大肠菌群大肠杆菌显色培养基
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培养基名称:大肠菌群大肠杆菌显色培养基(ECC)
英文名称:Chromogenic Coliform&E.coli Agar
大肠菌群大肠杆菌显色培养基(ECC)用途:用于大肠菌群和大肠杆菌的快速检测和计数。
大肠菌群大肠杆菌显色培养基(ECC)使用原理:
蛋白胨和酵母膏粉提供碳氮源和微量元素;氯化钠可维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂;十二烷基硫酸钠抑制革兰氏阳性菌;混合显色底物分别与大肠菌群和大肠杆菌所对应的酶发生特异性反应,水解底物,释放出显色基团,在淡黄色平板上大肠菌群产生橙红色的菌落,大肠杆菌产生蓝绿色的菌落。
大肠菌群大肠杆菌显色培养基(ECC)配方(每升):
蛋白胨15.0g
酵母膏粉3.0g
氯化钠5.0g
十二烷基硫酸钠0.1g
琼脂12.0g
混合显色底物6.77g
最终pH7.0±0.2
大肠菌群大肠杆菌显色培养基(ECC)使用方法:
1、称取大肠菌群大肠杆菌显色培养基(ECC)41.9g,加入蒸馏水或去离子水1.0L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,115℃高压灭菌10min。
2、以无菌手续取样品25.0g或25.0mL,加入含225.0mL无菌磷酸盐缓冲液(或生理盐水)的三角瓶内,充分振摇或用均质器均质1min成1:10稀释液,然后以1:10继续稀释,选择三个适宜的连续稀释度,每个稀释度接种两个平皿,倾注加热溶解并冷至45℃左右的培养基。
3、观察结果。
质量控制:
大肠菌群大肠杆菌显色培养基(ECC)倾注平皿后呈淡黄色,下列菌株接种后于36±1℃培养18~24h生长情况如下表。
菌名菌号生长状况培养特征
大肠埃希氏菌ATCC25922良好菌落蓝绿色
柠檬酸杆菌ATCC8090良好菌落橙红色
鼠伤寒沙门氏菌CMCC50115良好菌落无色
粪肠球菌ATCC29212受抑制-----
贮存:贮存于避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖。贮存期二年。规格:可配置1L的培养基干粉。