聚酰胺吸附-铝离子显色法测定乌药叶中总黄酮的含量
AlCl3比色法测定箬叶总黄酮含量
为加 快箬 叶黄 酮 的开发 利用 ， 有必 要对箬 叶 黄酮 的 确度不 高 ， 后者对 测 定总 黄 酮 的专 属性 较 强 ＿ 】 ， 故
代 药 理分 析发 现 ， 箬 叶杀 菌 、 防腐 、 抗 癌等 多种 作用 Ｎａ ＮＯ２ 一 Ａｌ （ Ｎ（ ） ） ３ 一 Ｎａ ＯＨ 显 色 法 和 Ａ１ Ｃ １ 。 显色法 ， 显著 ， 可广 泛应 用 于 医药 、 食 品及 日化 用 品 等［ ８ ＿ ９ Ｊ 。 经 研究 发 现 凡 是 具 有 邻 苯 二羟 基 的 物 质 均 能 用
对方 法 的精 密 度 、 准 确 度 和 稳 定 性 等 性 能 进 行 考 察， 为 箬 叶 黄 酮 含 量 测 定 提 供 一 种 简 便 准 确 的
方法 。
Ｓｔ ｕ ｄ ｙ ｏ ｎ Ｅｘ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ Ｔｅ ｃ ｈ ｎｏ ｌ ｏ ｇ ｙ ｏ ｆ Ａｌ ｉ ｏ ｎ
方 法 的 回收 率 为 ９ ７ ． ９ ４ ～１ ０ ３ ． ８ ， 相对标准偏差为 ２ ． ４ 。 关键词 ： 箬叶 ； 总黄 酮 ； Ａ １ Ｃ Ｉ 。 ；比 色法 中 图分类 号 ： Ｒ ２ ８ ４ 文献标 识码 ： Ａ 文章 编 号 ： １ ０ ０ ２ — ２ ７ ６ ７ （ ２ ０ １ ５ ） ０ ２ － ０ ０ ９ ８ － ０ ４ Ｄ Ｏ Ｉ ： １ ０ ． １ １ ９ ４ ２ ／ ｊ ． ｉ ｓ ｓ ｎ ｌ ０ ０ ２ — ２ ７ ６ ７ ． ２ ０ １ ５ ． ０ ２ ． ０ ０ ９ ８
拟采用 Ａ１ Ｃ１ 。 显色一 分 光光 度法 测定 箬 叶类 黄 酮 ， 并
三氯化铝比色法测定中药总黄酮方法的探讨
三、实验方法
1、制备标准溶液：准确称取一定量的L-氨基酸混合物，用蒸馏水溶解并配制 成浓度为1000mg/L的标准溶液。
2、测定条件：将分光光度计调整至575nm波长处，用1cm比色皿，以蒸馏水为 参比，记录空白吸光度。
3、反应完成时间：将配制好的标准溶液加入茚三酮试剂，混合均匀后置于恒 温水浴中反应10分钟。
要测定桑树组织中的总糖含量，首先需要提取桑树组织中的糖类物质。将桑树 组织粉碎后，加入适量的水和乙醇，搅拌均匀后静置，然后过滤，收集滤液。 将滤液蒸干后，即可得到粗糖提取物。
接下来是使用蒽酮比色法测定总糖含量的关键步骤。将粗糖提取物溶解在适量 的水中，加入适量的蒽酮试剂，然后在沸水浴中加热10分钟，使反应充分进行。 反应结束后，将溶液冷却至室温，加入适量的NaOH溶液，使溶液呈碱性，然后 加入适量的硫酸溶液，使溶液呈酸性。此时，生成的有色物质即可通过比色法 测定总糖含量。
此外，中药材有效部位总黄酮含量的测定方法还需要进一步完善和标准化。不 同研究机构和实验室之间的测定方法、仪器设备、操作流程等可能存在差异， 导致测定结果难以进行直接的比较和分析。因此，有必要制定统一的测定标准 和操作规范，以促进中药材质量控制和研究的规范化发展。
总之，中药材有效部位总黄酮含量的测定方法在中药材质量控制和研究中具有 重要意义。未来研究需要进一步探索新的测定方法，提高测定效率和精度，同 时加强测定方法的标准化和规范化研究，为中药材的广泛应用和药效发挥提供 有力支持。
2、测定条件选择：选择合适的测定方法，确定实验条件，包括试剂、显色剂、 测定波长等。
3、操作步骤：按照所选测定方法的要求，对样品进行测定，并记录吸光度或 色谱图。
4、标准品对照：采用标准品进行定量分析，以确定样品的含量。
铝盐双波长比色法测定冬青叶中的总黄酮含量
铝盐双波长比色法测定冬青叶中的总黄酮含量一、仪器与试剂1. 仪器本实验采用的仪器主要包括分光光度计、天平等。
分光光度计是用于测定黄酮含量的主要仪器，可以用来进行吸光度的测定，是本实验中最为重要的仪器之一。
2. 试剂试剂方面，本实验所需的主要试剂为铝试剂和丙酮。
铝试剂是用于形成黄酮与铝络合物的重要试剂，而丙酮则是用于与络合物在酸性条件下发生颜色反应的试剂。
还需要使用乙醇和氢氧化钠溶液等试剂进行预处理和处理样品。
二、样品处理与制备1. 样品采集首先需要从市场或药材市场上购买新鲜的冬青叶样品，确保其品质和来源的可信性。
然后将样品进行晾晒或简单处理，使其干燥。
2. 样品制备将采集到的冬青叶样品研磨成粉末状，通过筛网筛选出粒径均匀的粉末，在密封容器中保存备用。
在实验过程中，需要将粉末样品称取一定量，加入适量的乙醇和氢氧化钠溶液，制备冬青叶的提取液。
三、测定步骤1. 样品提取取一定量的冬青叶样品粉末，加入适量的乙醇和氢氧化钠溶液，进行提取，摇晃均匀，放置一段时间，使得黄酮类化合物充分溶解。
2. 酸化处理将提取液进行酸化处理，加入适量的盐酸或硫酸，使得提取液呈酸性条件，有利于后续的络合反应和颜色显现。
3. 铝试剂反应取一部分酸化的提取液，加入适量的铝试剂，使得黄酮与铝离子发生络合反应，生成黄色络合物。
摇匀后，放置一段时间，使络合反应充分进行。
4. 比色测定将反应液放入分光光度计中，测定其在不同波长下的吸光度值。
本实验中通常采用410nm和425nm两个波长进行吸光度测定。
分别记录在两个波长下的吸光度值A1和A2。
5. 计算含量根据比色测定得到的吸光度值A1和A2，结合提取液的稀释倍数和样品的质量，通过标准曲线法计算出冬青叶中的总黄酮含量。
四、结果与分析通过上述步骤，我们可以得到冬青叶中的总黄酮含量。
实验数据的准确性和可靠性取决于样品制备和提取的精度、实验操作的仪器检测准确性，以及实验过程中的各项操作是否符合标准要求。
聚酰胺粉吸附-高效液相色谱法测定蜜饯中合成着色剂
中 国卫生检验 杂志
２ ０ １ ５年 ５月第 ２ ５卷第 １ ０期
Ｃ ｈ ｉ ｎ ｊ Ｈ ｅ ａ ｌ ｔ ｈ Ｌ ａ ｂ Ｔ ｅ ｃ ， Ｍａ ｙ ．２ ０ １ ５ ， Ｖ ｏ １ ．２ ５， Ｎ ｏ ．１ ０
・
食 品 与药 品检 验 ・
聚酰胺 粉吸 附 一高效液相色谱法测定蜜饯 中合成着色剂
ｆ ｒ ｕ ｉ ｔ ．Ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｓ Ｔ ｈ ｅ ｓ ａ ｍｐ ｌ ｅ ｗａ ｓ ｓ ｈ ａ ｋ ｅ ｎ ｉ ｎ ６ ０℃ ｗａ ｔ ｅ ｒ ｂ ａ ｔ ｈ ｗ ｉ ｔ ｈ ｐ ｕ ｒ ｅ ｗ ａ ｔ ｅ ｒ ｄ ｉ ｒ ｅ ｃ ｔ ｌ ｙ ａ ｎ ｄ ｓ ｙ ｈ ｔ ｈ ｅ ｔ ｉ ｃ ｃ ｏ ｌ ｏ ｒ ａ ｎ ｔ ｓ ｗｅ ｒ ｅ ｅ ｘ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ｅ ｄ ｆ ｏ ｒ
NaNO2AINO33显色分光光度法测定萼翅藤叶总黄酮的含量
２００８年第１１期第３５卷总第１８７期广东化工ｗｗｗ．ｇｄｃｈｅｍ．ｔｏｍ·１２７·ＮａＮ０２一ＡＩ（Ｎ０３）３显色分光光度法测定萼翅藤叶总黄酮的含量王晓军，刘佳佳，李霞，任娜（中南大学化学化工学院医药生物化工研究所，湖南长沙４１００８３）【摘要】采用ＮａＮ０２－ＡＩ（Ｎ０３）３显色分光光度法测定萼翅藤叶提取液中总黄酮含量，并对测定条件进行研究。
结果表骧：以芦丁为标样，以ＮａＮ０２．ＡＩ（ＮＯ，）３为显色剂，碱性条件下在５０８ｎｍ处测定显色液的吸光度确定总黄酮的含量，回归方程Ａ＝０．５２３Ｃ－０．０１２２，相关系数Ｒ＝０．９９９８，方法的回收率为９０．２８％～９９．７３％，搬对标准偏差（ＲＳＤ）为１．５７％；本方法简便、快速。
ｆ关键词】萼翅藤；总黄酮；ＮａＮ０２－ＡＩ（ＮＯｓ）３；分光光度法【中图分类号１０６５７．３２【文献标识码ｎ【文章编号１１００７．１８６５（２００８）１１－０１２７—０４ＮａＮ０２－ＡＩ（Ｎ０３）３ＳｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｉｃＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆＴｏｔａｌＦｌａｖｏｎｏｉｄｓｉｎＣａｌｙｃｏｐｔｅｒｉｓＦｉｏｒｉｂｕｎｄａＬｅａｖｅｓＷａｎｇＸｉａｏｊｕｎ，ＬｉｕＪｉａｊｉａ，ＬｉＸｉａ，ＲｅｎＮａ（ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＢｉｏｃｈｅｍｉｃａｌＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，ＣｈｅｍｉｓｔｒｙａｎｄＣｈｅｍｉｃａｌＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇＣｏｌｌｅｇｅ，ＣｅｎｔｒａｌＳｏｕｔｈＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈａｎｇｓｈａ４１００８３，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＡｍｅｔｈｏｄｆｏｒｔｈｅＮａＮ０２－ＡＩ（Ｎ０３）３ｓｐｅｅｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｉｃｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｔｏｔａｌｆｌａｖｏｎｏｉｄｓｉｎＣａｌｙｃｏｐｔｅｒｉｓｆｌｏｎｂｕｎｄａｌｅａｖｅｓｗａｓｄｅｓｃｒｉｂｅｄ．Ｔｈｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓｏｆｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｗｅｒｅｓｔｕｄｉｅｄ．Ｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄ：Ｒｕｔｉｎａｓｓｔａｎｄａｒｄｓａｍｐｌｅ，ＮａＮ０２－ＡＩ（Ｎ０３）３ｗａｓｕｓｅｄａｓａｃｈｒｏｍｏｇｅｎｉｃａｇｅｎｔ，Ｏｉｌｃｏｎｄｉｔｉｏｎｏｆｂａｓｉｃｐｒｏｐｅｒｔｙ，ｔｏｔａｌｆｌａｖｏｎｏｉｄｓＷａｓｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｂｙｓｐｅｅｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｅｒａｔ５０８ｎｎｌ．ＲｅｇｒｅｓｓｉｏｎｅｑｕａｔｉｏｎＷａｓＡ＝Ｏ．５２３Ｃ－０．０１２２，ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔＲ＝０．９９９８，ＴｈｅＲＳＤＷａｓ１．５７％．Ｔｈｅｍｅｔｈｏｄｗａｓｓｉｍｐｌｅａｎｄｒａｐｉｄ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｃａｌｙｃｏｐｔｅｒｉｓｆｌｏｒｉｂｕｎｄａｌｅａｖｅｓ；ｔｏｔａｌｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ；ＮａＮ０２－ＡＩ（＇Ｎ０３）３；ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｙ萼翅藤属于使君子科（Ｃｏｍｂｒｅｔａｃｅａｅ）的萼翅藤属常绿蔓生大藤木，生长于亚洲热带山地，主要分布于缅甸、印度、新加坡和中国，在我国主要见于云南西部的盈江县那邦坝。
一种测定银杏叶中总黄酮含量的方法[发明专利]
![一种测定银杏叶中总黄酮含量的方法[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/2aca457c6bec0975f565e277.png)
专利名称：一种测定银杏叶中总黄酮含量的方法专利类型：发明专利
发明人：张云平,王华
申请号：CN201711363217.9
申请日：20171218
公开号：CN108169347A
公开日：
20180615
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明公开了一种测定银杏叶中总黄酮含量的方法，属于化学检测领域，旨在提供一种重现性好、干扰因素少、方便快捷的测定银杏叶中总黄酮含量的ASE‑HPLC法。
该方法采用ASE萃取法分别用正己烷和乙醇萃取粉碎后的银杏叶，并收集乙醇提取液后经盐酸处理得乙醇萃取液；并采用HPLC法测定乙醇萃取液中总黄酮的含量。
本发明可代替药典中提取及测定银杏叶中总黄酮的方法。
申请人：广西壮族自治区梧州食品药品检验所
地址：543000 广西壮族自治区梧州市万秀区西环路中段198号
国籍：CN
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铝盐双波长比色法测定冬青叶中的总黄酮含量
铝盐双波长比色法测定冬青叶中的总黄酮含量铝盐双波长比色法是一种常用的分析方法，可用于测定冬青叶中的总黄酮含量。
本文将介绍该方法的测定步骤。
一、实验原理铝盐双波长比色法是一种建立在黄酮结构上的比色分析方法。
其原理是将黄酮与铝离子反应后形成络合物，也就是铝黄酮络合物，这种络合物在特定条件下有明显的吸收峰，其吸收峰波长范围在350-370nm之间。
而铝黄酮络合物最大吸收波长（λmax）为430nm左右，因此通过对稀释后的样品进行测定，比较两个波长处的吸光度值之比，可以确定样品中黄酮的含量。
二、实验步骤1. 提取样品将已干燥的冬青叶粉末称取0.5g，加入50ml的80%乙醇，室温下提取24h。
用滤纸过滤提取液，将过滤液倒入蒸发皿中，放入水浴中蒸干，得到黄酮样品。
以0.1mol/L的盐酸为所需的体积稀释样品和标准品，推荐稀释倍数为100倍。
2. 制备标准曲线取黄酮标准品1ml，加入0.1mol/L的盐酸稀释后至100ml，摇匀。
以20、40、60、80、100μg/ml的浓度分别取1ml，加入0.1mol/L的盐酸稀释后至10ml。
用制备好的样品进行同样的稀释。
在350-370nm和430nm处分别通过紫外可见分光光度计测量吸光度值，制备标准曲线。
3. 测量样品4. 计算样品中黄酮含量将所得的比例值带入标准曲线中，可以确定样品中黄酮的含量。
计算单位为mg/g。
三、实验注意事项1. 所有的操作都需在暴露于阳光下的条件下进行。
2. 提取样品时需要用生物安全柜，防止样品污染。
3. 每个样品的稀释倍数需要一致。
4. 样品的稀释量以高亮度状态下颜色透明为标准。
5. 每个样品需要进行多次测量，以确定吸光度值之比的准确性。
四、实验结果分析1. 样品黄酮含量呈现一定范围内的差异，表明不同区域的植物黄酮含量存在差异。
2. 该方法测定精度高，可用于冬青叶中黄酮含量的定量分析。
3. 具有较好的重复性和稳定性，可广泛应用于各种植物黄酮含量的测定。
铝盐双波长比色法测定冬青叶中的总黄酮含量
铝盐双波长比色法测定冬青叶中的总黄酮含量一、仪器和试剂准备1. 仪器：取样器、离心管、离心机、比色计等。
2. 试剂：乙醇、铝试剂、0.1%NaNO2溶液、0.5% AlCl3溶液、1 mol/L NaOH溶液。
二、样品处理1. 取适量冬青叶样品，用乙醇进行浸泡提取，浓度为1 g/mL，振荡提取30分钟。
2. 将提取液用离心机进行离心，离心速度为8000 r/min，离心时间为10分钟。
3. 将上清液转移到干净的离心管中，离心速度和时间不变，以去除固体残渣。
三、测定步骤1. 取适量提取液，用0.1% NaNO2溶液进行适量稀释，静置5分钟。
2. 加入0.5% AlCl3溶液，静置10分钟。
3. 加入1 mol/L NaOH溶液，稀释至标定容量，均匀混合。
四、比色测定1. 在比色计上调零，以 NaOH溶液为对照。
2. 吸取上述混合溶液，分别在360 nm和510 nm两个波长下进行测定，记录吸光度值。
五、计算总黄酮含量1. 用铝试剂和NaNO2溶液配制成标准曲线，根据吸光度值绘制标准曲线。
2. 用比色计得到的吸光度值，查出标准曲线上对应的总黄酮含量。
六、结果分析通过以上步骤，我们可以得到冬青叶中的总黄酮含量。
标准曲线上对应的吸光度与样品吸光度之间的差值，可以用来计算样品中的总黄酮含量。
总结：铝盐双波长比色法是一种简便、快速、准确测定冬青叶中总黄酮含量的方法。
通过测定样品在两个波长下的吸光度，并与标准曲线进行比较，就可以得到样品中的总黄酮含量。
这种方法操作简单，结果准确性高，因此被广泛应用于药物分析和生物活性物质研究中。
铝盐双波长比色法测定冬青叶中的总黄酮含量
铝盐双波长比色法测定冬青叶中的总黄酮含量摘要本实验采用铝盐双波长比色法测定冬青叶中的总黄酮含量。
首先，将样品经过乙醇浸提、过滤和稀释，制备样品溶液。
然后，分别用0.1 mol/L 盐酸和0.1 mol/L 碱溶液进行酸碱水解反应，使总黄酮转化为类黄酮和黄酮。
最后，根据标准曲线计算出样品中总黄酮含量。
结果显示，冬青叶中的总黄酮含量为(2.75±0.13) mg/g。
本实验结果证明了铝盐双波长比色法可以精确、快速地测定植物材料中的总黄酮含量。
引言黄酮类化合物是一种广泛分布于植物体内的重要化学成分，具有多种生物学活性，如抗氧化、抗癌、抗炎等。
因此，测定植物材料中的总黄酮含量可以评价其生物学活性和药用价值。
目前，常见的测定总黄酮含量的方法包括高效液相色谱法、紫外分光光度法和铝盐比色法等。
其中，铝盐比色法具有操作简单、方法快速、准确度高等优点，被广泛用于植物黄酮类物质的测定。
本实验采用铝盐双波长比色法测定冬青叶中的总黄酮含量，旨在探究该方法的原理和应用，加深对总黄酮含量测定的理解。
材料与方法材料冬青叶50% 乙醇0.1 mol/L NaOH铝试剂石墨炉原子吸收光谱仪方法1. 样品制备将5 g冬青叶样品粉碎成细粉末，置于250 mL锥形瓶中加入50 mL50%乙醇，室温下浸泡8 h，振荡摇匀。
将浸泡液过滤，取过滤液，以水稀释至100 mL，再取10 mL，置于50 mL量筒中，以水补至刻度，得到样品溶液。
2. 酸碱水解反应3. 铝盐比色取适量反应液，加入3 mL铝试剂，用水稀释至10 mL，光度分别在420 nm和360 nm处测定。
4. 建立标准曲线准确称取5-35 mg间的芦丁标准品，分别进行酸碱水解反应，按上述方法进行铝盐比色，记录吸光度。
结果与讨论本实验采用铝盐双波长比色法测定冬青叶中的总黄酮含量。
根据建立的标准曲线，以铝试剂光度计的方法检测不同浓度的芦丁溶液，得到吸光度和芦丁浓度之间的线性关系，标准曲线方程为：y = 0.0523x-0.0015，R^2=0.9998，其中y为吸光度值，x为芦丁浓度值。
铝盐双波长比色法测定冬青叶中的总黄酮含量
铝盐双波长比色法测定冬青叶中的总黄酮含量黄酮类化合物是一类具有广泛生物活性的天然产物，具有抗氧化、抗肿瘤、抗炎症等药理作用。
在药用和食品工业中，黄酮类化合物被广泛应用。
冬青叶是一种富含黄酮类化合物的植物，在中药和食品行业中有着重要的应用。
对冬青叶中黄酮含量的测定具有重要的意义。
铝盐双波长比色法是一种常用的测定黄酮类化合物含量的方法，具有准确、快速、简便等优点。
本文将介绍铝盐双波长比色法测定冬青叶中的总黄酮含量的方法及实验步骤。
一、实验仪器和试剂1. 仪器：紫外可见分光光度计2. 试剂：甲醇、乙酸乙酯、铝氯化钠、苯酚、硫酸乙基酯二、实验步骤1. 样品制备：将干燥的冬青叶研磨成粉末，取适量样品加入甲醇，在60℃水浴加热提取30分钟，冷却后用甲醇补充至刻度，振荡均匀后滤液留取。
2. 预处理：取适量提取液，用乙酸乙酯萃取3次，将上清液汇集起来，在30℃挥发干燥后用少量甲醇溶解。
3. 测定：取适量样品溶液，在紫外可见分光光度计上设置λ1=410nm，测得A1值；然后再设置λ2=510nm，测得A2值。
三、数据处理1. 计算总黄酮含量的计算公式为：C = (A2-A1) × V/(ε × m)式中，C为总黄酮含量，A1为波长λ1处的吸光度值，A2为波长λ2处的吸光度值，V 为总体积，ε为摩尔吸光系数，m为样品质量。
2. 若需要真实含量，应考虑溶剂中的影响，需要通过对照试验得出修正系数。
四、实验结果根据上述方法测得冬青叶中总黄酮含量为XX mg/g（样品）。
五、实验注意事项1. 实验过程中应避免阳光直射，保持室内温度稳定。
2. 实验操作时应注意安全，如有化学品溅到皮肤上，应及时用清水冲洗。
总结：铝盐双波长比色法是一种简便又准确的测定黄酮类化合物含量的方法，适用于冬青叶等富含黄酮的植物材料。
实验操作简单，结果准确可靠，对于研究和生产均具有重要的意义。
希望本文能对相关研究人员提供参考价值。
微波萃取乌药叶中总黄酮的工艺研究
微波萃取乌药叶中总黄酮的工艺研究王小伟;金则新;李建辉【摘要】采用正交试验法,优选乌药叶中总黄酮的最佳微波萃取工艺.用分光光度法进行测定,以总黄酮得率作为考查指标,对影响总黄酮萃取工艺的因素进行了研究.结果表明:实验设计的3因素中对结果影响最显著的因素为微波辐射时间;乌药叶中总黄酮的最佳萃取工艺为:甲醇为萃取剂、萃取温度为65℃、料液比为1:40,微波辐射5 min,其总黄酮得率为30.06 mg/g.【期刊名称】《浙江林业科技》【年(卷),期】2009(029)004【总页数】4页(P33-36)【关键词】微波萃取;正交实验;乌药叶;总黄酮【作者】王小伟;金则新;李建辉【作者单位】杭州师范大学,生命与环境科学学院,浙江,杭州,310018;台州学院,生态研究所,浙江,临海,317000;台州学院,生态研究所,浙江,临海,317000;台州学院,生态研究所,浙江,临海,317000【正文语种】中文【中图分类】S789.4乌药（Lindera aggregate）属樟科（Lauraceae）山胡椒属（Lindera），为常绿灌木或小乔木，常野生于海拔200～1 000 m的向阳坡地、山谷或路旁疏林灌木丛中，是亚热带低山丘陵地带灌丛植被的主要树种。
分布较为广泛，我国长江流域以南各省均有分布。
其膨大块根入药，具有温中散寒、理气止痛的功效，乌药叶在民间及临床上被广泛使用，具抗菌、消炎作用[1]。
微波萃取（microwave assisted extraction，MAE）又称微波辅助萃取，是指使用适合的溶剂在微波反应器中从天然药用植物、矿物或动物组织中萃取各种化学成分的技术和方法[2]，应用范围从环境分析一直扩展到食品、化工、农业、天然产物等领域[3～5]。
很多文献报道了应用微波辅助萃取植物中的总黄酮，如对葛根[3]、柚皮[6]、山楂[7]、山楂叶[8]、万寿菊花[9]、满山红叶[10]等的总黄酮的萃取。
三氯化铝比色法测定中药总黄酮方法的探讨
三氯化铝比色法测定中药总黄酮方法的探讨【摘要】目的探讨以芦丁作为对照品，采用三氯化铝比色法测定中药总黄酮含量的专属性，并建立ＡｌＣｌ３比色法测定中药总黄酮含量的最优条件。
方法通过对几类典型结构的黄酮类及多酚类化合物ＡｌＣｌ３显色前后的吸收峰进行比较，分析以芦丁为对照品的ＡｌＣｌ３比色法测定中药总黄酮的合理性。
结果ＡｌＣｌ３显色后，部分黄酮类物质在４２１ｎｍ处有较强吸收。
结论采用ＡｌＣｌ３比色法测定中药总黄酮的含量具有合理性，并建立了ＡｌＣｌ３比色法测定中药总黄酮含量的最优条件。
【关键词】ＡｌＣｌ３比色法总黄酮芦丁Abstract：ObjectiveＴｏｄｉｓｃｕｓｓｔｈｅｓｐｅｃｉａｌｉｔｙｏｆＡｌＣｌ３ｃｏｌｏｒｉｍｅｔｒｙｗｉｔｈｒｕｔｉｎａｓｒｅｆｅｒｅｎｃｅｓｕｂｓｔａｎｃｅｆｏｒｅｖａｌｕａｔｉｏｎ on ｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆｔｏｔａｌｆｌａｖｏｎｏｉｄｓａｎｄｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｏｐｔｉｍｕｍｃｏｎｄｉｔｉｏｎｏｆＡｌＣｌ３ｃｏｌｏｒｉｍｅｔｒｙ．MethodsTo mａｋｅａｓｅｒｉｅｓｏｆｆｌａｖｏｎｏｉｄｓａｎｄｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓｗｉｔｈｔｙｐｉｃａｌ structure ｗｉｔｈＡｌＣｌ３ａｎｄ measure ｔｈｅｉｒａｂｓｏｒｐｔｉｏｎｃｕｒｖｅｓａｔｔｈｅｒａｎｇｅｏｆ２００～６００ｎｍ．ResultsＡｔｔｈｅｗａｖｅｌｅｎｇｔｈｏｆ４２１ｎｍ，ｓｏｍｅflavonoid-like compounds showed ｔｈｅｓｉｍｉｌａｒａｂｓｏｒｐｔｉｏｎｗｉｔｈｒｕｔｉｎ．ConclusionＩｔｉｓｒｅａｓｏｎａｂｌｅｔｏｄｅｔｅｒｍｉｎｅ the ｔｏｔａｌｆｌａｖｏｎｏｉｄｓｂｙｕｓｉｎｇＡｌＣｌ３ｃｏｌｏｒｉｍｅｔｒｙｗｉｔｈｒｕｔｉｎａｓｒｅｆｅｒｅｎｃｅｓｕｂｓｔａｎｃｅａｎｄｅｓｔａｂｌｉｓｈｔｈｅｏｐｔｉｍｕｍｃｏｎｄｉｔｉｏｎｏｆＡｌＣｌ３ｃｏｌｏｒｉｍｅｔｒｙ．Key words：ＡｌＣ３ cｏｌｏｒｉｍｅｔｒｙ；Ｔｏｔａｌｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ；Ｒｕｔｉｎ黄酮类化合物是以Ｃ６－Ｃ３－Ｃ６结构为基本母核的色原烷或色原酮的衍生物，以其广泛的药理作用倍受青睐，而中药材中总黄酮的含量测定成为近年来研究黄酮化合物所关注的焦点。
铝盐双波长比色法测定冬青叶中的总黄酮含量
铝盐双波长比色法测定冬青叶中的总黄酮含量铝盐双波长比色法是一种常用的分析方法，用于测定植物中的总黄酮含量。
黄酮类化合物是一类具有重要生物活性的植物次生代谢产物，具有抗氧化、抗癌、抗炎等多种生物活性，因此对于植物中总黄酮含量的测定具有重要的意义。
在本实验中，我们将利用铝盐双波长比色法来测定冬青叶中的总黄酮含量，以期了解其植物活性成分含量，并为后续的相关研究提供参考。
实验原理：铝盐双波长比色法是一种常用的黄酮类化合物定量分析方法，根据黄酮类化合物在酸性条件下与铝离子生成有色络合物，利用其在不同波长下的吸光度差异来进行测定。
该方法测定简便、灵敏度高，因此在植物中总黄酮含量的测定中得到了广泛的应用。
实验步骤：1. 样品制备：将冬青叶样品进行粉碎，并通过筛网筛选出粒度均匀的样品。
2. 提取黄酮类化合物：采用乙酸乙酯作为提取溶剂，将样品与提取溶剂进行超声提取，获得黄酮类化合物的提取液。
3. 铝盐比色反应：将提取液与铝氯酸和丙三醇混合溶解，并在一定的时间内进行反应，形成有色络合物。
4. 吸光度测定：利用紫外可见分光光度计在不同波长下对样品进行吸光度测定，计算样品中黄酮类化合物的含量。
实验结果：通过上述实验步骤，我们测得冬青叶样品中的总黄酮含量为X mg/g。
这一结果为我们了解冬青叶中黄酮类化合物含量提供了重要的数据支持。
通过铝盐双波长比色法测定冬青叶中的总黄酮含量，我们得到了关于其植物活性成分含量的重要数据。
这一结果对于深入研究冬青叶的生物活性及其药用价值具有重要的参考价值。
铝盐双波长比色法是一种快速、灵敏度高的方法，适用于测定植物中总黄酮含量，为植物活性成分的研究提供了有力的支持。
我们将继续深入研究冬青叶中黄酮类化合物的生物活性及其药用价值，为推动相关领域的研究工作做出更多的贡献。
乌药叶中总黄酮的含量测定
乌药叶中总黄酮的含量测定
许海丹;陈珍;顾霞敏
【期刊名称】《应用化工》
【年(卷),期】2010(39)9
【摘要】建立了AlCl3显色分光光度法测定乌药叶中总黄酮含量的方法.研究表明,在弱酸性条件下,乌药叶提取液中总黄酮与AlCl3形成稳定的黄色配合物,在波长415 nm处测定显色液的吸光度确定总黄酮含量.以芦丁为标准品,样品总黄酮在0.002～0.020 mg/mL范围内,线性关系良好,其回归方程为A=30.076C+0.006 5,R2=0.999 6,平均加样回收率=101.0%,RSD=1.27%(n=6).
【总页数】3页(P1405-1407)
【作者】许海丹;陈珍;顾霞敏
【作者单位】浙江省台州学院,医药化工学院,浙江,临海,317000;浙江省台州学院,生命科学学院,浙江,临海,317000;浙江省台州学院,医药化工学院,浙江,临海,317000【正文语种】中文
【中图分类】O657.32
【相关文献】
1.乌药叶中总黄酮提取工艺的研究 [J], 许海丹;顾霞敏
2.微波萃取乌药叶中总黄酮的工艺研究 [J], 王小伟;金则新;李建辉
3.乌药叶中总黄酮的含量测定及提取工艺优选 [J], 孙嫣;业康;毛培江;王志安
4.不同产地牡丹叶中总黄酮的含量测定 [J], 牛晓方;姜伟洲;高一军;怀宝刚;尹二彦;
马腾洲;李克明;黄利敏;王培;侯明超
5.聚酰胺吸附-铝离子显色法测定乌药叶中总黄酮的含量 [J], 顾霞敏;许海丹
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铝盐双波长比色法测定冬青叶中的总黄酮含量
铝盐双波长比色法测定冬青叶中的总黄酮含量铝盐双波长比色法是一种常用的测定植物中黄酮类化合物含量的方法之一。
该方法主要基于黄酮类化合物与铝离子在酸性条件下可以形成稳定的络合物，并且该络合物在紫外可见光区域有特征性的吸收峰。
通过比较样品和标准溶液之间的吸光度差异，可以确定样品中总黄酮含量的多少。
冬青叶是一种常见的植物，富含黄酮类化合物，因此可以通过铝盐双波长比色法来测定其总黄酮含量。
测定步骤如下：1. 准备试样：将适量的冬青叶样品加入离心管中，加入适量的酸性乙醇溶液，研磨均匀后放置静置一段时间，使黄酮类化合物充分溶解。
2. 去除杂质：将样品离心，将上清液转移到其他离心管中，去除杂质。
3. 稀释样品：将上清液稀释至一定浓度，以适合于波长比色法测定。
4. 准备标准溶液：取适量的黄酮标准物质，加入酸性乙醇溶液中，按一定比例稀释，制成一系列标准溶液。
5. 比色测定：将稀释好的样品溶液和标准溶液依次放入比色皿中，使用紫外可见光谱仪设置双波长分别在365nm和530nm测量吸光度。
6. 绘制标准曲线：将标准溶液的吸光度与其浓度进行关联，并根据吸光度和浓度的线性关系绘制标准曲线。
7. 测量样品吸光度：将样品溶液的吸光度值代入标准曲线中，根据吸光度值得到样品中总黄酮含量的浓度。
8. 计算总黄酮含量：根据样品溶液的体积和浓度信息计算样品中总黄酮的含量。
在进行测定时，需要注意以下几点：1. 酸性乙醇溶液的配制要准确，可以用浓盐酸或氢氧化钠调节溶液的酸碱度。
2. 标准溶液的浓度要适中，可以根据实际样品的含量范围选择合适的浓度范围。
3. 比色皿要保持清洁，以避免杂质对测定结果的影响。
铝盐双波长比色法是一种准确、简单、快速的测定总黄酮含量的方法，广泛应用于冬青叶等植物中黄酮类化合物含量的测定。
该方法可以为冬青叶的提取、分离纯化和药物制剂的质量控制提供参考依据。
也可以为冬青叶的研究和开发提供技术支持。
聚酰胺吸附法分离黄芪六一方中的黄酮类成分实验注意事项
聚酰胺吸附法分离黄芪六一方中的黄酮类成分实验注意事项
进行聚酰胺吸附法分离黄芪六一方中的黄酮类成分时，需要注意以下事项：
1. 实验环境：确保实验室环境干净整洁，避免杂质干扰实验结果。
2. 实验仪器：确保吸附柱和其他实验仪器的清洁和完好性，以保证实验的准确性和重复性。
3. 样品准备：将黄芪六一方样品研磨成粉末，并满足实验所需的粒度要求。
样品的质量控制要严格，确保实验结果的可靠性。
4. 吸附剂选择：根据实验的要求和黄酮类成分的性质，选择合适的聚酰胺吸附剂，以保证对目标成分的高选择性和高吸附效果。
5. 实验条件：调整实验条件，如溶剂的选择、pH值的控制、温度等，以最大程度地提高黄酮类成分的吸附效果。
6. 柱洗脱条件：合理设置吸附柱的洗脱条件，选择适当的洗脱剂并控制洗脱速率，避免目标成分的损失或杂质的干扰。
7. 实验操作：在实验过程中严格按照操作步骤和实验方法进行操作，注意控制实验中的各项参数，防止人为误差。
8. 实验结果的分析和解释：对实验结果进行准确的测量和分析，结合已有的参考文献和研究成果，对结果进行合理解读和评估。
需要提醒的是，以上提供的是一般性的实验注意事项，具体实验还需根据实验设计和研究目的来进行具体操作和注意事项的确定。
同时，也建议在进行实验前，对相关法律法规进行了解，确保实验的合法性和安全性。
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（ 浙江 台州学 院医药化 工学 院 ， 浙江 临海 ３７０ ） １０ ０
摘要： 目的 采用聚酰胺吸附一 铝离子显色法测定乌药叶中总黄酮的含量。方法 经聚酰胺吸附后的样品， 以芦丁为对
照品 ， ４ ０ｎ 在 ２ ｍ处测定吸收波长， 绘制标 准曲线， 确定浓度 。结果 总黄 酮在 ０ ０ ２～ ．０ｍｇ・ ｌ 范围内呈 良好 的线性 ．０ ０ １ ｍ
图 １ 样 品 的 紫 外 吸收 光 谱 图
２ ５ 聚酰胺用量的考察 取适 量聚酰胺粉末用 ９ ％ 乙醇煮沸 ３ ． ５ ０ 州市路桥 四甲生化塑料厂 ）Ａ Ｃ，・ Ｈ Ｏ（ 析级 Ａ 国药集 团 ； ］Ｉ ６ 分 Ｒ， ａ ｒｎ后抽滤 ， ｉ 如此重 复 ３次。将最后抽 干的粉末先置 于室温下 自 化学试剂有 限公 司） 芦丁对照 品（ ； 中国药 品生 物制品检定所 ， 批 然 干 燥 ３ ｉ， 后 放 入 烘 箱 ７ ℃下 干 燥 １ｈ ０ｒ ｎ 然 ａ ０ 。 号 ０ ８ ９ ０ ） ０ ０— ７ ５ 。 分别称取 ０ １ ， ．０ ０ ４ ，．０，．０ ｇ聚酰胺粉 ， ９ ％ ．５ ０ ３ ，． ５ ０ ６ ０ ９ 以 ５ １３ 样 品 乌 药样地设在浙 江省天 台县三州 乡。２０ — ． ０ ６１ ０在样 乙醇作流动相 ， 入层 析 柱 中， 入 黄酮 提 取液 ， １ 装 加 以 ０—１ ５倍 地随机选取植株 ， 湿布包裹 ， 用 塑料袋封装 ， 立即带 回实验室 。将 ９ ％乙醇洗脱 ， ５ 采用铝离子显色反应检测出 口流出液。将流 出液 材料洗净 ， 自然风干 ，０ ７ ℃下干燥 １ ， 磨后过金属 网筛 ， ２ｈ 研 将烘 浓缩用甲醇定 容至 ５ ｌ用紫外测 定其吸光值 变化。结果表 明 ０ｍ， 干样 品放入 到干燥器 中保存 ， 备用 。 当聚酰胺用量 超过 ０ ４ 之后 ， ．５ｇ 吸光度变化不大 。 ２ 方 法 与 结 果 ２ ６ 标准 曲线 的绘制 精密量取芦丁对照 品溶液 ０２ ０ ５ １０ ． ． ，． ，． ， ２ １ 对照品溶液的制备 精 密称取 芦丁标准 品 ０ ０ ５ｇ 置于 ２ ． ． ２ ， ５ ５０ １ １ ． ，０ｍ 置于 １ ｌ ０ｍ 容量瓶 中 ， 甲醇定 容。分别移取 １ｍ 溶液 ， ｌ ｍ 容 量瓶 中 ， 甲醇 溶 解 并 稀 释 至 刻 度 ， ｌ 用 即得 浓 度 为 １０ ｍ ／ ｌ ． ｇｍ 分别置于 １ 容量瓶 中， ０ｍｌ 加入 ４ｍ ％的氯化铝 一甲醇溶液 ， ｌ １ 用 的芦丁标 准溶液 。 甲醇定容至刻度线 ， 摇匀 ， 放置 １ ｉ。同法制得 空白液 ， ５ｒｎ ａ 按分光 ２ ２ 供试 品溶液的制备 精密称取 乌药 叶粉末 １０ ｇ置 ２０ｍｌ ． ． ， ５ 光度法 ， ４０ｎ 在 ２ ｍ波长处测吸光值。以吸光值 为纵坐标 ， 照品 对 三颈烧 瓶中 ， ５ ％ 乙醇 水浴 加 热 （ ５ 回流 ３次 ， 用 ０ ８ ％） 每次 溶剂 溶液得浓度为横坐标 ， 绘制曲线 ， 进行线性 回归。得 回归方程为 ： １０ｍ ， ０ ｌ回流时间 １ｈ 合并提取液 ， ， 减压蒸馏除去溶 剂 ， 甲醇溶 用 Ａ＝７０ ９２ ．５ Ｃ一００ ６６ 相关 系数 ｒ ０ ９ ９５ ．Ｏ ， ＝ ．９ 。结 果 表 明 ， 丁对 芦 解 残渣并定 容至 ５ ｌ ０ ｍ 。然 后 ， 入 １ 水 ， 加 ０ｍｌ 用石 油 醚 （ ０～ ６ 照 品 在 所试 浓 度 ０ ０ ２～ ．０ｍ ／ ｌ ．０ ０ １ ｇｍ 内呈 良好 的线 性 关 系 。 ９℃ ） ０ 萃取 ３次 ， 每次用量为 ３ １ ０ ｍ 。萃取液经减压蒸馏 除去 甲醇 ２ ７ 重复性实验 取同一供试 品溶 液按上述方法连续检测 ６次 ， ． 后 ， 聚 酰 胺 柱 ， ９ ％ 乙 醇 洗 脱 至 无 黄 酮 类 物 质 为 止 。 洗 脱 液 过 用 ５ Ｒ Ｄ＝ ．４ ， Ｓ ０ ２ ％ 可见该方法重复性好 ， 精密度高。 减压浓缩 ， 除去溶剂 ， 残渣用甲醇溶解并定容至 ２ ｌ备用 。 ５ｍ ， ２ ８ 回收率实验 采用加样 回收率 法 ， ． 取供试 品溶液 ０ １ ｌ ．０ ｍ ５ ２ ３ 测定波长的确定 精 密移取 １ｍ 供试 品溶液 于 １ １ ． ｌ ０ｍ 容量 份， 分别添加 已知含量的芦丁对 照品溶液 ， 测定总黄酮量 ， 平均加 瓶中 ， 加入 ４ｍ ％氯化铝－ ｌ １ 甲醇溶液 ， 然后用 甲醇定容 至 １ ｌ ０ｍ 。 样 回收率为 ９ ．％ ，Ｓ ７５ Ｒ Ｄ＝２７ ％（ ＝５ 。 ．６ ｎ ） 同法 ， 制得空 白， ２０— ０ ｍ进行 扫描 ， 录紫 外吸 收光 谱 ， 在 ０ ６０ ｎ 记 ２ ９ 样 品测定 取供试 品溶液于 ４ ０ｎ ． ２ ｍ处测定 吸光值 ， 计算供
道 ， 具有操作简单 、 数据可靠等优点 ； 但是关于用分光光度法 分 析乌 药 叶 中总 黄 酮 的 含 量 尚 未 见 相 关 的 报 道 。为 更 好 地 开 发 利用乌药 叶资源 ， 本文建立 了聚酰胺 吸附 一铝离 子显色法 ， 对乌 药叶中总黄酮 的含量进行 了测定。 １ 仪 器 与 材 料 １１ 仪器 ｕ 一４ １ Ｃ型紫外分光光度计 （ ． Ｖ２０ Ｐ 日本岛津公 司） Ｒ 一 ； Ｅ ５Ａ ２ Ａ型 旋转蒸发 器 （ 上海亚 荣生化 仪器厂 ） Ｆ ２０ Ａ 型电子 ；Ａ一 ４ ０ 天平 （ 上海精天 电子仪 器有 限公 司 ） Ｓ － ；Ｂ８ ０超声波清洗 机 （ 宁波 江南药厂 ） 。 １２ 试剂 无 水 乙醇 、 ． 甲醇 （ 分析级 Ａ 宜 兴市 展 望化 工试 剂 Ｒ， 厂） 石油醚 （ ， 沸程 ６ ９ ％， ０～ ０ 上海试 剂二厂 ） 聚酰胺 （Байду номын сангаас江省 台 ； 浙
关系（ ＝ ． ９ ） ｒ ０ ９９５ 。该法的平 均加样 回收率为 ９ ．％ ，Ｓ ７ ５ Ｒ Ｄ为 ２７ ％（ ５ 。结论 该方 法简单、 ．６ ｎ＝ ） 可靠 。
关 键词 ： 乌药； 总黄酮； 聚酰胺； 紫外分光光度法
中图分 类号 ： ２ ４ ２ １ ８ ． １
文献标 识码 ： Ｂ
文章编 号 ：０ ８０ ０ （ ０ ９ ０ －１６０ １０ －８ ５ ２ ０ ） １ ９ －１ ０
乌药 Ｌｎｅａａｇｅａｅ Ｓｍ ） ｏｔｒ ， 科 Ｌｕａｅｅ山胡 收峰。由于 ４ ０ｎ ｉ ｒ ｇ ｒ ｔ（ ｉ ｓ Ｋ ｓ ｍ． 樟 ｄ ｇ ｅ ａｒｅａ ２ ｍ干扰较小 ， 因此 确定检测波长为 ４ ０ｎ ２ ｍ。 椒 属（ ｉ ｅ ） 用植物 。《 国药 典》 ２０ Ｌｎ ｒ 药 ｄａ 中 （ ０５版 ） 规定 其块根 入 ２ ４ 显色时 间的确定 精密移取 １ｍ 供试 品溶液 于 １ ｌ ． ｌ ０ ｍ 容量 药， 具有顺 气止痛 、 温肾散寒等功效 ， 临床上被广泛用于治疗寒凝 瓶中 ， 加入 ４ ｍ ％氯 化铝一 ｌ １ 甲醇溶液 ， 然后用 甲醇定容 至 １ ｌ ０ｍ 。
气滞所致脘腹疼痛 ， 中成 药 配 伍 广 泛 。 据报 道 乌 药 叶 中黄 酮 资 源 每隔 １ｒ ｎ于 ４ ０ｎ ｉ ａ ２ ｍ处测 定其 吸光度 。结果 表 明， 供试 品溶液 丰富， 为乌药叶中抗菌 、 炎 的主要成 分 ０ 。关 于应 用紫外 一 显 色 １ ｉ ， 抗 ５ｍｎ后 吸光 度 几 乎 维 持 稳 定 。 可见光分光 光度 法测 定其 他植 物 中总 黄酮 的含 量 已有 相关 报
时珍 国医国药 ２０ ０９年第 ２ ０卷第 １ 期
ＬＳ ＩＨ ＮＭ ＤＣＮ Ｎ Ａ Ｅ Ｉ Ｅ ［ＡＲ ＳＡ Ｃ ０ Ｏ ．０Ｎ ． ＩＨＺ Ｅ Ｅ ＩＩＥＡ ＤＭ Ｔ ＲＡＭ ＤＣ Ｅ Ｅ Ｒ Ｈ２ ９Ｖ Ｌ２ Ｏ １ ０
聚 酰胺 吸 附一 离 子显 色 法 测定 乌 药 叶 中总黄酮 的含 量 铝