高中生物 专题5 DNA和蛋白质技术 课题3 血红蛋白的提取和分离练习 新人教版选修1
高三生物一轮复习专题55DNA和蛋白质技术课题3血红蛋白的提取和分离课时作业新人教版选修1
课题3血红蛋白的提取和分离__________________ [学业水平层次(A)]_______________I下列各项中,一般不影响凝胶色谱法分离蛋白质的分离度的是()A层析柱的高度B层析柱的直径C缓冲溶液D样品的分布【解析】分离度取决于柱高,为分离不同组分,凝胶柱必须有适宜的高度;样品的分布也影响分离度;缓冲溶液的PH影响蛋白质所带的电荷,因此也影响分离度。
只有层析柱的直径一般不会影响分离度。
【答案】B2-利用凝胶色谱法时什么样的蛋白质先洗脱出来()A.相对分子质量大的B.溶解度高的C.相对分子质量小的D.所带电荷多的【解析】相对分子质量较小的蛋白质能进入凝胶内部通道运行,路程较长,移动速度较慢;相对分子质量大的蛋白质,运行路程较短,移动速度较快,首先被洗脱出来。
【答案】A3•选用猪、牛、羊成熟的红细胞作分离蛋白质的实验材料,下列是其优点的是()A.血红蛋白是无色蛋白B红细胞有细胞核C.红细胞蛋白质含量高D红细胞DNA含量高【解析】哺乳动物成熟的红细胞没有细胞核,核物质也消失,所以红细胞内几乎没有DNA血红蛋白是有色蛋白。
【答案】C4在蛋白质的提取和分离中,矢于对样品处理过程中,分析无误的是O A洗涤红细胞的目的是去除血浆中的葡萄糖、无机盐B洗涤时离心速度过小,时间过短,白细胞等会沉淀,达不到分离的效果C洗涤过程选用质量分数为0.1 %的生理盐水D透析的目的是去除样品中相对分子质量较小的杂质【解析】本题主要考查了血红蛋白提取和分离中的样品处理。
洗涤红细胞的目的主要是除去血浆中的蛋白质;洗涤时离心速度过高,时间过长,会使白细胞等一同沉淀,达不到分离的效果:洗涤过程用到的是质量分数为0.9%的NaCl溶液。
【答案】D5下列矢于电泳的说法,不正确的是()A电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程B带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动C.蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中的迁移率取决于它所带净电荷的多少D.用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,蛋白质的电泳迁移率完全取决于分子的大小【解析】蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中的迁移率取决于它所带净电荷的多少以及分子的大小等因素。
[推荐学习]高中生物专题5DNA和蛋白质技术课题3血红蛋白的提取和分离优化练习
课题3 血红蛋白的提取和分离一、选择题1.凝胶色谱法是分离蛋白质分子的一种常用方法,但并非所有的蛋白质都可用此方法进行分离。
能分离的蛋白质分子之间必须( )A.具有相同的相对分子质量B.相对分子质量不同,但都是相对分子质量较大的分子C.相对分子质量不同,但都是相对分子质量较小的分子D.相对分子质量不同,但都在一定范围之内解析:相对分子质量大小不同的多种成分在通过凝胶时,按照相对分子质量大小“排队”,从而将各种成分分开。
在每种凝胶分离范围之外的分子,在不改变凝胶种类的情况下是很难分离的。
答案:D2.下列关于凝胶色谱法的原理及操作,不正确的是( )A.是利用凝胶把分子大小不同的物质分离开的一种方法B.在洗脱过程中,大分子不能进入凝胶内部而最先流出;小分子因进入凝胶内部而流速缓慢,后流出C.凝胶内部有很微细的多孔网状结构,其孔隙大小与被分离的物质分子的大小无相应关系D.一般情况下,凝胶对要分离的物质没有吸附作用,因此所有要分离的物质都应该被洗脱出来解析:选用不同种凝胶,其立体网状结构不同,孔隙大小不同,因此可分离出的分子大小也不同。
凝胶一般对分离的物质无吸附作用,所有要分离的物质都应该被洗脱出来,这是凝胶色谱法与一般层析法的不同。
答案:C3.下列关于凝胶柱上加入样品和洗脱操作的叙述,不正确的是( )A.加样前要使柱内凝胶面上的缓冲液下降到与凝胶面平齐B.让吸管管口沿管壁环绕移动贴壁加样至色谱柱顶端,不要破坏凝胶面C.打开下端出口,待样品完全进入凝胶层后,直接连接缓冲液洗脱瓶开始洗脱D.待红色的蛋白质接近色谱柱底端时,每5 mL收集一管,连续收集流出液解析:样品完全进入凝胶层后,加入磷酸缓冲液到适当高度,再连接缓冲液洗脱瓶,开始洗脱。
答案:C4.凝胶色谱柱制作的程序一般是( )①橡皮塞打孔②挖凹穴③装玻璃管④盖尼龙网⑤盖尼龙纱⑥将橡皮塞插入玻璃管⑦接尼龙管、装螺旋夹⑧柱顶插入安装了玻璃管的橡皮塞A.①→③→④→⑤→⑥→⑧→⑦→②B.①→②→③→④→⑤→⑥→⑦→⑧C.①→②→③→④→⑥→⑤→⑧→⑦D.①→②→③→⑦→⑥→⑤→⑧→④解析:凝胶柱制作的一般流程是:选择玻璃管→选择合适的橡皮塞→打孔→挖凹穴→装玻璃管→盖尼龙网→盖尼龙纱→将橡皮塞插入玻璃管→接尼龙管→装螺旋夹→柱顶插入安装了玻璃管的橡皮塞。
高中生物 专题五 DNA和蛋白质技术 课题3 血红蛋白的提取与分离作业(含解析)新人教版选修1-新人
课题3 血红蛋白的提取与分离一、选择题1.分离血红蛋白时,将搅拌好的混合液转移到离心管中,以2 000 r/min的速度离心10 min后,可以明显看到试管中的溶液分为4层。
下列描述中,正确的是( A ) A.第1层为无色透明的甲苯层B.第2层为红色透明层,含血红蛋白C.第4层为白色薄层固体,是脂溶性沉淀物D.第3层为暗红色沉淀物,含未破裂的细胞[解析]第1层为无色透明的甲苯层;第2层为白色薄层固体,是脂溶性物质的沉淀层;第3层是红色透明液体,是血红蛋白的水溶液;第4层是其他杂质的暗红色沉淀物。
2.关于凝胶色谱柱的装填,除哪项外均为正确解释( D )A.交联葡聚糖凝胶(G-75)“G”表示凝胶的交联程度、膨胀程度及分离X围,75表示凝胶得水值B.色谱柱内不能有气泡存在,一旦发现有气泡,必须重装C.用300 mL物质的量浓度为20 mmol/L的磷酸缓冲液充分洗涤平衡凝胶12 hD.凝胶用自来水充分溶胀后,配成凝胶悬浮液[解析]本实验中使用的交联葡聚糖凝胶(G-75),其中G表示凝胶的交联程度、膨胀程度及分离X围,75表示凝胶得水值,即每克凝胶膨胀时吸水7.5 g,A正确;气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序,降低分离效果,因此,一旦发现有气泡,必须重装,B正确;在凝胶色谱柱装填完之后,应在约50 cm高的操作压下,用300 mL物质的量浓度为20 mmol/L的磷酸缓冲液充分洗涤平衡凝胶12小时,以使凝胶装填紧密,C正确;凝胶溶胀时,应使用蒸馏水将其充分溶胀,制成凝胶悬浮液,D错误。
3.将搅拌好的混合液转移到离心管中,离心后,可以明显看到试管中的溶液分为4层,其中第3层是( C )A.无色透明的甲苯层B.脂溶性物质的沉淀层C.血红蛋白的水溶液D.其他杂质的暗红色沉淀物[解析]分离血红蛋白溶液时,将搅拌好的混合液转移到离心管中,经过中速长时离心后,可明显看到试管中溶液分为4层,从上往下数,第1层为甲苯层,第2层为脂溶性物质的沉淀层,第3层为血红蛋白水溶液,第4层为杂质沉淀层。
2020高中生物 专题5 DNA和蛋白质技术 课题3 血红蛋白的提取和分离练习 新人教版选修1
课题3 血红蛋白的提取和分离1.下列试剂可用于血红蛋白释放的是( )①0.9%的生理盐水②甲苯③磷酸缓冲液④蒸馏水⑤柠檬酸钠A.②④B.①④C.④⑤D.①③解析:0.9%的生理盐水是洗涤红细胞是应用的试剂,不能用于血红蛋白释放;甲苯的作用是溶解细胞膜的磷脂,加速血红蛋白的释放;磷酸缓冲液用于粗分离蛋白质,不能用于释放血红蛋白;蒸馏水作用是使红细胞吸水胀破,释放其中的血红蛋白;柠檬酸钠的作用是采血时,防止血液凝固,不能用于血红蛋白的释放。
答案:A2.在血红蛋白分离过程中如果红色带区歪曲、散乱、变宽,与其有关的是( )A.凝胶色谱柱的制作B.色谱柱的装填C.洗脱过程D.样品的处理解析:在血红蛋白分离过程中如果红色带区歪曲、散乱、变宽,说明色谱柱制作不成功,可能是凝胶装填不紧密、不均匀,或者存在气泡,打乱了洗脱次序所致。
答案:B3.下列有关“血红蛋白提取和分离”实验的正确叙述是( )A.用蒸馏水进行红细胞的洗涤,其目的是去除细胞表面的杂蛋白B.将血红蛋白溶液进行透析,其目的是去除相对分子质量较大的杂质C.血红蛋白释放时加入有机溶剂,其目的是使血红蛋白溶于有机溶剂D.整个过程不断用磷酸缓冲液处理,是为了维持血红蛋白的结构解析:对红细胞洗涤时应该用生理盐水,不能用蒸馏水,A错误;将血红蛋白溶液进行透析,其目的是去除相对分子质量较小的杂质,B错误;血红蛋白释放时加入有机溶剂,其目的是溶解磷脂,加速血红蛋白的释放,C错误;整个过程不断用磷酸缓冲液处理,是为了维持pH相对稳定,防止和血红蛋白的结构发生改变,D正确。
答案:D4.凝胶色谱柱取长为40 cm,内径为1.6 cm,有关说法中,不正确的是( )A.一般凝胶色谱柱直径的大小不会影响分离的效果B.凝胶色谱柱过高,超过1 m,不影响分离的效果C.凝胶色谱柱过矮,则影响混合物的分离度D.凝胶色谱柱直径过大会耗用过多洗脱液,样品的稀释度过大解析:一般凝胶色谱柱直径的大小不影响分离的效果,但是直径过大会造成洗脱液体积增大,样品的稀释度过大,因此应选择直径不超过2 cm的色谱柱。
高中生物 专题5 DNA和蛋白质技术 课题3 血红蛋白的提取和分离练习 新人教版选修1
课题3血红蛋白的提取和分离蛋白质分离的原理和方法 1.蛋白质分离的理论依据2.分离的方法 (1)凝胶色谱法:①概念:也称作分配色谱法,是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法。
②凝胶⎩⎪⎨⎪⎧ 形态:微小的多孔球体组成:大多数由多糖类化合物构成结构:内部有许多贯穿的通道③原理:相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道,路程较长,移动速度较慢,通过凝胶的时间较长;相对分子质量较大的蛋白质无法进入凝胶内部的通道,只能在凝胶外部移动,路程较短,移动速度较快,通过凝胶的时间较短。
(2)电泳:①概念:指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程。
②原理:在一定的pH 下,多肽、核酸等生物大分子的可解离基团会带上正电或负电,在电场的作用下,这些带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动。
③影响电泳速率的因素:1.透析法分离蛋白质的目的是除去小分子杂质。
2.利用凝胶色谱法分离蛋白质时,相对分子质量大的先洗脱出来,相对分子质量小的后洗脱出来。
3.在电泳中,待分离样品中分子带电性质的差异以及分子本身的大小、形状都会影响分子的迁移速度。
4.SDS —聚丙烯酰胺凝胶电泳的迁移速率完全取决于分子的大小。
5.蛋白质提取和分离的一般步骤是:样品处理与粗分离、④方法:常用的电泳方法有琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳。
3.缓冲溶液(1)作用:在一定范围内,抵制外界的酸和碱对溶液pH的影响,维持pH基本不变。
(2)配制:由1~2种缓冲剂溶解于水中配制而成,通过调节缓冲剂的使用比例就可以得到不同pH范围内使用的缓冲液。
[跟随名师·解疑难]1.凝胶色谱法(1)凝胶:是一些微小多孔的球体,内含许多贯穿的通道,具有多孔的凝胶,又称为分子筛。
(2)原理:项目相对分子质量大相对分子质量小直径大小大于凝胶颗粒空隙直径,被排阻在外面小于凝胶颗粒空隙直径,可以进入颗粒内部运动方式垂直向下移动无规则扩散进入凝胶颗粒运动速度较快较慢运动路程较短较长洗脱次序先从凝胶柱洗脱出来后从凝胶柱洗脱出来(1)琼脂糖凝胶电泳:由于琼脂糖本身不带电荷,所以,各种分子在电场中的迁移速率因各种分子的带电性质差异、分子大小、形状不同而不同,从而得以分离。
高中生物专题5DNA和蛋白质技术5.3血红蛋白的提取和分离练习新人教版选修55
课题3 血红蛋白的提取和分离基础巩固1电泳过程中,什么样的分子迁移速度最快?( )A.纤维状、大分子B.纤维状、小分子C.球状、大分子D.球状、小分子解析:电泳是利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小、形状的不同将样品中各分子分离。
一般来说,球状分子比纤维状分子移动速度快,小分子比大分子移动速度快。
答案:D2蛋白质提取和分离分为哪几步?( )A.样品处理、凝胶色谱操作、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳B.样品处理、凝胶色谱操作、纯化C.样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定D.样品处理、纯化、粗分离、纯度鉴定答案:C3选用红细胞作为分离蛋白质的实验材料,其原因是( )A.血红蛋白是有色蛋白B.红细胞无细胞核C.红细胞中血红蛋白含量高D.红细胞中DNA含量高解析:选用红细胞作为蛋白质分离的实验材料,是因为在红细胞的组成中,除水分以外,约90%是血红蛋白。
答案:C4洗涤红细胞时,所采用的离心方法是( )A.低速长时间离心B.低速短时间离心C.高速长时间离心D.高速短时间离心解析:高速或长时间离心,会导致白细胞和淋巴细胞一同沉淀,得不到纯净的红细胞,进而影响血红蛋白的提取纯度。
答案:B5在蛋白质的提取和分离中,关于对样品处理及粗分离过程的分析,正确的是( )A.洗涤红细胞的目的是去除血浆中的葡萄糖、无机盐B.洗涤时离心速度过小,时间过短,白细胞等会沉淀,达不到分离的效果C.洗涤过程选用质量分数为0.1%的NaCl溶液D.透析的目的是去除样品中相对分子质量较小的杂质解析:洗涤红细胞的目的是去除血浆中的杂蛋白;洗涤时离心速度过高、时间过长,白细胞等会沉淀,达不到分离的效果;洗涤过程应选用质量分数为0.9%的NaCl溶液。
答案:D6下列关于凝胶色谱柱装填的叙述,错误的是( )A.交联葡聚糖凝胶(Sephadex G-75)“G”表示凝胶的交联程度、膨胀程度及分离范围,75表示凝胶得水值B.色谱柱内不能有气泡存在,一旦发现有气泡,必须重装C.用300 mL物质的量浓度为20 mmol/L的磷酸缓冲液充分洗涤平衡凝胶12 hD.凝胶用自来水充分溶胀后,配成凝胶悬浮液解析:本实验中使用的交联葡聚糖凝胶(Sephadex G-75),其中G表示凝胶的交联程度、膨胀程度及分离范围,75表示凝胶得水值,即每克凝胶膨胀时吸水7.5 g;气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序,降低分离效果,因此,一旦发现有气泡,必须重装;在洗脱过程中,应在约50 cm 高的操作压下,用300 mL物质的量浓度为20 mmol/L的磷酸缓冲液充分洗涤平衡凝胶12 h,以使凝胶装填紧密;装填色谱柱前,应使用蒸馏水将凝胶充分溶胀,制成凝胶悬浮液。
高中生物专题5DNA和蛋白质技术课题3血红蛋白的提取和分离测评(含解析)新人教版选修
课题3 血红蛋白的提取和分离课后篇巩固提升基础巩固1.凝胶柱制作的顺序一般是( )①橡皮塞打孔②挖凹穴③装玻璃管④盖尼龙网⑤盖尼龙纱⑥将橡皮塞插入玻璃管⑦接尼龙管、装螺旋夹⑧柱顶插入安装玻璃管的橡皮塞A.①③④⑤⑥⑧⑦②B.①②③④⑤⑥⑦⑧C.①②③④⑥⑤⑧⑦D.①②③⑦⑥⑤⑧④:选择合适的橡皮塞→打孔→挖凹穴→装玻璃管→盖尼龙网→盖尼龙纱→将橡皮塞插到玻璃管→接尼龙管→装螺旋夹→柱顶插入安装玻璃管的橡皮管。
2.下面关于利用凝胶色谱法分离蛋白质的说法,错误的是( )A.凝胶是一些具有多孔的微小球体,相对分子质量较小的蛋白质可以进入凝胶颗粒内部,相对分子质量较小的蛋白质可以进入凝胶颗粒内部,路程长,移动的速度慢,A项正确;相对分子质量小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道,路程长,移动的速度慢;相对分子质量大的蛋白质不容易进入凝胶内部的通道,路程短,移动的速度快。
故最后从层析柱中洗脱出来的是相对分子质量最小的蛋白质,B项正确;红细胞的洗涤效果与洗涤次数、离心速度和离心时间有关,C项错误;电泳法是利用待测样品中各种分子带电性质的差异和分子本身的大小、形状不同,使带电分子产生不同的迁移速度,从而实现样品中各种分子的分离或鉴定。
判断纯化的蛋白质是否达到要求可以采用电泳法,D项正确。
3.下列关于血红蛋白提取和分离实验中样品处理步骤的描述,正确的是( )A.红细胞的洗涤:加入蒸馏水,缓慢搅拌,低速短时间离心B.血红蛋白的释放:加入生理盐水和甲苯,置于磁力搅拌器上充分搅拌C.分离血红蛋白:将搅拌好的混合液离心、过滤后,用分液漏斗分离D.透析:将血红蛋白溶液装入透析袋,置于pH为4.0的磷酸缓冲液中透析12 h,应加入生理盐水,防止细胞破裂;将血红蛋白从红细胞中释放时,需要加入蒸馏水,以便使红细胞破裂释放出血红蛋白;透析时,应将透析袋置于pH为7.0的磷酸缓冲液中透析12h。
4.红细胞中含有大量血红蛋白,我们可以选用鼠、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验来提取和分离血红蛋白。
高中生物专题5DNA和蛋白质技术课题3血红蛋白的提取和分离练习新人教版选修1
课题3 血红蛋白的提取和分离1.下列试剂可用于血红蛋白释放的是( )①0.9%的生理盐水②甲苯③磷酸缓冲液④蒸馏水⑤柠檬酸钠A.②④B.①④C.④⑤D.①③解析:0.9%的生理盐水是洗涤红细胞是应用的试剂,不能用于血红蛋白释放;甲苯的作用是溶解细胞膜的磷脂,加速血红蛋白的释放;磷酸缓冲液用于粗分离蛋白质,不能用于释放血红蛋白;蒸馏水作用是使红细胞吸水胀破,释放其中的血红蛋白;柠檬酸钠的作用是采血时,防止血液凝固,不能用于血红蛋白的释放。
答案:A2.在血红蛋白分离过程中如果红色带区歪曲、散乱、变宽,与其有关的是( )A.凝胶色谱柱的制作B.色谱柱的装填C.洗脱过程D.样品的处理解析:在血红蛋白分离过程中如果红色带区歪曲、散乱、变宽,说明色谱柱制作不成功,可能是凝胶装填不紧密、不均匀,或者存在气泡,打乱了洗脱次序所致。
答案:B3.下列有关“血红蛋白提取和分离”实验的正确叙述是( )A.用蒸馏水进行红细胞的洗涤,其目的是去除细胞表面的杂蛋白B.将血红蛋白溶液进行透析,其目的是去除相对分子质量较大的杂质C.血红蛋白释放时加入有机溶剂,其目的是使血红蛋白溶于有机溶剂D.整个过程不断用磷酸缓冲液处理,是为了维持血红蛋白的结构解析:对红细胞洗涤时应该用生理盐水,不能用蒸馏水,A错误;将血红蛋白溶液进行透析,其目的是去除相对分子质量较小的杂质,B错误;血红蛋白释放时加入有机溶剂,其目的是溶解磷脂,加速血红蛋白的释放,C错误;整个过程不断用磷酸缓冲液处理,是为了维持pH相对稳定,防止和血红蛋白的结构发生改变,D正确。
答案:D4.凝胶色谱柱取长为40 cm,内径为1.6 cm,有关说法中,不正确的是( )A.一般凝胶色谱柱直径的大小不会影响分离的效果B.凝胶色谱柱过高,超过1 m,不影响分离的效果C.凝胶色谱柱过矮,则影响混合物的分离度D.凝胶色谱柱直径过大会耗用过多洗脱液,样品的稀释度过大解析:一般凝胶色谱柱直径的大小不影响分离的效果,但是直径过大会造成洗脱液体积增大,样品的稀释度过大,因此应选择直径不超过2 cm的色谱柱。
【优质试卷】2019-2020高中生物 专题5 DNA和蛋白质技术 课题3 血红蛋白的提取和分离练习 新人教版选修1
课题3 血红蛋白的提取和分离1.下列试剂可用于血红蛋白释放的是( )①0.9%的生理盐水②甲苯③磷酸缓冲液④蒸馏水⑤柠檬酸钠A.②④B.①④C.④⑤D.①③解析:0.9%的生理盐水是洗涤红细胞是应用的试剂,不能用于血红蛋白释放;甲苯的作用是溶解细胞膜的磷脂,加速血红蛋白的释放;磷酸缓冲液用于粗分离蛋白质,不能用于释放血红蛋白;蒸馏水作用是使红细胞吸水胀破,释放其中的血红蛋白;柠檬酸钠的作用是采血时,防止血液凝固,不能用于血红蛋白的释放。
答案:A2.在血红蛋白分离过程中如果红色带区歪曲、散乱、变宽,与其有关的是( )A.凝胶色谱柱的制作B.色谱柱的装填C.洗脱过程D.样品的处理解析:在血红蛋白分离过程中如果红色带区歪曲、散乱、变宽,说明色谱柱制作不成功,可能是凝胶装填不紧密、不均匀,或者存在气泡,打乱了洗脱次序所致。
答案:B3.下列有关“血红蛋白提取和分离”实验的正确叙述是( )A.用蒸馏水进行红细胞的洗涤,其目的是去除细胞表面的杂蛋白B.将血红蛋白溶液进行透析,其目的是去除相对分子质量较大的杂质C.血红蛋白释放时加入有机溶剂,其目的是使血红蛋白溶于有机溶剂D.整个过程不断用磷酸缓冲液处理,是为了维持血红蛋白的结构解析:对红细胞洗涤时应该用生理盐水,不能用蒸馏水,A错误;将血红蛋白溶液进行透析,其目的是去除相对分子质量较小的杂质,B错误;血红蛋白释放时加入有机溶剂,其目的是溶解磷脂,加速血红蛋白的释放,C错误;整个过程不断用磷酸缓冲液处理,是为了维持pH相对稳定,防止和血红蛋白的结构发生改变,D正确。
答案:D4.凝胶色谱柱取长为40 cm,内径为1.6 cm,有关说法中,不正确的是( )A.一般凝胶色谱柱直径的大小不会影响分离的效果B.凝胶色谱柱过高,超过1 m,不影响分离的效果C.凝胶色谱柱过矮,则影响混合物的分离度D.凝胶色谱柱直径过大会耗用过多洗脱液,样品的稀释度过大解析:一般凝胶色谱柱直径的大小不影响分离的效果,但是直径过大会造成洗脱液体积增大,样品的稀释度过大,因此应选择直径不超过2 cm的色谱柱。
高中生物专题5DNA和蛋白质技术课题3血红蛋白的提取和分离学业分层测评新人教版选修1
专题5 DNA和蛋白质技术课题3 血红蛋白的提取和分离学业分层测评(建议用时:45分钟)[学业达标]1.下列有关凝胶色谱法的叙述,不正确的是( )A.凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法B.目前经常使用的凝胶有交联葡聚糖、聚丙烯酰胺和琼脂糖等C.大分子物质后被洗脱出来,小分子物质先被洗脱出来D.凝胶色谱法的原理是不同大小的分子所经的路径不同而得以分离【解析】相对分子质量较小的蛋白质由于扩散作用进入凝胶颗粒内部而使其所经过的路程较长;相对分子质量较大的蛋白质被排阻在凝胶颗粒外面,在颗粒之间迅速通过。
因此,大分子物质先被洗脱出来,小分子物质后被洗脱出来。
【答案】 C2.凝胶色谱法分离蛋白质的原理是( )A.根据蛋白质分子与凝胶的亲和力的大小B.根据蛋白质相对分子质量的大小C.根据蛋白质所带电荷的多少D.根据蛋白质溶解度的大小【解析】凝胶色谱法所用的凝胶实际上是一些微小多孔的球体,在小球体内部有许多贯穿的通道,相对分子质量小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道,路程较长,移动速度较慢;相对分子质量较大的蛋白质只能在凝胶外部移动,路程较短,移动速度较快,从而使相对分子质量不同的蛋白质分子得以分离。
故选B。
【答案】 B3.洗涤红细胞时,离心所采用的方法是( )A.低速长时间离心B.低速短时间离心C.高速长时间离心D.高速短时间离心【解析】高速或长时间离心,会导致白细胞和淋巴细胞一同沉淀,得不到纯净的红细胞,而影响后面血红蛋白的提取纯度。
【答案】 B4.对在凝胶柱上加入样品和洗脱的操作,不正确的是( )A.加样前要使柱内凝胶面上的缓冲液下降到与凝胶面平齐B.让吸管管口沿管壁环绕移动,贴壁加样至色谱柱顶端,不要破坏凝胶面C.打开下端出口,待样品完全进入凝胶层后,直接连接缓冲液洗脱瓶,开始洗脱D.待红色的蛋白质接近色谱柱底端时,用试管收集流出液,每5 mL收集一管,连续收集流出液【解析】打开下端出口,待样品完全进入凝胶层后,关闭下端出口,再用同样的方法小心加入适量的20 mmol/L的磷酸缓冲液到适当高度,然后连接缓冲液洗脱瓶,打开下端出口,开始洗脱。
高中生物专题5DNA和蛋白质技术3血红蛋白的提取和分离课后检测含解析新人教版选修1
血红蛋白的提取和分离一、选择题(每小题4分,共24分)1.已知某样品中存在甲、乙、丙、丁、戊五种物质,其分子大小、电荷的性质和数量情)况如图所示。
下列叙述正确的是( DB.若五种物质为蛋白质,则用凝胶色谱柱分离时,甲的移动速度最快C.将样品装入透析袋中透析12 h,若分子乙保留在袋内,则分子甲也保留在袋内D.若五种物质为蛋白质,用SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳分离样品中的蛋白质分子,则分子甲和分子丙形成的电泳带相距最远解析:分子戊分子量大于甲,以2 000 r/min的速度离心10 min,若分子戊存在于沉淀中,则分子甲不存在于沉淀中,A错。
丙的分子量最大,用凝胶色谱柱分离时,丙的移动速度最快,B错。
透析12 h,由于甲分子量较小,若分子乙保留在袋内,则分子甲不保留在袋内,C错。
分子甲和分子丙相差最大,移动速度相差最大,D正确。
2.有关凝胶色谱法和电泳法的说法正确的是( A )A.它们都是分离蛋白质的重要方法B.它们的原理相同C.使用凝胶色谱法需要用缓冲溶液而电泳不需要D.以上说法都正确解析:凝胶色谱法和电泳法都是分离蛋白质的重要方法,A正确;凝胶色谱法和电泳法的原理不同,凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小来分离蛋白质的,而电泳法是根据待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小、形状不同,使带电分子产生不同的迁移速度,从而实现样品中各种分子的分离,B错误;凝胶色谱法和电泳法都要用缓冲溶液来调节溶液的酸碱度,C错误;由A、B和C选项可知,B和C都错误,D错误。
3.将经处理破裂后的红细胞混合液以2 000 r/min的速度离心10 min后,离心管中的溶液分为四层,从上到下的顺序依次是( D )A.血红蛋白、甲苯层、脂溶性物质层、沉淀层B.甲苯层、沉淀层、血红蛋白、脂溶性物质层C.脂溶性物质层、血红蛋白、甲苯层、沉淀层D.甲苯层、脂溶性物质层、血红蛋白、沉淀层1解析:混合液经离心后,按密度大小排列,在离心管中从上到下的顺序依次是:第1层为无色透明的甲苯层;第2层为白色薄层固体,是脂溶性物质沉淀层;第3层为红色透明液体,这是血红蛋白的水溶液;第4层为暗红色沉淀物,主要是红细胞破碎物沉淀。
2019_2020学年高中生物专题5DNA和蛋白质技术课题3血红蛋白的提取和分离精练(含解析)新人教版选修1
课题3 血红蛋白的提取和分离一、选择题1.SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳法中加入的SDS的作用是( )A.增大蛋白质的相对分子质量B.将蛋白质分解成单个氨基酸C.掩盖不同蛋白质分子间的电荷差别D.增加不同蛋白质分子间的电荷差别解析:选C SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳法中加入SDS的目的是使蛋白质完全变性,解聚成单条肽链;同时SDS所带负电荷的量大大超过了蛋白质分子原有的电荷量,因而掩盖了不同蛋白质间的电荷差别。
2.下列叙述中错误的是( )A.改变NaCl溶液的浓度只能使DNA溶解而不能使其析出B.在沸水浴中,DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色C.用电泳法可分离带电性质、分子大小和形状不同的蛋白质D.用透析法可除去蛋白质样品中的小分子物质解析:选A 在不同浓度的NaCl溶液中DNA的溶解度不同,在物质的量浓度为0.14 mol/L 的NaCl溶液中溶解度最小,DNA析出,呈丝状物,过滤后存在于黏稠物中;在物质的量浓度为2 mol/L的NaCl溶液中溶解度最大,DNA呈溶解状态,过滤后存在于滤液中。
3.如凝胶色谱柱取长为40 cm,内径为1.6 cm,下列有关说法不正确的是( )A.凝胶色谱柱直径的大小不影响分离的效果,但直径过大造成洗脱液体积增大,样品的稀释度过大B.凝胶色谱柱过高超过 1 m,不影响分离的效果,但耗用洗脱液过多,样品的稀释度过大C.凝胶色谱柱过矮,则影响混合物的分离度D.以上说法有两种正确解析:选B 凝胶色谱柱直径的大小不影响分离的效果,但是直径过大会造成洗脱液体积增大,样品的稀释度过大,因此应选择直径不超过2 cm的色谱柱。
凝胶色谱柱的高度与分离度有关,一般不超过1 m,过短也会影响混合物的分离。
4.下列说法不正确的是( )A.血红蛋白在释放时,加蒸馏水到原血液的体积,再加40%体积的甲苯,充分搅拌10 min,红细胞破裂释放出血红蛋白B.血红蛋白溶液离心后分为4层,第1层为白色薄层固体C.血红蛋白溶液离心后分为4层,第4层为其他杂质的暗红色沉淀物D.血红蛋白溶液离心后分为4层,第3层为红色透明液体,这是血红蛋白的水溶液解析:选B 血红蛋白溶液离心后分为4层,其中第1层为无色透明甲苯层;第2层为白色薄层固体,是脂溶性物质沉淀层;第3层为红色透明的血红蛋白的水溶液层;第4层为暗红色杂质沉淀层。
2019-2020学年度高中生物选修1《生物技术实践》专题5 DNA和蛋白质技术课题3 血红蛋白的提取和分离人教版复
2019-2020学年度高中生物选修1《生物技术实践》专题5 DNA和蛋白质技术课题3 血红蛋白的提取和分离人教版复习特训第九十三篇第1题【单选题】下列叙述中错误的是( )A、改变NaCl溶液的浓度只能使DNA溶解而不能使其析出B、在沸水浴中,DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色C、用电泳法可分离带点性质、分子大小和形状不同的蛋白质D、用透析法可去除蛋白质样品中的小分子物质【答案】:【解析】:第2题【单选题】下列有关说法不正确的是( )A、探究果胶酶最适用量的实验中可先将果泥加热煮沸后冷却备用,目的是排除果泥中原有的酶对实验结果的干扰B、探究温度对酶活性的影响的实验中,将酶溶液加入底物后,迅速将温度调至设定的温度,并持续反应一段时间C、采用稀释涂布平板法计数某种细菌的原理是,当样品稀释度足够高时,固体平板上的一菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌,故可通过平板上的菌落数推测样品中的活菌数D、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,不同蛋白质分子的迁移率完全取决于分子的大小【答案】:【解析】:第3题【单选题】在血红蛋白的整个提取过程中,不断用磷酸缓冲液处理的目的是( )A、磷酸缓冲液会加速血红蛋白的提取过程B、血红蛋白是一种两性物质,需要酸中和C、防止血红蛋白被O2氧化D、让血红蛋白处在稳定的pH范围内,维持其结构和功能【答案】:【解析】:第4题【单选题】以下对DNA 和血红蛋白的提取与分离(鉴定)实验的分析错误的是( )A、都要用猪血细胞来做实验材料B、在DNA 的粗提取中可利用DNA在不同浓度盐溶液中的溶解度不同而析出C、在实验中都要进行除杂处理以便得到较纯净的DNA 或血红蛋白D、将析出的DNA 溶解在2mol/L的NaCl溶液中,加入二苯胺试剂沸水浴后呈现蓝色【答案】:【解析】:第5题【单选题】将搅拌好的混合液离心来分离血红蛋白溶液时,第2层是( )A、甲苯B、血红蛋白水溶液C、脂溶性物质的沉淀层D、其他杂质的沉淀【答案】:【解析】:第6题【单选题】在蛋白质的提取和分离实验中,下列对样品处理过程中,正确的是( )A、洗涤红细胞的目的是去除血浆中的葡萄糖、无机盐B、洗涤时离心速度过小,时间过短,白细胞等会沉淀,达不到分离的效果C、洗涤过程选用0.1%的生理盐水D、透析的目的是去除样品中相对分子质量较小的杂质【答案】:【解析】:第7题【单选题】使用凝胶色谱法分离蛋白质时,洗涤红细胞、释放血红蛋白和透析过程中,分别使用下列哪些试剂( ) ①蒸馏水②生理盐水③20 mmol/L的磷酸缓冲液④清水⑤柠檬酸钠A、①③⑤B、①②③C、②①③D、④①③【答案】:【解析】:第8题【单选题】下列有关“血红蛋白提取和分离”的相关叙述中,正确的是( )A、用蒸馏水进行红细胞的洗涤,其目的是去除细胞表面杂蛋白B、将血红蛋白溶液进行透析,其目的是去除相对分子质量较大的杂质C、血红蛋白释放时加入有机溶剂,其目的是使血红蛋白溶于有机溶剂D、整个过程不断用磷酸缓冲液处理,是为了维持血红蛋白的结构【答案】:【解析】:第9题【单选题】血红蛋白的提取和分离中,将搅拌好的混合液转移到离心管中,离心后,可以明显看到试管中的溶液分为4层,其中第3层是( )A、无色透明的甲苯层B、脂溶性物质的沉淀层C、血红蛋白的水溶液D、其他杂质的暗红色沉淀物【答案】:【解析】:第10题【单选题】在血红蛋白分离过程中如果红色带区歪曲、散乱、变宽,与其有关的是( )A、电泳B、色谱柱的装填C、洗脱过程D、样品的处理【答案】:【解析】:第11题【单选题】以下关于血红蛋白提取和分离的过程及原理叙述正确的是( )A、红细胞洗涤过程中要加入5倍体积的蒸馏水,重复洗涤3次B、将血红蛋白溶液放在质量分数为0.9%的NaCl溶液中透析12小时C、凝胶装填在色谱柱内要均匀,不能有气泡存在D、蛋白质通过凝胶时,相对分子质量较大的移动速度慢【答案】:【解析】:第12题【单选题】对下列实验操作与实验目的分析,错误的是( )A、提取绿叶中的色素时加入碳酸钙以防止色素被破坏B、观察细胞中DNA和RNA分布用盐酸形成酸性环境C、凝胶色谱法分离蛋白质加入缓冲液以维持pH稳定D、萃取胡萝卜素采用水浴加热的方式以防止温度过高【答案】:【解析】:第13题【单选题】使用SDS—聚丙烯酰胺电泳的过程中,不同蛋白质的电泳迁移率完全取决于( )A、电荷的多少B、分子的大小C、肽链的多少D、分子形状的差异【答案】:【解析】:第14题【单选题】蛋白质的分离与纯化技术是蛋白质研究的重要技术。
高中生物专题5DNA和蛋白质技术课题3血红蛋白的提取和分离素材3新人教版选修1(new)
课题3 血红蛋白的提取和分离一览众山小三维目标1.尝试对血液中血红蛋白的提取和分离,体验从复杂体系中提取生物大分子的基本过程和方法.2.简述色谱法、电泳法等分离生物大分子的基本原理。
通过查资料或实际操作,理解这些方法的运用过程。
提高搜集获取信息、分析问题、解决问题的能力.学法指导本节从课题背景着手引出本节重点是凝胶色谱法的原理和方法。
理解凝胶色谱法的原理,可以结合教科书上的插图,对凝胶色谱法分离蛋白质的原理和过程有一个直观的认识。
具体实验中要注意凝胶拄充填时,应注意那些事项。
电泳的原理以及常用的两种方法是本课题的重点内容。
诱学导入材料:天然琼脂(agar)是一种多聚糖,主要由琼脂糖(约占80%)及琼脂胶组成。
琼脂糖是由半乳糖及其衍生物构成的中性物质,不带电荷,而琼脂胶是一种含硫酸根和羧基的强酸性多糖,由于这些基团带有电荷,在电场作用下能产生较强的电渗现象,加之硫酸根可与某些蛋白质作用而影响电泳速度及分离效果。
目前多用琼脂糖为电泳支持物进行平板电泳.问题:为什么运用电泳法能达到分离生物大分子的目的?导入:电泳利用了各种生物大分子带电性质的差异以及分子本身的大小、形状的不同,使带电分子产生了不同的迁移速度,从而达到分离各种分子的目的.尊敬的读者:本文由我和我的同事在百忙中收集整编出来,本文档在发布之前我们对内容进行仔细校对,但是难免会有不尽如人意之处,如有疏漏之处请指正,希望本文能为您解开疑惑,引发思考。
文中部分文字受到网友的关怀和支持,在此表示感谢!在往后的日子希望与大家共同进步,成长。
This article is collected and compiled by my colleagues and I in our busy schedule. We proofread the content carefully before the release of this article, but it is inevitable that there will be some unsatisfactory points. If there are omissions, please correct them. I hope this article can solve your doubts and arouse your thinking. Part of the text by the user's care and support, thank you here! I hope to make progress and grow with you in the future.。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
专题5 DNA和蛋白质技术课题3 血红蛋白的提取和分离1.下列试剂可用于血红蛋白释放的是( )①0.9%的生理盐水②甲苯③磷酸缓冲液④蒸馏水⑤柠檬酸钠A.②④B.①④C.④⑤D.①③解析:0.9%的生理盐水是洗涤红细胞是应用的试剂,不能用于血红蛋白释放;甲苯的作用是溶解细胞膜的磷脂,加速血红蛋白的释放;磷酸缓冲液用于粗分离蛋白质,不能用于释放血红蛋白;蒸馏水作用是使红细胞吸水胀破,释放其中的血红蛋白;柠檬酸钠的作用是采血时,防止血液凝固,不能用于血红蛋白的释放。
答案:A2.在血红蛋白分离过程中如果红色带区歪曲、散乱、变宽,与其有关的是( )A.凝胶色谱柱的制作B.色谱柱的装填C.洗脱过程D.样品的处理解析:在血红蛋白分离过程中如果红色带区歪曲、散乱、变宽,说明色谱柱制作不成功,可能是凝胶装填不紧密、不均匀,或者存在气泡,打乱了洗脱次序所致。
答案:B3.下列有关“血红蛋白提取和分离”实验的正确叙述是( )A.用蒸馏水进行红细胞的洗涤,其目的是去除细胞表面的杂蛋白B.将血红蛋白溶液进行透析,其目的是去除相对分子质量较大的杂质C.血红蛋白释放时加入有机溶剂,其目的是使血红蛋白溶于有机溶剂D.整个过程不断用磷酸缓冲液处理,是为了维持血红蛋白的结构解析:对红细胞洗涤时应该用生理盐水,不能用蒸馏水,A错误;将血红蛋白溶液进行透析,其目的是去除相对分子质量较小的杂质,B错误;血红蛋白释放时加入有机溶剂,其目的是溶解磷脂,加速血红蛋白的释放,C错误;整个过程不断用磷酸缓冲液处理,是为了维持pH相对稳定,防止和血红蛋白的结构发生改变,D正确。
答案:D4.凝胶色谱柱取长为40 cm,内径为1.6 cm,有关说法中,不正确的是( )A.一般凝胶色谱柱直径的大小不会影响分离的效果B.凝胶色谱柱过高,超过1 m,不影响分离的效果C.凝胶色谱柱过矮,则影响混合物的分离度D.凝胶色谱柱直径过大会耗用过多洗脱液,样品的稀释度过大解析:一般凝胶色谱柱直径的大小不影响分离的效果,但是直径过大会造成洗脱液体积增大,样品的稀释度过大,因此应选择直径不超过2 cm的色谱柱。
凝胶色谱柱的高度与分离度有关,一般不超过1 m。
答案:B5.下图表示血红蛋白提取和分离的部分实验装置,请回答下列问题:(1)血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分,其在红细胞中的作用体现了蛋白质具有________功能。
(2)甲装置中,B是血红蛋白溶液,则A是________;乙装置中,C溶液的作用是________。
(3)甲装置用于________,目的是__________________。
用乙装置分离蛋白质的方法叫________,是根据______________分离蛋白质的有效方法。
(4)用乙装置分离血红蛋白时,待__________________时,用试管收集流出液,每5 mL 收集一管,连续收集。
解析:(1)血红蛋白能携带氧气,体现了蛋白质具有运输功能。
(2)甲装置中,B是血红蛋白溶液,则A是磷酸缓冲液;乙装置中,C溶液的作用是洗脱血红蛋白。
(3)甲装置用于透析(粗分离),目的是去除样品中相对分子质量较小的杂质。
用乙装置分离蛋白质的方法叫凝胶色谱法,是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法。
(4)待红色的蛋白质接近色谱柱底端时,用试管收集流出液,每5 mL收集一管,连续收集。
答案:(1)运输(2)磷酸缓冲液洗脱血红蛋白(3)透析(粗分离) 去除样品中分子量较小的杂质凝胶色谱法相对分子质量的大小(4)红色的蛋白质接近色谱柱底端1.使用凝胶色谱法分离蛋白质实验中,相对分子质量不同的蛋白质在凝胶中的行进过程,可表示为下图中( )解析:凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法。
相对分子质量较小的蛋白质能进入凝胶内部通道,路程较长,移动速度较慢;相对分子质量大的蛋白质,路程较短,移动速度较快,首先洗脱出来。
答案:B2.使用SDS—聚丙烯酰胺电泳的过程中,不同蛋白质的电泳迁移率完全取决于( ) A.电荷的多少B.分子的大小C.肽链的多少D.分子形状的差异解析:SDS能与各种蛋白质形成蛋白质SDS复合物,SDS所带的负电荷量大大超过蛋白质分子原有的电荷量,因而掩盖了不同蛋白质间的电荷差别,使电泳迁移率完全取决于分子的大小。
答案:B3.在血红蛋白的整个提取过程中,不断用磷酸缓冲液处理的目的是( )A.防止血红蛋白被氧气氧化B.血红蛋白是一种碱性物质,需磷酸中和C.磷酸缓冲液会加速血红蛋白的提取过程D.让血红蛋白处在稳定的pH范围内,维持其结构和性质解析:磷酸缓冲液的作用是稳定pH,从而维持血红蛋白的结构和性质。
答案:D4.下列是关于血红蛋白的提取和分离实验中关键步骤,其中正确的是( )A.蛋白质的提取和分离一般可分为粗分离、样品处理、纯化、纯度鉴定等4步B.蛋白质的提取和分离实验可以以猪、牛、鸡、蛙等动物的血液为材料分离血红蛋白C.对样品的处理过程分为红细胞的洗涤、血红蛋白的释放、透析和分离血红蛋白等D.对蛋白质的纯化和纯度鉴定的方法使用最多的是SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳解析:蛋白质提取和分离的实验步骤一般包括样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定等4步,A错误;蛋白质的提取和分离实验一般用哺乳动物的成熟的红细胞作为实验材料分离血红蛋白,一般不要鸡、蛙等动物血液为材料分离血红蛋白,B错误;样品处理的一般步骤分为红细胞的洗涤、血红蛋白的释放、分离血红蛋白、透析等,C错误;对蛋白质的纯化和纯度鉴定的方法使用最多的是SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,D正确。
答案:D5.从细胞中提取某种特定的蛋白质比提取DNA难度大,其原因不是( )A.蛋白质对温度、盐浓度、pH等条件更敏感,更易失活B.蛋白质的空间结构多样,理化性质各不相同,使得蛋白质的提取没有统一的方法C.提取某种特定的蛋白质需据其特性摸索提取的程序D.提取血红蛋白程序可分为样品处理、粗分离、纯化、纯度的鉴定四大步解析:蛋白质对温度、盐浓度、pH等条件更敏感,更易失活,是提取某种特定的蛋白质比提取DNA难度大的原因,A错误;蛋白质的空间结构多样,理化性质各不相同,使得蛋白质的提取没有统一的方法,是提取某种特定的蛋白质比提取DNA难度大的原因,B错误;提取某种特定的蛋白质需据其特性摸索提取的程序是提取某种特定的蛋白质比提取DNA难度大的原因,C错误;提取血红蛋白程序可分为样品处理、粗分离、纯化、纯度的鉴定四大步,这只是某一种蛋白质的提取步骤,不是难度大的原因,D正确。
答案:D6.蛋白质的提取和分离分为哪几步( )A.样品处理、凝胶色谱操作、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳B.样品处理、凝胶色谱操作、纯化C.样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定D.样品处理、纯化、粗分离、纯度鉴定解析:蛋白质提取和分离的实验步骤一般包括样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定等4步。
答案:C7.下列对凝胶电泳的相关认识,错误的是( )A.蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶电泳中的迁移率只取决于分子的大小B.蛋白质在SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳中的迁移率完全取决于分子的大小C.SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳不仅用于蛋白质相对分子质量的测定,还可用于蛋白质混合组分的分离D.凝胶中加入SDS可以消除净电荷对迁移率的影响解析:SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳中蛋白质分子所带的负电荷远远超过天然蛋白质分子的负电荷,消除了不同蛋白质分子的电荷效应,使蛋白质分子相对迁移率的大小完全取决于相对分子质量的高低。
答案:A8.在血红蛋白的提取和分离实验中,下列操作正确的是( )A.分离红细胞时需去除上层透明的黄色血浆B.红细胞释放出血红蛋白时只需加入蒸馏水C.分离血红蛋白溶液是低速短时间离心D.洗脱时,待红色蛋白质下移即开始收集流出液解析:分离红细胞时要及时除去血浆蛋白。
释放红细胞时需要加入蒸馏水和甲苯。
分离血细胞时,要短时低速离心,即一般为500 r/min,离心2 min,否则白细胞会一同沉淀,达不到分离效果。
分离血红蛋白时要高速长时间离心,以2 000 r/min的速度离心10 min。
洗脱时待红色的蛋白质接近色谱柱底端用试管收集流出液。
答案:A9.以下关于猪血红蛋白提纯的描述,不正确的是( )A.洗涤血红细胞时,使用生理盐水可以防止红细胞破裂B.猪成熟红细胞中缺少细胞器和细胞核,提纯时杂蛋白较少C.血红蛋白的颜色可用于凝胶色谱法分离过程的监测D.在凝胶色谱法分离过程中,血红蛋白比分子量较小的杂蛋白移动慢解析:在凝胶色谱法分离蛋白质的过程中,相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道,路程较长,移动速度较慢;而相对分子质量较大的分子无法进入凝胶内部的通道,只能在凝胶外部移动,路程较短,移动速度较快。
所以血红蛋白分子比相对分子质量较小的杂分子移动速度要快。
答案:D10.下列有关提取和分离血红蛋白的叙述,错误的是( )A.样品的处理就是通过一系列操作收集到血红蛋白溶液B.通过透析可以去除样品中分子质量较大的杂质,此为样品的粗提取C.可通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除去,即样品的纯化D.可通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定血红蛋白的纯度解析:粗分离即透析,其目的是除去样品中相对分子质量较小的杂质,B错误。
答案:B11.如今人类已跨入了蛋白质时代,对蛋白质的研究和应用,首先需要获得高纯度的蛋白质。
请回答下列问题:(1)蛋白质的提取和分离一般分为四步:_________、__________、__________和纯度鉴定。
(2)如果要从红细胞中分离出血红蛋白,实验前取新鲜血液要在采血容器中预先加入柠檬酸钠,这样做的目的是________________。
(3)血红蛋白的提取又可以细分为:红细胞的洗涤、_________、分离血红蛋白溶液和__________。
其中分离血红蛋白溶液时需要用到__________(仪器)分离出下层红色透明液体。
(4)装填凝胶色谱柱时,要注意色谱柱内不能有气泡存在,一旦发现有气泡必须重新装。
这是因为______________________________________________________。
(5)欲探究色谱柱的高度是否影响蛋白质分离的因素,应把______________________作为自变量,把_________________________________作为无关变量,把________________作为因变量。
答案:(1)样品处理粗分离纯化(2)防止血液凝固(3)血红蛋白的释放透析分液漏斗(4)气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序,降低分离效果(5)色谱柱的高度变化缓冲液的用量和pH、样品的用量、温度等因素大小不同的蛋白质分子的间距12.红细胞含有大量血红蛋白,红细胞的机能主要是由血红蛋白完成的。