生物化学.第十五章%20肾脏功能检验
肾脏和肾功能的临床生物化学检测
滤过的结果
血细胞不能通过 分子量>7万的大分子不能通过 中低分子量的蛋白可部分通过 分子量<4万的小分子自由通透
肾小球的滤过作用----滤过膜
滤过作用机制：
分子屏障：内皮窗孔（40-
100nm，起始屏障）、基底膜微 纤维网 孔（4-8nm，最主要的屏 障）、足细胞足突裂隙（7nm，
高超过30mg，30-300mg/24h，临床称微量白蛋白尿。
临床意义：是肾小球滤过膜早相损伤的灵敏指标。
二、肾功能的临床化学检测---肾小球滤过膜
选择性指数（SPI）分子屏障损伤时的评价指标
CIgG SPI= =
CTRF
尿IgG/血清IgG 尿TRF/血清TRF
尿蛋白选择性指数可用于评估肾小球滤过膜的病变程度、预后及指
二、肾功能的临床化学检测
（一）、综合 评价试验
（二）、肾小 球功能评价
（三）、肾小 管功能评价
肾清除试验
肾小球滤过率
重吸收功能
肾小球滤过膜 功能完整性
肾小球滤过膜 损伤程度评价
肾小管损伤标 志物
肾小管损伤情 况预测
二、肾功能的临床化学检测---综合评价试验
定 指双肾于单位时间内，能清除多少毫
肾义
相对应，是实验室评价肾小球滤过功能的常用指标。
尿毒症及终末期 20
失代偿 期
代偿期 80
正常
二、肾功能的临床化学检测---肾小球滤过率
血尿素与血肌酐（粗略评价指标）
BUN
CR
来源 代谢 意义
蛋白代谢终产物
肾小球完全滤过，肾 小管重吸收近50%
一定程度上较灵敏的 反映肾小球滤过率
临床生物化学检查(肾脏疾病实验室检查)
Scr临床意义
1.增高见于各种原因引起的肾小球滤过功能减 退 1）急性肾衰竭，Cr进行性↑，为器质性损害的 指标。
只有当GFR下降到正常的1/3时，Scr才明显↑， Scr不能代表Ccr测定，不能反映肾早期损害的 程度。
Scr临床意义
2）慢性肾衰竭Scr与病变程度一致：
肾衰竭代偿期 Scr<178μmol/L
衰、 3.体内蛋白质分解过多或摄入过多：急性传染
病、高热、上消化道出血、大手术、甲亢
肾小球滤过功能测定
内生肌酐清除率测定(Ccr) 血清肌酐测定(Scr) 血清尿素测定(SBUN) 血清尿酸测定(SUA) 菊粉清除率测定 血β 2-微球蛋白测定
血清尿酸测定 (serum uric acid,SUA)
肾脏疾病实验室检查
肾脏的结构
肾脏的功能单位——肾单位
肾单位的组成：
- 肾小球：滤过
远曲小管：浓缩，稀释 - 肾小管
近曲小管：排泄
180L肾小球滤液
近曲小管
HCO3-,NaCl优先重吸收 葡萄糖，氨基酸完全重吸收
1/3原液(≈60L)
髓袢
水，钠重吸收
18L(10%)
远曲小管 浓缩，稀释
集合管(1L)
内生肌酐清除率测定(Ccr)
内源性：体内肌酸脱水 肌酐来源
外源性：食物 大部分经肾小球滤过 肌酐排泄 不被小管重吸收，小管排泄少
内生肌酐清除率测定
(endogenenous creatinine clearance rate,Ccr)
定义：肾单位时间内，把若干毫升血浆中
的内生肌酐全部清除出去，称为内 生肌酐清除率。
﹡多种慢性肾脏疾病及肾衰竭 ﹡白血病及肿瘤 ﹡应用噻嗪类利尿剂(抑制肾小管排泌尿酸) ﹡长期禁食及糖尿病(酮体竞争抑制近端小 管尿酸排泌) ﹡子痫(肾血流量减少)
肾脏功能检验(生物化学检验课件)
02 尿素(urea)
是蛋白质代谢终产物，产生的量取决于蛋白质摄入量 和肝脏功能。
尿素占血中非蛋白氮化合物总量的45％。可自由通 过肾小球滤过膜。仅有少部分尿素经由胃肠道及皮肤排 出，因此，血清尿素水平在一定程度上反映了肾小球的 滤过能力。
1770 1416 1062 708 354
正常GFR百分比
120 100 80 60 40 20
BUN 112 98 84 70 56 42 28 14
0 GFR(ml／min)
（二）血清肌酐的测定
肌酐(creatinine，Cr)是肌酸和磷酸肌酸代谢的最终 产物。人体内肌酐包括两部分：
外源性肌酐：由食物摄取； 内源性肌酐：由肌肉组织代谢生成。 肌酐是小分子物质，不与血浆蛋白结合，由肾小球滤 过，不能被肾小管重吸收，仅少量被肾小管分泌到尿液中， 因此，在控制外源性肌酐摄取时，测定血清肌酐可作为肾 小球滤过功能的指标。
Jaffe反应法(苦味酸法CREA-J)：肌酐与碱性苦味酸作 用，510nm处比色分析。
OH-
苦味酸十肌酐
黄红色化合物
酶偶联速率法(CREA-S)：肌酐在肌酐水合酶催化下生 成肌酸，然后在肌酸激酶、丙酮酸激酶、乳酸脱氢酶偶 联作用下，使NADH氧化成NAD+，在340nm处监测吸 光度值降低速率，推出肌酐含量。
苦味酸生成红色，这些物质统称为假肌酐。
点 由于假肌酐也存在于红细胞中，因此测定肌 酐时采用血清或血浆作为标本，避免溶血。
假肌酐干扰的排除
01 吸附法
用硅酸铝土在酸性条件下吸附血清中的肌酐或用阳 离子交换树脂直接吸附血清中的肌酐后，再用Jaffe反应 显色。
肾脏功能实验室检测
肾脏功能实验室检测肾脏是人体中非常重要的器官之一，它的主要功能是排除体内代谢产物和维持体内的水电解质平衡。
当肾脏功能出现异常时，会导致各种疾病的发生。
为了准确评估和监测肾脏功能，医生常常会要求患者进行肾脏功能实验室检测。
一、尿液检测尿液检测是评价肾脏功能的重要方法之一。
通过分析尿液中的成分和性质，可以判断肾小球滤过功能、肾小管重吸收功能以及肾小管分泌功能等。
常见的尿液检测项目包括尿常规、尿蛋白定性和定量、尿钙、尿肌酐、尿酸等。
1. 尿常规尿常规是最常见的尿液检测项目之一，它包括尿液的颜色、透明度、比重、酸碱度、尿液中的红细胞、白细胞、上皮细胞、细菌和管型等的检测。
这些指标可以反映尿液的肾小球滤过功能、肾小管的重吸收和分泌功能以及尿路感染等情况。
2. 尿蛋白定性和定量尿蛋白定性和定量是评估肾脏功能的重要指标之一。
通过尿蛋白的定性检测，可以初步判断肾小球滤过膜的通透性是否损害，而尿蛋白定量则可以进一步评估肾小球滤过功能的程度。
3. 尿钙、尿肌酐、尿酸尿钙、尿肌酐和尿酸是反映肾小管重吸收功能和分泌功能的指标。
肾小管对这些物质的重吸收和分泌功能异常会导致尿液中它们的浓度发生变化，从而揭示肾脏功能的异常。
二、血液检测除了尿液检测外，血液检测也是评估肾脏功能的重要方法之一。
通过分析血液中的相关指标，可以综合评估肾小球滤过功能和肾小管重吸收功能。
常见的血液检测项目包括血肌酐、血尿素氮、血尿酸等。
1. 血肌酐和血尿素氮血肌酐和血尿素氮是衡量肾小球滤过功能的两个主要指标。
肾小球滤过功能下降时，血液中的肌酐和尿素氮浓度会升高。
通过测定它们的浓度，可以初步判断肾小球滤过功能的程度。
2. 血尿酸血尿酸是反映肾小管功能的指标。
肾小管对尿酸的排泄功能异常会导致血尿酸的浓度升高，从而诱发高尿酸血症和痛风等疾病。
三、肾小球滤过率测定肾小球滤过率（glomerular filtration rate, GFR）是最准确反映肾小球滤过功能的指标之一。
生化--肾脏疾病检验 图文
2.参考区间
成人 0.6～2.5 mg/L
3.临床意义
同Cr、Bu 及Ccr。更显著、更灵敏
二、肾小管功能检查
新疆医科大学第一临床医学院实验诊断学教研室
（一） 近端肾小管功能检查 1.β 2—微球蛋白测定 β 2—MG 由人体有核细胞，特别是淋巴细胞和肿瘤细胞产
生 ，生成较恒定，分子量11.8kD ，自由滤入原尿在 近端小管几乎全部重吸收，并被分解、破坏。 参考区间：
重吸收发生改变，影响尿的浓缩与稀释功能。 （2）方 法 ①受试日正常进食。 ②晨起8am排尿弃去。8am～8pm (昼尿)，每2h留
一次尿，8pm至次日8am（夜尿）随机留尿 ③准确测定各次尿量及比重
(3)参考区间
尿量 1000～2000 ml/24h ／1
昼／夜尿 3～4
②氮质血症的鉴别
正常情况： Bu/cr=10-15:1
肾性：Bu/cr：↑
肾小管：Bu/cr ：↓
肾前性：Bu/cr ：↑↑
肾后性：Bu/cr ：=10-15:1
（三）胱抑素C测定 Cystain C原理
1.原理
Cystain c 分子量小（13000kd），有核细 胞生成，可自由通过滤膜，在原尿中几乎全部 被近曲小管摄取、分解。
（八）肾性高血压
肾脏疾病
GFR↓
肾灌注量↓
肾实质破坏
Na,HO2排出↓ Na,HO2潴留↑
肾素分泌↑ ADS↑
ATⅡ↑
舒血管物质↓（PGE2等）
血容量↑
外周阻力↑
CO↑
高血压
（九）肾性贫血
机制: 1.肾促红素生成↓ 2.毒物抑制RBC生成 3.毒物破坏RBC 4.出血 5.铁的再利用障碍
肾脏功能的临床生物化学检验
影响因素 血肌酐水平高，肾小管排泌增多，导致Ccr高于 GFR 肌酐的肾外清除，约0.026mL.kg-1.min-1 药物：甲氰咪胍 抑制肾小管排泌,肌酐.
内生肌酐清除率测定（Ccr）
临床意义： 血清尿素氮增高见于： 肾性（肾小球滤过功能下降）： 1）原发性肾小球疾病：肾小球肾炎，肾病综合征 ； 2）继发性肾小球疾病：狼疮性肾炎、慢性肾盂肾 炎等。 肾前性：1）产生过多：摄入大量蛋白，蛋白高分解代谢 —高热、严重创伤、严重感染、服肾上腺皮质激素。 2）重吸收过多：严重便秘、上消化道出血。 3）肾血流量少：休克、心衰、脱水。 肾后性：前列腺增生、尿路结石、肿瘤等。
内生肌酐清除率测定（Ccr）
原理：肾单位时间内，把若干毫升血浆中的内生 肌酐全部清除出去，称内生肌酐清除（Ccr）。 血浆肌酐的生成量和尿的排出量较恒定，其含 量的变化主要受内源性肌酐的影响。而且肌酐 大部分是从肾小球滤过，不从肾小管重吸收。 清除内生肌酐的能力主要取决于肾小球滤过率。
标本留取方法：
血ß2-微球蛋白测定
原理： 血ß2-微球蛋白（血ß2-M）是体内有核细胞包 括淋巴细胞、血小板、多形核白细胞产生的一种 小分子球蛋白。血ß2-M广泛存在于血浆、尿、脑 脊液、唾液及初乳中。正常人血中ß2-M浓度很低， 可自由通过肾小球，然后在肾小管内几乎全被重 吸收。 参考范围：1-2mg/L。
血ß2-微球蛋白测定
其他检验项目
尿TH糖蛋白测定 原理： TH糖蛋白是远曲小管合成和分泌的特异蛋白。 远端小管受损，THP升高。 参考值：29.8-43.9mg/24H尿 临床意义： 1）THP增高：远端小管损伤，见于各种原因 所致的肾小管损伤。 2）THP减少：肾、肾衰竭
生物化学检查在肾病诊断中的意义
生物化学检查在肾病诊断中的意义肾脏是人体内一个很重要的器官，它能够将体内的废物和多余物质排出人体，同时还能够调节体内的水分和电解质的平衡，维持人体内环境的平衡。
但是，由于各种原因，肾脏的功能可能会受到影响，引起肾病的发生。
肾病对人体健康有很大的影响，严重的情况下可能会导致肾衰竭，进而危及生命。
因此，对于肾病的及早诊断十分重要。
而生物化学检查在肾病诊断中起着至关重要的作用。
一、肾功能损伤判断在生物化学检查中，血清肌酐和血尿素氮是用来反映肾脏功能的指标。
当肾小球滤过率下降时，就会导致血清肌酐和血尿素氮升高。
而当肾小球滤过率降低超过50%时，这两个指标就会明显升高。
因此，通过测定血清肌酐和血尿素氮的水平，可以判断肾脏功能是否受到损伤。
二、肾小球滤过率的测定肾小球滤过率则是反映肾脏功能的最重要的指标之一，可以通过血清肌酐检查和尿肌酐清除率测定。
而在肾小球滤过率减少时，还可以通过测定血浆肌酐和肌酐清除率来判断内分泌功能的变化。
三、血脂测定肾病时，肾功能变差，往往导致血脂代谢的紊乱，血胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白等指标会升高，而高密度脂蛋白会降低。
四、电解质的测定肾脏受到损伤时会影响人体内的电解质的平衡，所以肾病患者血钙、血磷、血镁、血钠等指标会发生变化。
五、肾小管功能的测定肾小管是肾脏的重要部位，主要是参与排泄和重吸收。
肾小管功能有所异常时，可以导致肌酸酐清除率降低，甚至出现肾糖尿病等临床表现。
综上所述，生物化学检查在肾病诊断中的意义不言而喻。
通过及时进行生物化学检查，诊断肾病的发生和发展，避免肾脏进一步受到伤害，对肾脏保护非常关键。
而且，对于早期肾病，生物化学检查是很容易被忽视的，但是及早诊断和治疗，可以避免不必要的身体损伤以及后期严重的并发症。
因此，肾病患者在日常生活中，必须定期进行生物化学检查，及时了解自己的身体状况，掌握科学的治疗方法，合理调理，尽早康复。
肾功能不全实验室生物化学诊断
血液
红细胞
尿素
铵 + 氰酸盐
Hb
不可逆
氨甲酰血红蛋白
反映近4星期左右期间尿素的平均水平
（五）血半胱氨酸蛋白酶抑制剂C （cystatin C，cys C）
特点： 有核细胞表达、分泌的一种碱性非糖基
蛋白，每日分泌量恒定。
分子量13kD，自由通过肾小球滤膜 途径：
cystainC被近曲小管上皮细胞摄取、分解，不回 到血液中，尿中仅微量排出。
意义 ◇ 尿中增高：
（1）敏感地反映近端重吸收功能受损 （2）血<5mg/L，尿中升高反映肾小管损伤
◇ 血清中增高： （1）肾小球滤过功能受损
（2）恶性肿瘤、炎症
2、1-微球蛋白
肝细胞和淋巴细胞产生 糖蛋白，分子量26-33KD
产生恒定，绝大部分被肾小管重新吸收 测定可以不受尿PH值影响
血液
有核细胞
cys C
非糖基化碱性蛋 白质
肾小管重吸收 分解
极少mg/L)
肾小球滤膜
特点：
1.在血浆中稳定，很少受到其他物质的 干扰，临床上使用较多
2.与肾小球滤过率相关性好，指标优 于肌酐
（六）菊粉（inulin）清除率
（1）菊粉的特点：
不被机体分解、结合、破坏
自由通过肾小球
不被肾小管分泌和重吸收
肾小体 肾小球 肾小囊
肾小管 近端小管 髓袢 远端小管
近端小管
远端小管
一、肾小球功能检查
肾小球滤过（glomerular filtration）:
当血液流经肾小球的毛细血管网时，血浆中的水和小 分子溶质，包括分子量较小的血浆蛋白质，通过滤过 膜滤过入肾小囊形成原尿的过程。
原尿的成分除了不含有血细胞和部分血浆蛋白质 以外，与血浆成分相同。
肾脏功能检验课件
肾小球滤过作用影响因素:
肾小球毛细血管血压 血浆胶体渗透压 肾小囊内压
肾小球滤过膜的通透性(d≤7nm) 有效滤过压 肾血流量(RBF)
影响
肾小球滤过率(glomerular filtration rate，GFR)
正常GFR约为120ml/min。
2020/8/17
7
分子量超过69KD，半径大于4nm的物质 带负电荷的物质
12
肾小球滤过率
➢表示方法:肾清除率
单位时间内肾排出某物质的总量与同一时间该物质血浆浓度之比：
C U V P
式中C：清除率，P：血中浓度，U：尿中浓度，V：单位时间尿量。
➢用于GFR测定的物质:
血浆中某物质经肾脏时，能从肾小球自由滤过,既不被肾小管重吸 收,也不被肾小管分泌,该物质的清除率就可以代表GFR
（ERPF）
肾有效血浆流量=(UPAH×V)/PPAH 肾血浆流量= ERPF /(90%) 肾全血流量(RBF)=RPF/(1-RBC比积)
参考范围：RPF 600～800ml/min，RBF 1 200～1 400ml/min
2020/8/17
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蛋白尿选择性指数
选择性蛋白尿
肾脏疾病早期，肾小球滤过膜电荷屏障损伤，尿中排出的蛋白质 为小分子蛋白质，以清蛋白质为主
2020/8/17
11
三、肾脏功能试验的评价与选择原则
肾小球滤过功能试验
肾小球滤过率
血肌酐(creatinine，Cr)测定 血尿素(urea，Urea)测定
血尿酸(uric acid，UA)测定
肾小管功能试验
肾近端小管重吸收功能试验 肾小管排泌功能试验
肾小管浓缩和稀释功能试验
肾小管和集合管酸碱调节功能试验
常用肾脏功能实验室检测及临床常用生物化学检测
常用肾脏功能实验室检测及临床常用生物化学检测肾功能检查一.肾小球滤过功能检查决定肾小球滤过作用的因素主要有三方面：滤过膜通透性是滤过的结构基础；有效滤过压是滤过的动力；肾血浆流量是滤过的物质基础。
（一）内生肌酐清除率（Ccr）：[原理]在严格控制饮食和肌肉活动相对稳定的情况下，血中肌酐是由肌肉的代谢过程中释放出来的，称为内生肌酐，正常人血中常保持恒定的水平。
肌酐经肾小球滤出后，不被肾小管重吸收，排泄量很少，肾在单位时间内把若干毫升血浆中的内生肌酐全部清除出去称内生肌酐清除率，相当于肾小球滤过率，是检测肾小球滤过功能最常用的试验。
[标本采集方法]（1）检验前连续低蛋白饮食共3天，每日蛋白质入量应少于40g。
禁食肉类，避免剧烈运动。
（2）第4日晨8时排净尿液，收集此后24h尿液，容器内添加甲苯防腐。
（3）试验日抽取静脉血2-3ml，与24h尿液同时送检。
[参考值]成人 80～120ml/min（1）判断肾小球损害的敏感指标，Ccr是较早反映GFR的敏感指标。
（2）评估肾功能损害程度，临床上根据Ccr可对肾功能进行分期2.血清肌酐和尿素氮浓度测定[原理]血肌酐（Scr）和血尿素氮（BUN）的浓度取决于机体的分解代谢与肾脏的排泄能力。
在摄入食物及体内分解代谢比较稳定的情况下，其血浓度取决于肾排泄能力，因此，Scr和BUN 浓度在一定程度上可反映肾小球滤过率功能的损害程度，是常用的肾功能指标。
[测定方法]Scr：目前肌酐测定中最重要的方法有Jaffe反应法及酶偶联法。
BUN：二乙酰一肟显色法，脲酶—波氏比色法等。
[参考值]Scr：血清男性53～106μmol/L女性44～97μmol/LBUN：成人3.2～7.1mmol/L[临床意义]1．非早期肾功能损伤指标，常在肾小球滤过功能严重受损时才明显升高。
2．在慢性肾衰竭尤其是尿毒症时升高程度与病变严重性一致①肾功能代偿期： Scr ＜178 μmol/L，BUN<9mmol/L②肾功能失代偿期（氮质血症期） Scr ＞178 μmol/L，BUN>9mmol/L③尿毒症期： Scr ＞445 μmol/L，BUN>20mmol/L。
肾病及其生化检测
在清除试验中所用物质应基本具备如下条件： （1） 分子量小，蛋白结合率低，能完全经肾小 球自由滤过。 （2） 无肾小管分泌，亦不被肾小管重吸收。 （3） 该物质在血及尿中的浓度测定方法简便易 行，有较好重复性。 （4） 试验中该物质血中浓度能保持相对恒定。 目前能满足上述（1）、（2）两项要求的是菊粉， 被认为是最能准确反映GFR的 “金标准”。
二． 血浆尿素(Uria BUN) 的测定
尿素是蛋白质和氨基酸代谢的最终产物。 一） 尿素的代谢过程。 AA经脱氨基作用生成氨+CO2（全身 各组织），经血液运至肝脏，加上肠道 吸收的氨一起在肝脏经鸟氨酸循环而生 成尿素。
尿素生成的鸟氨酸循环
二） 正常参考值
2.8—7.1mmol/L
三）临床意义
尿素测定目前多采用尿素酶偶联法：
2）酚-次氯酸盐显色法：
尿素酶水解尿素生成氨
3)纳氏试剂显色法： 尿素经尿素酶作用后生成氨，氨可 与纳氏试剂（HgI2.2KI的强碱溶液）作 用，生成棕黄色的碘化双汞铵。
⑵二乙酰一肟法（直接法）： 二乙酰不稳定，用二乙酰一肟代替， 后者遇酸水解成二乙酰。
试剂中加入Fe3+或Cd2+及 硫氨脲，可提高灵敏度，增加显色 稳定性，还能消除羟胺的干扰作用。 提高酸的浓度可增加灵敏度。二乙 酰一肟与瓜氨酸也有显色。
2）酶联法：
此法特异性高，标本不需去蛋白， 特别适用于自动分析。但工具酶过 多、价格昂贵。
正常参考值：血浆肌酐44-133 μmol/L。
三、 尿酸（uric acid, UA)测定
尿酸是嘌呤核苷酸分解生成嘌呤 核苷及嘌呤后，经水解脱氨和氧化， 生成的最终产物。尿酸随尿排出， 血中尿酸全部通过肾小球滤出，在 近曲小管几乎完全被重吸收，故尿 酸的清除率极低（<10%）。
生化复习——肾脏检查
肾脏疾病的实验室检查1、肾单位是肾脏的基本结构和功能单位。
2、肾小球率过滤（GFR）单位时间内（分钟）两肾生成的滤液量。
GFR＝GFR：(ml/min) V：每分钟尿量(ml/min)U: 尿中测定物质的浓度（mmol/L)P: 血中测定物质的浓度（mmol/L）放射性同位素不适用于肾功能严重受损人群和孕妇3、蛋白尿尿蛋白量＞150mg/24h。
5、氮质血症是肾功能衰竭的重要临床表现之一。
1）肾前性氮质血症尿素明显增高，肌酐正常或轻度增高。
2）肾后性氮质血症尿素明显增高，肌酐正常或轻度增高。
3）肾性氮质血症两者同时增高，表示肾功能严重受损。
6、肾小球滤过功能检查（项目）1）内生肌酐清除率（Ccr）判断肾小球损害的敏感指标；估价肾功能损害程度，比尿素和肌酐更敏感；指导临床治疗。
2）血清肌酐（Scr）Jaffe（苦味酸法）、酶法。
反应GFR减退的后期指标，Ccr降低50%时血肌酐增高。
3）血清尿素（BUN）：尿素酶法4）血胱抑素C（CysC）：胶乳颗粒增强免疫浊度法5）血清β2-微球蛋白6）血清尿酸7、肾小球屏障功能检查（项目）1）尿总蛋白（UTP）双缩脲比色法和邻苯三酚钼络合显色法2）尿微量白蛋白（mAlb）24h尿：mAlb排出量< 30 mg/24h,或<30mg/L是DM肾小球微血管病变最早期的客观指标之一，早期诊断DM肾病。
评估DM患者发生肾并发症的危险度。
高血压性肾损伤的早期标志物。
妊娠诱发高血压肾损伤的监测。
8、肾近端小管功能检查（项目）1）尿β2-微球蛋白主要用于肾小管损伤的监测。
尿pH ≤5.5时，β2-MG 会迅速降解。
只有血β2m＜5mg/L时（阈值），尿β2m升高才反映肾小管损伤。
2）尿α1-微球蛋白对于肾小管的重吸收障碍 1M要优于β2M，能够反映肾脏的早期改变。
3）视黄醇结合蛋白（RBP）与肾间质损害密切相关。
灵敏。
4）尿钠和滤过钠排泄分数（FeNa）作为估算肾小管坏死程度的指标。
临床生化检验肾功
尿素（Urea）的测定
血中蛋白质以外的含氮化合物称为非蛋白 氮组分（NPN）。NPN大部分由肾排出， 血中NPN浓度是反映GFR功能的一个指标。 血中NPN组分多达15种以上，其中血尿素 氮（BUN）占45%，因此BUN的变化更能 反映GFR功能，且测定方法更简单。因而 BUN测定逐渐取代NPN而成为常规方法
价显得尤为重要。
（接近成年人）
候接近正常水平 其早期无任何临床指征，进展缓慢，而糖尿病肾病一旦进入临床蛋白尿期则病情严重，发展迅速，能对糖尿病肾病早期肾损伤进行评
价显得尤为重要。
肌酸+H2O+O2
肌氨酸+尿素
Cys C与高血压肾病
肌酐α-酮戊二酸 + NADH + H+
性质决定用途：血清中Cys C的浓度正是反映肾小球的滤过率（glomerular filtrationrate, GFR）比较理想的内源性指标。
及嘌呤后，经水解脱氨和氧化，最后生成 ⑤其他：血清UA升高还见于慢性铅中毒、氯仿及四氯化碳中毒
28 唾液：
尿酸。UA随尿排出，血中UA全部通过肾小 ②血清Cr一天内生理变动幅度通常在10%内，但与个体肌肉量有关。
参考值: Surea : ②肾外因素：Ⅰ、肾前因素：肾血流量明显减少，GFR减退，导致尿素排出减少，血中浓度上升。
GLDH 谷氨酸 + NAD+ + H2O
参考值: Surea :
临床意义：
①在蛋白质摄入及体内分解代谢较恒定的 状态下Surea浓度取决于从肾排出的速度。 因此在一定程度上Surea能反映GFR的功能， 但是只有在有效肾单位约50%以上受损时 Surea才开始上升
②肾外因素：Ⅰ、肾前因素：肾血流量明显 减少，GFR减退，导致尿素排出减少，血中 浓度上升。常见于脱水、急性失血、休克 等有效循环容量急剧减少。Ⅱ、肾后因素： 见于尿路梗阻，尿路结石、肿瘤、前列腺 肿瘤或肥大等
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重要生化功能
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肾小管的内分泌功能
此外，肾脏也是一些激素的代谢场所与靶器官
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1．肾小球滤过功能
原尿的形成: 血液流过肾小球毛细血管网时，血浆中的水、小分子溶 质和小分子血浆蛋白，通过滤过膜滤入肾小囊腔形成原尿 肾小球滤过作用影响因素: 陆雄设计 请勿转载 肾小球滤过膜的通透性(d≤7nm) 有效滤过压 肾血流量(RBF)
式中C：清除率，P：血中浓度，U：尿中浓度，V：单位时间尿量。
用于GFR测定的物质:
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血浆中某物质经肾脏时，能从肾小球自由滤过,既不被肾小管重吸 收,也不被肾小管分泌,该物质的清除率就可以代表GFR 菊粉、肌酐、甘露醇
•菊粉清除率试验（Cin） ：测定GFR的“金标准” •内生肌酐清除率(Ccr)试验：检测GFR最常用
影响
肾小球毛细血管血压 血浆胶体渗透压 肾小囊内压
肾小球滤过率(glomerular filtration rate，GFR)
正常GFR约为120ml/min。
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分子量超过69KD，半径大于4nm的物质 带负电荷的物质
K＋、Na+、葡萄糖、氨基酸等
正电荷和中性分子
肾小球滤过膜结构
第十五章 肾脏功能检验 请勿转载 陆雄设计
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本章内容概要：
概述 血清尿素测定 血清肌酐测定 血清尿酸测定
请勿转载 本章教学要求： 陆雄设计
掌握 二乙酰一肟法和酶偶联速率法测定血清尿素，碱 性苦味酸法和酶偶联速率法测定血清肌酐以及内生肌酐清 除率，磷钨酸还原法和酶偶联比色法测定血清尿酸。 熟悉 尿素、肌酐、内生肌酐清除率以及尿酸测定的临 床意义，肾脏功能试验的选择原则与评价，肾脏疾病的生 物化学变化。 了解 肾脏的结构与功能。
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肾血流量测定
肾血流量或肾血浆流量
是指单位时间内流经肾脏的全血或血浆量
低浓度的对氨基马尿酸(PAH)肾清除试验 请勿转载 陆雄设计
当血浆中PAH浓度<50mg/L时，流经肾脏血浆中的PAH约90%从肾 脏清除，另有10%从肾的非排泌部分回到肾静脉。故PAH清除率只 代表有功能肾实质的血浆流量，即有效肾血浆流量（ERPF）
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第三节 血清肌酐测定
一、测定方法简介
血(尿)中肌酐测定的方法主要有Jaffe法、酶偶联法、高 请勿转载 陆雄设计 效液相色谱法。
在控制外源性肌酐摄取时，测定血清肌酐可作为肾滤过功能的指标。
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（一） Jaffe反应法 原理：
肌酐与苦味酸盐碱性溶液反应，生成黄红色的碱性肌 请勿转载 陆雄设计 酐苦味酸复合物，该反应称为Jaffe反应（苦味酸反应）
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第一节 概
一、肾脏的结构与功能
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述
二、肾脏疾病的生物化学变化 三、肾脏功能试验的评价与选择原则
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一、肾脏的结构与功能
(一) 肾脏的结构 解剖学结构
肾实质
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外层的皮质
内层的髓质构成 由20～28个肾锥体组成
肾小体
肾小管
髓袢 集合管 乳头管
肾盂
输尿管
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肾脏的组织学结构
血清尿酸的测定
磷钨酸还原法
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尿酸酶法
HPLC法
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（一）磷钨酸法
将血、尿样本制备成去蛋白滤液，具有还原性的尿酸 在碱性环境中使磷钨酸还原成蓝色的钨蓝，650～700nm处 请勿转载 陆雄设计 比色测定。 此法缺点是特异性不高，灵敏度低，显色不稳定。
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（二）尿酸酶法
1. 直接紫外分光法
非选择性蛋白尿
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肾脏疾病较为严重时，肾小球滤过膜分子屏障被破坏，尿中除清 蛋白外，还有分子量较大的蛋白质(如分子量为150kD的IgG)
SPI:判断肾小球滤过膜的屏障状况 SPI=(尿IgG/血IgG)/(尿Tf/血Tf)
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非蛋白氮酐、肌酸、氨、氨基酸、核苷酸等
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方法学评价：最常用的方法,简便、快速不需去蛋白，但是特异性差
假肌酐：一些与碱性苦味酸生成红色的物质 维生素C、丙酮、乙酰乙酸、α-酮酸、胆红素、葡萄糖、 请勿转载 陆雄设计 蛋白质以及头孢菌素类抗生素、强心甙、甲基多巴等 排除假肌酐的干扰： ①吸附法 ②速率法 ③二次读数法 ④在手工操作中制备无蛋白滤液或加入十二烷基硫酸钠去除 蛋白质干扰，在连续流动自动化生化分析仪中可采用透析器 清除蛋白质。 ⑤在缓冲液中加入硼酸盐消除葡萄糖、维生素C的干扰。
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计算 24h内Ccr：
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4h尿及空腹一次性取血，测每分钟尿量和每分钟Ccr：
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内生肌酐清除率测定的临床意义 1. 是判断肾小球滤过功能的敏感指标 2. 初步判断肾功能的损害程度
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3. 指导治疗 4. 慢性肾炎临床分型的参考
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第四节
一、测定方法简介
肾小管和集合管酸碱调节功能试验
尿蛋白检查
肾小球性蛋白尿检查 肾小管性蛋白尿检查
肾功能试验的选择原则
针对肾脏疾病类型、病程等临床诊断和治疗选择相应的肾功能试验 项目或项目组合，便于对肾脏疾病的早期诊断
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表示方法:肾清除率
肾小球滤过率
C U V P
单位时间内肾排出某物质的总量与同一时间该物质血浆浓度之比：
1. 直接紫外分光法 2. 酶偶联比色法 3. 酶联-紫外分光法
尿酸在282～292nm处有特异吸收峰，经尿酸酶作用 请勿转载 陆雄设计 后，生成的尿囊素在282～292nm无吸收峰，测量尿酸酶 作用前后吸光度之差，可计算血(尿)中尿酸含量。 该法灵敏度高，特异性强，其他物质无干扰；血清 样本可直接测定，不需沉淀蛋白、易于自动化，具有简 单、快速的优点。
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2. 判断肾功能损伤的程度 血清肌酐浓度可以初步判断肾功能损伤的程度： ①轻度肾损伤＜178μmol/L。 ②中度肾损伤＞178μmol/L(氮质血症)。 请勿转载 陆雄设计 ③重度肾损伤＞445μmol/L(肾功能衰竭)。 ④尿毒症＞1800μmol/L。
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三、内生肌酐清除率测定
肾有效血浆流量=(UPAH×V)/PPAH 肾血浆流量= ERPF /(90%) 肾全血流量(RBF)=RPF/(1-RBC比积)
参考范围：RPF 600～800ml/min，RBF 1 200～1 400ml/min
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蛋白尿选择性指数
选择性蛋白尿
肾脏疾病早期，肾小球滤过膜电荷屏障损伤，尿中排出的蛋白质 为小分子蛋白质，以清蛋白质为主
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2．肾小管和集合管重吸收功能
99%以上的滤液在流经肾小管和 集合管时被重吸收回到血液
原尿量约180L
(1) 肾小管重吸收的方式 主动重吸收 被动重吸收
排出的尿量仅为1.5L
+ + 2+ 逆浓度差，耗能 请勿转载 葡萄糖、氨基酸、K 、Na 、Ca 、Cl 陆雄设计 顺浓度差或电位差，不耗能 尿素和水
准确性高，反应所需时间很短，适合自动化分析，但规范实验条件有一定困难。
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二、尿素测定的临床意义
由于肾脏有强大的储备能力，因此，仅在肾小球滤 过率下降至正常的50％以下时，血浆或血清中尿素浓度 才会升高，故该指标灵敏度不高，不能作为早期肾功能 指标。 1. 血液尿素浓度增高 （1）生理性：高蛋白饮食，年龄增加 （2）病理性 ①肾前性:失水 ②肾性:影响肾小球滤过的疾病 ③肾后性:尿路阻塞的因素 婴儿孕妇低蛋白高糖饮食者 2．血尿素浓度降低 肝功能衰竭
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•第一步：
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•第二步： 纳氏试剂显色法： 或 酚-次氯酸盐显色法： （波氏法） 或 酶偶联速率法： 或 电导法
铵离子使电导增加，电导增加程度与产生的铵离子浓度成正比关系
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NADH
［方法评价］：
二乙酰一肟法： 灵敏度高、操作较为简便,线性范围较窄（＜150mmol/L） 特异性不高；本法难以实现自动化，目前临床上已很少使用。 请勿转载 陆雄设计 脲酶法(纳氏试剂与波氏法)： 特异性强，反应专一，但易受体液及环境中氨的干扰，因 此测定时需严防外源性氨的污染。一般用于手工操作测定，适 合基层单位开展；但试剂稳定性差。 酶偶联速率法： 准确度和灵敏度较高，多用于自动分析系统，试剂较贵 电导法：
原理：
通过测定已控制外源性肌酐摄取的病人血清和尿液中肌酐的含量， 计算24h或每分钟有多少毫升血浆中肌酐被肾脏清除的值即为Ccr。
操作：
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1. 受试者连续禁食肉类3d（无肌酐饮食），不要饮茶或咖啡，停 止服用利尿剂，实验前避免剧烈运动，饮足够量的水，使尿量不少于 1ml/min。 2. 于第4d早晨8时抽空腹静脉血3ml并分离出血清低温保存，同时 将尿液排空、弃去，然后收集至第5d早晨8时（24h）的全部尿液，加 入4～5ml甲苯以防腐。 3. 测定尿及血清肌酐含量和测量24h尿量。 4. 测量受试者身高与体重(kg)。
(2) 肾小管重吸收的部位 近端小管：肾小管的重吸收作用主要在此段进行 髓袢：肾小管液部分Na+，水重吸收。
“逆流倍增” 在尿液的浓缩和稀释
远端小管与集合管：滤液中部分Na+和水在远端小管和集合管被重吸收
Na+(主动转运），激素调节
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3．肾小管和集合管的排泌功能
H+ 、NH4+、K+、代谢产物以及进入机体的外源性物质 (1)近端小管、远端小管和集合管的泌H+功能 (2)远端小管和集合管泌NH3功能 请勿转载 陆雄设计 (3)远端小管和集合管泌钾功能 (4)近端小管的排泌代谢产物和外源性物质功能