50×TAE缓冲液使用说明

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缓冲液的配制方法

缓冲液的配制方法

核酸电泳【2 】相干试剂.缓冲液的配制办法50×TAE Buffer (pH8.5)组份浓度 2 M Tris-醋酸,100 mM EDTA配制量 1 L配制办法 1.称量下列试剂,置于1 L烧杯中.2.3.参加57.1 ml的乙酸,充分搅拌.4.加去离子水将溶液定容至l L后,室温保存.10×TBE Buffer (pH8.3)组份浓度 890 mM Tris-硼酸,20 mM EDTA配制量 1 L配制办法 l.称量下列试剂,置于l L烧杯中.2.3.加去离子水将溶液定容至l L后,室温保存.10×MOPS(3-吗啉基丙磺酸)Buffer组份浓度 200 rnM MOPS,20 mM NaOAc,10 mM EDTA配制量 1 L配制办法 1.称41.8 g MOPS,置于1 L烧杯中.2.加约700 ml DEPC处理水,搅拌消融.3.应用2 N NaOH调节pH值至7.0.4.再向溶液中参加下列试剂.5.用6.用0.45 m滤膜过滤除去杂质.7.室温避光保存.注:溶液见光或高温灭菌后会变黄.变黄时也可应用,但变黑时不要应用.溴乙锭 (10 mg/ml)组份浓度 10 mg/ml溴乙锭配制量 100 ml配制办法 1.称量1 g溴乙锭,参加到100 ml容器中.2.参加去离子水100 ml,充分搅拌数h完整消融溴乙锭.3.将溶液转移至棕色瓶中,室温避光保存.4.溴乙锭的工作浓度为0.5 g/ml.留意:溴乙锭是一种致癌物资,必须当心操作.Agarose凝胶配制办法 1.配制适量的电泳及制胶用的缓冲液(平日是0.5×TBE或1×TAE).2.根椐制胶量及凝胶浓度,精确称量琼脂糖粉,参加恰当的锥形瓶中.3.参加必定量的电泳缓冲液(总液体量不宜超过锥形瓶的50%容量).注:用于电泳的缓冲液和用于制胶的缓冲液必须同一.4.在锥形瓶的瓶封上保鲜膜,并在膜上扎些小孔,然后在微波炉中加热融化琼脂糖.加热进程中,当溶液沸腾后,请戴上防热手套.当心动摇锥形瓶.使琼脂糖充分平均融化.此操作反复数次,直至琼脂糖完整融化.必须留意,在微波炉中加热时光不宜过长,每次当溶液起泡沸腾时停滞加热,不然会引起溶液过热暴沸,造成琼脂糖凝胶浓度不准,也会破坏微波炉.融化琼脂糖时,必须保证琼脂糖充分完整融化,不然,会造成电泳图像隐约不清.5.使溶液冷却至60℃阁下,如须要可在此时参加溴乙锭溶液(终浓度0.5 µg/ml).并充分混匀.注:溴乙锭是一种致癌物资.应用含有溴乙锭的溶液时,请戴好手套.6.将琼脂糖溶液倒入制胶模中,然后在恰当地位处插上梳子.凝胶厚度一般在3~5 min之间.7.在室温下使胶凝固(大约30 min~1 h),然后放置于电泳槽中进行电泳.注:凝胶不立刻应用时,请用保鲜膜将凝胶包好后在4℃下保存,一般可保存2~5天.琼脂糖凝胶浓度与线形DNA的最佳分辩规模6×Loading Buffer(DNA电泳用)组份浓度配制量配制办法 1.称量下列试剂,置于500 ml烧杯中.2.3.参加180 ml的甘油(Glycerol)后,应用2 N NaOH调节pH值至7.0.4.用去离子水定容至500 ml后,室温保存.10 × Loadlng Buffer(RNA电泳用)组份浓度配制置配制办法 1.称量下列试剂,置于10 ml离心管中.2.3.参加5 ml的甘油(Glycerol)后,充分混匀.4.用DEPC处理水定容至10 ml后,室温保存.四.核酸.蛋白质杂交用相干试剂.缓冲液的配制办法20×SSC组份浓度 3.0 M NaCl,0.3 MNa3citrate·2H2O(柠檬酸钠)配制量 1 L配制办法 1.称量下列试剂,置于l L烧杯中.2.3滴加14 N HCl,调节pH值至7.0后,加去离子水将溶液定容至1 L.4.高温高压灭菌后,室温保存.20×SSPE Buffer组份浓度 3.0 M NaCl,0.2 M NaH2PO4,0.02 M EDTA配制量 1.L配制办法 1.称量下列试剂,置于l L烧杯中.2. 3.加NaOH 调节pH 值至7.4(约6.5 ml 的10 N NaOH). 4.加去离子水将溶液定容至l L. 5.高温高压灭菌后,室温保存.50 X Denhardt’S 溶液 组份浓度 配制量 500 ml 配制办法 1.称量下列试剂,置于500 ml 烧杯中. 2.加去离子水约400 ml,充分搅拌消融3.加去离子水将溶液定容至500 ml.4.用0.45µm 滤膜过滤后,分装成每份25 ml.5.-20℃保存.0.5 M 磷酸盐Buffer 组份浓度 0.5 M Na 2HPO 4. 配制量 l L配制办法 1.称量134 g Na 2HPO 4·7H 2O 置于l L 烧杯中. 2.参加约800 ml 的去离子水充分搅拌消融. 3.参加85%的H 3PO 4(浓磷酸)调节溶液pH 值至7.2. 4.加去离子水定容至1 L. 5.高温高压灭菌后,室温保存.Salmon DNA (鲑鱼精DNA)组份浓度 10 mg/ml Salmon DNA配制量约100 ml配制办法 1.称取鲑鱼精DNA 2 g置于500 ml烧杯中,参加约200 ml的TE Buffer.2用磁力搅拌器室温搅拌2~4h,消融后参加4 ml的5 M NaCl,使其终浓度为0.1 M.3.用苯酚和苯酚/氯仿各抽提1次.4.收受接管水相溶液后,应用17号皮下打针针头快速吸打溶液约20次,以割断DNA.5.参加2倍体积的预冷乙醇进行乙醇沉淀.6.离心收受接管DNA后,消融于100 ml的去离子水中.测定溶液的OD260值.7.盘算溶液的DNA浓度后,稀释DNA溶液至10 mg/ml.8.煮沸10min后,分装成小份(1 ml/份).-20℃保存.9.应用前在滚水浴中加热5min后,敏捷冰浴冷却.DNA变性缓冲液组份浓度 1.5 M NaCl,0.5 M NaOH配制量 1 L配制办法 1.称量下列试剂,置于l L烧杯中.2.3.加去离子水将溶液定容至l L后,室温保存.预杂交液/杂交液(DNA杂交用)组份浓度Array配制置 100 ml配制办法 1.称量下列试剂,置于200ml烧杯中.分混匀后,应用质后应用.(RNA 杂交用)组份浓度 配制量 100 mL 配制办法 1.称量下列试剂,置于200ml 烧杯中.分混匀后,应用杂质后应用.(Western 杂交用)组份浓度 39 mM Glycine,48 mM Tris,0.037%(W/V)SDS,20%(V/V)甲醇 配制量 1 L配制办法 1.称量下列试剂,置于l L 烧杯中.2. 3.加去离子水将溶液定溶至800 ml 后,参加200 ml 的甲醇. 4.室温保存.TBST Buffer(Western 杂交膜清洗液)组份浓度 20 mM Tris-HCl,150 mM NaCl,0.05%(V/V)Tween 20 配制量 1 L配制办法 1.称量下列试剂,置于l L 烧杯中.2.3.参加0.5 ml Tween 20后充分混匀.4.加去离子水将溶液定容至l L后,4℃保存.关闭缓冲液(Western杂交用)组份浓度 5%(W/V)脱脂奶粉/TBST Buffer配制量 100 ml配制办法 1.称5 g脱脂奶粉参加到100 mlTBST Buffer中,充分搅拌消融.2.4℃保存待用(本关闭液应当现配现用).五.试验室常用造就基的配制办法Ampicillin(氨卡青霉素)(100 mg/ml)组份浓度 100 mg/ml Ampicillin配制量 50 ml配制办法 1.称量5 g Ampicillin置于50 ml离心管中.2.参加40 ml灭菌水,充分混杂消融后,定容至50 ml.3.用0.22 µm过滤膜过滤除菌.4.小份分装(1 ml/份)后,-20℃保存.IPTG(异丙基-β-D-硫代半乳糖苷)(24 mg/ml)组份浓度 24 mg/mL IPTG配制量 50 mL配制办法 1.称1.2 g IPTG置于50 ml离心管中.2.参加40 ml灭菌水,充分混杂消融后,定容至50 ml.3.用0 22 µm过滤膜过滤除菌.4小份分装(1 ml,份)后,-20℃保存.X-Gal (20 mg/ml)组份浓度 20 mg/ml X-Gal配制量 50 ml配制办法 1.称量l g X-Gal置于50 ml离心管中.2.参加40 ml DMF(二甲基甲酰胺),充分混杂消融后,定容至50 ml.3.小份分装(1 ml/份)后,-20℃避光保存.LB造就基组份浓度 1%(W/V)Tryptone(胰蛋白胨),0.5%(W/V)Yeast Extract(酵母提取物),1%(W/V)NaCl 配制量 1 L配制办法 1.称取下列试剂,置于l L烧杯中.2.3.滴加5 N NaOH(约0.2 m1),调节pH值至7.0.4.加去离子水将造就基定容至1 L.5高温高压灭菌后,4.C保存.LB/Amp造就基组份浓度配制量 1 L配制办法 1.称取下列试剂,置于l L烧杯中.2.3.滴加5 N NaOH(约0.2 mL).调节pH值至7.0.4.加去离子水将造就基定容至1 L.5.高温高压灭菌后,冷却至室温.6.参加1 ml Ampicillin(100 mg/ml)后平均混杂.7.4℃保存.TB造就基组份浓度配制量 1.L配制办法 1.配制磷酸盐缓;中液(0.17 M KH2PO4,0.72 M K2HPO4)100 ml.消融2.31 g KH2PO4和l2.54 g K2HPO4于90 ml的去离子水中,搅拌消融后,加去离子水定容至100 ml,高温高压灭菌.2.称取下列试剂,置于l L烧杯中.3.4.加去离子水将造就基定容至1 L后,高温高压灭菌.5.待溶液冷却至60℃以下时,;参加100 ml的上述灭菌磷酸盐缓冲液.6.4℃保存.TB/Amp造就基组份浓度配制量 1 L配制办法 1.配制磷酸盐缓冲液(0.17 M KH2PO4,0.72 M K2HPO4)100 ml.消融2.31 g KH2PO4,和12.54g K2HPO4于90 ml的去离子水中,搅拌消融后,加去离子水定容至100 ml,高温高压灭菌.2.称取下列试剂,置于l L烧杯中.第11页,-共11页。

缓冲液的配制方法

缓冲液的配制方法

缓冲液的配制方法(总14页)--本页仅作为文档封面,使用时请直接删除即可----内页可以根据需求调整合适字体及大小--核酸电泳相关试剂、缓冲液的配制方法50×TAE Buffer组份浓度 2 M Tris-醋酸,100 mM EDTA配制量 1 L配制方法3.加入 ml的乙酸,充分搅拌。

4.加去离子水将溶液定容至l L后,室温保存。

10×TBE Buffer组份浓度 890 mM Tris-硼酸,20 mM EDTA配制量 1 L配制方法3.加去离子水将溶液定容至l L后,室温保存。

10×MOPS(3-吗啉基丙磺酸)Buffer组份浓度 200 rnM MOPS,20 mM NaOAc,10 mM EDTA配制量 1 L配制方法 1.称 g MOPS,置于1 L烧杯中。

2.加约700 ml DEPC处理水,搅拌溶解。

3.使用2 N NaOH调节pH值至。

6.用 m滤膜过滤除去杂质。

7.室温避光保存。

注:溶液见光或高温灭菌后会变黄。

变黄时也可使用,但变黑时不要使用。

溴乙锭 (10 mg/ml)组份浓度 10 mg/ml溴乙锭配制量 100 ml配制方法 1.称量1 g溴乙锭,加入到100 ml容器中。

2.加入去离子水100 ml,充分搅拌数h完全溶解溴乙锭。

3.将溶液转移至棕色瓶中,室温避光保存。

4.溴乙锭的工作浓度为 g/ml。

注意:溴乙锭是一种致癌物质,必须小心操作。

Agarose凝胶配制方法 1.配制适量的电泳及制胶用的缓冲液(通常是×TBE或1×TAE)。

2.根椐制胶量及凝胶浓度,准确称量琼脂糖粉,加入适当的锥形瓶中。

3.加入一定量的电泳缓冲液(总液体量不宜超过锥形瓶的50%容量)。

注:用于电泳的缓冲液和用于制胶的缓冲液必须统一。

4.在锥形瓶的瓶封上保鲜膜,并在膜上扎些小孔,然后在微波炉中加热熔化琼脂糖。

加热过程中,当溶液沸腾后,请戴上防热手套。

Tris-乙酸电泳缓冲液

Tris-乙酸电泳缓冲液
等相关实验。 Tris-乙酸电泳缓冲液即 Tris acetate-EDTA buffer,简称 TAE。1×TAE 工作液中含有 40mM
Tris-acetate、1mM EDTA(pH8.0)。TAE 是常用的 DNA 电泳缓冲液, 本试剂是 50 倍浓缩的 TAE,主要由 2M Tris-acetate,50mM EDTA 组成,使用时需用蒸馏水或去离子水稀释 50 倍 后使用。
Tris-乙酸电泳缓冲液(50×TAE)
试剂盒储存条件: 室温保存。
试剂盒组成:
产品组成 规格
Tris-乙酸电泳缓冲液(50×TAE) 使用说明书
100ml 100ml1来自500ml 500ml
1
有效期: 12 个月。
使用限制: 本试剂盒仅供科学研究使用,不可用于诊断或治疗。
产品简介: Tris-乙酸电泳缓冲液采用高纯度、高品质原料进行配制,可用于生命科学研究核酸提取
使用方法: 用蒸馏水或去离子水稀释到 1×后使用。

各种缓冲液配方

各种缓冲液配方

三、核酸电泳相关试剂、缓冲液的配制方法50×TAE Buffer (pH8.5)组份浓度2 M Tris-醋酸,100 mM EDTA 配制量 1 L配制方法1.2.3.加入57.1 ml 的乙酸,充分搅拌。

4.加去离子水将溶液定容至l L 后,室温保存。

10×TBE Buffer (pH8.3)组份浓度890 mM Tris- 硼酸,20 mM EDTA 配制量 1 L配制方法l.2.3.加去离子水将溶液定容至l L 后,室温保存。

10×MOPS(3-吗啉基丙磺酸)Buffer组份浓度200 rnM MOPS,20 mM NaOAc,10 mM EDTA 配制量 1 L配制方法1.称41.8 g MOPS,置于1 L 烧杯中。

2.加约700 ml DEPC 处理水,搅拌溶解。

3.使用2 N NaOH 调节pH 值至7.0。

4.5.用DEPC6.用0.45 m 滤膜过滤除去杂质。

7.室温避光保存。

注:溶液见光或高温灭菌后会变黄。

变黄时也可使用,但变黑时不要使用。

溴乙锭(10 mg/ml) 组份浓度10 mg/ml 溴乙锭配制量100 ml 配制方法 1.称量 1 g 溴乙锭,加入到100 ml 容器中。

2.加入去离子水100 ml ,充分搅拌数h 完全溶解溴乙锭。

3.将溶液转移至棕色瓶中,室温避光保存。

4.溴乙锭的工作浓度为0.5 g/ml 。

注意:溴乙锭是一种致癌物质,必须小心操作。

Agarose 凝胶配制方法1. 配制适量的电泳及制胶用的缓冲液(通常是0.5×TBE 或1×TAE)。

2.根椐制胶量及凝胶浓度,准确称量琼脂糖粉,加入适当的锥形瓶中。

3.加入一定量的电泳缓冲液(总液体量不宜超过锥形瓶的50%容量)。

注:用于电泳的缓冲液和用于制胶的缓冲液必须统一。

4.在锥形瓶的瓶封上保鲜膜,并在膜上扎些小孔,然后在微波炉中加热熔化琼脂糖。

加热过程中,当溶液沸腾后,请戴上防热手套。

[VIP专享]TAE缓冲液

[VIP专享]TAE缓冲液
loading buffer
loading buffer 的中文名字叫上样缓冲液,6*的缓冲液中可以显示两条带,前面的蓝色的 条带是溴酚蓝,代表的片段大小是 300bp,后面的有点绿色的条带是二甲苯青,代表的片 段大小在 4000bp 左右。 loading buffer 的功能主要有两个。第一,里边的指示剂溴酚蓝和二甲苯酚起到指示的 作用,显示电泳的进程,以便我们适时终止电泳;第二,里边的成分甘油可以加大样品密 度,使样品密度大于 TAE,从而沉降到点样孔中,防止样品飘出点样孔。另外,有的 Buffer 是加有 SDS 的,一般都会写明。SDS 主要是促使聚合酶变性,因为没有除尽的聚
5.加入 2-ME 的 Loading Buffer 可在室温下保存一个月左右
1.生物学的聚合酶链式反应
定义
聚合酶链式反应简称 PCR(英文全称:Polymerase Chain Reaction),
聚合酶链式反应
具体内容点击: 聚合酶链式反应,简称 PCR。聚合酶链式反应,其英文 Polymease Chain Reaction(PCR)是体外酶促合成特异 DNA 片段的一种方法,由高温变性、低温退火及 适温延伸等几步反应组成一个周期,循环进行,使目的 DNA 得以迅速扩增,具有特异性强、灵 敏度高、操作简便、省时等特点。它不仅可用于基因分离、克隆和核酸序列分析等基础研 究,还可用于疾病病的诊断或任何有 DNA,RNA 的地方.聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,简称 PCR)又称无细胞分子克隆或特异性 DNA 序列体外引物定向酶促 扩增技术。 由美国科学家 PE(Perkin Elmer 珀金-埃尔默)公司遗传部的 Dr. Mullis 发明, 由于 PCRPCR 技术在理论和应用上的跨时代意义,因此 Mullis 获得了 1993 年诺贝尔化学 奖。

Tris-乙酸电泳缓冲液(50×TAE,RNase free)

Tris-乙酸电泳缓冲液(50×TAE,RNase free)

北京雷根生物技术有限公司 Tris-乙酸电泳缓冲液(50×TAE,RNase free)
产品简介:
Tris-乙酸电泳缓冲液即Tris acetate-EDTA buffer,简称TAE。

1×TAE工作液中含有40mM Tris-acetate、1mM EDTA(pH8.0)。

TAE是非常常用的DNA电泳缓冲液。

本试剂是50倍浓缩的用0.1%DEPC处理水配制的TAE,使用时需用DEPC处理水稀释50倍后使用。

50×TAE(RNase free)主要用于RNA电泳。

产品组成:
操作步骤(仅供参考):
1、用DEPC处理水稀释到1×后使用。

注意事项:
1、如果每次的使用量很小,可以适当分装后再使用。

2、实验过程中,避免RNase污染。

3、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

有效期:12个月有效。

相关产品:
产品编号 产品名称
NA0006DNA凝胶加样缓冲液(6×DNA Loading Buffer)
NA0015MOPS电泳缓冲液(1×,RNase free)
NA0034Tris-硼酸电泳缓冲液(5×TBE)
NA0042Tris-磷酸电泳缓冲液(1×TPE)
NA0067碱性琼脂糖凝胶加样缓冲液(6×)
PE0025SDS-PAGE蛋白加样缓冲液(5×)
PE0092Tris-甘氨酸电泳缓冲液(5×SDS-PAGE)。

各种缓冲液配方

各种缓冲液配方

三、核酸电泳相关试剂、缓冲液的配制方法50×TAE Buffer (pH8.5)组份浓度 2 M Tris-醋酸,100 mM EDTA配制量 1 L配制方法 1.称量下列试剂,置于1 L烧杯中。

2.向烧杯中加入约800 ml的去离子水,充分搅拌溶解。

3.加入57.1 ml的乙酸,充分搅拌。

4.加去离子水将溶液定容至l L后,室温保存。

10×TBE Buffer (pH8.3)组份浓度890 mM Tris-硼酸,20 mM EDTA配制量 1 L配制方法l.称量下列试剂,置于l L烧杯中。

2.向烧杯中加入约800 ml的去离子水,充分搅拌溶解。

3.加去离子水将溶液定容至l L后,室温保存。

10×MOPS(3-吗啉基丙磺酸)Buffer组份浓度200 rnM MOPS,20 mM NaOAc,10 mM EDTA配制量 1 L配制方法 1.称41.8 g MOPS,置于1 L烧杯中。

2.加约700 ml DEPC处理水,搅拌溶解。

3.使用2 N NaOH调节pH值至7.0。

4.再向溶液中加入下列试剂。

5.用DEPC处理水将溶液定容至1 L。

6.用0.45 m滤膜过滤除去杂质。

7.室温避光保存。

注:溶液见光或高温灭菌后会变黄。

变黄时也可使用,但变黑时不要使用。

溴乙锭(10 mg/ml)组份浓度10 mg/ml溴乙锭配制量100 ml配制方法 1.称量1 g溴乙锭,加入到100 ml容器中。

2.加入去离子水100 ml,充分搅拌数h完全溶解溴乙锭。

3.将溶液转移至棕色瓶中,室温避光保存。

4.溴乙锭的工作浓度为0.5 g/ml。

注意:溴乙锭是一种致癌物质,必须小心操作。

Agarose凝胶配制方法 1.配制适量的电泳及制胶用的缓冲液(通常是0.5×TBE或1×TAE)。

2.根椐制胶量及凝胶浓度,准确称量琼脂糖粉,加入适当的锥形瓶中。

3.加入一定量的电泳缓冲液(总液体量不宜超过锥形瓶的50%容量)。

核酸电泳相关试剂、缓冲液的配制方法

核酸电泳相关试剂、缓冲液的配制方法

核酸电泳相关试剂、缓冲液的配制方法50×TAE Buffer (pH8.5)10×TBE Buffer (pH8.3)10×MOPS Buffer ■组份浓度 2 M Tirs-醋酸,100 mM EDTA■配制量 1 L■配制方法 1. 称量下列试剂,置于1 L烧杯中。

Tris 242 gNa2EDTA·2H2O 37.2 g2. 向烧杯中加入约800 ml的去离子水,充分搅拌溶解。

3. 加入57.1 ml的醋酸,充分搅拌。

4. 加去离子水将溶液定容至1 L后,室温保存。

■组份浓度 890 mM Tirs-硼酸,20 mM EDTA■配制量 1 L■配制方法 1. 称量下列试剂,置于1 L烧杯中。

Tris 108 gNa2EDTA·2H2O 7.44 g硼酸 55 g2. 向烧杯中加入约800 ml的去离子水,充分搅拌溶解。

3. 加去离子水将溶液定容至1 L后,室温保存。

■组份浓度 200 mM MOPS,20 mM NaOAc,10 mM EDTA■配制量 1 L■配制方法 1. 称量41.8 g MOPS,置于1 L烧杯中。

2. 加约700 ml DEPC处理水,搅拌溶解。

3. 使用2 N NaOH调节pH值至7.0。

4. 再向溶液中加入下列试剂。

1 M NaOAc(DEPC处理) 20 ml0.5 M EDTA(pH8.0)(DEPC处理) 20 ml5. 用DEPC处理水将溶液定容至1 L。

6. 用0.45 μm滤膜过滤除去杂质。

7. 室温避光保存。

注:溶液见光或高温灭菌后会变黄。

变黄时也可使用,但变黑时不要使用。

溴乙锭(10 mg/ml) Agarose凝胶■组份浓度 10 mg/ml溴乙锭■配制量 100 ml■配制方法 1. 称量1 g溴乙锭,加入到100 ml容器中。

2. 加入去离子水100 ml,充分搅拌数小时完全溶解溴乙锭。

柠檬酸钠抗原修复液(50×)使用说明书

柠檬酸钠抗原修复液(50×)使用说明书

柠檬酸钠 去交联试
和 EDTA
剂等
SDS 等
柠檬酸钠等
抗原修复 温度
95-100℃
95-100℃ 95-100℃
95-100℃
室温
80℃
石蜡切片 修复效果
+++
++
+++
++++
+
+
冰冻切片 修复效果
++
+
++
+++
+++
+
漂片修复 效果
++
+
++
+++
+
+++
毒性
无毒
无毒
无毒
微量毒性
无毒
无毒
使用便捷 程度
杭州昊鑫生物科技股份有限公司
htpp://
柠檬酸钠抗原修复液(50×)
柠檬酸钠抗原修复液(50×) 细胞或组织用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后,会导致蛋白之间的交联,遮蔽样品
的抗原位点,导致免疫染色时染色信号减弱,甚至出现一些假阳性染色结果。 柠檬酸钠抗原修复液(50×)采用了广泛使用的柠檬酸钠缓冲液(pH6.0),可有效去除醛类
温馨提示 为了您的自身安全,使用试剂前,请做好防护,如穿实验服,戴手套等。
储存温度 2~8℃保存。如果长时间不使用,请保存于-20℃。
包装清单 货号
HCY057
品名 柠檬酸钠抗原修复液(50×)
说明书
包装 100mL 1份

TAE概述

TAE概述

一、电泳缓冲液概述电泳缓冲液是指在进行分子电泳时所使用的缓冲溶液,用以稳定体系酸碱度。

常见的核酸电泳缓冲液有:TAE、TBE、TPE和MOPS等。

作用缓冲液在电泳过程中的一个作用是维持合适的pH。

电泳时正极与负极都会发生电解反应,正极发生的是氧化反应(4OH--4e->2H2O+O2),负极发生的是还原反应(4H++4e->2H2),长时间的电泳将使正极变酸,负极变碱。

一个好的缓冲系统应有较强的缓冲能力,是溶液两极的pH保持基本不变。

电泳缓冲液的另一个作用是使溶液具有一定的导电性,以利于DNA分子的迁移,例如,一般电泳缓冲液中应含有0.01-0.04mol/L的Na+离子,Na+离子的浓度太低时电泳速度变慢;太高时就会造成过大的电流使胶发热甚至熔化。

电泳缓冲液还有一个组分是EDTA,加入浓度为1-2mmol/L,目的是螯合Mg2+ 等离子,防止电泳时激活DNA酶,此外还可防止Mg2+离子与核酸生成沉淀。

特点二、TAE是使用最广泛的缓冲系统。

其特点是超螺旋在其中电泳时更符合实际相对分子质量(TBE中电泳时测出的相对分子质量会大于实际分子质量),且双链线状DNA在其中的迁移率较其他两种缓冲液快约10%,电泳大于13kb的片段时用TAE缓冲液将取得更好的分离效果,此外,回收DNA片段时也易用TAE缓冲系统进行电泳。

TAE的缺点是缓冲容量小,长时间电泳(如过夜)不可选用,除非有循环装置使两极的缓冲液得到交换。

TBE的特点是缓冲能力强,长时间电泳时可选用TBE,并且当用于电泳小于1kb 的片段时分离效果更好。

TBE用于琼脂糖凝胶时易造成高电渗作用,并且因与琼脂糖相互作用生成非共价结合的四羟基硼酸盐复合物而使DNA片段的回收率降低,所以不宜在回收电泳中使用。

TPE的缓冲能力也较强,但由于磷酸盐易在乙醇沉淀过程中析出,所以也不宜在回收DNA片段的电泳中使用。

三、50×TAE Buffer 配制方法:1。

碧云天EDTA抗原修复液(50X)说明书

碧云天EDTA抗原修复液(50X)说明书

碧云天生物技术/Beyotime Biotechnology 订货热线:400-1683301或800-8283301 订货e-mail :******************技术咨询:*****************网址:碧云天网站 微信公众号EDTA 抗原修复液(50X)产品编号 产品名称包装 P0085EDTA 抗原修复液(50X)100ml产品简介:碧云天生产的EDTA 抗原修复液(EDTA Antigen Retrieval Solution)是一种常用的抗原修复液,可以用于石蜡切片、冰冻切片等样品使用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后的抗原修复。

细胞或组织用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后,会导致蛋白之间的交联(cross-link),从而遮蔽样品的抗原位点,导致免疫染色时染色信号减弱,甚至出现一些假阳性染色结果。

本抗原修复液采用了广泛使用的EDTA ,可以有效去除醛类固定试剂导致的蛋白之间的交联,充分暴露石蜡切片等样品中的抗原表位,从而大大改善免疫染色效果。

通常石蜡切片都需进行抗原修复处理,而冰冻切片可以不进行抗原修复处理。

抗原修复会大大改善石蜡切片的免疫染色效果,但对于冰冻切片的染色效果很多文献资料表明也有显著改善。

特别是当冰冻切片免疫染色效果欠佳时,可以考虑尝试进行抗原修复。

从原理上来看,无论冰冻切片还是细胞爬片等,只要是用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定的样品,进行抗原修复都会有效去除蛋白之间的交联,充分暴露抗原表位,从而大大改善免疫染色效果。

本产品特别适合用于石蜡切片,也可以用于冰冻切片等其它样品。

关于碧云天生产的各种抗原修复液的主要特点和差异可参考我们的相关网页:/support/antigen-retrieval-solution.htm 。

一个包装的本产品可以配制成5000毫升抗原修复液(1X)。

按照每个片子需要10毫升抗原修复液(1X)计算,一个包装的本产品可以用于500个样品。

TAE缓冲液

TAE缓冲液

TAE缓冲液:电泳缓冲液Tris-乙酸TAE缓冲液成分及终浓度:1、2mol/L Tris碱2、1mol/L 乙酸3、100 mmol/L EDTA4、水配制1L的50×TAE缓冲液各成分用量:1、 Tris碱(242g)2、冰乙酸(57.1 ml)3、EDTA【200ml的0.5 mol/L EDTA(pH 8.0)】4、水(补足1L)50×TAE缓冲液的配制方法:称下列试剂,1L烧杯Tris 242g Na2EDTA.2H2O 37.2g然后加入800ml的去离子水,充分搅拌溶解。

加入57.1ml的醋酸,充分混匀。

加去离子水定容至1L,室温保存。

AE是使用最广泛的缓冲系统。

其特点是超螺旋在其中电泳时更符合实际相对分子质量(TBE 中电泳时测出的相对分子质量会大于实际分子质量),且双链线状DNA在其中的迁移率较其他两种缓冲液快约10%,电泳大于13kb的片段时用TAE缓冲液将取得更好的分离效果,此外,回收DNA片段时也易用TAE缓冲系统进行电泳。

TAE的缺点是缓冲容量小,长时间电泳(如过夜)不可选用,除非有循环装置使两极的缓冲液得到交换。

loading bufferloading buffer 的中文名字叫上样缓冲液,6*的缓冲液中可以显示两条带,前面的蓝色的条带是溴酚蓝,代表的片段大小是300bp,后面的有点绿色的条带是二甲苯青,代表的片段大小在4000bp左右。

loading buffer的功能主要有两个。

第一,里边的指示剂溴酚蓝和二甲苯酚起到指示的作用,显示电泳的进程,以便我们适时终止电泳;第二,里边的成分甘油可以加大样品密度,使样品密度大于TAE,从而沉降到点样孔中,防止样品飘出点样孔。

另外,有的Buffer是加有SDS的,一般都会写明。

SDS主要是促使聚合酶变性,因为没有除尽的聚合酶会结合在DNA双链上影响它的迁移速率。

细胞裂解后的裂解液,加loading 100℃加热,也是为了中止酶促反应,防止提取的蛋白质降解。

【2019年整理】TAE缓冲液

【2019年整理】TAE缓冲液

TAE缓冲液:电泳缓冲液Tris-乙酸TAE缓冲液成分及终浓度:1、2mol/L Tris碱2、1mol/L 乙酸3、100 mmol/L EDTA4、水配制1L的50×TAE缓冲液各成分用量:1、 Tris碱(242g)2、冰乙酸(57.1 ml)3、EDTA【200ml的0.5 mol/L EDTA(pH 8.0)】4、水(补足1L)50×TAE缓冲液的配制方法:称下列试剂,1L烧杯Tris 242g Na2EDTA.2H2O 37.2g然后加入800ml的去离子水,充分搅拌溶解。

加入57.1ml的醋酸,充分混匀。

加去离子水定容至1L,室温保存。

AE是使用最广泛的缓冲系统。

其特点是超螺旋在其中电泳时更符合实际相对分子质量(TBE 中电泳时测出的相对分子质量会大于实际分子质量),且双链线状DNA在其中的迁移率较其他两种缓冲液快约10%,电泳大于13kb的片段时用TAE缓冲液将取得更好的分离效果,此外,回收DNA片段时也易用TAE缓冲系统进行电泳。

TAE的缺点是缓冲容量小,长时间电泳(如过夜)不可选用,除非有循环装置使两极的缓冲液得到交换。

loading bufferloading buffer 的中文名字叫上样缓冲液,6*的缓冲液中可以显示两条带,前面的蓝色的条带是溴酚蓝,代表的片段大小是300bp,后面的有点绿色的条带是二甲苯青,代表的片段大小在4000bp左右。

loading buffer的功能主要有两个。

第一,里边的指示剂溴酚蓝和二甲苯酚起到指示的作用,显示电泳的进程,以便我们适时终止电泳;第二,里边的成分甘油可以加大样品密度,使样品密度大于TAE,从而沉降到点样孔中,防止样品飘出点样孔。

另外,有的Buffer是加有SDS的,一般都会写明。

SDS主要是促使聚合酶变性,因为没有除尽的聚合酶会结合在DNA双链上影响它的迁移速率。

细胞裂解后的裂解液,加loading 100℃加热,也是为了中止酶促反应,防止提取的蛋白质降解。

缓冲液的配制方法

缓冲液的配制方法

核酸电泳相关试剂、缓冲液的配制方法之迟辟智美创作50×TAE Buffer (pH8.5)组份浓度 2 M Tris-醋酸,100 mM EDTA配制量 1 L配制方法 1.称量下列试剂,置于1 L烧杯中.2..3.加入57.1 ml的乙酸,充沛搅拌.4.加去离子水将溶液定容至l L后,室温保管.10×TBE Buffer (pH8.3)组份浓度 890 mM Tris-硼酸,20 mM EDTA配制量 1 L配制方法 l.称量下列试剂,置于l L烧杯中.2..3.加去离子水将溶液定容至l L后,室温保管.10×MOPS(3-吗啉基丙磺酸)Buffer组份浓度 200 rnM MOPS,20 mM NaOAc,10 mM EDTA配制量 1 L配制方法 1.称41.8 g MOPS,置于1 L烧杯中.2.加约700 ml DEPC处置水,搅拌溶解.3.使用2 N NaOH调节pH值至7.0.4.再向溶液中加入下列试剂.5.用6.用0.45 m滤膜过滤除去杂质.7.室温避光保管.注:溶液见光或高温灭菌后会变黄.变黄时也可使用,但变黑时不要使用.溴乙锭 (10 mg/ml)组份浓度 10 mg/ml溴乙锭配制量 100 ml配制方法 1.称量1 g溴乙锭,加入到100 ml容器中.2.加入去离子水100 ml,充沛搅拌数h完全溶解溴乙锭.3.将溶液转移至棕色瓶中,室温避光保管.4.溴乙锭的工作浓度为0.5 g/ml.注意:溴乙锭是一种致癌物质,必需小心把持.Agarose凝胶配制方法 1.配制适量的电泳及制胶用的缓冲液(通常是0.5×TBE或1×TAE).2.根椐制胶量及凝胶浓度,准确称量琼脂糖粉,加入适当的锥形瓶中.3.加入一定量的电泳缓冲液(总液体量不宜超越锥形瓶的50%容量).注:用于电泳的缓冲液和用于制胶的缓冲液必需统一.4.在锥形瓶的瓶封上保鲜膜,并在膜上扎些小孔,然后在微波炉中加热熔化琼脂糖.加热过程中,当溶液沸腾后,请戴上防热手套.小心摇动锥形瓶.使琼脂糖充沛均匀熔化.此把持重复数次,直至琼脂糖完全熔化.必需注意,在微波炉中加热时间不宜过长,每次当溶液起泡沸腾时停止加热,否则会引起溶液过热暴沸,造成琼脂糖凝胶浓度禁绝,也会损坏微波炉.熔化琼脂糖时,必需保证琼脂糖充沛完全熔化,否则,会造成电泳图像模糊不清.5.使溶液冷却至60℃左右,如需要可在此时加入溴乙锭溶液(终浓度0.5 µg/ml).并充沛混匀.注:溴乙锭是一种致癌物质.使用含有溴乙锭的溶液时,请戴好手套.6.将琼脂糖溶液倒入制胶模中,然后在适当位置处插上梳子.凝胶厚度一般在3~5 min之间.7.在室温下使胶凝固(年夜约30 min~1 h),然后放置于电泳槽中进行电泳.注:凝胶不立即使用时,请用保鲜膜将凝胶包好后在4℃下保管,一般可保管2~5天.琼脂糖凝胶浓度与线形DNA的最佳分辨范围6×组份浓度配制量配制方法 1.称量下列试剂,置于500 ml烧杯中.2..3.加入180 ml的甘油(Glycerol)后,使用2 N NaOH调节pH值至7.0.4.用去离子水定容至500 ml后,室温保管.10 × Loadlng Buffer(RNA电泳用)组份浓度配制置配制方法 1.称量下列试剂,置于10 ml离心管中.2..3.加入5 ml的甘油(Glycerol)后,充沛混匀.10 ml后,室温保管.四、核酸、卵白质杂交用相关试剂、缓冲液的配制方法20×SSC组份浓度 3.0 M NaCl,0.3 MNa3citrate·2H2O(柠檬酸钠)配制量 1 L配制方法 1.称量下列试剂,置于l L烧杯中.2..3滴加14 N HCl,调节pH值至7.0后,加去离子水将溶液定容至1 L.4.高温高压灭菌后,室温保管.20×SSPE Buffer组份浓度 3.0 M NaCl,0.2 M NaH2PO4,0.02 M EDTA配制方法 1.称量下列试剂,置于l L 烧杯中.2..3.加NaOH 调节pH 值至7.4(约6.5 ml 的10 N NaOH).4.加去离子水将溶液定容至l L.5.高温高压灭菌后,室温保管. 50 X Denhardt’S 溶液 组份浓度 500 ml配制量配制方法 1.称量下列试500 ml 烧杯中. 剂,置于 2.加去离子水约400 ml ,充沛搅拌溶解3.加去离子水将溶液定容至500 ml.4.用0.45µm 滤膜过滤后,分装成每份25 ml. 5.-20℃保管. 0.5 M 磷酸盐Buffer组份浓度 0.5 M Na 2HPO 4. 配制量 l L配制方法 1.称量134 g Na 2HPO 4·7H 2O 置于l L 烧杯中. 2.加入约800 ml 的去离子水充沛搅拌溶解.3.加入85%的H 3PO 4(浓磷酸)调节溶液pH 值至7.2.4.加去离子水定容至1 L.5.高温高压灭菌后,室温保管. Salmon DNA (鲑鱼精DNA)组份浓度 10 mg/ml Salmon DNA 配制量 约100 ml配制方法 1.称取鲑鱼精DNA 2 g 置于500 ml 烧杯中,加入约200 ml 的TE Buffer.2用磁力搅拌器室温搅拌2~4h ,溶解后加入4 ml 的5 M NaCl ,使其终浓度为0.1 M.3.用苯酚和苯酚/氯仿各抽提1次.4.回收水相溶液后,使用17号皮下注射针头快速吸打溶液约20次,以 切断DNA.5.加入2倍体积的预冷乙醇进行乙醇沉淀.6.离心回收DNA 后,溶解于100 ml 的去离子水中.测定溶液的OD 260值.7.计算溶液的DNA 浓度后,稀释DNA 溶液至10 mg/ml. 8.煮沸10min 后,分装成小份(1 ml/份).-20℃保管. 9.使用前在沸水浴中加热5min 后,迅速冰浴冷却. DNA 变性缓冲液组份浓度 1.5 M NaCl ,0.5 M NaOH 配制量 1 L配制方法 1.称量下列试剂,置于l L 烧杯中.2..3.加去离子水将溶液定容至l L 后,室温保管. 预杂交液/杂交液(DNA 杂交用) 组份浓度 配制置 100 ml 配制方法 1.称量下列试200 ml 烧杯中.剂,置于2.充沛混匀后,使用0.45µm 滤膜滤去杂质后使用.预杂交液/杂交液(RNA 杂交用) 组份浓度 配制量 100 mL 配制方法 1.称量下列试200 ml 烧杯中. 剂,置于2.充沛混匀后,使用0.45µm 滤膜滤去杂质后使用.膜转移缓冲液(Western杂交用)组份浓度 39 mM Glycine,48 mM Tris,0.037%(W/V)SDS,20%(V/V)甲醇配制量 1 L配制方法 1.称量下列试剂,置于l L烧杯中.2..3.加去离子水将溶液定溶至800 ml后,加入200 ml的甲醇.4.室温保管.TBST Buffer(Western杂交膜清洗液)组份浓度 20 mM Tris-HCl,150 mM NaCl,0.05%(V/V)Tween 20配制量 1 L配制方法 1.称量下列试剂,置于l L烧杯中.2...5 ml Tween 20后充沛混匀.4.加去离子水将溶液定容至l L后,4℃保管.封闭缓冲液(Western杂交用)组份浓度 5%(W/V)脱脂奶粉/TBST Buffer配制量 100 ml配制方法 1.称5 g脱脂奶粉加入到100 mlTBST Buffer中,充沛搅拌溶解.2.4℃保管待用(本封闭液应该现配现用).五、实验室经常使用培养基的配制方法Ampicillin(氨卡青霉素)(100 mg/ml)组份浓度 100 mg/ml Ampicillin配制量 50 ml配制方法 1.称量5 g Ampicillin置于50 ml离心管中.2.加入40 ml灭菌水,充沛混合溶解后,定容至50 ml.3.用0.22 µm过滤膜过滤除菌.4.小份分装(1 ml/份)后,-20℃保管.IPTG(异丙基-β-D-硫代半乳糖苷)(24 mg/ml)组份浓度 24 mg/mL IPTG配制量 50 mL配制方法 1.称1.2 g IPTG置于50 ml离心管中.2.加入40 ml灭菌水,充沛混合溶解后,定容至50 ml.3.用0 22 µm过滤膜过滤除菌.4小份分装(1 ml,份)后,-20℃保管.X-Gal (20 mg/ml)组份浓度 20 mg/ml X-Gal配制量 50 ml配制方法 1.称量l g X-Gal置于50 ml离心管中.2.加入40 ml DMF(二甲基甲酰胺),充沛混合溶解后,定容至50 ml.3.小份分装(1 ml/份)后,-20℃避光保管.LB培养基组份浓度 1%(W/V)Tryptone(胰卵白胨),0.5%(W/V)Yeast Extract(酵母提取物),1%(W/V)NaCl配制量 1 L配制方法 1.称取下列试剂,置于l L烧杯中.2.3.滴加5 N NaOH(约0.2 m1),调节pH值至7.0.4.加去离子水将培养基定容至1 L.5高温高压灭菌后,4.C保管.LB/Amp培养基组份浓度配制量配制方法 1.称取下列试剂,置于l L烧杯中.2.3.滴加5 N NaOH(约0.2 mL).调节pH值至7.0.4.加去离子水将培养基定容至1 L.5.高温高压灭菌后,冷却至室温.6.加入1 ml Ampicillin(100 mg/ml)后均匀混合.7.4℃保管. TB 培养基组份浓度配制方法 1.配制磷酸盐(0.17 M缓;中液KH 2PO4,0.72 M K 2HPO 4)100 ml.溶解2.31 g KH 2PO 4和l2.54 g K 2HPO 4于90 ml 的去离子水中,搅拌溶解 后,加去离子水定容至100 ml ,高温高压灭菌.2.称取下列试剂,置于l L 烧杯中.3.4.加去离子水将培养基定容至1 L 后,高温高压灭菌.5.待溶液冷却至60℃以下时,;加入100 ml 的上述灭菌磷酸盐缓冲液.6.4℃保管.TB/Amp 培养基 组份浓度配制量配制方法 1.配制磷酸盐缓冲液(0.17 M KH 2PO 4,0.72 M K 2HPO 4)100 ml.溶解2.31 g KH 2PO 4,和12.54g K 2HPO 4于90 ml 的去离子水中,搅拌溶解后,加去离子水定容至100 ml ,高温高压灭菌.2.称取下列试剂,置于l L 烧杯中.。

核酸电泳相关试剂、缓冲液的配制方法(DOC)

核酸电泳相关试剂、缓冲液的配制方法(DOC)

核酸电泳相关试剂、缓冲液的配制方法(DOC)核酸电泳相关试剂、缓冲液的配制方法50×TAE Buffer (pH8.5)组份浓度 2 M Tris-醋酸,100 mM EDTA配制量 1 L配制方法1.称量下列试剂,置于1 L烧杯中。

2.向烧杯中加入约800 ml的去离子水,充分搅拌溶解。

3.加入57.1 ml的乙酸,充分搅拌。

4.加去离子水将溶液定容至l L后,室温保存。

10×TBE Buffer (pH8.3)组份浓度890 mM Tris-硼酸,20 mM EDTA配制量 1 L配制方法1.称量下列试剂,置于l L烧杯中。

2.向烧杯中加入约800 ml的去离子水,充分搅拌溶解。

3.加去离子水将溶液定容至l L后,室温保存。

10×MOPS(3-吗啉基丙磺酸)Buffer组份浓度200 rnM MOPS,20 mM NaOAc,10 mM EDTA 配制量 1 L配制方法1.称41.8 g MOPS,置于1 L烧杯中。

2.加约700 ml DEPC处理水,搅拌溶解。

3.使用2 N NaOH调节pH值至7.0。

4.再向溶液中加入下列试剂。

5.用DEPC处理水将溶液定容至1 L。

6.用0.45 m滤膜过滤除去杂质。

7.室温避光保存。

注:溶液见光或高温灭菌后会变黄。

变黄时也可使用,但变黑时不要使用。

溴乙锭(10 mg/ml)组份浓度10 mg/ml溴乙锭配制量100 ml配制方法1.称量1 g溴乙锭,加入到100 ml容器中。

2.加入去离子水100 ml,充分搅拌数h完全溶解溴乙锭。

3.将溶液转移至棕色瓶中,室温避光保存。

4.溴乙锭的工作浓度为0.5 g/ml。

注意:溴乙锭是一种致癌物质,必须小心操作。

Agarose凝胶配制方法1.配制适量的电泳及制胶用的缓冲液(通常是0.5×TBE或1×TAE)。

2.根椐制胶量及凝胶浓度,准确称量琼脂糖粉,加入适当的锥形瓶中。

TAE概述[培训]

TAE概述[培训]

一、电泳缓冲液概述电泳缓冲液是指在进行分子电泳时所使用的缓冲溶液,用以稳定体系酸碱度。

常见的核酸电泳缓冲液有:TAE、TBE、TPE和MOPS等。

作用缓冲液在电泳过程中的一个作用是维持合适的pH。

电泳时正极与负极都会发生电解反应,正极发生的是氧化反应(4OH--4e->2H2O+O2),负极发生的是还原反应(4H++4e->2H2),长时间的电泳将使正极变酸,负极变碱。

一个好的缓冲系统应有较强的缓冲能力,是溶液两极的pH保持基本不变。

电泳缓冲液的另一个作用是使溶液具有一定的导电性,以利于DNA分子的迁移,例如,一般电泳缓冲液中应含有0.01-0.04mol/L的Na+离子,Na+离子的浓度太低时电泳速度变慢;太高时就会造成过大的电流使胶发热甚至熔化。

电泳缓冲液还有一个组分是EDTA,加入浓度为1-2mmol/L,目的是螯合Mg2+ 等离子,防止电泳时激活DNA酶,此外还可防止Mg2+离子与核酸生成沉淀。

特点二、TAE是使用最广泛的缓冲系统。

其特点是超螺旋在其中电泳时更符合实际相对分子质量(TBE中电泳时测出的相对分子质量会大于实际分子质量),且双链线状DNA在其中的迁移率较其他两种缓冲液快约10%,电泳大于13kb的片段时用TAE缓冲液将取得更好的分离效果,此外,回收DNA片段时也易用TAE缓冲系统进行电泳。

TAE的缺点是缓冲容量小,长时间电泳(如过夜)不可选用,除非有循环装置使两极的缓冲液得到交换。

TBE的特点是缓冲能力强,长时间电泳时可选用TBE,并且当用于电泳小于1kb 的片段时分离效果更好。

TBE用于琼脂糖凝胶时易造成高电渗作用,并且因与琼脂糖相互作用生成非共价结合的四羟基硼酸盐复合物而使DNA片段的回收率降低,所以不宜在回收电泳中使用。

TPE的缓冲能力也较强,但由于磷酸盐易在乙醇沉淀过程中析出,所以也不宜在回收DNA片段的电泳中使用。

三、50×TAE Buffer 配制方法:1。

TAE概述

TAE概述

一、电泳缓冲液概述电泳缓冲液是指在进行分子电泳时所使用的缓冲溶液,用以稳定体系酸碱度。

常见的核酸电泳缓冲液有:TAE、TBE、TPE和MOPS等。

作用缓冲液在电泳过程中的一个作用是维持合适的pH。

电泳时正极与负极都会发生电解反应,正极发生的是氧化反应(4OH--4e->2H2O+O2),负极发生的是还原反应(4H++4e->2H2),长时间的电泳将使正极变酸,负极变碱。

一个好的缓冲系统应有较强的缓冲能力,是溶液两极的pH保持基本不变。

电泳缓冲液的另一个作用是使溶液具有一定的导电性,以利于DNA分子的迁移,例如,一般电泳缓冲液中应含有0.01-0.04mol/L的Na+离子,Na+离子的浓度太低时电泳速度变慢;太高时就会造成过大的电流使胶发热甚至熔化。

电泳缓冲液还有一个组分是EDTA,加入浓度为1-2mmol/L,目的是螯合Mg2+ 等离子,防止电泳时激活DNA酶,此外还可防止Mg2+离子与核酸生成沉淀。

特点二、TAE是使用最广泛的缓冲系统。

其特点是超螺旋在其中电泳时更符合实际相对分子质量(TBE中电泳时测出的相对分子质量会大于实际分子质量),且双链线状DNA在其中的迁移率较其他两种缓冲液快约10%,电泳大于13kb的片段时用TAE缓冲液将取得更好的分离效果,此外,回收DNA片段时也易用TAE缓冲系统进行电泳。

TAE的缺点是缓冲容量小,长时间电泳(如过夜)不可选用,除非有循环装置使两极的缓冲液得到交换。

TBE的特点是缓冲能力强,长时间电泳时可选用TBE,并且当用于电泳小于1kb 的片段时分离效果更好。

TBE用于琼脂糖凝胶时易造成高电渗作用,并且因与琼脂糖相互作用生成非共价结合的四羟基硼酸盐复合物而使DNA片段的回收率降低,所以不宜在回收电泳中使用。

TPE的缓冲能力也较强,但由于磷酸盐易在乙醇沉淀过程中析出,所以也不宜在回收DNA片段的电泳中使用。

三、50×TAE Buffer 配制方法:1。

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50×TAE缓冲液使用说明
货号:T1060
规格:500mL
保存:室温储存,有效期至少12个月。

产品说明:
TAE是生物学中使用最广泛的核酸电泳缓冲液,主要用于DNA的琼脂糖凝胶电泳。

TAE的主要成分是Tris-乙酸盐与EDTA,电泳时双链线状DNA的迁移率较快,电泳大于13kb的片段时分离效果好,此外,回收DNA片段时也宜用TAE缓冲系统进行电泳。

此TAE缓冲液为50×浓缩液,工作浓度为1×,可直接用蒸馏水稀释50倍后使用。

若产品出现沉淀析出,请置于37℃水浴使其溶解,不影响使用。

组分工作浓度
Tris-乙酸盐40mM
EDTA1mM
相关产品:
T10505×TBE缓冲液
D10106×DNA Lodding Buffer
G8142GoldViewⅡ型核酸染色剂(5000×)。

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