5×TBE缓冲液使用说明
缓冲液的配制方法
缓冲液的配制方法(总14页)--本页仅作为文档封面，使用时请直接删除即可----内页可以根据需求调整合适字体及大小--核酸电泳相关试剂、缓冲液的配制方法50×TAE Buffer组份浓度 2 M Tris-醋酸，100 mM EDTA配制量 1 L配制方法3.加入 ml的乙酸，充分搅拌。
4.加去离子水将溶液定容至l L后，室温保存。
10×TBE Buffer组份浓度 890 mM Tris-硼酸，20 mM EDTA配制量 1 L配制方法3.加去离子水将溶液定容至l L后，室温保存。
10×MOPS(3-吗啉基丙磺酸)Buffer组份浓度 200 rnM MOPS，20 mM NaOAc，10 mM EDTA配制量 1 L配制方法 1.称 g MOPS，置于1 L烧杯中。
2.加约700 ml DEPC处理水，搅拌溶解。
3.使用2 N NaOH调节pH值至。
6.用 m滤膜过滤除去杂质。
7.室温避光保存。
注：溶液见光或高温灭菌后会变黄。
变黄时也可使用，但变黑时不要使用。
溴乙锭 (10 mg/ml)组份浓度 10 mg/ml溴乙锭配制量 100 ml配制方法 1.称量1 g溴乙锭，加入到100 ml容器中。
2.加入去离子水100 ml，充分搅拌数h完全溶解溴乙锭。
3.将溶液转移至棕色瓶中，室温避光保存。
4.溴乙锭的工作浓度为 g/ml。
注意：溴乙锭是一种致癌物质，必须小心操作。
Agarose凝胶配制方法 1.配制适量的电泳及制胶用的缓冲液(通常是×TBE或1×TAE)。
2.根椐制胶量及凝胶浓度，准确称量琼脂糖粉，加入适当的锥形瓶中。
3.加入一定量的电泳缓冲液(总液体量不宜超过锥形瓶的50%容量)。
注：用于电泳的缓冲液和用于制胶的缓冲液必须统一。
4.在锥形瓶的瓶封上保鲜膜，并在膜上扎些小孔，然后在微波炉中加热熔化琼脂糖。
加热过程中，当溶液沸腾后，请戴上防热手套。
各种缓冲液配方
三、核酸电泳相关试剂、缓冲液的配制方法50×TAE Buffer (pH8.5)组份浓度2 M Tris-醋酸，100 mM EDTA 配制量 1 L配制方法1.2.3.加入57.1 ml 的乙酸，充分搅拌。
4.加去离子水将溶液定容至l L 后，室温保存。
10×TBE Buffer (pH8.3)组份浓度890 mM Tris- 硼酸，20 mM EDTA 配制量 1 L配制方法l.2.3.加去离子水将溶液定容至l L 后，室温保存。
10×MOPS(3-吗啉基丙磺酸)Buffer组份浓度200 rnM MOPS，20 mM NaOAc，10 mM EDTA 配制量 1 L配制方法1.称41.8 g MOPS，置于1 L 烧杯中。
2.加约700 ml DEPC 处理水，搅拌溶解。
3.使用2 N NaOH 调节pH 值至7.0。
4.5.用DEPC6.用0.45 m 滤膜过滤除去杂质。
7.室温避光保存。
注：溶液见光或高温灭菌后会变黄。
变黄时也可使用，但变黑时不要使用。
溴乙锭(10 mg/ml) 组份浓度10 mg/ml 溴乙锭配制量100 ml 配制方法 1.称量 1 g 溴乙锭，加入到100 ml 容器中。
2.加入去离子水100 ml ，充分搅拌数h 完全溶解溴乙锭。
3.将溶液转移至棕色瓶中，室温避光保存。
4.溴乙锭的工作浓度为0.5 g/ml 。
注意：溴乙锭是一种致癌物质，必须小心操作。
Agarose 凝胶配制方法1. 配制适量的电泳及制胶用的缓冲液（通常是0.5×TBE 或1×TAE）。
2.根椐制胶量及凝胶浓度，准确称量琼脂糖粉，加入适当的锥形瓶中。
3.加入一定量的电泳缓冲液（总液体量不宜超过锥形瓶的50%容量）。
注：用于电泳的缓冲液和用于制胶的缓冲液必须统一。
4.在锥形瓶的瓶封上保鲜膜，并在膜上扎些小孔，然后在微波炉中加热熔化琼脂糖。
加热过程中，当溶液沸腾后，请戴上防热手套。
5X TBE
5X TBE Buffer品名 Cat. Number規格定價5X TBE bufferL0401L/Bottle 259☆產品特色：5X TBE buffer 可讓你立即應用於配製核酸電泳中所需的電泳buffer 及電泳膠片，不但可節省你寶貴的時間，不用你自行配製buffer ，也不用麻煩你去調整PH 值喔！☆5X TBE buffer 配方：0.45M Tris ，0.45M Boric acid ，10mM Na 2EDTA ， pH8.3 @25°C 。
☆操作步驟：1. 1X 電泳buffer 500ml: 400ml ddH 2O ＋100ml5X TBE buffer2. 2%電泳膠片：2g Agarose 加入100ml 1X TBEbuffer 中利用微波爐加熱至完全溶解後，冷卻至60℃左右，再到入鑄膠模內，並插上齒梳，待凝固後即可使用。
☆小米貼心叮嚀：1. 高濃度的10X TBE buffer 於室溫下長期貯存常會出現沈澱，因此為你選用5X 濃度作為長期貯存stock 的最佳濃度。
2. TBE buffer 的buffer capacity 比TAE buffer強，因此TBE buffer 較TAE buffer 適合用來跑較長時間的電泳。
但因為TBE 成分中包含硼酸，目前已知硼酸會影響到部分酵素的作用活性，因此若分離出的DNA 需進行下一步酵素處理，如Cloning 或限制酶切等實驗，則需注意硼酸是否有去除乾淨。
3. 除了TBE buffer 之外，你也可以選用TAE buffer 作為你的電泳液喔！4. 小米提醒你，製作電泳膠片的buffer 需與電泳buffer 相同，才能把電泳跑好喔！5. 1X TBE buffer 若久置於室溫中，會有可能發黴，因此小米建議你可以少量、多次的配製buffer 備用，以免因為使用到發黴的buffer 而影響你的電泳結果喔！6. 有些較小型電泳槽的製造商會建議使用0.5XTBE ，小米建議你最好要聽從他們的意見以免跑電泳時發生過熱的現象。
DNA电泳相关试剂及缓冲液的配制
DNA 电泳相关试剂及缓冲液的配制1. 0.5M EDTA(pH=8.0):在800ml 蒸馏水中加入186.1g 二水乙二胺四乙酸钠（EDTA-Na 2·2H 2O),充分搅拌，这时溶液为乳白色，加NaOH 调解pH 值至8.0，这时溶液颜色逐渐变为澄清。
最后定容至1L 。
高压灭菌。
2.5 X TBE:Tris 碱54g;硼酸27.5g;20ml0.5M EDTA(pH=8.0),加蒸馏水定容至1L 。
高压灭菌。
（不过我在实验中没有灭菌，实验结果影响不大）。
1 X TBE:5 X TBE 缓冲液与蒸馏水按1: 4稀释就OK。
配置方法方法1：1%的溴酚蓝将托盘天平上称取1g 溴酚蓝定溶于100ml 无水乙醇中，转移入滴瓶中，贴标签备用。
方法2：0.05%的溴酚蓝配western blot 用的2*SDS 上样缓冲液需要用到0.1%的溴酚蓝，2-DE中溴酚蓝一般也是配成0.1%母液。
实际上，溴酚蓝在水中的溶解度不高，直接将0.1g溴酚蓝溶于100ml水是有困难的。
下面是其较合适的配制方法：0.05%的溴酚蓝配制方法：取溴酚蓝0.1g，加0.05mol/L氢氧化钠溶液3.0ml使溶解，再加水稀释至200ml，即得。
变色范围pH2.8～4.6（黄→蓝绿）。
只是不知道加入NaOH会不会影响2-DE实验。
估计影响不大，因为指示剂用量毕竟很少。
方法3：1％溴酚蓝加1g水溶性钠型溴酚蓝于100ml水中，搅拌或涡旋混合直到完全溶解。
溴酚蓝其钠盐易溶解在水里。
相关词条甲醇、乙醇、苯、有机化学、氢氧化钠Western上样缓冲液配制整理● 6×SDS 样品缓冲液 4×Tris·Cl/SDS,PH6.8 (0.28mol/L) 7ml甘油[30%(V/V)]3.0ml（3.8g ） 甘油密度为1.2613g/cm3(20/4℃)SDS [1%（m/V ）] 1g溴酚蓝[0.0012%(m/V)] 1.2mgDTT (0.5mol/L)0.93g如果需要，加去离子蒸馏水至10ml ；等量分装成0.5ml 并于-70℃贮存● 8×Tris·Cl/SDS,PH6.8 ●丽春红S 染色液Tris-base （0.5mol/L ） 6.05g40ml 水中溶解后以1mol/L 盐酸调至PH6.8，补加至100ml 。
缓冲液的配制方法
核酸电泳相关试剂、缓冲液的配制方法50×TAE Buffer (pH8.5)组份浓度 2 M Tris-醋酸，100 mM EDTA配制量 1 L配制方法 1.称量下列试剂，置于1 L烧杯中。
2.向烧杯中加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。
3.加入57.1 ml的乙酸，充分搅拌。
4.加去离子水将溶液定容至l L后，室温保存。
10×TBE Buffer (pH8.3)组份浓度890 mM Tris-硼酸，20 mM EDTA配制量 1 L配制方法l.称量下列试剂，置于l L烧杯中。
2.向烧杯中加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。
3.加去离子水将溶液定容至l L后，室温保存。
10×MOPS(3-吗啉基丙磺酸)Buffer组份浓度200 rnM MOPS，20 mM NaOAc，10 mM EDTA配制量 1 L配制方法 1.称41.8 g MOPS，置于1 L烧杯中。
2.加约700 ml DEPC处理水，搅拌溶解。
3.使用2 N NaOH调节pH值至7.0。
4.再向溶液中加入下列试剂。
5.用DEPC处理水将溶液定容至1 L。
6.用0.45 m滤膜过滤除去杂质。
7.室温避光保存。
注：溶液见光或高温灭菌后会变黄。
变黄时也可使用，但变黑时不要使用。
溴乙锭(10 mg/ml)组份浓度10 mg/ml溴乙锭配制量100 ml配制方法 1.称量1 g溴乙锭，加入到100 ml容器中。
2.加入去离子水100 ml，充分搅拌数h完全溶解溴乙锭。
3.将溶液转移至棕色瓶中，室温避光保存。
4.溴乙锭的工作浓度为0.5 g/ml。
注意：溴乙锭是一种致癌物质，必须小心操作。
Agarose凝胶配制方法 1.配制适量的电泳及制胶用的缓冲液(通常是0.5×TBE或1×TAE)。
2.根椐制胶量及凝胶浓度，准确称量琼脂糖粉，加入适当的锥形瓶中。
3.加入一定量的电泳缓冲液(总液体量不宜超过锥形瓶的50%容量)。
实验室常见缓冲液配制
实验室常用缓冲液配置方案1)1 M Tris-HCl (pH7.4, 7.6, 8.0)组份浓度：1 M Tris-HCl配制量：1 L配制方法：1. 称量121.1 g Tris置于1 L烧杯中。
2. 加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。
值。
4.将溶液定容至1 L。
5. 高温高压灭菌后，室温保存。
注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。
2)10×TE Buffer (pH7.4, 7.6, 8.0)组份浓度：100 mM Tris-HCl, 10 mM EDTA配制量：1 L配制方法：2.向烧杯中加入约800 ml的去离子水，均匀混合。
3. 将溶液定容至1 L后，高温高压灭菌。
4. 室温保存。
3)1.5 M Tris-HCl (pH8.8)组份浓度：1.5 M Tris-HCl配制量：1 L配制方法：1. 称量181.7 g Tris置于1 L烧杯中。
2. 加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。
3. 用浓盐酸调节pH值至8.8。
4. 将溶液定容至1 L。
5. 高温高压灭菌后，室温保存。
注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。
4)3 M 醋酸钠(pH5.2)组份浓度：3M 醋酸钠配制量：100ml配制方法：1.称量40.8g NaAc·3H2O（或者24.6g无水NaAc）置于100-200ml烧杯中，加入月40ml的去离子水搅拌溶解2.加入冰醋酸调节pH值至5.23.加去离子水将溶液定容至100ml4高温高压灭菌后，室温保存。
5)PBS Buffer组份浓度：137 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 10 mM Na2HPO4, 2 mM KH2PO4配制量：1 L配制方法：2.向烧杯中加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。
PAGE非变性蛋白上样缓冲液(5×)
北京雷根生物技术有限公司
PAGE 非变性蛋白上样缓冲液(5×)
简介：
PAGE 非变性蛋白上样缓冲液(5×)是一种经过改良的以溴酚蓝为染料的不含变性剂的5倍浓缩的蛋白上样缓冲液。
Leagene PAGE 非变性蛋白上样缓冲液(5×)常用于PAGE 的非变性蛋白样品的上样。
组成：
操作步骤(仅供参考)：
1、 在室温或不超过37℃的水浴中溶解PAGE 非变性蛋白上样缓冲液(5×)。
水浴溶解后立即室温存放，尽量避免长时间置于水浴中。
2、 按照蛋白样品加入蛋白上样缓冲液(5×)的比例， 混合蛋白样品和PAGE 非变性蛋白上样缓冲液(5×)。
3、 直接上样到SDS-PAGE 胶加样孔内即可。
4、 通常电泳至蓝色染料到达PAGE 胶的底部附近即可停止。
注意事项：
1、 PAGE 非变性蛋白上样缓冲液(5×)必须完全溶解后再使用。
2、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期： 12个月有效。
亦可4℃短期保存。
相关：
编号 名称 PE0021 Storage PAGE 非变性蛋白上样缓冲液(5×) 5ml -20℃
使用说明书 1份 编号 名称 PE0018 SDS-PAGE 凝胶配制试剂盒 PE0080
Tris-HCl 缓冲液(1mol/L,pH6.8) PE0103
Acr-Bis(30%,29:1) PS0013
RIPA 裂解液(强) PT0001
BCA 蛋白定量试剂盒 TC1213 总胆固醇(TC)检测试剂盒(COD-PAP 单试剂比色法)。
Tris-硼酸电泳缓冲液(5×TBE)
北京雷根生物技术有限公司
Tris-硼酸电泳缓冲液(5×TBE)
产品简介：
Tris-硼酸电泳缓冲液简称TBE。
0.5×TBE工作液中含有45mM Tris-硼酸、1mM EDTA(pH8.0)。
TBE是常用的DNA电泳缓冲液。
一般情况下，DNA电泳常使用0.5×TBE工作液，Tris-乙酸电泳缓冲液的优点：缓冲能力弱，适宜分离相对较小(小于2000bp)的DNA片段。
亦可以使用0.5～1×TBE工作液，该工作液缓冲能力相对较强。
本试剂是10倍浓缩的TBE，使用时需用蒸馏水或去离子水稀释为0.5×TBE后使用。
主要成分：主要由450mM Tris-硼酸，10mM EDTA等组成。
操作步骤（仅供参考）：
1、用蒸馏水或去离子水稀释到0.5×后使用。
注意事项：
1、10×TBE储存液不稳定，容易产生沉淀，建议采用5×TBE，因为5×TBE储存起来更稳定。
2、工作液使用0.5×TBE，亦可以使用0.5～1×TBE工作液，该工作液缓冲能力相对较强。
3、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期：12个月有效。
相关产品：
产品编号 产品名称
NA0006DNA凝胶加样缓冲液(6×DNA Loading Buffer)
NA0015MOPS电泳缓冲液(1×,RNase free)
NA0030Tris-乙酸电泳缓冲液(50×TAE)
PE0092Tris-甘氨酸电泳缓冲液(5×SDS-PAGE)。
核酸电泳相关试剂、缓冲液的配制方法
核酸电泳相关试剂、缓冲液的配制方法50×TAE Buffer (pH8.5)10×TBE Buffer (pH8.3)10×MOPS Buffer ■组份浓度 2 M Tirs-醋酸，100 mM EDTA■配制量 1 L■配制方法 1. 称量下列试剂，置于1 L烧杯中。
Tris 242 gNa2EDTA·2H2O 37.2 g2. 向烧杯中加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。
3. 加入57.1 ml的醋酸，充分搅拌。
4. 加去离子水将溶液定容至1 L后，室温保存。
■组份浓度 890 mM Tirs-硼酸，20 mM EDTA■配制量 1 L■配制方法 1. 称量下列试剂，置于1 L烧杯中。
Tris 108 gNa2EDTA·2H2O 7.44 g硼酸 55 g2. 向烧杯中加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。
3. 加去离子水将溶液定容至1 L后，室温保存。
■组份浓度 200 mM MOPS，20 mM NaOAc，10 mM EDTA■配制量 1 L■配制方法 1. 称量41.8 g MOPS，置于1 L烧杯中。
2. 加约700 ml DEPC处理水，搅拌溶解。
3. 使用2 N NaOH调节pH值至7.0。
4. 再向溶液中加入下列试剂。
1 M NaOAc（DEPC处理） 20 ml0.5 M EDTA（pH8.0）（DEPC处理） 20 ml5. 用DEPC处理水将溶液定容至1 L。
6. 用0.45 μm滤膜过滤除去杂质。
7. 室温避光保存。
注：溶液见光或高温灭菌后会变黄。
变黄时也可使用，但变黑时不要使用。
溴乙锭(10 mg/ml) Agarose凝胶■组份浓度 10 mg/ml溴乙锭■配制量 100 ml■配制方法 1. 称量1 g溴乙锭，加入到100 ml容器中。
2. 加入去离子水100 ml，充分搅拌数小时完全溶解溴乙锭。
DNA凝胶加样缓冲液(5×DNA Loading Buffer)
北京雷根生物技术有限公司 DNA凝胶加样缓冲液(5×DNA Loading Buffer)
产品简介：
DNA凝胶加样缓冲液(5×DNA loading buffer)，是一种经过适当改良的5倍浓缩的DNA上样缓冲液。
本上样缓冲液以溴酚蓝为指示剂，稀释至1×后比重仍然较大，加样后易下沉，且颜色清晰可见，起到电泳指示的作用。
Leagene DNA Loading Buffer是5倍浓缩的，使用时需稀释至1×使用。
主要成分：主要由溴酚蓝、二甲苯青FF、Tris-HCl等组成。
操作步骤（仅供参考）：
1、按照每4μl DNA样品加入1μl DNA Loading Buffer的比例，混合DNA样品和DNA
Loading Buffer(5×)。
2、直接加到DNA胶内，电泳。
注意事项：
1、如果每次的使用量很小，可以适当分装后再使用。
2、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期：12个月有效。
相关产品：
产品编号 产品名称
NA0015MOPS电泳缓冲液(1×,RNase free)
NA0021RNA凝胶加样缓冲液(6×)
NA0030Tris-乙酸电泳缓冲液(50×TAE)
NA0034Tris-硼酸电泳缓冲液(5×TBE)
NA0067碱性琼脂糖凝胶加样缓冲液(6×)
PE0025SDS-PAGE蛋白加样缓冲液(5×)。
经典实验室常用缓冲液配置方案
实验室常用缓冲液配置方案1)1 M Tris-HCl （pH7.4，7。
6, 8。
0)组份浓度：1 M Tris—HCl配制量：1 L配制方法：1。
称量121.1 g Tris置于1 L烧杯中.2。
加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解.3. 按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。
浓HClPH值7。
4 约70ml7。
6 约60ml8.0 约42ml4. 将溶液定容至1 L.5. 高温高压灭菌后，室温保存。
注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。
2)10×TE Buffer（pH7。
4，7.6, 8。
0）组份浓度:100 mM Tris-HCl，10 mM EDTA配制量：1 L配制方法：1。
量取下列溶液，置于1 L烧杯中。
100ml1M Tris－HCl Buffer（PH7。
4，7.6，8。
0)500mM EDTA(PH8.0）20ml2. 向烧杯中加入约800 ml的去离子水，均匀混合。
3。
将溶液定容至1 L后，高温高压灭菌。
4. 室温保存.3）1。
5 M Tris—HCl (pH8.8）组份浓度：1.5 M Tris-HCl配制量：1 L配制方法：1。
称量181。
7 g Tris置于1 L烧杯中。
2. 加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。
3. 用浓盐酸调节pH值至8。
8.4。
将溶液定容至1 L.5。
高温高压灭菌后,室温保存。
注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。
4）3 M醋酸钠（pH5。
2）组份浓度:3M 醋酸钠配制量：100ml配制方法：1。
称量40.8g NaAc·3H2O置于100-200ml烧杯中，加入月40ml的去离子水搅拌溶解2。
加入冰醋酸调节pH值至5.23。
核酸预制胶说明书
核酸预制胶说明书保存：4℃，2个月。
操作步骤：非变性预制胶：1.准备样品：将样品和loading buffer（5×）按照4：1混合均匀。
2.准备1×running buffer：取200ml的5×TBE buffer，加入去离子水至1L，制备成1×TBE buffer。
3.将预制胶装入兼容的电泳槽中，加入电泳缓冲液，再缓慢地将梳子拔出。
4.上样：在梳孔内加入适当浓度和体积的DNA样品。
5.电泳条件：150V,50~75min（电泳时间取决于凝胶浓度）6.电泳结束，取出凝胶。
尿素变性预制胶：1.准备样品：将样品和UREA-TBE loading buffer（5×）按照4：1混合均匀,100℃下加热3-5min。
2.准备1×running buffer：取200ml的5×TBE buffer，加入去离子水至1L，制备成1×TBE buffer。
3.将预制胶装入兼容的电泳槽中，加入电泳缓冲液，再缓慢地将梳子拔出。
4.上样：用1×TBE buffer反复冲洗梳孔以清除梳孔内的尿素，在梳孔内加入适当浓度和体积的DNA样品。
5.电泳条件：150V,50~75min（电泳时间取决于凝胶浓度）6.电泳结束，取出凝胶。
预制胶兼容的电泳槽:Precast-EZgel可以兼容大部分的mini SDS-PAGE电泳槽，包括∙Bio-Rad Mini-PROTEAN(II/3/Tetra System)∙Hoefer Mighty Small(SE250/SE260/SE280)∙Life Technology Novex Mini-Cell(请与特制挡板配合使用)预制胶在Bio-Rad电泳槽的应用a.将Bio-Rad电泳槽中的U型密封条（如图绿色部分）拉出，注意这时的密封条两端是有突起的，突起的这面为正面，无突起的为反面。
b.将密封条旋转180度(正面朝里，反面朝外)，重新装回电泳槽中，注意把密封圈周边压实，防止发生漏液。
反转录PCR操作手册1
RT-PCR实验步骤一．实验器具：1.移液枪：1ml、200μl、20μl、10μl、2.5μl2.吸头：1ml、200μl、20μl3.匀浆管：5ml4.EP管：1.5ml、500μl、200μl5.试剂瓶：棕色试剂瓶(广口，放75%乙醇)6.量筒：100ml7.容量瓶：1000ml8.试管架：5ml、1.5ml、20μl9.铝制饭盒：1-2个10.大瓷缸：1个11.锡泊纸：一卷12.卷纸：2卷13.三角烧瓶：带盖，稍大二．实验器具处理1.塑料制品：(包括枪头、EP管、匀浆管等)先将DEPC水从容量瓶中倒入瓷缸中，将塑料制品逐个浸泡其中(注意：小枪头要充分浸泡，必要时需要针筒打入DEPC水)，过夜后取出(注意：DEPC水很难自然晾干，所以建议先将刚取出的DEPC物品甩干，枪头装入枪头盒后甩干，EP管和匀浆管装入饭盒后甩干，然后在37度孵箱烘干)。
高压后烤干备用。
如果DEPC处理过的物品时间已超过一个星期，再次使用前应再次高压。
2.玻璃制品：泡酸过夜，冲洗干净，先泡1‰DEPC过夜，再蒙锡纸烤干备用。
3.匀浆器：(包括剪刀、镊子)先洗净后，超声消毒即可(不需要泡DEPC)。
三．试剂配制1．DEPC水：吸出1ml DEPC放在1000ml容量瓶中加双蒸水定容至1000ml，配成1‰DEPC水，并充分振荡混匀备用。
2．75%乙醇：用无水乙醇+DEPC水配，然后放-20℃保存(DEPC水需先高压，高压时注意：1.装DEPC水的瓶子在盖子和瓶之间要放上线头；2.高压时间在40-45分钟，所以水要适当多加一点；3.高压结束后，不要强行放气，要让压力自然下降，不然水会喷出)。
3．异丙醇：放入棕色瓶中。
4．氯仿：放入棕色瓶中。
5．琼脂糖四．缓冲液配制1．电泳缓冲液(5×TBE贮存液)：Tris 54g、硼酸 27.5g、0.5M EDTA 20ml pH8.0、加蒸溜水至1000ml。
使用时，将5×TBE稀释10倍成0.5×TBE就可以在电泳时使用(工作浓度) 2．上样缓冲液(6×缓冲液，4℃保存)：0.25%溴酚蓝、0.25%二甲苯青FF、30%甘油五．琼脂糖凝胶配制1．1.0%：1.0g琼脂糖+100ml电泳缓冲液，微波炉加热至沸腾(如果首次煮胶，一定要煮透，以不出现泡沫为标志)，熔化的琼脂物冷却至60℃时加入10mg/ml溴化乙锭2.5μl，充分混匀，将温热的凝胶倒入已置好梳子的胶膜中，在室温下放置30-45min(可以放入4度冰箱加快琼脂糖凝固)后现进行电泳。
tbe电泳缓冲液工作浓度
tbe电泳缓冲液工作浓度TBE电泳缓冲液是一种常用于核酸电泳实验的缓冲液，它的工作浓度对于实验结果的准确性和稳定性至关重要。
本文将就TBE电泳缓冲液的工作浓度进行详细介绍。
一、TBE电泳缓冲液的概述TBE电泳缓冲液是由三种成分组成的混合物，分别是三种缓冲盐——三硼酸（Tris-borate）、乙酸（boric acid）和EDTA（乙二胺四乙酸）。
二、TBE电泳缓冲液的工作浓度TBE电泳缓冲液的工作浓度一般为1×，即经过稀释后得到的浓度为1倍的TBE缓冲液。
这种浓度被广泛应用于核酸电泳实验中，能够提供良好的电泳条件和分离效果。
三、TBE电泳缓冲液的配制方法1. 准备所需试剂：三硼酸、乙酸和EDTA。
2. 按照一定比例称取相应质量的三硼酸、乙酸和EDTA。
3. 将三硼酸、乙酸和EDTA溶解在适量的去离子水中，并充分搅拌混合。
4. 调节溶液的pH值至所需范围，一般为8.0左右。
5. 最后用去离子水稀释溶液，得到所需浓度的TBE电泳缓冲液。
四、TBE电泳缓冲液的作用1. 提供适当的离子强度和pH值，维持电泳系统的稳定性。
2. 保持DNA或RNA在电泳过程中的一定带电状态，使其能够在电场中迁移。
3. 提供足够的缓冲能力，抵消电泳过程中酸碱产生的变化，保持电泳系统的稳定性。
4. 在电泳过程中形成一个适当的离子环境，促使DNA或RNA分子发生准确的迁移。
五、TBE电泳缓冲液的注意事项1. 在配制过程中要严格按照配方比例和步骤进行，保证溶液的准确性和稳定性。
2. 注意缓冲液的pH值，过高或过低都会影响电泳结果。
3. 配制好的TBE缓冲液应密封保存，避免受到空气中的二氧化碳和杂质污染。
4. 在使用TBE缓冲液时，应根据实验需求进行稀释，避免浪费和过量使用。
六、TBE电泳缓冲液的优缺点1. 优点：TBE电泳缓冲液的成本相对较低，制备简单，能够提供较好的电泳条件和分离效果。
2. 缺点：TBE电泳缓冲液中含有乙酸，具有一定的刺激性和挥发性，使用时需注意安全防护。
5×蛋白上样缓冲液(含巯基还原剂)使用说明
5×蛋白上样缓冲液（含巯基还原剂）使用说明货号：P1041规格：10ml保存：-20℃保存，自发货之日起至少3个月有效。
产品简介：5×蛋白上样缓冲液（含巯基还原剂）适用于SDS-PAGE(SDS变性聚丙烯酰胺凝胶电泳)时作蛋白质上样用。
其主要成份为SDS，巯基还原剂，溴酚蓝，缓冲盐溶液等。
SDS可与蛋白质结合使蛋白质－SDS复合物上带有大量的负电荷，这时蛋白质本身的电荷完全被SDS掩盖，消除了各种蛋白质本身电荷的差异，SDS还可以断开分子内和分子间的氢键，破坏蛋白质分子的二级和三级结构，巯基还原剂可以断开半胱氨酸残基之间的二硫键，破坏蛋白质的四级结构，消除了蛋白结构之间的差异。
最终无电荷及结构上差异的蛋白（亚单位），电泳速度只是与其分子量大小有关。
溴酚蓝用作电泳时的指示剂，可大概指示电泳结束的时间。
使用说明：1.请按每40μL蛋白样品加入10μL上样缓冲液的比例（5倍稀释）来使用。
如果蛋白浓度过高，可用双蒸水稀释。
2.混匀后，100℃水浴加热3-5分钟，使蛋白变性。
3.冷却到室温后，10000-14000rpm离心2-5分钟，取上清直接上样电泳即可。
注意事项：1.聚丙烯酰胺凝胶浓度为8%时溴酚蓝指示条带的位置大概在30kd左右，胶浓度12%时，约在20kd左右，胶浓度15%时，大概在10kd。
请根据自己目标条带来判断结果电泳时间。
2.本试剂因含巯基还原剂，有一定的毒性，为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
3.蛋白上样缓冲液含有溴酚蓝指示剂，PH值受保存温度影响，在低温冻存状态下，溶液可能会呈现深棕色，不影响产品使用。
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5×TBE缓冲液使用说明
货号：T1050
规格：500ml
保存：室温储存，有效期至少12个月。
产品说明：
TBE缓冲液是生物学中常使用的核酸电泳缓冲盐溶液，主要用于DNA的琼脂糖凝胶电泳。
TBE 的主要成分是Tris-硼酸盐与EDTA，缓冲能力强，适合较长时间电泳，分辨率较高，电泳小于1kb的片段时分离效果好。
TBE缓冲液中的硼酸成分会影响DNA回收效率以及后续的酶反应，若要进行DNA片段的琼脂糖凝胶电泳回收实验，建议使用TAE缓冲液。
本产品为5×浓缩液，工作浓度为0.5×，可直接用蒸馏水稀释10倍后使用。
若产品出现沉淀析出，请置于37℃水浴使其溶解，不影响使用。
组分工作浓度
Tris-硼酸盐45mM
EDTA1mM。