从猪大肠腌液中提取肝素钠的研究
肝素钠实验报告
一、实验目的1. 学习肝素钠的提取方法。
2. 掌握肝素钠的鉴定方法。
3. 了解肝素钠的药理作用和应用。
二、实验原理肝素钠是一种具有抗凝血作用的物质，主要由猪肠黏膜或牛肺中提取。
其分子结构中含有大量的硫酸基团，具有强大的抗凝血活性。
本实验采用酸碱沉淀法提取肝素钠，并通过硫酸铜法进行鉴定。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 猪肠黏膜- 醋酸- 硫酸铜- 碘化钾- 氢氧化钠- 乙醇- 无水硫酸钠- 蒸馏水2. 实验仪器：- 研钵- 烧杯- 烧瓶- 漏斗- 滤纸- 酒精灯- 铁架台- 移液管- 容量瓶- 滴定管- 恒温水浴锅四、实验步骤1. 提取肝素钠（1）将猪肠黏膜剪成小块，放入研钵中，加入适量的醋酸，研磨至糊状。
（2）将糊状物倒入烧杯中，加入适量的蒸馏水，煮沸30分钟。
（3）用滤纸过滤，收集滤液。
（4）将滤液加入适量的氢氧化钠，调节pH值至7-8，静置过夜。
（5）次日，用滤纸过滤，收集沉淀。
（6）将沉淀用乙醇洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，得到肝素钠粗制品。
2. 鉴定肝素钠（1）取一定量的肝素钠粗制品，加入适量的硫酸铜溶液，观察颜色变化。
（2）取一定量的肝素钠粗制品，加入适量的碘化钾溶液，观察颜色变化。
五、实验结果与分析1. 提取结果经过提取，得到了肝素钠粗制品，颜色呈淡黄色。
2. 鉴定结果（1）加入硫酸铜溶液后，溶液呈蓝色，证明肝素钠中含有硫酸基团。
（2）加入碘化钾溶液后，溶液呈棕红色，进一步证明肝素钠中含有硫酸基团。
六、实验结论1. 成功提取了肝素钠粗制品。
2. 通过硫酸铜法和碘化钾法鉴定，证明肝素钠中含有硫酸基团。
七、实验讨论1. 在提取过程中，酸碱沉淀法能够有效提取肝素钠，但提取率较低。
2. 在鉴定过程中，硫酸铜法和碘化钾法能够快速、简便地鉴定肝素钠。
3. 肝素钠作为一种重要的抗凝血药物，在临床应用中具有重要意义。
八、实验总结本次实验通过学习肝素钠的提取与鉴定方法，掌握了肝素钠的基本知识。
在实验过程中，注意了操作细节，确保了实验结果的准确性。
肝素钠提取技术
肝素钠提取技术肝素钠是一种常用的抗凝剂，广泛应用于临床医学中。
肝素钠的提取技术是一项重要的研究领域，对肝素钠的提纯、纯化、分离等方面进行研究，可以提高肝素钠的纯度和产量，进而提高其在临床应用中的效果。
肝素钠是一种由猪肠粘液中提取的低分子多糖，具有抗凝、抗炎、抗血小板聚集等功效，是临床上常用的抗凝剂之一。
但是猪肠粘液中的肝素钠含量较低，且杂质多，需要通过提取技术进行纯化。
目前常用的肝素钠提取技术主要包括离体提取法、微生物发酵法和基因工程法等。
离体提取法是一种传统的肝素钠提取技术，其优点是成本低、操作简便。
具体步骤如下：首先，将猪肠粘液进行预处理，去除杂质，获得粗提液；然后，采用盐析、酸碱沉淀、凝胶层析等方法对粗提液进行分离纯化，最终得到肝素钠产品。
这种方法适用于小规模的肝素钠提取，但是提取过程中可能存在激发细胞凝集、降低肝素钠收率等问题。
微生物发酵法是一种利用微生物合成肝素钠的技术。
常用的微生物包括酵母菌、大肠杆菌等。
具体步骤如下：首先，将含有肝素前体物的培养基与微生物进行培养，经过一系列的代谢反应，合成肝素前体物；然后，通过酸碱处理、层析纯化等方法，从培养物中提取得到肝素钠。
这种方法的优点是可以实现大规模生产，但是合成的肝素钠结构与天然产物有所差异，且提取工艺复杂。
基因工程法是一种新兴的肝素钠提取技术。
通过在细胞中转入肝素钠合成相关基因，使细胞能够合成肝素钠，从而实现肝素钠的大规模生产。
具体步骤如下：首先，将含有肝素钠合成基因的质粒转入目标细胞中，使细胞能够表达肝素合成相关基因；然后，通过培养、酸碱处理、层析纯化等步骤，从细胞培养物中提取得到肝素钠。
基因工程法的优点是可以实现精确控制肝素钠结构、纯度和产量，但是技术难度较大，成本较高。
总结来说，肝素钠提取技术是一项复杂的研究领域，其中离体提取法、微生物发酵法和基因工程法是常用的提取方法。
不同的方法有各自的优缺点，可以根据实际需要选择合适的方法进行研究。
从猪小肠中提取粗品肝素钠工艺方案
所有记录都将进行归档，其资料保存在产品销售的三年之后才能进行销
毁。
四、小结
本工艺方案采用盐解法获得肝素钠粗品，提倡绿色工艺，减少了对周围环境的污染，
有效提高和稳定产品的质量，产品活性损失小，运营生产成本小，原材料可反复使用，为
企业创造经济价值。
五、附件材料
图 2.刮肠机
图 3.码量
图 4.腌渍车间
数量 1 2 300 1 1 1000 2
1000 1 2 2 1000 300
1 1 1
单位 台 个 斤 个 个 根 个
斤 吨 个 台 斤 斤
张 个 台
表 2.WD-1701 肝素钠树脂参数
聚合物类型 均一系数 粒径 稳定性 有效粒径 密度
交联聚丙烯酸胺 max.1.8 ＞90% 0.5-1.2mm PH 0-14 0.65(+/-0.05) 1.08app.g/ml
清洁设备容器，可用抹布进行擦拭。
处理生产废弃物。
更换现场标识，其内容填写无误。
整理文件记录并归档，放在相应的记录存放柜中并上锁。
5.产品检验结果
产品企业可以自行检验的，可送置相关检验室进行检验，检验结果符合
国家标准。
不能自检的，应找药品检验机构进行检验，才能进行销售。
建立完整的检验记录，确保产品的准确性、真实性、安全性。
从猪小肠中提取粗品肝素钠工艺方案
一、设计背景 肝素钠是粘多糖硫酸酯类抗凝血药物，一般运用于心血管疾病的治疗中，肝素钠的原 料药是肝属钠粗品，目前市面上来源最广的是从健康生猪的小肠黏膜中提取，由于不经生 产加工的猪小肠中含有大量的微生物等杂质，需经人工过提取分离，从而获取人体所能利 用的肝素钠原料药。我国地域广阔，拥有全世界最丰富的生猪资源，中国是肝素钠的生产 大国，也是肝素钠的出口大国，现如今海普瑞公司出品的依诺肝素钠注射液已销往意大利、 奥地利、捷克等许多欧盟国家，其中国产品为-普洛静。国内绝大多数生产线之所以会采 用从猪小肠提取肝素钠粗品，是因为猪小肠中的肝素分子结构和人体自带的肝素分子结构 相似，且价格廉价。 现如今小肠的市场价格大概是在 40 元左右一根，而一台刮肠机一天的工作量，在机 器不出故障的前提下，每天能至少能刮出一千根，因此设想购入 1000 根小肠，可配置一 台刮肠机。一根猪小肠的重量大概在两斤左右，一千根猪小肠则为 2000 斤，两千斤的猪 小肠则换算为一吨，一吨的猪小肠预设所需 1000 斤肠加工专用盐。 因疫情原因本设计采用了抗疫肠衣加工专用盐，氯化钠的含量 98.5%，能维护公共健 康与安全。 本设计采用 WD-1071 肝素钠树脂，它是一种肝素钠专用提取树脂，因其交换能力强， 提取速率快，能有效减少污染，保养周期长，可用于大规模的肝素钠粗品生产。 二、设计依据 肝素粗品提取的传统方法有酶解法、盐解-离子交换法、盐解-季铵盐沉淀法，传统的 酶解提取肝素钠技术，资源消耗高，环境污染大，附加值低，本设计采用盐解法。 盐解法是肝素钠生产者较早采用的提取方法，其操作简单，对环境污染较小。它的主
猪肠粘膜中肝素钠提取技术的 研究现状和发展趋势
Asian Case Reports in Veterinary Medicine 亚洲兽医病例研究, 2019, 8(1), 1-8Published Online January 2019 in Hans. /journal/acrpvmhttps:///10.12677/acrpvm.2019.81001Research Status and Development Trendof Extraction Technologyof Crude Heparin SodiumShunshun Shu1, Qian Mi1, Chengrong Han1, Zhang Fengyun1, Shangwen Tang2, Jun Niu1*1C.P. Food (Xiangyang) Co. Ltd., Xiangyang Hubei2Hubei College of Arts and Sciences, Xiangyang HubeiReceived: Apr. 10th, 2019; accepted: Apr. 23rd, 2019; published: Apr. 30th, 2019AbstractHeparin sodium is the sodium salt of heparin, which has great medical and biological value. The clinical application of heparin has gradually expanded, and the population of drug users has gradually increased, which has led to the expansion of the global heparin drug market and the growth of the demand for crude heparin sodium. Based on the development status of crude hepa-rin sodium extraction technology at home and abroad, the extraction process of crude heparin so-dium was comprehensively evaluated, and the development trend of crude heparin sodium at home was prospected.KeywordsCrude Heparin Sodium, Extraction Technology, Anticoagulant Mechanism, Purification of Heparin Sodium, Development Trend猪肠粘膜中肝素钠提取技术的研究现状和发展趋势舒顺顺1，米倩1，韩成荣1，张凤云1，汤尚文2，牛军1*1正大食品(襄阳)有限公司，湖北襄阳2湖北文理学院，湖北襄阳收稿日期：2019年4月10日；录用日期：2019年4月23日；发布日期：2019年4月30日*通讯作者。
肝素钠提取技术 (2)
肝素钠提取技术引言肝素钠是一种重要的药物，广泛应用于心脑血管疾病的治疗中。
而肝素钠的提取技术对于生产高质量的药物具有关键作用。
本文将介绍肝素钠的提取技术原理、步骤以及优化方法，以帮助读者了解肝素钠的提取过程。
提取技术原理肝素钠是一种由整个牛和猪的粘多糖混合提取而得的复合物。
其提取的原理可以归结为以下几个步骤：1.原料准备：从整个牛或猪的粘多糖样品中提取肝素钠前，需要先对原料进行准备。
这包括去除杂质、切碎或粉碎原料等步骤。
2.酶解：通过加入适当的酶，如肝素酶，将原料中的肝素钠从多糖中酶解出来。
酶解的条件包括适当的温度、pH值以及酶的浓度等。
3.分离：酶解后，需要将肝素钠从酶解液中分离出来。
这可以通过离心、过滤等方法实现。
分离后，可以得到肝素钠的粗提取物。
4.精确提取：根据肝素钠的特性，进一步进行精确的提取。
这包括使用不同化学方法进行纯化、结晶等步骤，以获得高纯度的肝素钠。
提取技术步骤下面将详细介绍肝素钠提取技术的具体步骤：1.原料准备：选择新鲜的整个牛或猪的粘多糖样品作为提取原料。
对原料进行清洗，去除杂质，并将其切碎或者粉碎。
这样可以增加提取效率和提取速度。
2.酶解：将经过原料准备的样品与适量的肝素酶混合，加入适当的缓冲溶液。
根据酶解的要求，控制温度和pH 值，并在搅拌的条件下进行酶解反应。
3.分离：将酶解液进行离心或者过滤，以分离肝素钠。
离心或过滤后，可以得到肝素钠的粗提取物。
4.精确提取：通过加入适当的化学试剂，例如酒精、盐酸等，将粗提取物进行进一步纯化。
通过结晶、洗涤和干燥等步骤，得到高纯度的肝素钠。
优化方法在肝素钠的提取过程中，有一些优化方法可以提高提取效率和纯度，包括：1.选择合适的酶：不同的酶具有不同的酶解效果，因此选择适当的酶可以提高提取效果。
2.优化酶解条件：控制酶解的温度、pH值和酶的浓度等参数，可以提高酶解的效率和提取的纯度。
3.精确控制分离条件：选择适当的离心速度或者过滤条件，可以有效地分离出肝素钠。
肝素钠提取技术3篇
肝素钠提取技术肝素钠提取技术肝素钠是一种被广泛应用于临床上的抗凝剂，通过抑制凝血酶的活性来防止血栓形成。
肝素钠的提取技术对于其应用具有非常重要的意义。
下面将介绍肝素钠的提取技术。
一、肝素钠的来源肝素钠主要来源于动物的肺、心、肠等组织中。
由于不同来源的肝素钠含量和质量不同，会影响肝素钠的提取成本和效果。
目前最常用的肝素钠来源是猪腺素。
二、肝素钠的提取方法1、摸索法摸索法是最早期使用的肝素钠提取方法，并被广泛应用于医疗界。
其工作原理是使用摸索钳夹住猪的小肠外壁，将肝素钠挤压出来，然后在标本内添加酒精使其沉淀，最后过滤后获得肝素钠。
这种方法的效率较低，因为不同猪的胰岛素含量和质量有很大的变异性，同时也不易控制肝素钠的纯度。
2、酸解法酸解法是一种较新的肝素钠提取方法。
其特点是使用酸性介质使组织的胰岛素分解为溶液中，然后进行离心沉淀和过滤等纯化操作，最终获得分离纯度较高的肝素钠。
酸解法的优点在于能够批量生产且控制纯度，因此也为工业化生产奠定了基础。
3、酶切法酶切法是目前最先进的肝素钠提取技术。
该方法利用蛋白酶对肝素钠进行蛋白质分解，然后通过离心、萃取、柱层析等步骤进行纯化。
与传统的摸索法比较，酶切法能够保证肝素钠的纯度和质量，而且可能产生的污染比其他技术更少。
三、肝素钠的应用肝素钠广泛应用于临床上的静脉输液、测定肝素钠的药代动力学和防止血栓形成等方面。
同时，肝素钠也可以在体外培养等领域中发挥作用。
由于其应用范围广、效果好，并且安全性高，因此得到了人们广泛的赞誉。
四、肝素钠的注意事项1、在使用肝素钠时，必须严格遵照医生的用药指示，不可以自行调整药量和用药时间。
同时，必须注意肝素钠的过量使用可能导致出血等不良反应。
2、在进行肝素钠的提取和贮存时，必须注意保持洁净，防止污染和氧化。
同时，也需要严格控制提取和贮存的温度和湿度，以防止肝素钠的损失和变质。
3、在使用肝素钠时，应该注意与其他药物的相互作用。
对于可能有相互作用的药物应该在医生的指导下根据具体情况进行调整。
以油肠为原料提取肝素钠工艺的初探
孙 学超
摘要
本 文 采 用 盐 解 、酶 解 和 复合 酶 解 对进 口 油肠 进 行 分解 实验 ，通 过 对 分 解 液 的
效价测 定对三种 分解 方法进行 了比较 ，其 中盐解的总效价 为４ １ ７ ７ ２ Ｕ Ｓ Ｐ Ｕ ，单 酶解 的总效价 为４ ４ Ｉ ６ ３ Ｕ ｓ Ｐ Ｕ ，复合 酶解的总效价是 ４ ５ ７ ０ １ Ｕ Ｓ Ｐ Ｕ ，说明在油 肠 的分解 中单一 的盐解和 酶解 均不及以脂肪酶和蛋 白酶 的复合 酶解 效率 高， 而且 复合 酶解之后油脂 明显减 少 ，能有效的减 少后续吸 附时的树脂 污染以及 设备损 害，为工厂 大规模 生浓度为０ ． ２ ７ ｍｏ ｌ ・ Ｌ ～ ，用２ ｍｏ １ ・ Ｌ 的氢氧化 钠调至ｐ Ｈ＝ ９ ，升温至３ ５ Ｅ，加入２ ７ ０ ９ 碱性蛋 白酶１ ． ５ ｇ ，将 温 度缓 慢升 至５ ７ ￣ Ｃ，并 保 温搅 拌２ ｈ ，然后 加温 至 ８ ５ ℃以上 并保 温 １ ５ ｍｉ ｎ ，离心 ，测 上清液 的 体积 及抗 凝活性 。 １ ． ２ ． ３油肠的复合酶解 取用匀浆机匀碎的油肠料液５ Ｌ，加入氯化钠 ，使料液 中 氯化 钠 的终浓 度 为０ ． ２ ７ ｍｏ ｌ ・ Ｌ ～ ，用２ ｍｏ ｌ ・ Ｌ 的氢 氧化 钠调 至Ｐ Ｈ＝ ７ ． ５ ，升温 至３ ５ ℃ ，加 入脂 肪 酶０ ． ５ ｇ ，并保 温搅
拌ｌ ｈ ，然后 调ｐ Ｈ＝ ９ ． ０ ，加 入 ２ ７ ０ ９ 碱性 蛋 白酶 １ ． ５ ｇ 将 温 度
１材料 与方法
１ ． １试验材料
进Ｅ ｌ 油肠 （ 南通天龙畜产 品有限公司提供 ），绵羊血 浆 （ 苍 山向明生化助剂厂 ），肝素钠标准品 （ Ｓ ｉ ｇ ｍａ 公 司），２ ７ ０ ９ 碱性蛋 白酶 （ ≥１ ０ ０ ， ０ ０ ０ Ｕ／ ｇ 北京博士奥生物 科技有限公司），脂肪酶 （ ≥ ３ ０ ， ０ ０ ０ Ｕ／ ｇ Ｓ ｉ ｇ ｍａ 公司）。
实验猪小肠提取肝素钠技术
猪小肠提取肝素钠技术肝素钠是一种抗凝血药,用于临床至今已50多年的历史,长期应用不衰。
广泛用于治疗急性心肌梗塞,病毒性肝炎,与核糖核酸合用可增加对乙型肝炎的疗效.配合化疗.还有利于防止癌细胞的转移.此外肝素钠能阻抑血液的凝结过程,用于防止血栓形成,在降血脂和增进人体免疫功能方面也有一定的作用.肝素钠生产缺口很大,产品供不应求,由我国出口的肝素钠风靡欧美许多国家,年创外汇1000余万美元.每2000根猪小肠加工肠衣的粘膜可生产1公斤肝素钠,价值2200元左右.按此工艺提取的肝素钠,虽然经过了精制,但未经药理检查,不能直接临床使用.可将产品售给生产制药厂,进一步加工成制剂.(一): 主要原料:1,猪小肠粘膜新鲜的猪肠做肠衣时刮出的肠粘膜.2,氢氧化钠用于调节pH值,选用化学纯试剂.3,氯化钠选用化学纯试剂.4,D—254树脂. 是一种聚苯乙烯二乙烯苯三甲胺型强碱性阴离子交换树脂.交换能力较强,但机械强度较差,也可以选用714树脂,1299X9大孔树脂经及其它类似的树脂进行离子交换.在这里,树脂的作用是用来吸附肝素钠.（二）工艺流程肠粘膜-提取-吸附-洗涤-洗脱-干燥-精制-成品制作过程（三）1、提取：在猪肠衣刮下的粘膜中加入5%的氯化钠溶液，要完全淹没粘膜，用氢氧化纳溶液调节溶液的PH值为9至9.5，浸渍0.5小时左右。
此步的关键是肠粘必须新鲜，且含水量适中（总固定量为6%至7%）2、吸附：将上述溶液冷却至50度左右，除去浮在上面的油和杂质。
加入已处理的714树脂，树脂用量为粘膜量的4%至6%，吸附0.5小时，随时样校正PH值，使其在9.0至9.5之间，然后用70目至80目的的尼龙网过滤，滤出树脂，除去滤液。
3、洗涤：将吸附了肝素的树脂用水漂洗干净（至洗液澄清为止），滤干。
然后将树脂放在桶中，加1倍量1.4摩/升氯化钠溶液搅拌洗涤1小时，滤干。
再反复用1倍量1.2摩/升氯化钠溶液按上述条件洗涤两次并滤干树脂。
猪肠粘膜盐解法制备肝素的原理
猪肠粘膜盐解法制备肝素的原理
肝素是一种天然的抗凝血剂，广泛应用于临床。
猪肠粘膜盐解法是制备肝素的一种常用方法，其原理主要包括以下几个步骤。
将猪肠粘膜取出并清洗，去除杂质。
猪肠粘膜是一种富含肝素的组织，其中的肝素主要以硫酸盐的形式存在。
所以，在制备肝素的过程中，需要将猪肠粘膜中的肝素硫酸盐进行盐解，使其转化为肝素。
将清洗后的猪肠粘膜切碎，并加入盐酸等化学试剂。
盐酸的作用是将猪肠粘膜中的肝素硫酸盐进行酸解，使其转化为肝素。
盐酸的酸性条件可以促进肝素硫酸盐分子内的硫酸酯键断裂，从而实现盐解的目的。
然后，将酸解后的猪肠粘膜溶液进行中和处理。
在酸解过程中，盐酸会使猪肠粘膜溶液呈酸性，为了恢复溶液的中性，需要进行中和处理。
通常使用碳酸钠等碱性物质进行中和。
中和后，溶液中的肝素便以肝素钠的形式存在。
通过过滤等操作，将溶液中的杂质去除。
在制备肝素的过程中，可能会产生一些杂质，如蛋白质、核酸等。
为了得到纯净的肝素钠溶液，需要通过过滤等操作将这些杂质去除。
总结起来，猪肠粘膜盐解法制备肝素的原理主要包括酸解和中和两个步骤。
通过将猪肠粘膜中的肝素硫酸盐进行盐解和中和处理，最
终得到纯净的肝素钠溶液。
这种方法简单易行，制备的肝素质量稳定可靠，因此被广泛应用于肝素的生产。
肝素钠是怎样提取的？
肝素钠是怎样提取的？一、原料处理：将新鲜的猪肠（或冷冻猪肠自然解冻之后）用清水仔细清洗去除内外污物和外部皮肤脂肪后，绞碎成糜状，并在充分搅拌下，加入等量的水混合后，再加入少许溶度为0.1%的防腐剂混合均匀。
二、离子交换吸附：先将上述酶解提取液冷却至室温，仔细捞除浮于液面的油脂薄片层，控制升温至45度，停止加热，在搅拌下加入事先预处理好的D-254型树脂已有效的吸附料液中的肝素钠成分，新树脂的用量一般为料液的2.55-3%，用过后的再生熟知应酌情加大其用量，搅拌、吸附处理3个小时后静置过滤，滤液可作为生产治疗冠心病的新药冠心舒的原料。
将上述已经吸附有肝素成分的D-254树脂先用清水充分漂洗，干净后，再用大约一倍的1.2mol/L氯化钠溶液对洗涤好的D-254树脂进行肝素钠操作：*次洗脱液为树脂体积的1.5倍左右，大约洗脱4小时，第二次洗脱为树脂体积的0.5倍左右，洗脱时间为1小时。
滤干树脂，将洗脱液予以合并。
将上述所得的洗脱液调节到PH=10-11，搅拌30分钟后，静置6小时，然后仔细的析出上层清液，下部沉淀物尽量的抽滤至干。
合并清液和滤液，精细调节PH=6.0-6.5，加入1.5倍量的95%乙醇沉淀过夜，翌日，仔细地烘吸出上层清液，收集下部沉淀物，抽滤至干（母液可套用于调PH值前的洗脱液中）。
经真空烘干，即得肝素钠粗品。
三、酶解提取：先将上述原料在充分搅拌下，用少量稀碱液精细地调节至PH值为8-9（可用相应的精密PH试纸进行测定，下同）再加入事先已经绞碎的新鲜胰浆作为酶解剂（所加入的猪胰浆按照原料液实际重量的1%-1.5%为宜），搅匀后，缓慢升温至40度左右，继续搅拌，并保持料液PH=7.5-8，保持液温于37-40度下，酶解3-4小时，然后升温至47-50度，维持PH值=8.0-8.5，再酌情补加少许猪胰浆后，继续酶解4-5小时，在上述酶解过程中，如果酶解料液的PH纸复查有所下降之际，句应该及时用少许稀碱液（5%-8%NaOH溶液）仔细调整。
猪肠粘膜盐解法制备肝素的原理
猪肠粘膜盐解法制备肝素的原理
肝素是一种重要的抗凝血剂，广泛应用于临床医学领域。
猪肠粘膜盐解法是一种常用的制备肝素的方法。
本文将介绍猪肠粘膜盐解法制备肝素的原理及其步骤。
猪肠粘膜盐解法是通过提取猪肠粘膜中的肝素，经过一系列的化学反应和纯化步骤，最终得到纯度较高的肝素产品。
该方法的原理基于肝素在猪肠粘膜中的存在，并利用肝素的特性进行提取和纯化。
猪肠粘膜需要经过一系列的处理步骤，如清洗、切割和浸泡等，以去除杂质和细菌。
然后，将处理后的猪肠粘膜加入盐溶液中，通过盐解作用将肝素从粘膜中释放出来。
盐解的原理是利用盐的离子作用，使肝素与粘膜分离。
接下来，通过离心等操作，将肝素与粘膜分离。
然后，对肝素进行一系列的纯化步骤，如沉淀、洗涤和过滤等，以去除杂质和其他有机物。
这些步骤可以提高肝素的纯度和活性。
在纯化过程中，还需要进行肝素的结构分析和活性检测。
结构分析可以通过质谱和核磁共振等技术手段进行，以确定肝素的分子结构和组成。
活性检测则是通过凝血时间等指标来评估肝素的抗凝血活性。
经过一系列的处理和检测，得到的肝素产品可以用于临床应用。
猪
肠粘膜盐解法制备的肝素具有较高的纯度和活性，可以有效地抑制血液凝固，预防血栓形成。
猪肠粘膜盐解法是一种常用的制备肝素的方法。
通过提取猪肠粘膜中的肝素，并经过一系列的化学反应和纯化步骤，可以得到纯度较高的肝素产品。
这种方法具有操作简便、成本较低等优点，因此在肝素的制备过程中得到了广泛应用。
_肝素钠提取技术
_肝素钠提取技术肝素钠作为一种抗凝血剂在医疗领域中被广泛使用，其提取技术的发展对于肝素钠的生产与应用有着非常重要的意义。
本文将从肝素钠的来源、提取方法以及常见的分离纯化方法等方面进行探讨。
一、肝素钠的来源肝素钠源于动物组织，其中以猪肠黏膜和肝脏的含量较高。
肝素钠的来源通常分为两种：1. 动物成分来源猪肠黏膜是肝素钠的主要来源之一，猪肠黏膜的含量高达10-20g/kg。
此外，肝脏、牛心包等也是一些潜在的肝素钠来源。
2. 微生物来源随着微生物技术的不断发展，要求越来越高的纯度和活性水平，微生物发酵法，如大肠杆菌发酵法、念珠菌发酵法、放线菌发酵法等成为得到肝素钠的良好来源之一。
与动物来源相比，微生物来源的产品通常具有更高的特异性和生物安全性。
二、肝素钠的提取方法不同来源的肝素钠提取方法也各有特点。
下面就动物成分来源和微生物来源的两种情况分别进行探讨。
1. 动物成分来源的经典提取方法(1) 碱法碱法是肝素钠提取中最为常用的方法之一。
该方法通过一系列步骤提取猪肠黏液、肝脏、心包等含量较高的动物组织中的肝素，方法简便，操作容易。
提取步骤如下：①将动物组织先经过去蛋白质、脂肪等杂质的处理，得到含有主要成分的液体。
②在加入硫酸的条件下进行硫酸碱解，得到硫酸性硫酸肝素③将得到的硫酸肝素在碱性条件下进行中和和还原，获得肝素钠。
(2) 酶法酶法是一种较新的提取方法，其利用萃取酶作为一个特定的分解酶进行肝素钠的提取。
这种方法可以根据肝素钠和非肝素糖链的化学和物理特性将肝素糖链和非肝素糖链部分分离，以获得肝素钠。
酶法提取的优点是高效、快捷，参数易于控制。
2. 微生物来源的提取方法(1) 大肠杆菌发酵法该方法是使用转化菌株（ Escherichia coli BL21等）并表达肝素光链、重链和乙酰基化酶，通过常规蛋白表达和纯化方法，以获得经重组的肝素。
此法优点是灵活、产率高且注入高纯度的肝素不受动物传染病和有害成分污染的影响。
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利 用 标准 曲 线查 算
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得 知 提取 的 粗 品 肝 素 钠 单 位 效价 为
’ 得 精 制 肝 素钠 约 喇众 〕
粗 品 肝 素钠 含 有肝 素 钠
’ 回收 率
以 上 每 千 克猪 大肠 腌 液 可 提
年第
期
川北 教 育学 院学 报
℃ 下恒 温 搅 拌 吸附
℃ 以下时加入
处理好 的
,
脂 在
,
小时 用
, , ,
目 尼 龙 布 滤 去 液 体 树 脂 用 水 清洗 干 净 用
倍量
氯 化钠 溶液 浸 泡 搅 拌 氯 化钠 溶 液 在 次 并 收 集 洗 脱液 用
小 时 滤干 再用
乙 醇沉 淀
氯 化钠 溶 液 重 复 处 理
,
次 滤干后用
标 准 曲线 如 图
表
试
标 准 肝 素 钠 及 样 品 的 光吸 收 值
管
号
肝 素 标准 液 而
样 品液 而 蒸馏 水 耐
巴 比 妥缓 冲 液 而
耐
州酬耐
天青
染料 耐
田 岁时
总 体积 耐
光 吸 收值
结果
刃
从
猪 大肠 腌 液 中提 取 出肝 素钠 粗 品
!
取 稀释
为
倍 的 粗 品 肝 素钠 的 样 品 液 耐 所 测 得 光 吸 收 值
一 滤 渣 弃去
, 、 ,
,
猪大 肠 腌 液
稀释 过滤 滤液
滤液 弃 去 加人 树 脂 一 吸附
吸 附 肝 素钠 的 树 脂
清洗 吸 附 肝 素 钠 的 树脂 二次
肝 素钠 粗 品
一 树脂 再 生
洗 脱 一 洗脱 液 鱼筵 一 沉 淀物 复鱼 一 复 沉 物 王燥
收稿 日期
!
一
一
俞纯 方
陈吉森
刘
韬
, ,
,
,
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. . . : 吴 东儒 精 类 的 生 物 化 学 上 海 高等教 育 出 版社 肠2 . . . . : 2 李 良铸 等 生 化 制 药 学 北 京 中国 医 药科 技 出 版社 卯 1 2 1 一 2 9 9 . . . : 一 3 16 何 兆 雄 等 动 物 生 化 制 药基 拙 北 京 中 国 商业 出 版社 . . : 张 洪 昌 赵 丽 王 秀 云 等 胆 红素 肝 素 生 产 技 术 北 京 科 技文 放 出 版社 . . . . : 一 陈 来 同 徐德 昌 生 化 工 艺 学 北 京 北 京 大 学 出 版 社 卯 7 刀 2 2 8 3 . . 蔡 平 低 效价 粗 品 肝素 钠 的 纯 化 中 国 药 学 杂 志 卯 1
乙 醇复 沉
倍量
小时
,
℃ 下 浸 泡 洗脱
小 时 过 滤 收 集洗 脱液 再 用 小 时 沉 淀物 用
, 的
倍量 的
收 集 沉 淀 物 将 沉 淀 物 放 在 印 ℃ 烘箱 中恒 温 干 燥
小 时 即 得到 肝 素钠粗 品
, ,
产品 的鉴 定
加 伽 盐 酸 时 封 于 安 瓶 瓶 中加 热 小时 将水 解 液 用 中和 再 加 乙 酞 丙酮 进 行 乙 酞 化 再 加 对 一 二 甲 氨 基 苯 甲 醛 鉴定 伯 胺 试 剂 加 热后 显 红 色 证 明 提 取 物 取提 取 物
, , ,
含肝 素钠
产 品 中肝 素 钠 的 效 价 测 定
原理
肝 素 能 使含 氨 基 的 碱 性 染 料 如 天 青
、 , ,
等 的光 吸收向短波移 动 当肝素 在低浓 度 波长
一
、
的 情 况 下 其 浓 度 与光 吸 收 值之 间 符 合 朗伯
比 尔 定律 用 肝 素 的 标 准 液 作 出 光
第
卷第
期
优
川 北 教 育 学 院 学 报
!
仪
年
!
月
别
哪
从 猪 大 肠 腌 液 中提 取 肝 素 钠 的 研 究
俞 纯方
摘
陈 吉森
,
刘
韬
要 研 究 从 猪 大肠 腾 液 中提 取 肝 素 钠 的 方 法 并 测 定 了 其 效 价 实验 结 果 是 从 每 千 克
,
猪 大 肠 掩 液 中 可提 取 肝 素 钠
,
的
,
而用
猪小 肠 粘 膜 提 取 肝 素钠 时 需加
, ,
盐解 若把 两 者 混 合提 取肝 素钠 则 既 可 以 节约
,
,
,
,
充分
利用 资 源 又 可 减 少环 境 污 染 达 到 变 废 为 宝 的 目的
肝素结 构 中的酸性 基 团 硫 酸 基 在 溶 液 中 以 聚阴 离 子 的形 式 存在 可 以 用 不 同 的 强 碱
, . 9 1 7 8
参 考 文献
,
,
1
,
,
.
9 1
5 8
3
1 5
,
,
,
, 9 1 9 8
. %
.
,
,
1
,
,
1
1 1
:
.
6 2
(
)
6 7 5
: 俞 纯 方 西 南 农 业 大 学动 物 科技 学院 副 教 授 重 庆 北 赔
, ,
,
取刃7 16
陈 吉 森 :川 北 教 育 学 院 图 书馆 副 教授 四 川 遂 宁 刘 韬 : 西 南 农 业 大 学动 物 科 技 学 院 级 毕业生
, ,
吸 收 值 与 肝 素 浓 度 之 间 关 系 的 标 准 曲线 并 同 时 测 定样 品 的 光 吸 收 值 对 照 标 准 曲线 即 可 查
算 出 样 品 中肝 素 钠 的 效 价 值
绘制标 准 曲 线
用 肝 素钠 标 准 液 及 样 品 液 测 得 光 吸收 值 如 表
,
并 根 据 肝 素 钠 标 准 液 的光 吸 收 值 绘 出
性 阴 离子 变 换 树脂 吸 附
一
一
衬
、
衬
一
户〔
,
一
付
衬
,
〕
,
一
,
、
采用
,
等 低交 联 度 的 树 脂 建 立 交 换平 衡 快 交 换 能力 强 而 采 用
,
短
等 树脂 机 械 强 度更 高 不 易 破 碎损 耗 可 降低 生 产 成 本 另 外 在 吸 附 过 程 中要 多 次 调 节 酸 碱度 使
,
声 值 保持 在
一
范围内
, , ,
其 中盐 卤影 响 树 脂 的 吸 附 碱 解 前 要 加 水 稀 释 同 . 时 实 验 证 明 洗 脱 液必 须 用 精盐 配 制 才 能提 高 产 品 的 质量 与 收 率 沉淀 时 乙 醇 用 量 要 控 制 在 . 1 : 1 比 重 偏 高 可 使 N a I析 出 影 响粗 品单 位效 价 过 低则 肝 素 钠沉 淀 不 全 影 响收 率 C 原 料 中氯 化 钠含 量 很高
叱
器材
提 取罐 塑 料 桶 无 级 调 速 电 动 搅 拌 器 计 精 密 试 纸 尼 龙 布 烘 箱等 肝 素 钠 粗 品 的 提取
,
,
,
,
型 分 光 光 度 计 分 析 天 平 恒 温 水浴 箱 比 重
,
,
,
,
,
原 料 中 的肝 素 和 其 它 粘 多 糖 一 起与 蛋 白 质 结 合 着 所 以 肝 素钠 的 制 备 包 括 肝 素 复 合 物 的 提取 分 解 和 肝 素钠 的 分 级 分 离 三 步 本 实验 用 碱 性 盐 解 完 成前 两 步 用 强 碱 性 阴 离 子 交 换 树 脂 完 成 最后 一 步 其 工 艺 流 程 如 下
,
,
,
、
,
,
材料 与 方 法 材料 与 试 剂
猪大 肠 腌液 新 鲜 取 自北 磅 中外 合 资 伍 达 畜 产 品 公 司
, , ,
氢氧化钠
,
,
盐酸
,
乙醇
,
氯 化钠
,
,
巴 比妥
,
乙酞 丙 酮
,
,
对
一
,
二 甲 氨基 苯 甲 醛
天青
上海新 中
华化 工 厂 产 品
强 碱性 阴 离子 交换 树脂
树 脂 肝 素 钠 成 都 肉联 厂 生 化 制 剂 厂 产 品
性 被 广泛 用 于 治疗 血 管 栓 塞 疾 病 免 疫复 合体 疾病 和 用 于 降 血 脂 早期 肝 素 主 要 从 牛 肺 中 提
取 近 年来 临 床 使 用 的肝 素 几 乎 都来 自猪 小 肠 粘 膜 也 有 从 猪 肺 腌 渍肠 衣 卤水 中提 取 肝 素钠
的 介 绍 但 尚未 见 从 猪 大 肠粘 膜 或猪 大 肠腌 液 中 提 取 肝 素钠 的 报 道 为 了 更 有 效地 综合 开 发 利 用 猪 资 源 我 们 进 行 了 从 猪 大 肠腌 液 中 提取 肝 素钠 的 实 验 研 究 并 测 定 了 其 效 价
总第
期
图
肝 素 钠 效 价 与 光 吸 收 值 关 系的 标 准 曲 线
, ,
讨论
猪 大 肠 腌 液 是 食 品 加 工 过 程 中 的 废 弃物 一 般未 加 以 利 用 且 污 染 环 境 本 实 验 证 明 猪大 肠 腌 液 中含 有 一 定 量 的肝 素 有 加 以开 发的 价 值 猪大 肠 腌 液 中含 有 约
从 猪 大 肠 腌 液 中提 取肝 素钠 的 研究