ml的乙酸，充分搅拌。
4.加去离子水将溶液定容至l L后，室温保存。
10×TBE Buffer (pH8.3)组份浓度890 mM Tris-硼酸，20 mM EDTA配制量 1 L配制方法3.加去离子水将溶液定容至l L后，室温保存。
10×MOPS(3-吗啉基丙磺酸)Buffer组份浓度200 rnM MOPS，20 mM NaOAc，10 mM EDTA配制量 1 L配制方法 1.称41.8 g MOPS，置于1 L烧杯中。
2.加约700 ml DEPC处理水，搅拌溶解。
3.使用2 N NaOH调节pH值至7.0。
6.用0.45 m滤膜过滤除去杂质。
7.室温避光保存。
注：溶液见光或高温灭菌后会变黄。
变黄时也可使用，但变黑时不要使用。
溴乙锭(10 mg/ml)组份浓度10 mg/ml溴乙锭配制量100 ml配制方法 1.称量1 g溴乙锭，加入到100 ml容器中。
2.加入去离子水100 ml，充分搅拌数h完全溶解溴乙锭。
3.将溶液转移至棕色瓶中，室温避光保存。
4.溴乙锭的工作浓度为0.5 g/ml。
注意：溴乙锭是一种致癌物质，必须小心操作。
Agarose凝胶配制方法 1.配制适量的电泳及制胶用的缓冲液(通常是0.5×TBE或1×TAE)。
2.根椐制胶量及凝胶浓度，准确称量琼脂糖粉，加入适当的锥形瓶中。
3.加入一定量的电泳缓冲液(总液体量不宜超过锥形瓶的50%容量)。
注：用于电泳的缓冲液和用于制胶的缓冲液必须统一。
4.在锥形瓶的瓶封上保鲜膜，并在膜上扎些小孔，然后在微波炉中加热熔化琼脂糖。
加热过程中，当溶液沸腾后，请戴上防热手套。
小心摇动锥形瓶。
使琼脂糖充分均匀熔化。
此操作重复数次，直至琼脂糖完全熔化。
Tris缓冲盐溶液(1×TBS,pH7.5)
北京雷根生物技术有限公司
Tris 缓冲盐溶液(1×TBS,pH7.5)
简介：
Tris 缓冲盐溶液简称TBS, 属于常规pH 缓冲液，常用于清洗Western Blot 中蛋白印迹膜或配制封闭液，是常用分子生物学试剂。
Tris 缓冲盐溶液主要成分为Tris-HCl(pH7.5)、氯化钠、防腐剂，不含Tween 20。
组成：
操作步骤(仅供参考)：
1、 根据实验具体要求操作。
2、 一般加入0.05～0.1% Tween 20，即获得1×TBST 进行下游实验。
注意事项：
1、 如果每次的使用量很小，可以适当分装后再使用。
2、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期： 12个月有效。
相关：
编号 名称 PW0007 Storage Tris 缓冲盐溶液(1×TBS,pH7.5) 500ml 4℃ 使用说明书 1份 编号 名称 DC0032
Masson 三色染色液 PS0013
RIPA 裂解液(强) PT0013
考马斯亮蓝快速染色液 PW0024
Tween20/TBS 溶液(10×TBST,pH7.5) PW0040
Western blot 一抗稀释液 PW0053
Western 抗体洗脱液(碱性) PW0084
丽春红S 染色储存液(10×Ponceau S) TO1013 丙二醛(MDA)检测试剂盒(TBA 比色法)。
1× TBST 缓冲液 安全技术说明书
安全技术说明书 第1部分 化学品及企业标识产品名称：1× TBST 缓冲液产品编号：B01121011205 B01制造商或供应商：嘉兴方舟生地址：浙江省嘉兴市平湖市经第2部分 危险性概述紧急情况概述造成轻微皮肤刺激；如果吸入谨慎起见用水冲洗眼睛；切勿给的医生出示此安全技术说明书GHS 危险性类别非危险物质或混合物明书 SAFETY DATA SHEET 文件编发布日修订日打印日1× TBST 缓冲液业标识冲液Tris Buffered Saline, with Tween- 20 1×5 B01121011206 B01121011207 B01121011208方舟生物科技有限公司湖市经济技术开发区新兴二路988号科创中心6号楼4358果吸入,请将患者移到新鲜空气处；接触后用肥皂和大；切勿给失去知觉者喂食任何东西；用水漱口。
请教医说明书。
文件编号 SDS B011-1发布日期 2021-01-12修订日期 2021-01-12打印日期 2021-03-25×，pH7.4 3层皂和大量的水冲洗；请教医生，向到现场GHS 标签要素，包括防范说明非危险物质或混合物物理和化学危险目前掌握信息，没有物理或化健康危害目前掌握信息，没有健康危害环境危害目前掌握信息，没有环境的危其它危害物目前暂未发现第3部分 组成/成分信息 混合物组分 Tris-(hydroxymethyl)-amino Sodium Chloride Tween-20第4部分 急救措施口接触： 如误吞食，如果人吸入暴露： 如误吸入,请将患皮肤接触： 用肥皂和大量的水眼睛接触： 用大量水彻底冲洗说明理或化学的危险性。
康危害。
境的危害。
CAS #aminomethane 77-86-17647-14-5 9005-64-5 如果人是清醒的，用水清洗口腔。
请教医生。
请将患者移到新鲜空气处。
如呼吸困难， 请教医生。
SDS-PAGE 蛋白上样缓冲液(1X)
SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(1X)产品简介：SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(SDS-PAGE Sample Loading Buffer，1X)，是一种经过改良的以溴酚蓝为染料的蛋白上样缓冲液。
可以直接用于细胞或组织样品的裂解，并用于后续常规的SDS-PAGE蛋白样品的上样。
使用SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(1X)直接裂解蛋白样品的优点是比较便捷；缺点是裂解好的蛋白样品不能用常规的Bradford法或BCA法测定蛋白浓度。
这样蛋白上样量的均一性就较难控制，需要借助考马斯亮蓝等的染色结果或Western的检测结果，来调整上样量。
当细胞量或组织用量能控制得比较均一时，使用本裂解液直接裂解获取蛋白样品会比较便捷。
本产品也可以用于SDS-PAGE时待上样蛋白样品的稀释等。
保存条件：-20℃保存，至少一年有效。
注意事项：SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(1X)中含少量DTT，有轻微刺激性气味，但不含剧毒的巯基乙醇。
SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(1X)必须完全溶解后再使用。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明：1.在室温或不超过37℃的水浴中溶解SDS-PAGE上样缓冲液(1X)。
水浴溶解后立即室温存放，尽量避免长时间置于水浴中。
2.对于贴壁细胞：去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰，可以不洗)。
按照6孔板每孔加入150-250微升SDS-PAGE上样缓冲液(1X)的比例加入裂解液。
用枪吹打数下，使SDS-PAGE上样缓冲液(1X)和细胞充分接触。
通常SDS-PAGE上样缓冲液(1X)接触细胞1-2秒后，细胞就会被裂解。
裂解后的样品收集到一洁净离心管内。
3. 对于悬浮细胞：离心收集细胞，用手指把细胞用力弹散。
按照6孔板每孔细胞加入150-250微升SDS-PAGE上样缓冲液(1X)的比例加入SDS-PAGE上样缓冲液(1X)。
再用手指轻弹以充分裂解细胞。
TBST缓冲液配制及使用方法精选文档
T B S T缓冲液配制及使用方法精选文档TTMS system office room 【TTMS16H-TTMS2A-TTMS8Q8-TBST缓冲液TBST是TBS+Tween的缩写,TBS是Tris-HCl缓冲盐溶液,为等渗盐溶液加Tris-HCl缓冲液用1N HC1调pH至7.4,Tween为一种非离子型去污剂,有复性抗原的作用,可提高特异性的识别能力.如果配置1000ml的TBST：•先称量NaCl40g，倒入烧杯中，加DDW蒸馏水400ml,再称量NaCl47.6g，倒入刚才的那个烧杯中,：由于NaCl的量太多，一次称量不方便，所以分两次称量，且易于溶解）。
往烧杯中加入Tris—HCl缓冲液100ml，最后加吐温20，5ml,转入1000ml容量瓶中，在定容，转移即可。
TBST缓冲液是以进口粉剂为原材料配制，品质稳定。
·主要用于免疫组化和原位杂交，酶联免疫等实验中，清洗免疫印迹膜；·无色液体，0.22 μm膜过滤纯化；·室温储存，效期为18个月；使用说明· 1×TBST缓冲液配制：900 ml去离子水与100 ml 10×TBST缓冲液充分混匀；友情提示·室温条件下保存，如果低温保存溶液，可能会产生沉淀，可摇晃或加热溶解；为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作；用来洗细胞的TBS/PBS最好加KCl，这样比较接近体液的电解质比例其他用途如WB 等可以忽略，只要电导和离子浓度符合要求就可以了。
个别去垢剂如SDS遇到钾会沉淀，所以更不能加KClpH和盐浓度看自己需要而定，不用拘泥于书本，当然一般来说是等渗的150mM NaClTrisBufferedsalineTween，10X（TBST缓冲液，10X）产品组成保存条件：1：室温保存，12个月2：如果低温保存溶液，可能会有晶体沉淀产生，可通过摇晃或加热溶解即可使用。
1×PBS缓冲液片说明书
北京索莱宝科技有限公司
1×PBS缓冲液片说明书
货号：P1000
规格：100片/瓶，100ml/片
保存：室温储存，有效期三年。
产品说明：
磷酸盐缓冲液(PBS)是一种常用于生物研究的缓冲溶液，使用的用途非常广泛。
PBS具有等渗、平衡渗透压、维持离子强度和PH缓冲等作用。
PBS的渗透性和离子浓度与人体(同位素)的浓度相匹配，对大多数细胞都是无毒的。
PBS不会破坏生物蛋白的结构及生物特性，对完整的、具有活性的物质能保证其在最适条件下参与生物反应，所以一般有活性的生物制剂使用PBS是首选。
磷酸盐缓冲液片剂已广泛应用于ELISA、EIA、RIA、,蛋白质芯片、WB、免疫PCR、免疫组化、IHC、流式FACS、石蜡包埋等科学研究实验中。
使用说明：
该产品为白色圆形磷酸盐缓冲液片可以方便快速制备1X PBS缓冲溶液，一片片剂溶于100mL去离子水中可生成0.01M磷酸盐缓冲液，0.0027M氯化钾和0.137M氯化钠，25°C时pH为7.4。
注意事项：
1、使用去离子水（确保水温25°C，pH7.0）
2、适当地搅拌缓冲溶液。
3、由于PBS缓冲液容易产生沉淀或发生变质，建议现配现用。
4、可通过过滤或高温高压进行灭菌。
滤液通过0.22μm缓冲溶液过滤到无菌瓶或高压蒸汽15到20分钟。
灭菌的缓冲溶液可密封保存在2~8°C长达一年。
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噬菌体库固相-液相筛选的标准操作规程
噬菌体库固相-液相筛选的标准操作规程（编号：063）
1、目的及适用范围
为了避免筛选到非特异性结合的噬菌体克隆，采用轮换淘选法，主要用于噬菌体展示库的初步筛选。
2、主要仪器
酶联条、微量移液器、摇床、垂直混匀仪、三角烧瓶、37℃摇床
3、试剂及配制方法
3.1 1×TBS配方：
Tris-HCI缓冲液（0.5M pH7.6）100mL
NaCl 8.5-9g
双蒸水加至1000mL
先以少量双蒸水溶解NaCl，再加入Tris-HCl缓冲液，最后加双蒸水至1000mL，充分摇匀。
3.2 1×TBST（含0.05%Tween20）：
1000mL1×TBS中加入0.5mL Tween20
3.3 包被液：（pH 9.6 0.05 M碳酸盐缓冲液）
Na2CO3 1.59g
NaHCO3 2.93g
加蒸馏水至 1000mL
溶解后每瓶50mL分装，高压灭菌备用。
3.4 5%[W/V]BSA：100mL1×TBS中加入5g BSA。
3.5 2 M Tris·Cl（pH8.0）：242g Tris置于800mL超纯水中，溶解后，HCl调pH值至8.0，再用超纯水定容至1000mL。
3.6 0.2 M Gly-HCl（pH2.2）：15g glycine 置于800mL超纯水中，溶解后，HCl调pH值至2.2，再用超纯水定容至1000mL。
3.7 2×YT：
胰蛋白胨16g/L
酵母提取物10g/L
氯化钠5g/L
根据经验值用NaOH调节该培养基的pH，使其达到7.4(该pH适合目前使用最广的原核表达
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缓冲液的配制方法
核酸电泳相关试剂、缓冲液的配制方法之迟辟智美创作50×TAE Buffer (pH8.5)组份浓度 2 M Tris-醋酸，100 mM EDTA配制量 1 L配制方法 1.称量下列试剂，置于1 L烧杯中.2..3.加入57.1 ml的乙酸，充沛搅拌.4.加去离子水将溶液定容至l L后，室温保管.10×TBE Buffer (pH8.3)组份浓度 890 mM Tris-硼酸，20 mM EDTA配制量 1 L配制方法 l.称量下列试剂，置于l L烧杯中.2..3.加去离子水将溶液定容至l L后，室温保管.10×MOPS(3-吗啉基丙磺酸)Buffer组份浓度 200 rnM MOPS，20 mM NaOAc，10 mM EDTA配制量 1 L配制方法 1.称41.8 g MOPS，置于1 L烧杯中.2.加约700 ml DEPC处置水，搅拌溶解.3.使用2 N NaOH调节pH值至7.0.4.再向溶液中加入下列试剂.5.用6.用0.45 m滤膜过滤除去杂质.7.室温避光保管.注：溶液见光或高温灭菌后会变黄.变黄时也可使用，但变黑时不要使用.溴乙锭 (10 mg/ml)组份浓度 10 mg/ml溴乙锭配制量 100 ml配制方法 1.称量1 g溴乙锭，加入到100 ml容器中.2.加入去离子水100 ml，充沛搅拌数h完全溶解溴乙锭.3.将溶液转移至棕色瓶中，室温避光保管.4.溴乙锭的工作浓度为0.5 g/ml.注意：溴乙锭是一种致癌物质，必需小心把持.Agarose凝胶配制方法 1.配制适量的电泳及制胶用的缓冲液(通常是0.5×TBE或1×TAE).2.根椐制胶量及凝胶浓度，准确称量琼脂糖粉，加入适当的锥形瓶中.3.加入一定量的电泳缓冲液(总液体量不宜超越锥形瓶的50%容量).注：用于电泳的缓冲液和用于制胶的缓冲液必需统一.4.在锥形瓶的瓶封上保鲜膜，并在膜上扎些小孔，然后在微波炉中加热熔化琼脂糖.加热过程中，当溶液沸腾后，请戴上防热手套.小心摇动锥形瓶.使琼脂糖充沛均匀熔化.此把持重复数次，直至琼脂糖完全熔化.必需注意，在微波炉中加热时间不宜过长，每次当溶液起泡沸腾时停止加热，否则会引起溶液过热暴沸，造成琼脂糖凝胶浓度禁绝，也会损坏微波炉.熔化琼脂糖时，必需保证琼脂糖充沛完全熔化，否则，会造成电泳图像模糊不清.5.使溶液冷却至60℃左右，如需要可在此时加入溴乙锭溶液(终浓度0.5 µg/ml).并充沛混匀.注：溴乙锭是一种致癌物质.使用含有溴乙锭的溶液时，请戴好手套.6.将琼脂糖溶液倒入制胶模中，然后在适当位置处插上梳子.凝胶厚度一般在3~5 min之间.7.在室温下使胶凝固(年夜约30 min~1 h)，然后放置于电泳槽中进行电泳.注：凝胶不立即使用时，请用保鲜膜将凝胶包好后在4℃下保管，一般可保管2~5天.琼脂糖凝胶浓度与线形DNA的最佳分辨范围6×组份浓度配制量配制方法 1.称量下列试剂，置于500 ml烧杯中.2..3.加入180 ml的甘油(Glycerol)后，使用2 N NaOH调节pH值至7.0.4.用去离子水定容至500 ml后，室温保管.10 × Loadlng Buffer(RNA电泳用)组份浓度配制置配制方法 1.称量下列试剂，置于10 ml离心管中.2..3.加入5 ml的甘油(Glycerol)后，充沛混匀.10 ml后，室温保管.四、核酸、卵白质杂交用相关试剂、缓冲液的配制方法20×SSC组份浓度 3.0 M NaCl，0.3 MNa3citrate·2H2O(柠檬酸钠)配制量 1 L配制方法 1.称量下列试剂，置于l L烧杯中.2..3滴加14 N HCl，调节pH值至7.0后，加去离子水将溶液定容至1 L.4.高温高压灭菌后，室温保管.20×SSPE Buffer组份浓度 3.0 M NaCl，0.2 M NaH2PO4，0.02 M EDTA配制方法 1.称量下列试剂，置于l L 烧杯中.2..3.加NaOH 调节pH 值至7.4(约6.5 ml 的10 N NaOH).4.加去离子水将溶液定容至l L.5.高温高压灭菌后，室温保管. 50 X Denhardt’S 溶液 组份浓度 500 ml配制量配制方法 1.称量下列试500 ml 烧杯中. 剂，置于 2.加去离子水约400 ml ，充沛搅拌溶解3.加去离子水将溶液定容至500 ml.4.用0.45µm 滤膜过滤后，分装成每份25 ml. 5.-20℃保管. 0.5 M 磷酸盐Buffer组份浓度 0.5 M Na 2HPO 4. 配制量 l L配制方法 1.称量134 g Na 2HPO 4·7H 2O 置于l L 烧杯中. 2.加入约800 ml 的去离子水充沛搅拌溶解.3.加入85%的H 3PO 4(浓磷酸)调节溶液pH 值至7.2.4.加去离子水定容至1 L.5.高温高压灭菌后，室温保管. Salmon DNA (鲑鱼精DNA)组份浓度 10 mg/ml Salmon DNA 配制量 约100 ml配制方法 1.称取鲑鱼精DNA 2 g 置于500 ml 烧杯中，加入约200 ml 的TE Buffer.2用磁力搅拌器室温搅拌2~4h ，溶解后加入4 ml 的5 M NaCl ，使其终浓度为0.1 M.3.用苯酚和苯酚/氯仿各抽提1次.4.回收水相溶液后，使用17号皮下注射针头快速吸打溶液约20次，以 切断DNA.5.加入2倍体积的预冷乙醇进行乙醇沉淀.6.离心回收DNA 后，溶解于100 ml 的去离子水中.测定溶液的OD 260值.7.计算溶液的DNA 浓度后，稀释DNA 溶液至10 mg/ml. 8.煮沸10min 后，分装成小份(1 ml/份).-20℃保管. 9.使用前在沸水浴中加热5min 后，迅速冰浴冷却. DNA 变性缓冲液组份浓度 1.5 M NaCl ，0.5 M NaOH 配制量 1 L配制方法 1.称量下列试剂，置于l L 烧杯中.2..3.加去离子水将溶液定容至l L 后，室温保管. 预杂交液/杂交液(DNA 杂交用) 组份浓度 配制置 100 ml 配制方法 1.称量下列试200 ml 烧杯中.剂，置于2.充沛混匀后，使用0.45µm 滤膜滤去杂质后使用.预杂交液/杂交液(RNA 杂交用) 组份浓度 配制量 100 mL 配制方法 1.称量下列试200 ml 烧杯中. 剂，置于2.充沛混匀后，使用0.45µm 滤膜滤去杂质后使用.膜转移缓冲液(Western杂交用)组份浓度 39 mM Glycine，48 mM Tris，0.037%(W/V)SDS，20%(V/V)甲醇配制量 1 L配制方法 1.称量下列试剂，置于l L烧杯中.2..3.加去离子水将溶液定溶至800 ml后，加入200 ml的甲醇.4.室温保管.TBST Buffer(Western杂交膜清洗液)组份浓度 20 mM Tris-HCl，150 mM NaCl，0.05%(V/V)Tween 20配制量 1 L配制方法 1.称量下列试剂，置于l L烧杯中.2...5 ml Tween 20后充沛混匀.4.加去离子水将溶液定容至l L后，4℃保管.封闭缓冲液(Western杂交用)组份浓度 5%(W/V)脱脂奶粉/TBST Buffer配制量 100 ml配制方法 1.称5 g脱脂奶粉加入到100 mlTBST Buffer中，充沛搅拌溶解.2.4℃保管待用(本封闭液应该现配现用).五、实验室经常使用培养基的配制方法Ampicillin(氨卡青霉素)(100 mg/ml)组份浓度 100 mg/ml Ampicillin配制量 50 ml配制方法 1.称量5 g Ampicillin置于50 ml离心管中.2.加入40 ml灭菌水，充沛混合溶解后，定容至50 ml.3.用0.22 µm过滤膜过滤除菌.4.小份分装(1 ml/份)后，-20℃保管.IPTG(异丙基-β-D-硫代半乳糖苷)(24 mg/ml)组份浓度 24 mg/mL IPTG配制量 50 mL配制方法 1.称1.2 g IPTG置于50 ml离心管中.2.加入40 ml灭菌水，充沛混合溶解后，定容至50 ml.3.用0 22 µm过滤膜过滤除菌.4小份分装(1 ml，份)后，-20℃保管.X-Gal (20 mg/ml)组份浓度 20 mg/ml X-Gal配制量 50 ml配制方法 1.称量l g X-Gal置于50 ml离心管中.2.加入40 ml DMF(二甲基甲酰胺)，充沛混合溶解后，定容至50 ml.3.小份分装(1 ml/份)后，-20℃避光保管.LB培养基组份浓度 1%(W/V)Tryptone(胰卵白胨)，0.5%(W/V)Yeast Extract(酵母提取物)，1%(W/V)NaCl配制量 1 L配制方法 1.称取下列试剂，置于l L烧杯中.2.3.滴加5 N NaOH(约0.2 m1)，调节pH值至7.0.4.加去离子水将培养基定容至1 L.5高温高压灭菌后，4.C保管.LB/Amp培养基组份浓度配制量配制方法 1.称取下列试剂，置于l L烧杯中.2.3.滴加5 N NaOH(约0.2 mL).调节pH值至7.0.4.加去离子水将培养基定容至1 L.5.高温高压灭菌后，冷却至室温.6.加入1 ml Ampicillin(100 mg/ml)后均匀混合.7.4℃保管. TB 培养基组份浓度配制方法 1.配制磷酸盐(0.17 M缓；中液KH 2PO4，0.72 M K 2HPO 4)100 ml.溶解2.31 g KH 2PO 4和l2.54 g K 2HPO 4于90 ml 的去离子水中，搅拌溶解 后，加去离子水定容至100 ml ，高温高压灭菌.2.称取下列试剂，置于l L 烧杯中.3.4.加去离子水将培养基定容至1 L 后，高温高压灭菌.5.待溶液冷却至60℃以下时，；加入100 ml 的上述灭菌磷酸盐缓冲液.6.4℃保管.TB/Amp 培养基 组份浓度配制量配制方法 1.配制磷酸盐缓冲液(0.17 M KH 2PO 4，0.72 M K 2HPO 4)100 ml.溶解2.31 g KH 2PO 4,和12.54g K 2HPO 4于90 ml 的去离子水中，搅拌溶解后，加去离子水定容至100 ml ，高温高压灭菌.2.称取下列试剂，置于l L 烧杯中.。