高考生物复习夺标学案 专题15 微生物的利用 新人教版
2015高考生物 第2讲 微生物的利用课后巩固提升 新人教版选修1
（智慧测评）2015高考生物第2讲微生物的利用课后巩固提升新人教版选修1一、选择题1．(2013·苏北八校联考)微生物培养过程中，要十分重视无菌操作，现代生物学实验中的许多方面也要进行无菌操作，防止杂菌污染，请分析下列操作中错误的是( )①煮沸消毒可以杀死微生物的营养细胞和部分芽孢②接种操作要在酒精灯火焰附近进行③无菌繁殖脱毒苗时，植物的外植体要进行消毒④家庭制作葡萄酒时要将容器和葡萄进行灭菌⑤培养基要进行高压蒸汽灭菌⑥加入培养基中的指示剂和染料不需要灭菌A．①③B．②④C．③⑤ D．④⑥解析：无菌操作包括消毒和灭菌。
需进行消毒处理的有植物的外植体及操作人员的双手等，需进行灭菌的有器皿、培养基、添加剂(指示剂或染色剂)等。
煮沸可以杀死微生物的营养细胞和一部分芽孢，属于消毒；为防止空气中杂菌污染，接种时要在酒精灯火焰附近进行；家庭制作葡萄酒时所利用的微生物是葡萄表面的酵母菌，故不能灭菌；培养基常进行高压蒸汽灭菌。
故④⑥操作错误。
答案：D2．用平板划线法或稀释涂布平板法纯化大肠杆菌时( )①可以用相同的培养基②都需要使用接种针进行接种③都需要在酒精灯火焰旁进行接种④都可以用来计数活菌A．①② B．③④C．①③ D．②④解析：平板划线法或稀释涂布平板法都使用固体培养基；平板划线法采用接种针进行操作，而稀释涂布平板法采用涂布器进行操作；纯化时，要进行无菌操作，需要在酒精灯火焰旁接种，以避免空气中的微生物混入培养基；平板划线法一般用于分离而不是用于计数。
答案：C3．下表为培养某种微生物的培养基配方，下列相关叙述错误的是( )成NaNO3K2HPO4KCl MgSO4·7H2O FeSO4(CH2O) H2O 青霉B．依用途划分，该培养基属于选择培养基C．培养基中的唯一碳源是(CH2O)，唯一氮源是NaNO3D．若用该培养基培养纤维素分解菌，则应除去(CH2O)，再添加纤维素解析：由于配方中没有琼脂，所以从物理性质上划分为液体培养基；由于配方中含有青霉素，对微生物有一定的筛选作用，所以从用途上划分为选择培养基；由于培养基中含有青霉素，纤维素分解菌不能生存，除去(CH2O)外，还应除去青霉素，同时添加纤维素和琼脂。
高三生物一轮复习精品学案：微生物的利用
[考纲要求] 1.微生物的分离和培养。
2.培养基对微生物的选择作用。
3.某种微生物数量的测定。
4.微生物在其他方面的应用。
考点一微生物的实验室培养1．培养基(1)概念：人们按照微生物对________________的不同需求，配制出供其________________的营养基质。
(2)营养组成：一般都含有________________和无机盐。
此外，还需要满足微生物生长对______、氧气以及________________________的要求。
(3)种类①按照物理性质可分为________培养基、固体培养基、半固体培养基。
②按照成分的来源可分为天然培养基和______________培养基。
③按照功能用途可分为选择培养基、________培养基等。
2．无菌技术(1)含义：在培养微生物的操作中，所有防止________________的方法。
(2)常用方法3．大肠杆菌的纯化培养(1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基计算→→溶化→→(2)纯化大肠杆菌的方法①平板划线法：通过接种环在琼脂固体培养基表面________________的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。
特别提醒a．操作第一步即取菌种之前及每次划线之前都需要进行火焰灼烧灭菌，划线操作结束时，仍需灼烧接种环，每次灼烧目的如下表：b.灼烧接种环，待其冷却后才能伸入菌液，以免温度太高杀死菌种。
c．第二次及其以后的划线操作总是从上一次划线末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐渐减少，最终得到由单个细菌繁殖而来的菌落。
d．划线时最后一区不要与第一区相连。
e．划线用力大小要适当，防止用力过大将培养基划破。
②稀释涂布平板法：将菌液进行一系列的________________，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。
(3)菌种的保存方法①对于频繁使用的菌种，可以采用__________________________________________的方法。
2024届高考一轮复习生物教案(新教材人教版鲁湘辽)：微生物的培养技术及应用
第2课时 微生物的培养技术及应用课标要求 1.获得纯净的微生物培养物是发酵工程的基础。
2.阐明在发酵工程中灭菌是获得纯净的微生物培养物的基础。
3.阐明无菌技术是在操作过程中，保持无菌物品和无菌区域不被微生物污染的技术。
4.举例说明通过调整培养基的配方可有目的的培养某种微生物。
5.概述平板划线法和稀释涂布平板法是实验室中进行微生物分离和纯化的常用方法。
6.概述稀释涂布平板法和显微镜计数法是测定微生物数量的常用方法。
考点一 微生物的培养技术及应用1．培养基的配制(1)培养基的概念、用途和类型①概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出的供其生长繁殖的营养基质。
②用途：用以培养、分离、鉴定、保存微生物或积累其代谢物。
③种类：按物理性质分⎩⎪⎨⎪⎧液体培养基↓(加入凝固剂，如琼脂)固体培养基(2)培养基的配方①主要营养物质：水、碳源、氮源、无机盐。
②其他条件：pH 、特殊营养物质和氧气。
如下表：微生物 乳酸杆菌 霉菌 细菌 厌氧微生物 特殊需求添加维生素pH 调至酸性pH 调至中性或弱碱性无氧2.无菌技术(1)目的：获得纯净的微生物培养物。
(2)关键：防止杂菌污染。
(3)消毒与灭菌的比较 项目 消毒灭菌 作用强度 较为温和的理化因素 强烈的理化因素 作用程度杀死物体表面或内部一部分微生物杀死物体内外的所有微生物芽孢和孢子一般不能杀灭能杀灭适用对象实验操作的空间、操作者衣着和双手微生物培养器皿、接种用具和培养基等常用方法煮沸消毒法、巴氏消毒法等湿热灭菌法、干热灭菌法、灼烧灭菌法等(4)注意事项①实验操作时，应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品接触。
②为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在超净工作台上并在酒精灯火焰附近进行。
3．微生物的纯培养(1)概念辨析(2)酵母菌纯培养的操作步骤(3)平板划线法操作步骤下图是平板划线操作的示意图，据图回答下列问题：(1)用图中字母和箭头表示平板划线操作的正确步骤：d→b→f→a→e→c→h→g。
高考生物一轮复习资料 专题一微生物的利用课件 新人教版选修1
•4．两种纯化细菌的方法的比较
项目 优点 缺点 平板 可以观察菌落特 划 征，对混合菌进 不能计数 线法 行分离 吸收量较 稀释 少，较麻 涂布 可以计数，可以 烦，平板 不干燥效 平板 观察菌落特征 果不好， 法 适用范围 适用于好 氧菌
适用于厌 氧菌和兼 性厌氧菌
小贴士
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微生物的培养与应用
•(2)微生物培养的无菌技术 •进行无菌操作主要是为了防止外来杂菌的入侵，重点是消毒和灭 菌。 •①消毒和灭菌的区别
使用方法
结果 仅杀死物体表面或内 部一部分对人体有害 的微生物(不包括芽孢 和孢子) 杀死物体内外所有的 微生物，包括芽孢和 孢子
常用的方法 煮沸消毒法、巴氏 消毒法、化学药剂 消毒法、紫外线消 毒法等 灼烧灭菌、干热灭 菌、高压蒸汽灭菌
工业生产
化学
培养基成分明确( 成分 合成培养基 用化学成分已知的 化学物质配成)
分类、鉴定
培养基中加入某种化 选择培 养基 用途 学物质，以抑制不需
培养、分离出特定微生物(如培养酵 母菌和霉菌，可在培养基中加入青 霉素；培养金黄色葡萄球菌，可在 培养基中加入高浓度食盐)
要的微生物的生长，
促进所需要的微生物 的生长
•知识点二
微生物的利用
23 固体斜面 答案： ○
24 菌落 25 4 ℃ 26 不长 27 污染 ○ ○ ○ ○
30 选择培养基 ○ 31 尿素 ○ 32 稀释 28 甘油管藏 ○ 29 －20 ℃ ○ ○
涂布平板法 件
○ 显微镜直接计数
33
C ○ V ×M
34
35 被测试的条 ○
36 非测试因素 ○
⑭巴氏消毒法
⑮所有的微生物
2015届高考生物总复习 微生物的培养和利用定时演练冲击高考 新人教版
【创新设计】2015届高考生物总复习微生物的培养和利用定时演练冲击高考新人教版(时间：30分钟)一、选择题1．(2013·东城区检测)欲从土壤中分离出能分解尿素的细菌，下列实验操作中不正确的是()。
A．将土壤用无菌水进行一系列的梯度稀释B．同一浓度的土壤稀释液应至少涂布三个平板C．可将未接种的培养基在相同条件下培养作为对照D．用加入刚果红指示剂的培养基可筛选出分解尿素的细菌解析本题考查微生物的分离与培养，意在考查考生的实验分析能力。
为了获得单个菌落，应将土壤用无菌水进行一系列的梯度稀释，A正确；为了使结果更加准确，同一浓度的土壤稀释液至少要涂布3个平板进行重复实验，然后计算平均值，B正确；加入刚果红的培养基用来筛选纤维素分解菌，D错误。
答案 D2．(2013·广东深圳一模，2)某学者欲研究被石油污染过的土壤中细菌数量，并从中筛选出能分解石油的细菌。
下列操作错误的是()。
A．利用平板划线法对细菌进行计数B．用以石油为唯一碳源的培养基筛选C．采用稀释涂布平板法分离菌种D．称取和稀释土壤时应在火焰旁解析平板划线法能对细菌分离纯化，但不能对细菌进行计数，稀释涂布平板法可以分离菌种还可进行计数，A项错误。
答案 A3．(2013·成都模考)分离土壤中分解尿素的细菌，对培养基的要求是()。
①加尿素②不加尿素③加琼脂④不加琼脂⑤加葡萄糖⑥不加葡萄糖⑦加硝酸盐⑧不加硝酸盐A．①③⑤⑦B．①③⑤⑧C．②④⑥⑧D．①④⑥⑦解析土壤中分解尿素的细菌能够利用尿素作为氮源，因此若培养基中氮源只有尿素，分解尿素的细菌能生长，其他微生物不能生长；分离微生物要用固体培养基，必须加入琼脂；土壤中分解尿素的细菌属于异养型微生物，需要加葡萄糖作为碳源。
答案 B4．(2013·成都模考)关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述错误的是()。
A．操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌B．将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯C．等培养基冷却至50 ℃左右时进行倒平板D．待平板冷却凝固5～10 min后将平板倒过来放置解析操作顺序为先灭菌再倒平板；牛肉膏会黏附在称量纸上，应该将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯；培养基冷却至50 ℃左右既没有凝固，同时又不烫手，可以进行倒平板；为了防止冷却过程中培养皿盖上凝集的水珠对平板的污染，培养基冷却凝固后就要将平板倒过来放置。
高考生物一轮复习 专题一 微生物的利用教案(含解析)新人教版选修1
2015届高考生物一轮复习 专题一 微生物的利用教案（含解析）新人教版选修1最新考纲1．微生物的分离与培养 2．某种微生物数量的测定 3．培养基对微生物的选择作用4．利用微生物发酵来生产特定的产物以及微生物在其他方面的应用考纲解读1．培养基的种类、营养要求及配制原则 2．无菌技术的具体操作及应用3．运用相关技术解决微生物的分离与培养等实际问题知识点一 微生物的培养培养基⎩⎪⎨⎪⎧概念：人们按照微生物对① 的不同需求，配制出的供其② 的营养基质营养构成⎩⎪⎨⎪⎧（1）一般都含有③ 、④ 、⑤ 、⑥（2）还需满足不同微生物对pH 、⑦ 以及⑧ 的要求 议一议：高温灭菌的原理是什么？想一想：接种过程为什么要在酒精灯的火焰旁进行？ 微生物培养的基本技术⎩⎪⎪⎨⎪⎪⎧配制培养基：称量→混合→溶化→调pH→分装→包扎灭菌：加水→加培养基→密封→排冷气→维持压力→取出倒平板（或搁置 斜面）接种⎩⎪⎨⎪⎧接种过程：洗净双手→点燃酒精灯→接种→贴标签接种工具：包括⑲接种方法：⑳ 法、○21 法注意事项：整个操作过程都要在○22 旁完成培养：接种后的培养皿放入恒温箱内培养查一查：什么是菌落？它有什么用途？知识点二 微生物的利用菌种保藏土壤中分解尿素的细菌的分离与计数⎩⎪⎪⎨⎪⎪⎧菌种筛选⎩⎨⎧培养基：○30 特点：○31 是唯一氮源统计菌落数目⎩⎨⎧方法⎩⎨⎧○32 ○33 计算公式：○34 设置对照⎩⎨⎧对照实验：是指除了○35 外，其他条件都相同的实验主要目的：排除实验组中○36 对实验结果的影响 分解纤维素的微生物的分离——纤维素分解菌的筛选⎩⎪⎪⎨⎪⎪⎧（1）土壤取样：选择富含○37 的环境（2）将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上A.制备鉴别培养基：主要碳源是○38B.刚果红染色法a.先培养○39 ，再加入刚果红进行颜色反应b.○40 时加入刚果红（3）进一步鉴定a.为确定得到的菌是否是纤维素分解菌，还需进行○41 的实验b.测定方法一般是对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的○42 进行定量测定想一想：什么叫选择培养基？看一看：纤维素分解菌筛选的原理是什么？1．培养基的配制原则(1)目的要明确：配制时应根据微生物的种类、培养目的等确定配制的培养基种类。
2013届高考生物复习夺标学案 专题15 微生物的利用 新人教版
2013高考生物夺标系列专题15 微生物的利用一、考纲解读考纲下载考纲解读命题规律命题趋势1.微生物的分离和培养1.了解培养基的种类、配制原则；掌握无菌技术及分离纯化微生物的研究思路和方法。
2.会运用测定微生物数量的常用方法来测定微生物的数量。
3.掌握利用培养基对微生物选择的实验原理，会1.从命题内容上看，对微生物的利用，微生物培养技术。
培养基的选用，在高考题中出现的概率相对较高。
2.从命题思路上看，主要考查相关实验的原理、过程和方法，特别注重实验过程1.命题趋势：微生物的培养、应用，常用微生物的营养与代谢关系、发酵条件的控制、相应的实验操作要领等。
2.热点预测：预计2013年高考对该2.某种微生物数量的测定3.培养基对微生物的选择作用有抑菌作用物质的提取及应用等。
热点题型1 掌握微生物实验室培养的基本知识，解答微生物培养的有关问题【例1】有关平板划线操作正确的是（）A.使用已灭菌的接种环、培养皿，操作过程中不再灭菌B.打开含菌种的试管需通过火焰灭菌，取出菌种后需马上塞上棉塞C.将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线即可D.最后将平板倒置，放入培养箱中培养【例2】下列常用的无菌操作中错误的是( )A．无菌操作不要求杀死培养基中的一切细菌B．用酒精擦拭双手方法对操作者进行消毒C．实验操作过程应在酒精灯火焰附近进行D．玻璃器皿(吸管、培养皿)可用酒精擦拭【例3】甲、乙两同学学习完微生物的实验室培养后，要利用所学知识研究水中微生物的情况。
Ⅰ.甲为了检测饮用水中是否会有某种细菌，配制如下培养基进行培养：蛋白胨10 g乳糖 5 g蔗糖 5 gK2HPO4 2 g蒸馏水1000 mL将pH调到7.2（1）该培养，其功能是____________________。
（2）该培养基所含有的氮源有___________，其功能是____________________。
（3）该培养基除含碳源、氮源外，还有微生物需要的营养物质，是____________________。
2022高考生物 考点预测分析 微生物的利用（含解析）新人教版
202X高考生物考点预测分析：微生物的利用【考纲要求】1进行微生物的分离和培养2进行某种微生物数量的测定3尝试进行培养对微生物的选择作用4利用微生物发酵【高考分布】注：①直方图横轴代表高考考点②直方图纵轴代表5年高考汇总分值【命题分析】1．本部分在选修一中占有比较重要的地位，重点考查的是微生物的分离和培养技术、特定微生物的数量测定、培养基对微生物的选择作用和微生物的实验室培养，其中微生物的接种和培养、培养基的种类和作用、微生物的计数等是高考的常考点。
2．预计微生物的接种和培养、培养基的种类和作用、微生物的计数等考点考查的可能性仍较大，尤其是平板划线法、微生物的分离和培养等实际问题的考查会更多。
【试题预测】一、选择题（共10小题）1．202X·江苏百校联考下列关于果酒和果醋的制作原理、发酵过程的叙述中，错误的是A．果酒和果醋的发酵菌种不同，但代谢类型相同B．制作果酒和果醋时都应用体积分数为70%的酒精对发酵瓶消毒C．变酸果酒的表面观察到的菌膜可能是醋酸菌的菌落D．果酒和果醋的制作可用同一装置，但需控制不同发酵条件【解析】果酒的制作菌种是酵母菌，是兼性厌氧菌，制作果醋的醋酸杆菌是好氧菌。
【答案】A2．202X·安徽省合肥二模用平板划线法或稀释涂布平板法纯化大肠杆菌时。
①可以用相同的培养基②都需要使用接种针进行接种③都需要在火焰旁进行接种④都可以用来计数活菌A．①② B．③④ C．①③ D．②④【解析】平板划线法或稀释涂布平板法都使用固体培养基，故①正确；平板划线法采用接种针进行操作，而稀释涂布平板法采用涂布器进行操作，故②错误；纯化时，要进行无菌操作，需要在火焰旁接种，避免空气中的微生物混入培养基，故③正确；平板划线法一般用于分离而不是计数，故④错误。
【答案】 C3．下列有关培养基和菌种鉴定的叙述不正确的是。
A．植物组织培养常用的是固体培养基B．可利用固体培养基上菌落的特征来判断和鉴别细菌的类型C．利用刚果红培养基上是否形成透明圈来筛选纤维素分解菌D．在无氮培养基中加入酚红指示剂鉴定尿素分解菌【解析】在只含有尿素作为氮源的培养基中加入酚红指示剂鉴定尿素分解菌。
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一、考纲解读
考纲下载考纲解读命题规律命题趋势
1.微生物的分离和培养1.了解培养基的种类、
配制原则；掌握无菌
技术及分离纯化微
生物的研究思路和
方法。
2.会运用测定微生物
数量的常用方法来
测定微生物的数量。
3.掌握利用培养基对
微生物选择的实验
原理，会描述其大体
实验流程。
1.从命题内容上看，
对微生物的利用，
微生物培养技术。
培养基的选用，在
高考题中出现的概
率相对较高。
2.从命题思路上看，
主要考查相关实验
的原理、过程和方
法，特别注重实验
过程中关键操作步
骤的考查。
3.关注生活热点问
题，做到理论联系
实际，以生物学原
理分析实际生产问
题。
1.命题趋势：微生
物的培养、应
用，常用微生物
的营养与代谢
关系、发酵条件
的控制、相应的
实验操作要领
等。
2.热点预测：预计
2013年高考对
该部分的考查，
将集中在微生
物的培养、分离
和计数，题型主
要为非选择题。
考查内容以实
验为基础，又和
生产实际相联
系，如对污染的
土壤中如何筛
选出高效降解
原油的菌株、具
有抑菌作用物
质的提取及应
用等。
2.某种微生物数量
的测定
3.培养基对微生物
的选择作用
热点题型1 掌握微生物实验室培养的基本知识，解答微生物培养的有关问题【例1】有关平板划线操作正确的是（）
A.使用已灭菌的接种环、培养皿，操作过程中不再灭菌
B.打开含菌种的试管需通过火焰灭菌，取出菌种后需马上塞上棉塞
C.将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线即可
D.最后将平板倒置，放入培养箱中培养
【例2】下列常用的无菌操作中错误的是 ( )
A．无菌操作不要求杀死培养基中的一切细菌
B．用酒精擦拭双手方法对操作者进行消毒
C．实验操作过程应在酒精灯火焰附近进行
D．玻璃器皿(吸管、培养皿)可用酒精擦拭
【例3】甲、乙两同学学习完微生物的实验室培养后，要利用所学知识研究水中微生物的情况。
Ⅰ.甲为了检测饮用水中是否会有某种细菌，配制如下培养基进行培养：
蛋白胨10 g
乳糖 5 g
蔗糖 5 g
K2HPO4 2 g
蒸馏水1000 mL
将pH调到7.2
（1）该培养基所含有的碳源有___________，其功能是____________________。
（2）该培养基所含有的氮源有___________，其功能是____________________。
（3）该培养基除含碳源、氮源外，还有微生物需要的营养物质，是____________________。
（4）用该培养基培养微生物时，还需要控制哪些理化条件？。
Ⅱ.乙同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。
实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察。
请回答与此实验相关的问题。
（1）乙同学培养基为（物理性质）培养基，其中含有的蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了__ __和__ ____。
（2）对培养基进行灭菌，应该采用的方法是___ ____。
（3）为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了湖水样品的平板置于__ ____中培养，培养的温度设定在37℃。
要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上
接种___ ___作为对照进行实验。
题型攻略【知识储备】1.病毒的生存离不开细胞，不能用含有机物的培养基直接培养，应用相应的宿主细胞来培养。
2. 微生物和动物、植物营养要素比较
碳源氮源能源无机盐、水
动物 糖类、脂肪等 蛋白质或其降解物
同碳源
都需要，种类及功能基
本相同
微生物
异养型 糖类、脂肪、
醇、有机酸等
蛋白质或其降解
物、铵盐、硝酸盐、
N 2等
同碳源 自养型 CO 2、碳酸盐等
NH 3、铵盐、硝酸盐等
氧化无机物或利用光能 绿色植物
铵盐、硝酸盐
光能
3.消毒和灭菌
比较项目 理化因素的作用强度 消灭微生物的数量 芽孢和孢子能否被消灭
消毒 较为温和 部分生活状态的微生物
不能 灭菌
强烈
全部微生物
能
4.两种纯化细菌的方法的比较 优点
缺点 适用范围 平板划 线分离法 可以观察菌落特征，对混合菌进行分离 不能计数
适用于好氧菌
稀释倒 平板法
可以计数，可以观察菌落特征
吸收量较少，较麻烦，平板不干燥效果不好，容易蔓延
适用于厌氧，兼性厌氧
5．培养基的营养构成
①各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、碳源、氮源和无机盐；②不同培养基还要满足不同微生物对pH 、特殊营养物质以及氧气的要求。
6．配制牛肉膏蛋白胨固体培养基的注意事项
①倒平板的温度一般50℃左右适宜，温度过高会烫手，过低培养基又会凝固；②平板需倒置，这样既可使培养基表面的水分更好地挥发，又可防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。
7．平板划线操作的注意事项
①第一次划线及每次划线之前都需要灼烧接种环灭菌；②灼烧接种环之后，要冷却后才能伸入菌液，以免温度太高杀死菌种；③划线时最后一区域不要与第一区域相连；④划线用力大小要适当，防止用力过大将培养基划破。
灭菌和消毒的实质大都是使微生物的蛋白质或核酸发生变性。
热点题型2 掌握微生物的计数方法，解答微生物的计数问题
【例1】用稀释涂布平板法来统计样品中活菌的数目，其结果与实际值相比（）
A．比实际值高B．比实际值低
C．和实际值一致 D．比实际值可能高也可能低
【例2】下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述，其中错误的是
A．用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板
B．取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1ml，分别涂布于各组平板上
C．将实验组和对照组平板倒置，37℃恒温培养24-48小时
D．确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数
【例3】自然界中的微生物往往是混杂生长的。
人们在研究微生物时一般要将它们分离提纯，然后进行数量的测定。
下面是对大肠杆菌进行数量测定的实验，请回答有关问题。
实验步骤：
（1）制备稀释倍数为102、103、104、105、106的系列稀释液。
（2）为了得到更加准确的结果，你选用法接种样品。
（3）适宜温度下培养。
结果分析：
（1）测定的大肠杆菌数，在对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下几种统计结果，正确可信的是，其理由是。
A．一个平板，统计的菌落数是230
B．两个平板，统计的菌落数是220和260，取平均值240
C．三个平板，统计的菌落数分别是210、50和520，取平均值260
D．四个平板，统计的菌落数分别是210、300、240和250，取平均值250 （2）一同学在稀释倍数为105的培养基中测得平板上菌落数的平均值为234，那么每毫升样品中的菌落数是（涂布平板时所用稀释液的体积为0．2mL）。
（3）用这种方法测定的大肠杆菌密度，实际活菌数量要比测得的数量，因为。
题型攻略
【知识储备】统计菌落数目的方法
（1）显微镜直接计数法
①原理：利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量；②方法：用计数板计数；③缺点：不能区分死菌与活菌。
（2）间接计数法（活菌计数法）
①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。
通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。
热点题型3 运用选择培养基的选择原理，解答从环境中分离所需微生物的综合题
【例1】苯酚是工业生产排放的有毒污染物质，自然界中存在着降解苯酚的微生物。
某工厂产生的废水中含有苯酚，为了降解废水中的苯酚，研究人员从土壤中筛选获得了只能降解利用苯酚的细菌菌株，筛选的主要步骤如下图所示，①为土壤样品。
下列相关叙述错误的是
（）
A.图中②培养目的菌株的选择培养基中应加入苯酚作为碳源
B.如果要测定②中活细菌数量，常采用稀释涂布平板法
C.若图中④为对照实验，则其中应以苯酚作为唯一的碳源
D.使用平板划线法可以在⑥上获得单菌落
【例2】。