浅蓝菌素对人成骨肉瘤细胞U2-OS在裸鼠体内生长抑制的作用

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黄芩素在诱导骨肉瘤细胞株U2-OS凋亡过程中对Bax和Bcl-2mRNA表达的影响

黄芩素在诱导骨肉瘤细胞株U2-OS凋亡过程中对Bax和Bcl-2mRNA表达的影响宋江涛;郭卫春【期刊名称】《中国现代中药》【年(卷),期】2016(018)008【摘要】目的:研究黄芩素在诱导骨肉瘤细胞株U2-OS凋亡信号转导过程中对凋亡相关基因Bcl-2、Bax的影响.方法:采用RT-PCR检测黄芩素作用前、后骨肉瘤细胞株U2-OS中Bcl-2和Bax的mRNA表达变化情况,了解不同的黄芩素剂量和作用时间骨肉瘤细胞株U2-OS中凋亡蛋白Bcl-2和Bax表达变化,并计算Bcl-2/Bax比值.结果:与骨肉瘤组相比,黄芩素作用组Bcl-2的mRNA表达随着浓度增加和作用时间延长而递减,Bax的mRNA表达随着浓度增加和作用时间延长而递增,Bcl-2/Bax比值下降.结论:黄芩素能通过下调Bcl-2的mRNA表达和上调Bax 的mRNA表达而诱导骨肉瘤细胞凋亡.【总页数】3页(P977-979)【作者】宋江涛;郭卫春【作者单位】武汉大学人民医院骨科,湖北武汉430060;武汉大学人民医院骨科,湖北武汉430060【正文语种】中文【相关文献】1.核仁素表达下调对顺铂诱导人骨肉瘤细胞株SaOS-2增殖抑制和凋亡的影响 [J], 吴蓓;王万春;黎志宏2.螺内酯对急性心肌梗死心肌细胞凋亡相关基因Bcl-2mRNA及BaxmRNA表达影响 [J], 许香梅;任晓敏;刘曙光;刘海云;王晓燕;董士民3.石斛合剂对糖尿病模型大鼠胰岛细胞凋亡及凋亡相关基因Bax、Bcl-2mRNA表达的影响 [J], 高尤亮;施红;杨秀珍;余文珍;郑燕芳;王晓宁;江敏4.浅蓝菌素在诱导骨肉瘤细胞株U2-OS凋亡过程中对Bcl-2和Bax的影响 [J], 黄伟;舒勇;黄山虎;刘志礼;解志波;刘先明5.复元胶囊对实验性骨关节软骨细胞凋亡及Bax和Bcl-2mRNA表达的影响 [J], 周小莉;李荣亨因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

无血清培养基分离并鉴定U2OS人骨肉瘤肿瘤干细胞

无血清培养基分离并鉴定U2OS人骨肉瘤肿瘤干细胞摘要】目的应用无血清培养基分离U2OS人骨肉瘤肿瘤干细胞，并鉴定相关肿瘤标志物表达。

方法体外培养人骨肉瘤U2OS细胞株和U2OS人骨肉瘤肿瘤干细胞，免疫荧光检测U2OS人骨肉瘤肿瘤干细胞球中CD105表达。

采用免疫印迹法检测人骨肉瘤U2OS细胞株和U2OS人骨肉瘤肿瘤干细胞Nanog和Oct4蛋白表达。

采用半定量PCR检测人骨肉瘤U2OS细胞株和U2OS人骨肉瘤肿瘤干细胞SOX2、Nanog和Oct4 mRNA的表达。

结果荧光显微镜下可见，U2OS人骨肉瘤肿瘤干细胞球中部分细胞CD105呈阳性表达。

免疫印迹检测结果显示人骨肉瘤U2OS细胞株的Nanog和Oct4蛋白相对表达量为0.853±0.404和0.603 ±0.153，均明显低于U2OS人骨肉瘤肿瘤干细胞0.973±0.305 和0.827±0.322（均p<0.05）。

半定量PCR检测结果显示U2OS人骨肉瘤肿瘤干细胞SOX2、 Nanog和Oct4 mRNA的相对表达量为0.190±0.027、0.178±0.025、0.170±0.021，均明显高于人骨肉瘤U2OS细胞株0.032±0.009、0.086±0.016、0.019±0.006（均p<0.05）。

结论人骨肉瘤U2OS细胞株中存在肿瘤干细胞，无血清培养可用于分离培养人骨肉瘤肿瘤干细胞。

【关键词】骨肉瘤骨肉瘤干细胞无血清培养基悬浮培养【中图分类号】R730 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2014）31-0073-02骨肉瘤是一种起源于间叶组织的恶性肿瘤，多见于青少年。

是恶性程度最高的肿瘤之一[1] 。

尽管化疗结合手术的新型治疗方法改善了患者预后，但骨肉瘤患者在联合化疗时耐药患者的比例高于30%[2, 3] ，对于已转移的骨肉瘤，生存率并没有得到显著的提高，患者长期存活率只有65%左右。

Avastin抑制骨肉瘤裸鼠模型血管生成实验研究

Avastin抑制骨肉瘤裸鼠模型血管生成实验研究仲召阳;王东;李梦侠;卿毅;曹晓静;戴楠【期刊名称】《重庆医学》【年(卷),期】2009(38)19【摘要】目的观察Avastin抑制骨肉瘤裸鼠移植瘤血管生成并探讨其作用机制.方法人骨肉瘤细胞9901荷瘤裸鼠12只随机分为3组:对照组、Avastin低剂量组(2mg·kg-1·w-1)和Avastin高剂量组(5mg·kg-1·w-1),每周瘤内注射1次,共治疗2次,治疗过程中观察肿瘤生长情况.治疗后处死裸鼠,计算抑瘤率,并通过病理组织学观察、免疫组织化学和激光共聚焦观察肿瘤内微血管密度、坏死、增殖、凋亡和肿瘤细胞缺氧情况.结果 Avastin低剂量治疗组和Avastin高剂量治疗组的抑瘤率分别为32.87%、39.81%;对照组、Avastin低剂量治疗组和Avastin高剂量治疗组3组坏死的比例分别为2.01%、11.49%和12.15%.Avastin低剂量治疗组和Avastin高剂量治疗组的微血管密度及增殖指数明显低于对照组(P<0.05),凋亡指数明显高于对照组(P<0.05),但Avastin低剂量治疗组和Avastin高剂量治疗组的微血管密度、增殖指数和凋亡指数差异无统计学意义(P>0.05).EF-5和CD31免疫荧光双标激光共聚焦显微镜观察显示Avastin治疗组血管密度降低、组织缺氧加重.结论 Avastin能显著抑制骨肉瘤的血管生成和肿瘤细胞的增殖,诱导细胞凋亡,进而显著抑制裸鼠原位肿瘤的生长.【总页数】4页(P2454-2456,插1)【作者】仲召阳;王东;李梦侠;卿毅;曹晓静;戴楠【作者单位】第三军医大学大坪医院野战外科研究所肿瘤中心,重庆,400042;第三军医大学大坪医院野战外科研究所肿瘤中心,重庆,400042;第三军医大学大坪医院野战外科研究所肿瘤中心,重庆,400042;第三军医大学大坪医院野战外科研究所肿瘤中心,重庆,400042;第三军医大学大坪医院野战外科研究所肿瘤中心,重庆,400042;第三军医大学大坪医院野战外科研究所肿瘤中心,重庆,400042【正文语种】中文【中图分类】R738.1【相关文献】1.骨肉瘤VEGF表达及VEGF抗体抑制血管生成的实验研究 [J], 王东;仲召阳;李增鹏;张沁宏;何怡;卿毅2.内皮抑素治疗人骨肉瘤裸鼠模型的实验研究 [J], 王东;仲召阳;李增鹏;卿毅;张沁宏3.软骨血管生成抑制剂抑制血管生成的实验研究 [J], 沈先荣4.唑来膦酸联合多柔比星治疗人骨肉瘤裸鼠模型的实验研究 [J], 刘巍峰;牛晓辉;张清;徐海荣;郝林;丁易;袁润英;陈大福5.Avastin联合抗原致敏的DC-CTL细胞体外抑制口腔鳞癌细胞生长的实验研究[J], 蒋丽娟;郑阳;泥艳红;韩伟;黄晓峰;胡勤刚;王志勇因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

siRNA抑制骨肉瘤U2OS细胞系中SIRT6的表达及其生物学作用研究

siRNA抑制骨肉瘤U2OS细胞系中SIRT6的表达及其生物学作用研究余天;李娟;张伟凯;张帆【期刊名称】《中国癌症杂志》【年(卷),期】2018(028)010【摘要】背景与目的:sirtuin6(SIRT6)蛋白是对人体细胞生长、代谢调控及应激反应等具有重要作用的一种核蛋白,常在细胞核中发挥多种调控作用.但该蛋白在骨肉瘤中的作用还不清楚,本研究通过下调人骨肉瘤U2OS细胞系中SIRT6的表达,观察其对U2OS细胞的作用.方法:设计合成SIRT6的siRNA序列,通过LipofectamineTM2000转染U2OS细胞系,通过蛋白质印迹法(Western blot)检测SIRT6蛋白的表达情况,利用流式细胞术检测细胞凋亡,细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)法检测细胞增殖,Transwell法检测细胞侵袭和迁移能力,CCK-8法分析对紫杉醇的敏感性.结果:成功构建SIRT6 siRNA序列,Western blot检测转染后24、48和72 h的蛋白水平,实验组较对照组明显降低.流式细胞术检测细胞凋亡也显示实验组凋亡增加(P<0.05).Transwell法检测结果显示,实验组侵袭与迁移能力较对照组下降(P<0.05).CCK-8法检测细胞生长情况,可见经紫杉醇处理后实验组生长较对照组下降明显,差异有统计学意义(P<0.05).结论:下调骨肉瘤U2OS细胞中SIRT6的表达可以抑制骨肉瘤细胞侵袭,促进凋亡,并增强骨肉瘤细胞对紫杉醇的化疗敏感性.【总页数】5页(P721-725)【作者】余天;李娟;张伟凯;张帆【作者单位】华中科技大学同济医学院附属同济医院眼科,湖北武汉 430030;华中科技大学同济医学院附属协和医院干细胞研究与应用中心,湖北武汉 430022;华中科技大学同济医学院附属同济医院骨科,湖北武汉 430030;华中科技大学同济医学院附属同济医院骨科,湖北武汉 430030【正文语种】中文【中图分类】R738.1【相关文献】1.人 microRNA -194过表达及抑制表达慢病毒载体的构建及对人骨肉瘤细胞系SOSP-9607生物学特性的影响 [J], 韩康;杨彤涛;周勇;马保安;赵廷宝;卞娜;蔡成魁;颜世举;王鑫;肖春;孙聪;杨静2.siRNA抑制β-catenin表达在骨肉瘤MG63细胞系中的作用 [J], 张帆;陈安民;郭风劲;陈剑峰3.miR-21在人骨肉瘤细胞系U2OS体外侵袭中的作用及其机制 [J], 吕晨;陈鑫;朱雄白;林文军;王路;黄正湘;杨胜武4.miR-21在人骨肉瘤细胞系U2OS体外侵袭中的作用及其机制 [J], 吕晨; 陈鑫; 朱雄白; 林文军; 王路; 黄正湘; 杨胜武5.APE1 siRNA表达载体的构建及其对骨肉瘤细胞APE1表达的抑制作用 [J], 王东;仲召阳;李增鹏;张沁宏;卿毅;杨宇馨因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

GLP2促进骨肉瘤细胞向成骨细胞的定向分化并抑制骨肉瘤细胞的生长

GLP2促进骨肉瘤细胞向成骨细胞的定向分化并抑制骨肉瘤细
胞的生长
佚名
【期刊名称】《实用肿瘤学杂志》
【年(卷),期】2018(032)003
【摘要】研究人员发现GLP2在人骨肉瘤细胞的成骨分化过程中产生了积极作用。

该研究结果表明,GLP2在体内和体外抑制骨肉瘤细胞的生长。

机制研究揭示GLP2抑制核因子κB（NF-κB）的表达和活性,引起骨肉瘤细胞中c-Myc、PKM2和Cyclin D1的降低。

【总页数】1页(P197)
【正文语种】中文
【相关文献】
1.环氧化酶-2抑制药对肺癌细胞和骨肉瘤细胞生长的抑制作用 [J], 孙敬华;蔡林;
陈方舟
2.PTTG1 siRNA增加塞来昔布对骨肉瘤细胞生长抑制作用的实验研究 [J], 郝鑫宾; 李明伟
3.沉默SOX4抑制骨肉瘤细胞的生长和转移 [J], 傅蔷; 史纪元; 赵婷; 查鹭婷; 刘安生
4.番茄红素对体外人骨肉瘤细胞增殖及荷骨肉瘤裸小鼠肿瘤生长的影响 [J], 柴旭
泽
5.Cox-2抑制剂对骨肉瘤细胞及乳腺癌细胞生长的抑制作用 [J], 孙敬华;蔡林;陈方舟;张克勇;屈雪菊
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浅蓝菌素对人胰腺癌细胞株BXPC-3的影响及机制

基础论著 ●
浅蓝菌素对人胰腺癌细胞株ＢＸＰＣ．３的影响及机制
许乐乐许眷芳
【摘要】目的研究脂肪酸合酶（ＦＡｓ）抑制剂浅蓝菌素（Ｃｅｒ）对胰腺癌ＢＸＰＣ．３细胞体外生长和凋采用不同浓度（０、２．５、５、１０、２０、４０ｔｘｇ／ｍ１）Ｃｅｒ处理
Ｃｈｕｎ－ｆａｎｇ．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆ１ＣＳｕｚｈｏｕＭｕｎｉｃｉｐａｌＨｏｓｐｉｔａｌ，Ｓｕｚｈｏｕ２１５００６Ｃｈｉｎａ
Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇａｕｔｈｏｒ．＂ＸＵＣｈｕｎ－ｆａｎｇ，Ｅｍａｉｌ．＂ｘｃｆ６０１＠ｉｄ３．ＣＯｍ
・８６・
中华临床医师杂志（电子版）２０１３年１盟月第７卷第ｌ９期ＣｈｉｎＪＣｌｉｎｉｃｉａｎｓ（ＥｌｅｃｔｒｏｎｉｃＥｄｉｔｉｏｎ）．Ｏｃｔｏｂｅｒ１．２０１３．Ｖｏ１．７．Ｎｏ．１９
亡率和细胞周期的变化；反转录聚合酶链反应（ＲＴＰＣＲ）检测ＦＡＳｒｎＲＮＡ、Ｂｃ１．２ｍＲＮＡ、ＢａｘｍＲＮＡ表达水平的变化；免疫印迹法（Ｗｅｓｔｅｎｒｂｌｏｔ）检测细胞凋亡因子Ｂｃ１．２、Ｂａｘ蛋白表达情况。结果（１）Ｃｅｒ可明显抑制ＢＸＰＣ．３细胞的生长，并随着浓度的增加和作用时间的延长而明显增强（Ｐ＜０．０５）。（２）ＢＸＰＣ．３

浅蓝菌素阻遏骨肉瘤细胞增殖及诱导凋亡的实验研究

浅蓝菌素阻遏骨肉瘤细胞增殖及诱导凋亡的实验研究解志波;舒勇;黄山虎;刘志礼;黄伟【期刊名称】《江西医学院学报》【年(卷),期】2009(49)2【摘要】目的探讨脂肪酸合酶(FAS)抑制剂浅蓝菌素能否阻遏人骨肉瘤细胞增殖与诱发凋亡。

方法采用人骨肉瘤细胞系U2-OS,在体外实验中应用噻唑蓝法(MTT法)观察浅蓝菌素对人骨肉瘤细胞U2-OS生长的抑制作用,并通过流式细胞仪对细胞凋亡和细胞周期变化进行检测。

结果U2-OS细胞在浅蓝菌素作用下,细胞增殖被阻遏,并呈现剂量效应关系,2.5、5.0、10.0和20.0mg/L浅蓝菌素作用24h的抑制率分别为(18.58±2.49)%、(35.11±3.49)%、(56.60±3.53)%和(79.69±2.83)%,与对照组比较有显著性差异(P<0.05)。

流式细胞仪显示浅蓝菌素可诱发骨肉瘤细胞发生凋亡并且此作用呈剂量、时间依赖趋势;细胞周期分析浅蓝菌素能阻滞肿瘤细胞从S期进入G2/M期,并诱导其细胞凋亡。

结论浅蓝菌素抑制FAS可阻遏骨肉瘤细胞增殖,其机制可能是诱导细胞发生S期阻滞和细胞凋亡。

【总页数】5页(P28-31)【关键词】骨肉瘤;浅蓝菌素;肿瘤细胞;脂肪酸合酶【作者】解志波;舒勇;黄山虎;刘志礼;黄伟【作者单位】南昌大学研究生院医学部;南昌大学第一附属医院矫外科【正文语种】中文【中图分类】R-33;R349.5【相关文献】1.脂肪酸合酶抑制剂——浅蓝菌素阻遏K562细胞增殖及诱导凋亡的实验研究 [J], 陈宝安;黄培林;戴振声2.浅蓝菌素联合表阿霉素对人骨肉瘤细胞U2-OS增殖的抑制作用 [J], 邹平安;刘志礼;罗庆丰;王高;周扬;舒勇3.浅蓝菌素诱导口腔鳞状细胞癌细胞凋亡的实验研究 [J], 张晔;郭传瑸;俞光岩4.浅蓝菌素阻遏骨肉瘤细胞增及诱导凋亡的实验研究 [J], 解志波;舒勇;黄山虎;刘志礼;黄伟5.浅蓝菌素在诱导骨肉瘤细胞株U2-OS凋亡过程中对Bcl-2和Bax的影响 [J], 黄伟;舒勇;黄山虎;刘志礼;解志波;刘先明因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

【推荐下载】浅蓝菌素脂质体的制备及其对肿瘤细胞体外增殖影响研究

浅蓝菌素脂质体的制备及其对肿瘤细胞体外增殖影响研究【编者按】医药论文是科技论文的一种是用来进行医药科学研究和描述研究成果的论说性文章。

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浅蓝菌素脂质体的制备及其对肿瘤细胞体外增殖影响研究【摘要】目的制备浅蓝菌素脂质体并研究其对HER2/neu(erbB?2)原癌基因过表达肿瘤细胞株体外增殖的影响。

方法采用超声薄膜分散法制备浅蓝菌素脂质体;正交设计优化处方;HPLC法测定药物包封率及脂质体中药物浓度;离心加速实验及冷藏实验考察脂质体稳定性;活细胞计数法测定细胞生长曲线;MTT法测定游离浅蓝菌素及浅蓝菌素脂质体对细胞的增殖抑制作用。

结果浅蓝菌素脂质体的平均粒径为134.3 nm，稳定性良好，最佳处方条件下药物包封率为(53.45 3.67)%，脂质体中药物质量浓度为(1.126 0.065) mg/mL，剂量依赖性抑制SK?Br3和SK?Ov3细胞的增殖，IC50分别为9.62和9.32 mol L-1。

结论该制备工艺和处方可行，所制备的浅蓝菌素脂质体对SK?Br3细胞和SK?Ov3细胞有明显的增殖抑制作用，且作用强于游离浅蓝菌素。

【关键词】浅蓝菌素脂质体包封率肿瘤细胞IC50 Abstract:Objective To optimize the preparation of cerulenin iposomes and investigate the effect of cerulenin liposomes on proliferation of tumor cells overexpressing HER?2/neu in vitro. Methods Cerulenin embedded in liposomes was assayed by HPLC and the embedding rate of cerulenin was calculated. Particle size and distribution of cerulenin liposomes were investigated by laser scatter and stability of liposomes was investigated by centrifugal acceleration experiment and deep freezing. The growth curves of cells treated with cerulenin liposomes at different concentrations were determined by counting the cell number and IC50 of cerulenin liposomes was determined by MTT method. Results The average diameter of cerulenin liposomes was 134.3 nm with good stability. The embedding rate of cerulenin into liposomes was 53.45%, and the concentration of cerulenin in liposomes was 1.126 mg/mL. The liposomes inhibited the growth of SK?Br3 and SK?Ov3 cells in vitro in a dose?dependent manner and the IC50 of cerulenin liposomes on SK?Br3 and SK?Ov3 cells was 9.62 10-6 and 9.32 10-6 mol/L respectively. Conclusion The cerulenin liposomes that were prepared with the modified formulation inhibited the proliferation of SK?Br3 and SK?Ov3 cells in vitro with IC50 less than those of free cerulenin. Key words:Cerulenin; liposomes; embedding rate; tumor cells; IC50 近年来研究发现脂肪酸合成酶(FAS)在多种恶性肿瘤如乳腺癌、卵巢癌中呈高表达，并且与肿瘤的恶性程度及预后相关[1，2]。

miRNA沉默VCP基因抑制骨肉瘤细胞U2OS增殖和迁移的体外研究的开题报告

miRNA沉默VCP基因抑制骨肉瘤细胞U2OS增殖和迁移的体外研究的开题报告一、研究背景和意义：骨肉瘤是一种常见的高度恶性的肿瘤，易转移和复发，目前治疗难度较大。

寻找有效的治疗方法成为研究的热点。

VCP（Valosin-containing protein）是一种重要的分子伴侣，在肿瘤中起着关键的调控作用。

此外，miRNA-1也被证明能够抑制肿瘤的增殖和迁移。

因此，将miRNA-1与VCP基因连接起来进行相关研究，有望发现新的抑制骨肉瘤的治疗方法，并为临床治疗提供理论依据。

二、研究问题：本研究旨在探究miRNA-1通过与VCP基因连接对U2OS（一种常见的骨肉瘤细胞株）增殖和迁移抑制作用及其机制的影响，主要研究问题如下：1. miRNA-1沉默是否能够抑制VCP基因的表达？2. miRNA-1沉默是否能够抑制U2OS细胞的增殖和迁移？3. miRNA-1沉默对细胞周期的影响是如何产生的？三、研究方法：1. 细胞培养和处理：U2OS细胞株分为对照组与实验组，对照组细胞处理为空载体，实验组细胞处理miRNA-1沉默质粒。

2. 细胞存活率的检测：MTT法测定细胞在不同时间点的存活率。

3. 细胞增殖和迁移的检测：利用细胞计数法和Transwell小室法测定细胞的增殖和迁移情况。

4. 蛋白质检测：Western blot法检测VCP、CDK2、p21等蛋白的表达。

四、研究预期结果及意义：1. miRNA-1沉默可抑制VCP基因的表达，并且能够抑制U2OS细胞的增殖和迁移。

2. miRNA-1沉默对U2OS细胞周期有影响，促进细胞周期在G1期停滞，抑制细胞的增殖。

3. 本研究为VCP基因在骨肉瘤中的作用提供新思路，并有望为治疗骨肉瘤提供新的策略和方法。

2022年贵州省贵阳市乌当区羊昌中学高三生物月考试题含解析

2022年贵州省贵阳市乌当区羊昌中学高三生物月考试题含解析一、选择题（本题共40小题，每小题1.5分。

在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。

）1. 右图为人体某细胞所经历的各个阶段示意图，图中①~⑦为不同的细胞，a~c表示细胞所进行的生理过程。

据图分析，下列叙述错误的是A．与①相比，②③④的分化能力减弱B．⑤⑥⑦的mRNA种类完全不同C．b过程异常，细胞可能发生癌变D．进入c过程的细胞，细胞核体积变大，酶活性降低参考答案：B2. 据英国《卫报》披露，纽卡斯尔大学研究人员不久前成功实现一项生殖医学技术，将患有线粒体疾病妇女的受精卵中的细胞核移植到健康妇女捐献的去核卵子中，最终产下了健康的婴儿。

下列叙述错误的是A、此项技术的基础是动物的细胞和组织培养B、此项技术的原理与克隆羊“多莉”完全相同C、健康妇女捐献的卵子的细胞质具有调控移入细胞核发育的作用D、婴儿出生后具有患病夫妇以及捐献健康卵子的妇女三方的遗传特征参考答案：B 3. 毛角蛋白Ⅱ型中间丝（KIFⅡ）基因与绒山羊的羊绒质量密切相关。

获得转KIFⅡ基因的高绒质绒山羊的简单流程如图。

下列说法错误的是：（）A. 过程①中要用的工具酶是限制性核酸内切酶、DNA连接酶和质粒B．在过程②中，用胰蛋白酶处理将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞C. 在培养过程中，将成纤维细胞置于5%CO2的气体环境中，CO2的作用是调节PHD. 在胚胎移植前，通过胚胎分割技术可获得较多胚胎。

参考答案：A4. 下列对胡萝卜素的提取过程的分析，正确的是A. 胡萝卜颗粒越小，烘干时温度越高、时间越长，烘干效果越好B. 图甲 a 处安装的冷凝回流装置，是为了防止加热时有机溶剂的挥发C. 图甲中完成胡萝卜素萃取后，直接将烧瓶转移到乙装置中进行浓缩D. 图乙装置中锥形瓶收集的液体是浓缩后纯度和浓度较高的胡萝卜素参考答案：B【分析】图甲为萃取胡萝卜素的装置，a处安装的冷凝回流装置，是为了防止加热时有机溶剂的挥发。

华蟾素联合紫杉醇对骨肉瘤U_(2)OS细胞抑制作用的研究

甘肃医药2021年40卷第6期Gansu Medical Journal ，2021，Vol.40，No.6华蟾素联合紫杉醇对骨肉瘤U 2OS 细胞抑制作用的研究马秀才1李晶2马晓燕1罗国栋1王建澍2绽春蕊1俞永智1宋建民11.甘肃省人民医院，甘肃兰州730000；2.甘肃省肿瘤医院，甘肃兰州730050【摘要】目的：探讨华蟾素联合紫杉醇对人骨肉瘤细胞增殖的抑制作用及机理。

方法：体外培养人骨肉瘤U 2OS 细胞，按照实验设计分为对照组、华蟾素组、紫杉醇组、华蟾素联合化疗药组，每组在不同实验条件下按不同时间点（24，48，72h ）进行检测。

MTT 法检测各组骨肉瘤细胞生长的抑制率，TUNEL 染色观察细胞凋亡程度并计算其凋亡率，免疫荧光染色检测凋亡相关蛋白Bax 和Bcl-2的含量并计算其比值，RT-PCR 、Western Blot 法检测凋亡相关及Wnt/β-catenin 通路相关蛋白的表达。

结果：MTT 结果显示，华蟾素联合化疗药组细胞生存率明显降低，该组细胞被药物作用48h 后生存率是（24.58±1.65）%，相当于紫杉醇组同期（40.85±1.34）%的1/2（P <0.01）。

TUNEL 染色显示，与作用于细胞24，48h 相比，作用72h 后凋亡率达到（60.35±1.57）%，凋亡率明显增加（P <0.01）。

免疫荧光、RT-PCR 及Western Blot 法结果提示，随着药物作用时间的延长，华蟾素联合化疗药组Bax 的表达逐渐增加，而Bcl-2的表达逐渐减少，Bax/Bcl-2含量的比值也逐渐增加。

同时，Wnt/β-catenin 通路关键蛋白β-catenin 、caspase-3的表达也逐渐增加。

结论：华蟾素具有抑制骨肉瘤U 2OS 细胞增殖和诱导其凋亡的作用，其联合化疗药在疗效上呈时间依赖性，而其机制可能与激活Wnt/β-catenin 通路相关。

LY294002抑制成骨肉瘤细胞U2-OS侵袭迁徙

LY294002抑制成骨肉瘤细胞U2-OS侵袭迁徙毛建华;罗庆丰;刘志礼;王恒;朱粮博;龙新华;周荣平【摘要】目的：探讨LY294002对成骨肉瘤细胞体外侵袭迁徙的影响。

方法不同浓度的LY294002作用U2-OS细胞24 h，检测细胞增殖情况；Wound healing 和Transwell invasion 实验检测细胞迁徙和侵袭情况。

结果 LY294002可抑制U2-OS细胞增殖并呈剂量依赖；LY294002（40μM）处理细胞组细胞迁徙率为（37．97±2．49）％，阴性对照组细胞迁徙率为（83．78±2．84）％，两组间具有显著的统计学差异（ P＜0．01）；LY294002（40μM）处理细胞组穿膜细胞数显著低于阴性对照组穿膜细胞数〔分别为（36．1±5．0）个/视野和（89．1±6．4）个/视野〕（ P＜0．01）。

结论 LY294002能有效抑制成骨肉瘤细胞U2-OS细胞体外迁徙，有望成为成骨肉瘤化学治疗药物。

%Objective Objective To investigate the effect of LY 294002 on invasion and migration in vitro of osteosarco-ma cells.Methods Various concentrations ofLY294002 were adopted to deal with human osteosarcoma cells U 2-OS for 24 h;The cell proliferation was detected by MTT assay;Wound healing and Transwell invasion assays were performed to evaluate the cell migration and invasion abilities .Results The LY294002 could inhibite U2-OS cell proliferation dramatically and the inhibi-tory effect was concentration-dependent .The cell migration rates in LY294002 management group and the negative group were (37.9 ±2.49)%and (83.78±2.84)%,respectively.There was statistical difference .The trans-membraned cells in LY294002 management group were significantly lower than those of the negative group (36.1 ±5.0/HP and 89.1 ±6.4/HP,respectively)(P<0.01).Conclusion LY294002 could efficiently inhibit migration and invasion in vitro of osteosarcoma cells U 2-OS,and it has the potential to become a molecular target for anti-osteosarcoma metastasis .【期刊名称】《实用癌症杂志》【年(卷),期】2014(000)002【总页数】3页(P123-125)【关键词】LY294002;成骨肉瘤;侵袭迁徙【作者】毛建华;罗庆丰;刘志礼;王恒;朱粮博;龙新华;周荣平【作者单位】330006 南昌大学第一附属医院; 324100 浙江省江山市人民医院;330006 江西省肿瘤医院;330006 南昌大学第一附属医院;330006 南昌大学第一附属医院;330006 南昌大学第一附属医院;330006 南昌大学第一附属医院;330006 南昌大学第二附属医院【正文语种】中文【中图分类】R738.1PI3K/AKT信号通路在肿瘤细胞增殖凋亡及药物耐受中起着非常重要的作用［1-2］，但是其化学抑制剂LY294002对成骨骨肉瘤细胞迁徙侵袭的影响尚未见报道，本研究以成骨肉瘤细胞系U2-OS细胞为研究对象，给予 LY294002干预，MTT，wound healing和 Transwell invasion实验检测细胞增殖、迁徙和侵袭能力，探讨LY294002对成骨肉瘤细胞侵袭迁徙的影响。

浅蓝菌素联合表阿霉素对人骨肉瘤细胞U2-OS增殖的抑制作用

浅蓝菌素联合表阿霉素对人骨肉瘤细胞U2-OS增殖的抑制作用邹平安;刘志礼;罗庆丰;王高;周扬;舒勇【摘要】目的研究浅蓝菌素(Cerulenin)增强表阿霉素(Epirubicin)对人骨肉瘤细胞(U2-OS)抑制作用.方法在体外表阿霉素和浅蓝菌素单独及联合作用于人骨肉瘤细胞U2-OS,MTT法检测其增殖抑制情况,金氏Q值评价联合用药效应.结果表阿霉素及浅蓝菌素均对人骨肉瘤细胞(U2-OS)有抑制作用;联合用药细胞抑制率明显增高,Q值分别为1.24(1 μg/ml表阿霉素+1 μg/ml浅蓝菌素)和0.96(10 μg/ml 表阿霉素+20 μg/ml浅蓝菌素).结论浅蓝菌素能增强表阿霉素对人骨肉瘤细胞(U2-OS)的抑制效应.【期刊名称】《实用癌症杂志》【年(卷),期】2011(026)003【总页数】3页(P243-244,249)【关键词】浅蓝菌素;表阿霉素;人骨肉瘤细胞(U2-OS);增殖抑制【作者】邹平安;刘志礼;罗庆丰;王高;周扬;舒勇【作者单位】330006,南昌大学研究生医学部2008级;330006,南昌大学第一附属医院骨科;330029,江西省肿瘤医院病理科;330006,南昌大学研究生医学部2008级;330006,南昌大学研究生医学部2008级;330006,南昌大学第一附属医院骨科【正文语种】中文【中图分类】R738.7骨肉瘤是1种常见于青少年的原发性恶性骨肿瘤，在0～14岁的青少年中和0～19岁青少年中的发病率分别为每年3.5～4.6/百万人和每年4.6～5.6/百万人[1]，化疗是其主要的治疗手段之一。

表阿霉素是骨肉瘤化疗的常见药物之一，但临床证实骨肉瘤细胞对表阿霉素易产生耐药性。

浅蓝菌素能在体内、外诱导人多种恶性肿瘤细胞凋亡、抑制增殖[2，3]。

本实验旨在探讨浅蓝菌素是否能增强表阿霉素骨肉瘤细胞U2-OS的抑制作用，为骨肉瘤协同用药提供实验基础。

1 材料与方法1.1 材料骨肉瘤细胞株U2-OS购自北京协和医科大学生物细胞库;F12型培养基购自美国Hyclone公司;胎牛血清购自杭州四季青生物工程有限公司;胰蛋白酶冻干粉(含EDTA)购自美国Sigma公司;表阿霉素购自浙江海正药业公司,溶于灭菌去离子水中制备成10 mg/ml的母液,培养基稀释成工作浓度,4℃储存;DMSO、MTT、浅蓝菌素(Cerulenin)购自美国Sigma公司,溶于二甲基亚砜(DMSO)中制备成50 mg/ml 的母液，培养基稀释成工作浓度(用培养基稀释后工作液DMSO浓度<1%)，-20℃储存。

抑制survivin基因的表达对骨肉瘤细胞株U-2OS凋亡的影响

抑制survivin基因的表达对骨肉瘤细胞株U-2OS凋亡的影响张文韬;段宁;程辉光;宋涛;杨团民;同志超【期刊名称】《国际病理科学与临床杂志》【年(卷),期】2015(000)005【摘要】目的：观察抑制survivin基因表达后对骨肉瘤细胞株U-2OS凋亡的影响。

方法：下调骨肉瘤细胞株U-2OS中survivin的表达，并采用免疫印迹法(western blot)和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测U-2OS细胞株中survivin的蛋白和mRNA表达；同时采用甲基偶氮哇盐(MTT)法、流式细胞术和western blot检测下调survinin对化疗药物顺铂增加细胞凋亡和减少存活率作用的影响，并探讨其对抗凋亡分子Bcl-2以及促凋亡分子Bax的蛋白表达的作用。

结果：survivin-siRNA成功转染U-2OS细胞株后，western blot和RT-PCR检测结果均显示U-2OS细胞株中survivin的蛋白和mRNA表达水平显著低于空白对照组(P<0.05)；MTT比色法结果显示下调survivin可促进化疗药物顺铂对U-2OS细胞株存活率降低及生长抑制率增加的作用；western blotting检测结果表明，与空白对照组相比，Bcl-2的蛋白表达显著减少(P<0.05)，而Bax的蛋白表达显著增加(P<0.05)。

结论：下调survivin基因表达可促进骨肉瘤U-2OS细胞株的凋亡，并增加其对化疗药物顺铂的敏感性，为以survivin作为靶基因治疗骨肉瘤提供实验依据。

【总页数】6页(P834-839)【作者】张文韬;段宁;程辉光;宋涛;杨团民;同志超【作者单位】西安市红会医院骨科，西安710054;西安市红会医院骨科，西安710054;西安市红会医院骨科，西安710054;西安市红会医院骨科，西安710054;西安市红会医院骨科，西安710054;西安市红会医院骨科，西安710054【正文语种】中文【相关文献】1.姜黄素对人骨肉瘤U-2OS细胞细胞周期、凋亡及Bcl-2表达的影响 [J], 黄牛;2.抑制survivin基因的表达对骨肉瘤细胞株U-2OS凋亡的影响 [J], 张文韬;段宁;程辉光;宋涛;杨团民;同志超;3.核仁素表达下调对顺铂诱导人骨肉瘤细胞株SaOS-2增殖抑制和凋亡的影响 [J], 吴蓓;王万春;黎志宏4.姜黄素对人骨肉瘤U-2OS细胞细胞周期、凋亡及Bcl-2表达的影响 [J], 黄牛5.靶向生存素基因siRNA诱导骨肉瘤细胞株U-2OS的凋亡 [J], 王佳;吕刚;顾海伦;王岩峰因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

miRNA沉默VCP对骨肉瘤细胞U2-OS增殖和迁移的影响

Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇａｕｔｈｏｒ：ＬＩＵＺｈｉ —Ｚｉ．Ｅ —ｍａｉＺ：ｚｇｍ７９７７＠１６３．ｃｏｎ
【Ａｂｓｔｒａｃｔ】ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆＶＣＰｋｎｏｃｋｄｏｗｎｏｎｔｈｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎａｎｄｍｉｇｒａｔｉｏｎｏｆｈｕｍａｎ
广东医学２０１３年５月第３４卷第１０期ＧｕａｎｇｄｏｎｇＭｅｄｉｃａｌＪｏｕｒｎａｌＭａｙ．２０１３．Ｖｏ１．３４．Ｎｏ．１０
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１４８１・
ｍｉＲＮＡ沉默ＶＣＰ对骨肉瘤细胞Ｕ２一ＯＳ增殖和迁移的影响术
龙新华，刘志礼。＾，黄山虎，毛建华王高，周扬
，
南昌大学第一附属医院骨科（南昌３３０００６）；南昌大学第三附属医院骨科（南昌３３０００６）
【摘要】目的探讨沉默ｖｃＰ基因对人骨肉瘤细胞系增殖、迁移的影响。方法
构建靶向ＶＣＰ基因的重组
质粒载体（Ｘ１３５—１— ２、Ｘ１３５— ２—１、Ｘ１３５—３—１）和阴性对照载体（Ｎｅｇａｔｉｖｅ），测序鉴定；Ｘ１３５—１ —２、Ｘ１３５—２—

姜黄素对人骨肉瘤U-2OS细胞细胞周期、凋亡及Bcl-2表达的影响

姜黄素对人骨肉瘤U-2OS细胞细胞周期、凋亡及Bcl-2表达的影响黄牛【摘要】目的探讨姜黄素对入骨肉瘤U-2OS细胞细胞周期、凋亡及Bcl-2表达的影响.方法采用不同浓度(10μg/ml、50μg/ml、100μg/ml、200μg/ml)、不同时间(24h、48h、72h)姜黄素处理人骨肉瘤U-2OS细胞,分别采用MTT法、流式细胞仪及western blot检测细胞增殖、细胞凋亡及Bcl-2蛋白表达.结果姜黄素对U-2OS细胞体外增殖具有显著的抑制作用,并呈现剂量及时间依赖性.随着姜黄素浓度及作用时间的增加,G0-G1期细胞所占比率显著增高.姜黄素对U-2OS细胞凋亡具有显著的促进作用,并呈现剂量及时间依赖性.姜黄素处理后U-2OS细胞Bcl-2蛋白表达显著降低,且其降低程度与姜黄素浓度呈正相关.结论姜黄素可通过剂量依赖与时间依赖,促进骨肉瘤U-2OS细胞G0-G1期阻滞,从而诱导骨肉瘤U-2OS细胞凋亡,调节凋亡相关基因Bcl-2低表达是其可能作用机制.【期刊名称】《湖北科技学院学报（医学版）》【年(卷),期】2016(030)002【总页数】4页(P99-101,105)【关键词】姜黄素;骨肉瘤;凋亡;细胞周期;Bcl-2【作者】黄牛【作者单位】武汉大学基础医学院生物医学工程学,湖北武汉430071【正文语种】中文【中图分类】R285.5骨肉瘤是临床常见的恶性骨肿瘤之一，好发于青少年，其对放、化疗等治疗方案敏感性较低，预后较差。

因此，探讨更有效的骨肉瘤防治措施是近年来临床研究的热点难点。

姜黄素是由姜科黄属植物姜黄根茎中提取的多酚类化合物，具有抗炎、抗氧化及抗肿瘤等多种生物学活性[1]。

近年来研究表明，姜黄素可诱导多种体外培养的肿瘤细胞如胃癌[2]、肝癌[3]及结肠癌[4]等的凋亡，但其对人骨肉瘤的作用鲜见报道。

为探讨姜黄素对人骨肉瘤细胞的作用，本研究采用体外培养方法，观察不同浓度、不同时间姜黄素处理对人骨肉瘤U-2OS细胞凋亡、细胞周期及Bcl-2表达的影响，旨在为骨肉瘤的临床治疗提供可靠理论依据。

胡萝卜素诱导人骨肉瘤细胞U2OS自噬和凋亡的作用及机制

胡萝卜素诱导人骨肉瘤细胞U2OS自噬和凋亡的作用及机制肖波;郎媛媛【期刊名称】《临床检验杂志（电子版）》【年(卷),期】2017(006)003【摘要】目的研究毒胡萝卜素(TG)诱导人骨肉瘤细胞U2OS自噬与凋亡的作用,并探讨两者发生以及相互关联的分子机制.方法用Lipofectamine 2000转染GFP-LC3表达质粒,通过荧光显微镜观察U2OS细胞荧光斑的形成,从而明确TG诱导细胞自噬的作用;用TG或同时联合3-甲基腺嘌呤(3-MA)处理U2OS细胞后,检测自噬蛋白LC3的表达,各组细胞凋亡情况以及细胞形态改变.结果 TG可诱导U2OS细胞发生自噬,可见GFP-LC3融合蛋白聚集,形成绿色荧光斑点,3-MA可明显抑制TG诱导的自噬作用的发生;TG诱导U2OS细胞介导自噬的过程中LC3-II 表达增高,同时TG可诱导U2OS细胞发生凋亡,在TG给药前用3-MA处理后会增强这种凋亡作用.结论 TG能抑制U2OS细胞的生长,并诱导其发生凋亡和自噬.TG 诱导的自噬作为保护性机制,可发挥拮抗凋亡的作用.【总页数】2页(P433-434)【作者】肖波;郎媛媛【作者单位】天津医科大学研究生院,天津医科大学基础医学院免疫学系,天津300070;天津市第二儿童医院检验科,天津 300400【正文语种】中文【相关文献】1.自噬抑制增强白藜芦醇对人软骨肉瘤细胞凋亡的诱导 [J], 周凯亮;吴凯;张小磊;王雍立;金海东;田乃锋;陈招杰;徐华梓2.Akt激酶抑制剂MK-2206诱导U2OS人骨肉瘤细胞凋亡与自噬 [J], 王雪莹;李照梅;周运生;郭文莉;王凤泽3.胡萝卜素诱导人骨肉瘤细胞U2OS自噬和凋亡的作用及机制 [J], 肖波;郎媛媛;4.miR-21在人骨肉瘤细胞系U2OS体外侵袭中的作用及其机制 [J], 吕晨;陈鑫;朱雄白;林文军;王路;黄正湘;杨胜武5.抑制miR-30a/HMGA2介导的骨肉瘤细胞自噬对化学药物治疗诱导的细胞凋亡的作用 [J], 夏勤;倪江东;黄俊;潘柏祺;严明明;李文钊因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。