顺铂纳米脂质体体内变化的实验研究
顺铂耐药卵巢癌细胞化疗敏感性实验
秦晓黎;金平;靳荣09(030)001
【摘 要】[目的]研究顺铂(DDP)、洛铂(LBP)、紫杉醇(PTX)、吉西他滨(GEM)对卵巢癌SKOV3细胞及顺铂耐药SKOV3/DDP细胞增殖的影响.[方法]培养基中不含药物的处理组为对照组,加入不同浓度化疗药物的处理组为实验组.在相差显微镜下观察细胞形态变化:用MTT法测定单药应用、双药联合使用对两种细胞生长的影响;流式细胞仪分析细胞周期和凋亡率的变化.[结果]SKOV3/DDP细胞耐药指数为7.10±2.19.紫杉醇、洛铂、吉西他滨对两种细胞的抑制率无明显差别.洛铂、紫杉醇、吉西他滨两药联合组与相应单一用药组相比,能显著抑制肿瘤细胞的生长,其中吉西他滨+洛铂及紫杉醇+洛铂组抑制率明显增高.相同浓度顺铂作用48 h后,SKOV3/DDP细胞的凋亡率低于SKOV3细胞.洛铂、紫杉醇、吉西他滨作用两种细胞48 h后,细胞凋亡率差异无统计学意义.顺铂、洛铂与紫杉醇、吉西他滨主要作用于不同的细胞周期.[结论]SKOV3/DDP细胞对紫杉醇、洛铂、吉西他滨无交叉耐药.联合用药有高效协同抑制细胞生长作用.临床治疗卵巢癌顺铂耐药患者可考虑选择吉西他滨+洛铂、紫杉醇+洛铂联合化疗.
2.二甲双胍逆转人卵巢癌细胞株对顺铂耐药的实验研究 [J], 王小霞;尹书琴;康佳丽;袁金
3.miR-218抑制卵巢癌细胞A2780对顺铂耐药性的实验研究 [J], 饶玉梅;陈彩虹
4.靶向GLI1基因增强卵巢癌细胞化疗敏感性的实验研究 [J], 巩向玲;宋彩霞;刘世松;王平
5.敲低着丝粒蛋白U对顺铂耐药卵巢癌细胞自我更新、顺铂耐药和Wnt/β-catenin信号活性的抑制作用 [J], 任英俊;张慧;周颖
【总页数】6页(P82-87)
卵巢癌纳米靶向药物治疗的研究进展
卵巢癌纳米靶向药物治疗的研究进展鲍圣芳;李佳蕊【摘要】卵巢癌发病隐匿，极易发生侵袭和转移，发现时多处于疾病的晚期，是病死率较高的妇科恶性肿瘤。
部分患者难以耐受术后化疗药物的不良反应，术后化疗效果较不理想。
另外，卵巢癌易发生化疗药物耐药，复发转移率高。
这些问题推动了卵巢癌纳米靶向药物的研究。
国内外学者根据实体瘤的高通透性和滞留效应这一原理，制备载药纳米粒，靶向肿瘤，完成药物释放。
体内外试验发现其抗肿瘤药效增强，药物不良反应减少。
通过研究各类纳米材料，联合基因、免疫疗法，纳米靶向药物的种类趋于多样化。
同时，具有诊疗功能的纳米靶向药物也在开发中。
就纳米靶向技术在卵巢癌治疗中的研究进展进行综述，包括被动靶向、主动靶向、磁靶向、基因靶向、免疫靶向和超声靶向。
%Ovarian cancer is the leading cause of death among gynecological malignancies. Signs and symptoms of ovarian cancer are frequently absent in early stages. It is easily to invade or spread to other parts of the body. So, it is difficult to diagnose until it spreads and advances to later stages. Some patients cannot tolerate the adverse chemotherapy reaction, so the effect of chemotherapy is hardly satisfactory. Moreover, drug resistance is common and recurrent rate of ovarian cancer is high. These challenges lead to the development of drug delivery nanoparticles for ovarian cancer treatment. Based on enhanced permeability and retention effect, domestic and foreign scholars prepare drug delivery nanoparticles and targeted tumor to complete drug release. It helps to enhance efficacy and reduce side effects in vivo and in vitro research. Various drug delivery nanoparticles are developed by differentnanomaterials and some combine with gene, immune therapy. Nano-sized carriers can also be functionalized to both diagnose and treat cancer. This review focuses on different types of targeted nanotherapy for ovarian cancer treatment, including passive targeting, active targeting, magnetic targeting, gene targeting, immune targeting and ultrasound targeting.【期刊名称】《国际妇产科学杂志》【年(卷),期】2015(000)005【总页数】4页(P568-570,574)【关键词】卵巢肿瘤;纳米技术;药物载体;基因疗法;药物释放系统【作者】鲍圣芳;李佳蕊【作者单位】200092 上海交通大学医学院附属新华医院妇科;200092 上海交通大学医学院附属新华医院妇科【正文语种】中文卵巢癌病死率高，根据其病理及分期，常采用手术、化疗联合治疗[1]。
脂质体的研究进展学
新型药物载体免疫脂质体的研究进展 08药剂3班乔宇 20080702067免疫脂质体(immunoliposomes)是单克隆抗体(monoclonal antibody，mAb，简称“单抗”)或其片段修饰的脂质体的简称，这种新型药物载体对靶细胞具有分子水平上的识别能力，具有很多优势，包括对肿瘤靶细胞呈现明显的选择性杀伤作用，且杀伤活性比游离药物、非特异抗体脂质体、单独单抗等更强；在荷瘤动物体内呈特异性分布，肿瘤病灶药物浓度升高，药物毒副作用较小；体内循环半衰期长及运载药物量大等。
免疫脂质体发展至今经历了数代：第一代是抗体或抗体片断直接与脂质体的脂膜相连，但由于巨噬细胞的吞噬很快被血液清除；第二代在第一代的表面引入了聚乙二醇(PEG)等亲水性大分子，延长了在血液中的循环时间，但PEG长链对单抗的屏蔽使抗体与靶细胞的结合能力降低；第三代将抗体连接在PEG或其衍生物的末端，制成空问稳定性免疫脂质体(sterically stabilized immunoliposomes，SIL)，延长了包含药物的脂质体的血液循环时问，且单抗伸展至脂质体外部发挥寻靶作用。
本文就免疫脂质体的分类、抗体连接脂质体的方法、临床应用及其发展现状进行综述。
1 免疫脂质体的分类根据靶向特异性细胞和器官的原理可将免疫脂质体分为抗体介导和受体介导两类。
1．1 抗体介导的免疫脂质体抗体介导的免疫脂质体是利用抗原一抗体特异性结合反应，将单抗与脂质体偶联。
抗体有单克隆抗体和多克隆抗体之分，单抗因其专一性在抗体应用中占主导地位。
现今，全世界已有超过1 50种单抗应用于临床或正处于临床研究阶段，且也已从原先的纯鼠单抗发展为人鼠嵌合抗体及人源化抗体，如已上市的人源化单抗Daclizumab、Palivizumab、Trastuzumab等；临床应用中，单抗从最初治疗器官移植排斥反应、降凝血发展到治疗癌症、HIV感染等疑难性疾病[2】。
1．1．1 两种抗体修饰的双靶向免疫脂质体靶向物用两种不同的抗体修饰脂质体，可增加其结合特异性和细胞摄取率，并且抗体在靶向细胞时能产生协同作用【3】。
NGX6基因联合顺铂治疗肺癌的体内外研究_张敬
NGX6基因联合顺铂治疗肺癌的体内外研究张敬1，王哲2，史晓宇1，孟玮1，马峰1，王金3，赵永明3（1.河北北方学院附属第一医院肿瘤内科，河北张家口075000；2.河北北方学院附属第一医院泌尿外科，河北张家口075000；3.河北北方学院药学系，河北张家口075000）资助项目：张家口市2013年度科学技术研究与发展计划（1321099D ）作者简介：张敬，女，硕士，主治医师，研究方向：肺癌治疗的基础与临床研究，E-mail ：zhangjingbfxy@163．com 。
［摘要］目的探讨NGX6基因联合顺铂对肺癌A549细胞和NCI-H1975细胞的体外抑制作用及其体内抗肿瘤效果。
方法以脂质体鱼精蛋白为载体，构建载NGX6基因的阳离子脂质体-DNA 复合物。
将A549细胞和NCI-H1975细胞均分为NGX6组（载NGX6基因的LPD ，NGX6浓度为30μg /mL ）、顺铂组、NGX6+顺铂组，以PBS 为阴性对照。
采用MTT 检测各组对A549细胞和NCI-H1975细胞的生长抑制作用；克隆形成实验计算克隆形成率和抑制率；构建肺癌移植肿瘤模型，将裸鼠分为同细胞处理相同的4组，每组10只，统计各组裸鼠肿瘤体积和生存期，观察各组裸鼠肿瘤组织细胞凋亡情况。
结果对肿瘤细胞的增殖抑制能力显著强于NGX6组和顺铂（P ＜0.01）。
克隆形成实验结果表明，NGX6+顺铂组的肿瘤细胞克隆数小于NGX6组和顺铂组（P ＜0.01）。
体内抗肿瘤实验结果表明，NGX6+顺铂组对荷瘤裸鼠的肿瘤生长抑制率显著高于NGX6组和顺铂组（P ＜0.01）。
NGX6+顺铂组，NGX6组，顺铂组和生理盐水组荷瘤裸鼠的中位生存期分别为43、31、29、15d 。
结论NGX6基因联合顺铂能够有效抑制肺癌细胞的增殖和肿瘤的生长。
表明基因干预联合细胞毒性药物化疗能为肿瘤的治疗提供了一种新的治疗手段。
［关键词］NGX6基因；肺癌；顺铂；A549细胞；NCI-H1975细胞；体内；体外［中图分类号］Ｒ734.2［文献标识码］A ［文章编号］1005－1678（2015）05－0033－04NGX6gene combined with cisplatin in treatment oflung cancer in vitro and in vivoZHANG Jing 1，WANG Zhe 2，SHI Xiao-yu 1，MENG Wei 1，MA Feng 1，WANG Jin 3，ZHAO Yong-ming 3（1.Department of Oncology ，The First Attached Hospital of Hebei Northern University ，Zhangjiakou 075000，China ；2.Department of Urology ，The First Attached Hospital of Hebei Northern University ，Zhangjiakou 075000，China ；3.Department of Pharmacy ，Hebei North University ，Zhangjiakou 075000，China ）［Abstract ］Objective To evaluate the effect of NGX6combined with cisplatin on the inhibition rate of A549cells and NCI-H1975cells and antitumor effects in vivo．Methods The NGX6was loaded in the LPD ，and prepare Liposome protamine DNA complexes.A549cells and NCI-H1975cells were seperately divided into NGX6group （30μg /mL NGX6concentration ），cisplatin group ，NGX6+cisplatin group ，PBS as negative control group.The effect of cytotoxicity of four group on A549cells and NCI-H1975cell were evaluated by MTT assay.the clone forming rate and the inhibition rate were determined by Cell colony count.lung transplantation tumor model were successfully established ，then nude mice were divided into four groups as abeve ，each group of 10，tumor size and survival period were determined tumor cell apoptosis were observed．Ｒesults The cell viability of A549cells and NCI-H1975cells of （NGX6+cisplatin ）were lower than that of NGX6group ，cisplatin group and saline group ，respectively （P ＜0.01）.The cloning efficiency of A549cells and NCI-H1975cells of （NGX6+cisplatin ）were lower than that of NGX6group ，cisplatin group and saline group ，respectively （P ＜0.01）.The tumor inhibitory rate was in vivo for （NGX6+cisplatin ）was higher than other group （P ＜0.01）.The median survival of nude mice in （NGX6+cisplatin ），NGX6，cisplatin and saline group were 43，31，29and 15days．Conclusion NGX6combination with cisplatin can inhibit the cell proliferate of lung cancer cells and inhibit the tumor growth and the combination of NGX6and cisplatin may be a potentially effective treatment for lung cancer．［Keywords ］NGX6；lung cancer ；cisplatin ；A549cells ；NCI-H1975cells ；in vitro ；in vivo肺癌是当前威胁人类的头号肿瘤疾病。
肺靶向抗癌药物脂质体的研究进展
肺靶向抗癌药物脂质体的研究进展唐倩;谈利红;余瑜【摘要】肺癌是威胁人类生命健康的重大疾病之一,近年来临床上抗肺癌药物的研究发展迅速,但目前抗肺癌药物靶向性较弱,在攻击肺瘤细胞的同时也杀死了正常的组织细胞,毒副作用大是研究抗肺癌药物的难点.肺靶向抗癌药物的研究与开发成为攻克这一难题的重要途径.目前各国对于肺靶向抗癌药物的研究主要集中在靶向药物的载体方面,脂质体作为靶向给药载体,是广大医药研发人员的研究热点.本文综述了近年来肺靶向抗癌药物的研究现状及发展的趋势,并在此基础上对肺靶向抗癌药物脂质体在研发中存在的问题提出自己的一点见解.【期刊名称】《重庆医学》【年(卷),期】2018(047)030【总页数】3页(P3939-3941)【关键词】靶向;抗肿瘤药;脂质体;肺肿瘤【作者】唐倩;谈利红;余瑜【作者单位】重庆医药高等专科学校 401331;重庆市药物制剂工程技术研究中心401331;重庆医药高等专科学校 401331;重庆市药物制剂工程技术研究中心401331;重庆医科大学药学院 400016【正文语种】中文【中图分类】R979.1在世界范围内，每年大约有150万的癌症病例被诊断为肺癌，其中85%是非小细胞肺癌(NSCLC)，通常治疗NSCLC的手段是手术或放疗[1]。
但更多情况下，为了防止肿瘤的转移、复发和提高生存率，还需要化疗。
目前临床上常用铂类联合紫杉醇、多烯紫杉醇(DTX)、吉西他滨、长春瑞滨等药物治疗晚期NSCLC。
但紫杉醇或DTX注射液等抗癌药物，靶向性差，在杀伤肿瘤细胞的同时，也会破坏正常组织细胞，从而增强了药物的不良反应，因此，研究和开发肺靶向抗癌药物已成为解决这一问题的重要途径[2]。
脂质体具有靶向性强、细胞亲和性好、生物降解性强、缓释性好、毒性小等特点，作为药物运载体最具成药性[3]。
关于抗肺癌靶向药物脂质体的开发成为了医药工作者的研究热点。
为此，本文就近年来抗肺癌药物脂质体的肺部靶向性问题、安全性问题、作用机制和制备工艺等方面进行综述，以期为其进一步的研究开发提供一定的理论基础。
抗癌药顺铂的发现史给我们的启示
抗癌“老”药顺铂的发现史给我们的“新”启示顺铂（cisplatin）可以说名副其实的“老”药，早在1845年就由M.Peyrone合成（故也称Peyrone盐），1978年即被美国食品药品监督管理局(FDA) 就批准了顺铂的临床应用，迄今仍然在临床应用（和其它化疗药联用）。
这个已经用了30余年的“老”药，能带给我们什么“新”启示呢？！在回答这个问题前，有必要先回顾一下顺铂的发现历史。
顺铂这个化疗药，相信很多人都知道或听说过, 这是一种可以说是神奇的化学药（尽管其副作用也为人所诟病），它对睾丸癌的治愈率几乎是100%，并且对肺癌、头颈癌、骨癌和早期卵巢癌也有很好的疗效。
如下图所示，它结构非常简单，作用机理比较明确，顺铂进入体内后，铂与DNA单链内两点或双链发生交叉联结，抑制癌细胞的DNA复制过程，使之发生细胞凋亡（详细作用机理可参见此英文网站）。
并且，更重要的是，顺铂对多种癌症都有很好的治疗和抗癌作用，可以说是一种广谱抗癌药，因此，顺铂也被誉为“抗癌药里的青霉素”。
尽管如前所述，早在1845年就已经由M.Peyrone 合成，但是它的抗癌活性却直到20世纪七十年代初，才被初步发现，这段历史挺有意思，聊聊和大家一起分享。
当时，密西根州立大学(Michigan State University)化学系的Barnett Rosenberg (照片见下图）和其同事Loretta Van Camp、Thomas Krigas 设计一个实验以确定电磁能是否可以让细胞生长熄火( stop cell growth)。
他们偶然发现从电极游离的铂，当与氯离子和铵(chloride and ammounium)连用时，对细胞生长有惊人的作用，即：他们发现这个由铂电极而产生的电解产物可以抑制大肠杆菌的细胞分裂，这个重要发现，1965年发表在著名的Nature上，文章基本信息如下：Title: INHIBITION OF CELL DIVISION IN ESCHERICHIA COLI BY ELECTROLYSIS PRODUCTS FROM A PLATINUM ELECTRODE Author(s): ROSENBERG. B, VANCAMP L, KRIGAS TSource: NATURE Volume: 205 Issue: 4972 Pages: 698-& Published: 1 965Times Cited: 1,057该文迄今已经被引用超过千次。
裸鼠顺铂方案
裸鼠顺铂方案背景裸鼠（Nude mice）是一种严重免疫缺陷的实验动物模型，常被用于进行肿瘤药物研究。
顺铂（Cisplatin）是一种常用的抗肿瘤药物，已被广泛应用于临床治疗。
本方案旨在探索裸鼠体内给予顺铂的最佳方案，以便在裸鼠模型中更好地评估该药物的抗肿瘤效果。
实验目的1.确定裸鼠对顺铂的最佳耐受剂量2.评估裸鼠给予顺铂后的肿瘤生长抑制效果3.探索顺铂在裸鼠体内的药代动力学特征实验设计1. 动物模型建立根据实验需要，选取裸鼠作为动物模型。
裸鼠的肿瘤模型可以通过多种方式建立，例如移植裸鼠体内的肿瘤细胞株。
在实验开始前，确保裸鼠没有任何感染和疾病。
2. 药物制备从可靠的药物供应商购买顺铂，并按照制造商的说明书制备药物溶液。
确保药物的浓度准确无误。
3. 药物给药方案根据实验目的和文献报道，设计以下不同给药方案：1.单次给药：给予裸鼠一次性的顺铂剂量，观察短期内的药物效应。
2.多次给药：将顺铂剂量分为多次给药，观察长期的药物效应。
3.不同给药时间间隔：给予裸鼠不同时间间隔下的顺铂剂量，以模拟临床应用中的间歇治疗。
4. 实验组设置根据实验设计，将裸鼠分为不同的实验组，每个组内包括适量的动物数量。
每个实验组按照给药方案进行接受顺铂给药。
5. 肿瘤生长抑制效果评估定期检测和记录各实验组裸鼠的肿瘤大小和体重变化。
常用的评估指标包括肿瘤体积、肿瘤抑制率和生存期延长。
6. 药代动力学研究收集不同时间点的裸鼠血液样本，并经过适当的处理，使用高效液相色谱法（HPLC）或其他适当的技术分析顺铂在血浆中的浓度变化。
在药代动力学研究中，可以计算药物的半衰期、清除率等参数，以更好地了解顺铂在裸鼠体内的代谢和消除特征。
结论通过以上的实验设计，我们可以评估裸鼠对顺铂的耐受性、顺铂的抑制肿瘤生长效果以及顺铂在裸鼠体内的药代动力学特征。
这些结果将有助于进一步的药物研发和临床应用中的优化治疗方案。
需要注意的是，裸鼠模型作为实验动物模型，虽然在一定程度上可以反映人体肿瘤的生长和治疗情况，但仍然存在一定的局限性。
高效液相色谱法测定动脉注射用微粉化顺铂中顺铂的含量及有关物质
００ ％） ．５ 。
岛津高效液相色谱系统 （ ｃ ０ Ｌ ～２ Ａ二元泵 、Ｉ一２ Ａ 自 ｓＬ ０ 动进样器 、Ｔ － １Ａ Ｖ Ｃ Ｏ ０ Ｓ Ｐ柱温箱 、Ｓ Ｄ ２ Ａ紫外检 测器 、 ．Ｐ － ０ Ｌ ｏ ｔｎ色谱 工作站 ）Ｃ ２ ５ Ｃ Ｓｌ ｉ ｕｏ ； Ｐ ２ Ｄ型 分析天平 （ 国 Ｓｒ — 德 ａｔ ｏ
ｌ ） ｆ ｓ。 ｕ
２６ 稳 定 性 考 察 ． 按 含 量 测 定 项 下 的 方 法 ， 别 对 顺 铂 对 照 品储 备 液 在避 分 光 的 情 况 下 于 ０ ２４ ６ ８ｈ进 样 ，峰 面 积 积 分值 基本 不 变 ， ， ， ， ，
顺 铂对 照 品 （ 比利 时 ， 度 ９ ． ％）动 脉 注 射 用 微 粉 化 纯 ９９ ９ ； 顺 铂 （ ｔ 化 药 株 式会 社 生 产 ， 号 分 别 为 ７０ ５ ，７５ ４ Ｅ本 批 ７ ５ ０７ ０ ５ ，
分别精 密量取顺 铂 对照 品储 备液 ０ 、 、、０ｍ 置 １ ． ２ ５ ｌ ｌ ５ ０ ｍ Ｌ容量瓶 中， 用二 甲基 甲酰胺定容至刻度 ． 再精密量取顺 铂 对照品 ２ 、． ｍｇ ． ５０ 分别置 于 ｌ ｌ ０ ０ｍ 容量瓶中，加入对照品储 备 液定容至刻度 ， 摇匀 即得标准系列溶液。根据上述 色谱条 件 ， 别进样 １ ｌ 分 ０ 标准系列溶液 ， 记录峰面积积分值 。以顺 铂对照 品进样量 （ ） ｃ 为横坐标 ， 面积积分值 （ 为纵坐标 ， 峰 Ａ）
绘 制标 准 曲线 ，得 线 性 方程 为 Ａ ２ ０２ ８ ＋ ００６ ｒ０９ ９ ＝ ７ ５ Ｃ ３ ３ ．，＝ ． ８ ９
脂质体技术的研究进展
例如： 1.阿霉素热敏脂质体
经肝动脉注射后，在肝脏部位升温至42℃，结果： (1)在肿瘤中的药物浓度高于正常肝组织; (2)温敏脂质体组的药物浓度明显大于未加热组。
2. 甲氨蝶呤热敏脂质体
尾静脉注射，肿瘤部位加热至42℃。结果 (1)局部加热科引导药物选择性作用于鼠皮下LEWIS癌; (2)局部加热组可使肿瘤组织对药物的摄取增加，约为增加 14倍，从而增加抑瘤作用。
可以看出:长循环脂质体的血浆半衰期比注射剂的大,峰浓度是注射剂 的180,AUC是注射剂的96倍,说明在同样剂量条件下,注射剂的分布和消 除都比长循环脂质体快,长循环脂质体在体内能够维持较长循环时间。
☆免疫脂质体
设计原理：
免疫脂质体为机体修饰脂质体的简称。即通过在脂质体 表面接上某种蛋白质，如抗体来提高脂质体的专一靶向性。
b 按荷电性分
中性脂质体 负电性脂质体 正电性脂质体
c 按性能分
一般脂质体（包括SUV, LUV,MLV) 特殊性能脂质体（包括热敏、pH敏感、免疫、光敏脂质体 等）
（3）特点 靶向性和淋巴定向性
被动靶向：是脂质体静脉给药的基本特征，即脂质体静 脉给药后主要被肝、脾等巨噬细胞丰富的组织吞噬，具有 肝、脾的自然靶向性。 主动靶向：即在脂质体上连接特异性配体，通过配体分子 与靶细胞的特异性作用，介导主动靶向。常见的配体如抗 体、糖、蛋白质等。 物理化学靶向性：利用作用部位的pH和温度等的变化来改 变脂质体膜的通透性，使其选择性释放药物而实现的靶向给 药。较成功的粒子为温度敏感脂质体。
脂质体技术 的研究进展
中国药科大学
周建平 姚静
第一部分
概述
一、脂质体技术的发展概况 ☆1956年——Bangham和Standish电镜观察发现磷脂分散
口腔鳞状细胞癌化疗药物的现状及研究进展
［３３］ＲｅｎＦ，ＧｕｏＱ，ＺｈｏｕＨ．Ｍｅｎｉｎｒｅｐｒｅｓｓｅｓｔｈｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｏｆｇａｓ ｔｒｉｃｃａｎｃｅｒｃｅｌｌｓｂｙｉｎｔｅｒａｃｔｉｎｇｗｉｔｈＩＱＧＡＰ１［Ｊ］．ＢｉｏｍｅｄＲｅｐ，２０２３，１８（４）：２７．［３４］ＨｕＷ，ＷａｎｇＺ，ＺｈａｎｇＳ，ｅｔａｌ．ＩＱＧＡＰ１ｐｒｏｍｏｔｅｓｐａｎｃｒｅａｔｉｃｃａｎｃｅｒｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎａｎｄｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌｔｒａｎｓｉｔｉｏｎ（ＥＭＴ）ｔｈｒｏｕｇｈＷｎｔ／β ｃａｔｅｎｉｎｓｉｇｎａｌｉｎｇ［Ｊ］．ＳｃｉＲｅｐ，２０１９，９（１）：７５３９．［３５］ＷｕＹ，ＴａｏＹ，ＣｈｅｎＹ，ｅｔａｌ．ＲｈｏＣｒｅｇｕｌａｔｅｓｔｈｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｏｆｇａｓｔｒｉｃｃａｎｃｅｒｃｅｌｌｓｔｈｒｏｕｇｈｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｗｉｔｈＩＱＧＡＰ１［Ｊ］．ＰＬｏＳＯｎｅ，２０１２，７（１１）：ｅ４８９１７．［３６］ＦａｎＪ，ＺｈａｎｇＷ，ＷｕＹ，ｅｔａｌ．ｍｉＲ １２４ｉｎｈｉｂｉｔｓｃｅｌｌｇｒｏｗｔｈｔｈｒｏｕｇｈｔａｒｇｅｔｉｎｇＩＱＧＡＰ１ｉｎｃｏｌｏｒｅｃｔａｌｃａｎｃｅｒ［Ｊ］．ＭｏｌＭｅｄＲｅｐ，２０１８，１８（６）：５２７０－８．［３７］Ｍｅｎｓａｈ ＯｓｍａｎＥ，ＶｅｎｉａｍｉｎｏｖａＮ，ＭｅｒｃｈａｎｔＪ．ＭｅｎｉｎａｎｄＪｕｎＤｒｅｇｕｌａｔｅｇａｓｔｒｉｎｇｅｎｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｔｈｒｏｕｇｈｐｒｏｘｉｍａｌＤＮＡｅｌｅｍｅｎｔｓ［Ｊ］．ＡｍＪＰｈｙｓｉｏｌＧａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔＬｉｖｅｒＰｈｙｓｉｏｌ，２０１１，３０１（５）：Ｇ７８３－９０．［３８］ＶｅｎｉａｍｉｎｏｖａＮ，ＨａｙｅｓＭ，ＶａｒｎｅｙＪ，ｅｔａｌ．ＣｏｎｄｉｔｉｏｎａｌｄｅｌｅｔｉｏｎｏｆｍｅｎｉｎｒｅｓｕｌｔｓｉｎａｎｔｒａｌＧｃｅｌｌｈｙｐｅｒｐｌａｓｉａａｎｄｈｙｐｅｒｇａｓｔｒｉｎｅｍｉａ［Ｊ］．ＡｍＪＰｈｙｓｉｏｌＧａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔＬｉｖｅｒＰｈｙｓｉｏｌ，２０１２，３０３（６）：Ｇ７５２－６４．［３９］ＳｕｎｄａｒｅｓａｎＳ，ＫａｎｇＡ，ＨａｙｅｓＭ，ｅｔａｌ．Ｍｅｎ１ｄｅｌｅｔｉｏｎｏｆａｎｄｉｎ ｄｕｃｅｓｈｙｐｅｒｇａｓｔｒｉｎｅｍｉａａｎｄｇａｓｔｒｉｃｃａｒｃｉｎｏｉｄｓ［Ｊ］．Ｇｕｔ，２０１７，６６（６）：１０１２－２１．［４０］Ｍｅｎｓａｈ ＯｓｍａｎＥ，ＺａｖｒｏｓＹ，ＭｅｒｃｈａｎｔＪ．ＳｏｍａｔｏｓｔａｔｉｎｓｔｉｍｕｌａｔｅｓｍｅｎｉｎｇｅｎｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｂｙｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇｐｒｏｔｅｉｎｋｉｎａｓｅＡ［Ｊ］．ＡｍＪＰｈｙｓｉｏｌＧａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔＬｉｖｅｒＰｈｙｓｉｏｌ，２００８，２９５（４）：Ｇ８４３－５４．网络出版时间：２０２４－０４－１２１１：０２：０４ 网络出版地址：ｈｔｔｐｓ：／／ｌｉｎｋ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ／ｕｒｌｉｄ／３４．１０６５．Ｒ．２０２４０４１０．１０１４．０２７口腔鳞状细胞癌化疗药物的现状及研究进展姬智博１，陈瑞果２，杨 浩３，马 坤２，后 军３综述 孙 磊１审校摘要 依据肿瘤分期及病理诊断，口腔鳞状细胞癌主要采用手术、放疗、化疗或联合治疗。
临床应用和临床试验中的脂质体纳米粒概述
脂质体纳米粒概述引言纳米药物是纳米技术、药学和生物医学科学的融合，并随着用于疾病治疗、显像剂和治疗诊断应用的新型纳米制剂的设计而迅速发展。
美国食品和药物管理局（FDA）对纳米制剂的定义是与1-100纳米（nm）范围内的纳米颗粒组合的制剂；或尺寸在此范围之外却显示出尺寸相关特性的制剂型式。
与游离药物分子相比，这些制剂具有许多优点，增加了溶解度、药代动力学和疗效得到改善、毒性最小化。
已经上市的纳米药物已经有50中，包括多种纳米制剂，脂质纳米粒是其中的佼佼者。
脂质纳米粒是多组分脂质系统，通常包含磷脂、可电离脂质、胆固醇和聚乙二醇化脂质。
传统类型的脂质纳米粒是指脂质体，由英国血液学家Alec D Bangham在1961年首次提出。
通过采用负染剂染色磷脂，可以在电子显微镜下观察脂质体。
这些磷脂组成磷脂双分子层，进而形成球形。
随后，在1980年，第一种由活性靶向配体修饰的靶向脂质体被开发出来，其可以增加药物在靶组织器官细胞中的累积，使药物不会释放到其他部位，这使得脂质体的能力大大提高。
与传统脂质体相比，这些脂质体的总体疗效得到改善。
尽管经过30年的探索，脂质体已经可以作为多种药物分子的有效载体，但直到20世纪90年代，美国食品和药物管理局（FDA）才首次批准脂质体药物。
这一里程碑是Doxil，它是一种包裹阿霉素的“隐形”脂质体（图1a），其用于卵巢癌和转移性乳腺癌以及各种形式的骨髓瘤的临床治疗。
由于阿霉素被包裹在聚乙二醇脂质体中，游离阿霉素的副作用（包括慢性心肌病和充血性心力衰竭）显著减轻。
此外，Doxil中的聚乙二醇化脂质体可以延长该药物给药后在血液中的循环时间。
在此之后，被动靶向至肿瘤。
总的来说，由于增强渗透和滞留（EPR）效应，Doxil与游离阿霉素相比，显著降低心脏毒性并增强抗癌能力。
21世纪以来，多组分制剂出发发生了根本改变，纳米制剂取得极大的进展。
这些多组分处方开始用于传递基因治疗药物寡核苷酸。
纳米脂质体可有效止血或可应用于大规模灾害
第 卷第 ３ 期２ ０ １ ３ 年
纳 米 脂 质 体 可 有 效 止 血 或 可应 用 于 大 规 模 灾 害
日本 防卫 医科 大学 副教 授 木 下 学 领 导 的研 究 小 组 日前宣 布 ， 他 们 在动 物实 验 中发现 利用 纳米 脂 质体 能有效 止 血 ， 这一 技术 有望 在发 生大 规模 灾 害时发 挥 作用。 当Ｎ－ ％动 物 的血管 破损 后 ， 血液 中 的血小 板就 会
发 挥作 用 。研 究小 组准 备 明年 开始 临床试 验 ， 争取 尽 早使 该技 术达 到 实用水 平 。
高 敫儆 考 肿 瘤 米
国家 纳米科 学 中心 梁 兴杰 研究 组 和高 能 物 理 研
研 取 得 重 要 （ 苎展
化疗 药 物 的研究 ， 还 未 引起 足 够 重 视 ， 这 方 面 的报 道 在 国 内外 尚少 。 分 子 的表 面特性 影 响到 纳米颗 粒 与作用 位 点 ， 如
一
的顺 铂 药物 浓 度 ， 通过阻断 Ｄ Ｎ Ａ遗 传 物 质 的 复 制 进
一
步抑 制 耐药肿 瘤 细胞 的繁 殖 。
中科 院纳 米生 物 效应 与 安全 性重 点 实验 室 ， ２ ０ ０ ４ 循 环 时 间 。由于 纳米颗 粒 的粘 附性 和小 的粒 径 ， 有 利 年 首次 发现 利 用 内含 Ｇ ｄ原 子 的金 属 富勒 烯 三 明治
血栓 ， 所 以不会 出现血 栓症 等 副作用 。当发生 大规 模
灾害并 导 致大 批居 民受 伤 出血 时 ， 这 一技 术有 望充 分
量 出血 ， 它就会 因失 血 过 多 而 死 亡 。但 是 ， 按 照 每 公 斤 体重 注射 ２ ０毫 克 的 比例 给 ｌ ０只 如 此 受 伤 的兔 子
载顺铂纳米脂质体对荷宫颈癌HeLa细胞移植瘤裸鼠的体内作用
载顺铂纳米脂质体对荷宫颈癌HeLa细胞移植瘤裸鼠的体内作用高华;王云飞;王文静;张梅莹;李青;丁莹;狄文【期刊名称】《上海交通大学学报（医学版）》【年(卷),期】2017(037)005【摘要】Objective · To establish human cervical cancer xenografts in nude mice and investigate the antitumor therapeutic effects and safety of EGF modified cisplatin-alginate conjugate liposomes. Methods · Cervical cancer-bearing mouse model was established by subcutaneously injecting Hela cells in nude mice. General state and xenograft growth of the mice were observed. Tumor volumes, tumor weights, and the body weights of mice during the treatment were recorded and analyzed. The expression levels of EGFR in xenografts were detected by immunohistochemistry. Results · ① EGFR was highly expressed in the xenografts. ② CS-EGF-Lip inhibited the tumor growth effect ively (P=0.000). ③ The inhibition rates of tumor volume and tumor weight of CS-EGF-Lip were 80.22% and 58.60% respectively, which were better than those of cisplatin (P=0.000). ④ CS-EGF-Lip had minimal influence on body weight in mice (P=0.000). Conclus ion · CS-EGF-Lip has more effective antitumor effects than cisplatin in cervical cancer-bearing mice, which can inhibit tumor growth of solid tumors with enhanced efficacy and safety.%目的·建立荷宫颈癌Hela细胞移植瘤裸鼠模型,检测载顺铂纳米脂质体对该模型小鼠的体内作用和安全性.方法·构建Hela细胞皮下成瘤裸鼠模型.观察载顺铂纳米脂质体作用后荷瘤裸鼠的一般状态、肿瘤生长情况,测定及比较瘤体大小和质量,称量并比较裸鼠体质量,对表皮生长因子受体(EGFR)在瘤体中的表达进行免疫组化检测.结果·①Hela细胞皮下成瘤裸鼠的肿瘤组织中EGFR高表达.②载顺铂纳米脂质体显著抑制荷瘤小鼠皮下肿瘤的生长(P=0.000).③载顺铂纳米脂质体组(CS-EGF-Lip)的肿瘤体积抑瘤率达80.22%,瘤体质量抑制率达58.60%,抑瘤效果明显优于顺铂组(P=0.000).④载顺铂纳米脂质体对荷瘤小鼠体质量的影响最小(P=0.000).结论·载顺铂纳米脂质体给药系统较顺铂的抑瘤作用显著,可以更有效、安全地发挥抑制实体瘤瘤体生长的作用.【总页数】5页(P606-610)【作者】高华;王云飞;王文静;张梅莹;李青;丁莹;狄文【作者单位】上海交通大学医学院附属仁济医院妇产科,上海市妇科肿瘤重点实验室,上海 200127;济宁医学院附属医院妇科,济宁 272029;上海交通大学医学院附属仁济医院妇产科,上海市妇科肿瘤重点实验室,上海 200127;上海交通大学医学院附属仁济医院妇产科,上海市妇科肿瘤重点实验室,上海 200127;上海交通大学医学院附属仁济医院妇产科,上海市妇科肿瘤重点实验室,上海 200127;上海交通大学医学院附属仁济医院妇产科,上海市妇科肿瘤重点实验室,上海 200127;上海交通大学医学院附属仁济医院妇产科,上海市妇科肿瘤重点实验室,上海 200127【正文语种】中文【中图分类】R737.33【相关文献】1.沉默HeLa细胞端粒酶活性对其在裸鼠体内移植瘤生长的影响 [J], 石英爱;赵强;张海英;张丽红;王光兰;陈爽;王勇2.白细胞介素24对裸鼠人宫颈癌Hela细胞移植瘤抑制作用的探讨 [J], 王朝霞;李莉3.YH-16对宫颈癌Hela细胞及其裸鼠皮下移植瘤作用研究 [J], 程丽;刘梅梅;隋丽华;程海燕;张云艳4.Bcl-2与c-mycASODN 联合转染对裸鼠宫颈癌Hela细胞皮下移植瘤抑制作用研究 [J], 魏玮; 姜玉华; 王艳琴; 张在云; 于晓明5.Bcl-2与c-mycASODN联合转染对裸鼠宫颈癌Hela细胞皮下移植瘤抑制作用研究 [J], 魏玮; 姜玉华; 王艳琴; 张在云; 于晓明因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
脂质体(1)
3.pH敏感脂质体
脂质体
内吞
核内体
膜融合
Jenifer等[10]用pH敏感脂质体包裹了阿糖胞苷用于治疗 口腔癌。实验表明,同为叶酸受体介导内吞的脂质体,pH 敏感脂质体对癌细胞的杀伤毒性为非pH敏感脂质体的17 倍。
[ 10] SudimackJJ, GuoW, TjarksW, et a.l Anovel pH- sensitive liposome formulationcontainingoleyl alcohol[ J]. Bio-chimBiophysActa, 2002, 1564( 1): 3137
脂质体 Liposomes
CONTENTS
1 2 3 4 5 6 脂质体基本概念 脂质体组成与结构 脂质体的剂型特点 制备方法、质量标准 脂质体制备原理 应用前景
脂质体概念（Liposome）
脂质体（或称类脂小球，液晶微囊）
是将药物包封于类脂质（如磷脂、胆固醇等）双分子层内形成 的微型泡囊。
脂质体组成与结构
[1] 阎家麒, 王悦, 王九一. 紫杉醇隐形脂质体的制备及在小鼠体内的组织分布 [ J].药学学报, 2000, 35( 9): 706-709
2.糖基修饰的脂质体
文献[2]报导巨噬细胞表面表达大量甘露糖受体,甘露糖覆 盖的脂质体质粒DNA与裸质粒DNA或无甘露糖覆盖的脂质体 质粒DNA相比较,特异性抗免疫球蛋白G(lgG)滴度和脾细胞 增生程度都有加强,说明其抗肿瘤效应增加。
对于两亲性药物， 如某些弱酸弱碱， 其油水分配系数 介质pH和离子强 度的影响较大， 用被动载药法制 得的脂质体包封 率低。
被动载药法
• 主要有薄膜分散法、反相蒸发法、注入法、超声 波分散法，冻融法，冷冻干燥法、复乳法、超临 界法等 • 最原始但又是迄今为止最基本和应用最广泛的脂 质体的制备方法 ——薄膜分散法
顺铂纳米载体体外抗肿瘤作用的比较研究
顺铂纳米载体体外抗肿瘤作用的比较研究孙晓译;梁文权【期刊名称】《浙江大学学报（医学版）》【年(卷),期】2011(040)004【摘要】目的:比较顺铂脂质体和顺铂纳米粒细胞转运和抗肿瘤作用的差异,探讨载体种类对药物传递的影响.方法:制备得到粒径、电位、载药量、释放曲线相近的顺铂脂质体和明胶纳米粒,考察二者在A549细胞中的细胞摄取和消除动力学情况,通过内吞抑制剂研究颗粒入胞途径.利用MTT试验评价纳米载体的抗肿瘤活性.结果:两种载体主要通过clathrin介导的内吞途径和大胞饮入胞,顺铂纳米粒摄取水平显著高于脂质体.而后者的胞内滞留能力远高于前者,平均滞留时间(MRT)为纳米粒组的3倍,曲线下面积(AUC)约为纳米粒2倍.MTF结果表明,顺铂脂质体的抗肿瘤活性远高于明胶纳米粒,IC50分别为(2.94 +0.21、20.70±1.05) μg/ml.结论:制剂参数相近的两种纳米粒在细胞摄取、消除的药物传递过程中有较大的区别,引起体外抗肿瘤活性的差异.与纳米粒相比,脂质体是更适合顺铂发挥疗效的纳米载体.【总页数】6页(P408-413)【作者】孙晓译;梁文权【作者单位】浙江大学城市学院医学与生命科学学院,浙江杭州310015;浙江大学药学院,浙江杭州310058【正文语种】中文【中图分类】R730.5【相关文献】1.顺铂与DMPIBPA合用体外抗肿瘤作用研究 [J], 李佳军;马军;田玉顺;2.顺铂与 DMPIBPA 合用体外抗肿瘤作用研究 [J], 李佳军;马军;田玉顺3.4-乙氧基-2-羟基-6-甲基苯甲酸体外抗肿瘤作用及与顺铂联合作用研究 [J], 王子睿;贺小琼;姚乾;王静;贺云发;胡松杉4.4-乙氧基-2-羟基-6-甲基苯甲酸体外抗肿瘤作用及与顺铂联合作用研究 [J], 王子睿;贺小琼;姚乾;王静;贺云发;胡松杉;5.姜黄素联合顺铂对卵巢癌细胞COC1的体外抗肿瘤作用 [J], 关松磊;胡秀丽;刘忠英;宋凤瑞;刘志强因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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２
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图２．
肿瘤、肝、肺和肾组织内总铂宙量变化
２．３肝、。肾和肺组织中药物含量变化：在肝、肺和肾脏中，ＬＤＤＰ组的总铂含量均明显高于ＣＤＤＰ组 （图２）。肝脏中，ＬＤＤＰ组的总铀含量较其它组织高，峰值达１６．７２±６．６０“ｇ／ｍｌ，其后下降速度平 缓，ＣＤＤＰ组总铂浓度较肿瘤组织和肺脏高，但低于肾脏，其峰值为５．８０±４．０１。肺组织中，ＬＤＤＰ 组总铂含量峰值为８．５８±２．２９９９／ｍｌ，其后下降速度较快，７２ｈ时为３．１４±１．６９肛ｇ／ｍｌ，ＣＤＤＰ组总铂 峰值为２．３７±０．５３垤／ｍｌ。在肾脏中，ＬＤＤＰ组总铂含量的峰值为１０．２２±１．８４ｔｌｇ／ｍ１，其后下降缓慢， 高浓度维持了较长时间，ＣＤＤＰ组总铂含量峰值为７．７８±１．２７“ｇ／ｍｌ，与ＬＤＤＰ组相差不大，但下降速
度较快。比较儿种组织中总铂的ＡＵＣ值，ＬＤＤＰ组均显著高于ＣＤＤＰ组，在肝脏中两者的比值为３．１７，
肺脏中也为３．３０，肾脏中最低，为２．４０，但均明显低于肿瘤组织７．４８倍的比值。
表２．肿瘤、肝、肺和肾组织内总铂ＡＵＣ值
Ｃａｎｃｅｒ ｔｉＳＳＨＣ Ｌｉｖｃｒ ｔｉｓｓｕｅ Ｌｕｎｇ ｔｉｓｓｕｅ Ｋｉｄｎｅｙ ｔｉＳＳＵＣ
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（腿・ｈ・ｍ１１）
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１２３１．３６
１０１４．９９
ＣＤＤＰ
１３５．７５
５５２．３０
２０９．４４
５１２．０５
３．讨
论
顺铂抗瘤谱广，广泛应用于各种实体瘤的治疗。但顺舶进入机体斤，大部分与血浆蛋白形成牢 同结合而失去抗肿瘤活性，因而需较大的剂量才能在肿瘤组织中达到有效的浓度，因而加大了药物 对人体的毒性反应。顺铀对人体的毒性反应主要为肾毒性和对造血系统的毒性。脂质体对顺铂的包 裹可隔离顺铂与血浆蛋白的结合，延长游离顺铂在机体的循环时间，因而有更多的药物能进入肿瘤 组织中。含聚乙二醇（ＰＥＧ）的脂质体由丁．空间效应，可抑制机体网状内皮系统对脂质体的识别和吞噬
．８８－
破坏，显著延长脂质体在血液中的循环时间。 实验结果显示，ＣＤＤＰ注射后入血后，峰浓度为３．２４“ｇ／ｍｌ，并迅速降，氐，２ｈ后已经血浆已测不 到游离的ＤＤＰ。肿瘤患者注射ＤＤＰ（１００ｍｇ／ｍ２）后，游离铂也在两小时后检测不出，提示游离铂在 体内存在时间较短。而ＬＤＤＰ注射后７２小时之后血液中的游离铂为１．０４心／ｍｌ，其峰浓度是ＣＤＤＰ组 的４倍多，有更多的游离铂存在于血液中且在血液中的循环时间显著延长。另外，根据一些作者试 验，荷瘤鼠接受１．６４—２ｍｇ／ｋｇ的顺铂，能达剑放疗增敏作用，放疗增敏的血药峰浓度约１ｕｇ／ｍ１，故 ＬＤＤＰ给药后７２小时的血药浓度可能仍有临床意义。 ＬＤＤＰ进入血液后，在血浆中的变化过程分两个时相，类似于药动学的两室模型，但其包含的意 义略有不同。初始相顺铂的浓度快速地下降，半衰期为１．２７小时，推测ＬＤＤＰ在体内的进行了快速 分布。其后第二相缓慢下降，半衰期为１９．４７小时，下降的速度可能代表了ＬＤＤＰ在血浆中的破坏速 度，这个破坏速度与ＬＤＤＰ在血浆中释放顺铂的速度是呈正相关的，因此可表征顺铂从ＬＤＤＰ中释放 的速度，这个速度可能是与ＬＤＤＰ药理效应有关的重要参数。 从肿瘤组织的总铂分布看，ＬＤＤＰ组总铂含量是ＣＤＤＰ组的３’８倍；ＬＤＤＰ组总铂的ＡＵＣ值是ＣＤＤＰ组的 ７．４８倍：因此ＬＤＤＰ组进入肿瘤组织的药物显著多于ＣＤＤＰ组。肝、肺和肾脏中，ＬＤＤＰ组总铂含量也 显著高于ＣＤＤＰ组，但比例均小丁．肿瘤组织中两组的比例。从几种组织中ＬＤＤＰ组和ｃＤＤＰ组总铂ＡＵＣ 值的比例看，肿瘤组织中西组ＡＵＣ值比例最高，为７．４８；’肾脏中比例最低，为２．４０；肝和肺均分别 为３．１７和３．３０，肿瘤组织中的比例显著高于其它组织，推测ＬＤＤＰ组药物进入肿瘤组织还有与进入 其它组织不同的机理。ＬＤＤＰ在血液的循环中，不断释放游离顺铂，游离顺铂扩散进入肿瘤组织，这 个途径与顺铂进入其它组织是相同的。但肿瘤内新生的毛细血管结构较正常组织疏松，常为单层内 皮细胞构成，且其间的接触疏松，间隙常人于ｌＯＯｎｍ。将脂质体粒径制成纳米级，则可使其在血液 循环中被动地沉集在肼，瘤组织内（ＥＰＲ效应），而这个粒径的脂质体是不能通过止常组织的毛细血管 的。肾脏毒性是顺铂的主要毒副反应之一，虽然肾脏中两组总铂ＡＵＣ值的比例最小，但还是达２倍 多，肾脏中铂的增加对肾脏功能的影响还需进一步的探索。对其它组织的影响应进一步探索。ＬＤＤＰ 的药动学过程可解释其在我们的药效实验中表现出米的较ＣＤＤＰ抗肿瘤效应强得多的优势。
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１．５药物分析 １．５．１血浆游离顺铂浓度测定：采用ＨＰＬＣ法检测血浆中的药物含量。用ＤＤＴＣ与样本中的铂络合， 提取络合物用于测定；以顺铂对照品的生理盐水溶液制备标准曲线，外标法定量计算样本中顺铂的 含量。本方法测定的顺铂含量为游离顺铂及能从蛋白结合中解离出来的铂的含量。分析方法简述如 下：色谱条件：色谱柱为Ａｎｇｉｌｅｎｔ Ｈｙｐｅｒｓｉｌ ＯＤＳ柱（２５０Ｘ４ｍｍ，５ｕｍ），流动相为甲醇：水＝７２：２８（ｖ／ｖ）， 流速为ｌｍｌ／分钟；紫外检测波长为２５４ｎｍ。色谱数据用Ａｎｇｉ ｌｅｎｔ色谱工作站处理，外标法定量。样 品处理：精密吸取血浆，用生理盐水定容至ｌｍｌ，加入５％ＤＤＴＣ试液，混匀置于３７℃恒温水浴３０分 钟，取出冷至室温，加入氯仿２ｍｌ，旋涡振荡２分钟充分提取，以２０００ｒ／ｍ离心１０分钟，分离出氯 仿，并用１．５ｍｌ氯仿洗涤残渣，３７℃恒温水浴中用干燥空气吹干。加入ｌＯＯｕｌ氯仿，漩涡震荡３０秒 溶解，１０“１进样。验证分析方法的精密度和准确度，其日内和日间变异均＜１０％。 １．５．２组织中总铂浓度测定：采用石墨炉原子吸收光谱法测定组织中总铂含量。以Ｐｔ标准溶液作标 准曲线，线性范围为１０～２００ｎｇ／ｍｌ，ｒ＝Ｏ．９９９５；日内和日间ＲＳＤ＜ＩＯ％。组织样本（肺脏、肝脏、肾脏 和肿瘤）剪碎，放入消解罐里，加入３ｍＬ硝酸，ｉｍＬ盐酸，２ｍＬ过氧化氢，放置半小时，然后放在电 热板上加热，空白组织样同法处理作参比。消解完全，分别转入到２５ｍＬ容量瓶定容。测定条件：石 墨管类型为涂层非平台型；灰化温度为１２００＂Ｃ；原子化温度为２７００。Ｃ；信号检测为氘灯，灯电流为 ６．ＯｍＡ，波长为２６５．９ｎｍ，带宽２ ｎｆＩｌ：进样量３０“ｌ。 ２结果 ２．１血浆中游离顺铂的变化 两组小鼠血浆中游离顺铂浓度的变化明显不同，ＣＤＤＰ组小鼠在药物注射后血清中游离顺铂峰浓 度为３．２４４７“ｇｌｍｌ，并迅速降低，两个小时后在血液中已经检测不到游离顺铂。ＬＤＤＰ组药物注射后 游离顺铂峰浓度为１３．７９Ｐｇ／ｍｌ，是ＣＤＤＰ组峰浓度的４倍多。在最初几小时内，ＬＤＤＰ组游离铂的浓 度有一个快速下降的过程，其后下降缓慢，维持时间明显延长，在７２小时时仍能检测到其在血液中 的浓度为１．０４ｐｇ／ｍｌ（图１）。用药代动力学软件３Ｐ９７对ＬＤＤＰ的药时曲线进行拟合，药时曲线类似 于药动学两室模型的变化过程，药动学参数见表１。ＬＤＤＰ在注射进入动物体内后，呈现两相性变化， 初始相顺铂的浓度快速地下降，半衰期为１．２７小时，其后第二相缓慢下降，半衰期为１９．４７小时。 由于分析方法检测到的是血浆中游离的顺铂和包裹在脂质体中的顺铂，故初始相的变化表征的是 ＬＤＤＰ在体内的分布速度，第二相的变化可能表征了脂质体在血浆中的破坏速度。
１材料与方法
１．１药品与试剂 普通顺铂注射剂（ＣＤＤＰ），山尔齐鲁制药厂产品，批号０６０９２４。顺铂的对照品，山东齐鲁制药 厂惠赠，纯度９９％，用生理盐水配制成５０．８３ｍｇ／１００ｍｌ准备液备用。Ｏ．９％氯化钠注射液，四川科伦 药业股份有限公司产品，批号Ａ ０６１０２２Ｄ。ＤＤＴＣ，前用０．１ｍｏｌ／Ｌ ＮａＯＨ溶液配制成５％的试液备用。Ｐｔ 标准水溶液（１．０ ｇ／Ｌ）购至上海计量测试技术研究院。硝酸、盐酸、过氧化氢、甲醇和氯仿均为分 析纯。 １．２仪器
Ａｇｉｌｅｎｔ １１００高效液相色谱仪，美国Ａｇｉｌｅｎｔ公司产品，包括Ｇ１３１１Ａ四元泵，Ｇ１３２２Ａ脱气机， Ｇ１３２８Ａ进样器，Ｇ１３１５Ａ二极管阵列检测器；Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ ＢＰ２１１Ｄ分析大平，Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ公司产品；ＤＣ一１２Ｈ
恒温水浴锅，上海安谱科学仪器有限公司产品；离心机，司产品。 １．３顺铂长循环纳米脂质体（ＬＤＤＰ）的制备
顺铂纳米脂质体体内变化的实验研究
葛勇前１张晓萌２杨焕军２陆国椿１王漪璇１蒋国梁２芮蒙杰３陈剑３干欣欣３徐宇虹’ （１复旦大学附属肿瘤医院药剂科、２放疗科，上海２０００３２３上海交通大学药学院，上海２００２４０）
顺铂（Ｃｉｓｐｌａｔｉｎ，ＤＤＰ）是一种高效广谱的抗肿瘤约，不仅能杀伤肿瘤细胞，抑制细胞修复， 还具有较强的放疗增敏作用。但是，顺铂进入体内后，大部分与血浆蛋白形成难以解离的结合物， 失去抗肿瘤作用，因此怎样避免或减少ＤＤＰ与血浆蛋白的结合，提高ＤＤＰ的有效生物利用度，是目 前ＤＤＰ研究的热点。脂质体特别是长循环脂质体技术的发展提供了解决问题的有效手段，脂质体的 包裹隔离了ＤＤＰ与血浆蛋白的接触，延长了游离ＤＤＰ在体内的循环时间，纳米级的脂质体还能穿过 肿瘤新生毛细血管，在肿瘤内聚集，大大提高ＤＤＰ在肿瘤内的浓度，同时还能减少ＤＤＰ进入正常组 织的量，从而减低ＤＤＰ的毒副反应。本文报道我们制备的ＤＤＰ的长循环纳米脂质体在小鼠体内的变 化过程。