靶向NBS1的RNA干扰对鼻咽癌CNE-2细胞放射增敏作用的研究

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靶向Akt1小干扰RNA对人喉癌细胞增殖和凋亡的影响

ＹＡＮｎ，ｒｉｇＺＨＡＮＧｄｏＨｃｂＤｅａｔｎｆＲａｉｔｅａｙＧｅｅａｓｉａｆＳｅｙｎｉｔｒｇｏ，ＬａｎｎｒｖｎｅＳｅｙｎ１０６Ｃｈｎｐｒｍｅｔｏｄｏｈｒｐ，ｎｒｌＨｏｐｔｌｈｎａｇＭｌａｙＲｅｉｎｉｏｉｇＰｏｉｃ，ｈｎａｇ０１，ｉａｏｉ１
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１２方法．
１．－１细胞培养１％胎牛血清，０／青霉素和１０Ｉ／ｌ２０１０Ｕｍｌ０ｇｍｘ链霉素ＲＭＩ１４Ｐ一６０培养基，７，％Ｃ和湿度培养，３℃ ５Ｏ饱每
ｂａｋａｄｎｇｔｅｃｎｒｌｇｏｐＴｈｒｌｅａｉｅａｔｉｓｉｈｂｔｄｕｖｖｌｒｔｓｄｃｅｓｄｅｌａｏｔｓｓａｄｌｎｎｅａｉｏｔｏｒｕ；ｅｐｏｉｒｔｖｃｉｔｗａｎｉｉ，ｓｒｉａａｅｗａｅｒａｅ，ｃｌｐｐｏｉｎｖｆｖｙｅｎｃｏｉｒｔｎｒａｅｆｅｔＲＮＡｒｎｆｃｉｎｅｒｓｓａｅｉｃｅｓｄａｔｒＡｋｉｌｓｔａｓｅｔ．Ｃｏｌｉｎｏｎｃｕｓｏ：ＲＮＡｉｔｒｅｅｃａｎｉｉｃｌｐｏｉｒｔｎａｄｉ — ｎｅｒｎｅｃｎｉｈｂｔｅｌｒｌｅａｉｎｎｆｆｏｄｃｐｐｏｉｆｌｒｎｅｌｃｒｉｏｅｌｌｅＡｋｌｍａｅａｎｖｌｔｒｅｎｔｅｇｎｈｒｐｆｌｒｎｅｌｃｒｉｏ．ｕｅａｏｔｓｓｏｙｇａａｃｎｍａｃｌｉ．ｔｙｂｏｅａｇｔｉｈｅｅｔｅａｙｏａｇａａｃｎｍａａｎｙ

EGCG对鼻咽癌CNE-2裸鼠移植瘤放疗的增敏作用及机制

ＮＡｘｅｓｏｅｐｒｓｉｎ．Ｋｅｗｏｄｙｒｓ：Ｅｐｇｌｏａｅｈｎ３一ｌａｅ；ｎｏｈａｙｇａｃｒｉｍａ；ｘｎｔａｓｌｔｄｃｒｉｏｍａ；ｒｄｏｈｒｐｙ；ｉａｃｔｅ一ＧａｔｉｓａｐｒｎｅｌａｃｎｏｅｏｒｎｐａｅａｃｎｎａｉｔｅａＣａｐｅ３ｓａ一ｓ
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UCN_01增加鼻咽癌细胞放射敏感性的相关机制_惠周光

论著UCN 01增加鼻咽癌细胞放射敏感性的相关机制惠周光李晔雄杨伟志高远红余子豪摘要目的在前期研究基础上,进一步探讨UCN 01增加鼻咽癌细胞放射敏感性的相关机制。

方法应用流式细胞仪和凋亡试剂盒测定不同条件下CNE 1细胞的凋亡比例。

应用彗星分析法测定不同实验组肿瘤细胞在照射后不同时间的DNA 损伤程度,用以观察UCN 01对CNE 1细胞修复DNA 损伤能力的影响。

结果照射+UCN 01组与单纯照射组相比,细胞总凋亡比例仅有轻微增加(14.9% 13.6%),其中主要表现为早期凋亡比例轻度增加(5.0% 3.9%),两组细胞晚期凋亡比例相仿(9.9% 9.7%),细胞凋亡不是UCN 01对C NE 1细胞放射增敏的主要机制。

照射后加入UCN 01组细胞的尾力矩下降速度较单纯照射组明显降低,即DNA 的修复速度降低,两组的半修复时间分别为3.1、0.4h,说明UC N 01使CNE 1细胞修复放射性DNA 损伤的能力下降。

结论 UCN 01未明显增加放射后C NE 1细胞的凋亡比例;UC N 01使细胞修复放射性DNA 损伤的能力降低可能是该药放射增敏的重要机制之一。

关键词放射增敏药; 细胞凋亡; 彗星分析法; 细胞系,肿瘤Mechanism of radiosensitization of UCN 01in nasopharyngeal cancer cells H UI Zhou guang,LI Ye xiong ,Y ANG Wei zhi,GAO Yuan hong ,YU Zi hao.Department o f Ra diation Oncology ,Cancer Institu te (Hos pita l ),Ch inese Aca dem y o f Medical Sciences ,Peking Union Medical College,Beijin g 100021,China Correspon ding author :LI Ye xiong,Email :ye xiong@Abstract Objective Based on the former study,radi osensitization mechanism of 7 Hydroxystaurosporine (UCN 01)in nasopharyngeal cancer cell is further investigated.Methods Hu man nasopharyngeal carcinoma cell line CNE 1with p53mutation,was used in this s tudy.The effect of UCN 01on apoptosis in irradiated CNE 1cells was determined by flow cytometry after the cells had been dyed by annexin V and propidium iodide (PI).The effect of UCN 01on DNA damage repair ability of CNE 1cell was measured by Comet assay.Results In CNE 1cell,the total percentage of apop totic cells was only slightly increased in irradiation plus UCN 01group when compared wi th irradiation alone group (14.9% 13.6%),and most of which was due to the slight increase in early ap optosis (5.0% 3.9%).The percentage of later apoptotic cells was comparable between the t wo groups (9.9% 9.7%).The decrease of tail moment,which shows the DNA damage repair ability,was obviously slower in radiation plus UCN 01group than the radiati on alone group.UCN 01did abate the cell ability of DNA damage repair with a half repair ti me of 0.4h and 3.1h in the two groups.Conclusions UCN 01is not able to increase the radiation induced CNE 1cell apoptosis.Repair inhi bition of radiation induced DNA damage should be an i m portant radiosensi tization mechanis m of UCN 01.Key w ords Radiation sensitizing agents; Apoptosis; Comet assay; Cell line,tumor基金项目:国家自然科学基金委重点项目资助项目(10335050)作者单位:100021北京,中国医学科学院中国协和医科大学肿瘤研究所肿瘤医院放疗科通讯作者:李晔雄,Email:yexiong@yahoo.c om抑癌基因p53功能缺失的细胞在DNA 受损后主要表现为G 2期阻滞(以修复DNA 损伤),这是肿瘤细胞自我保护并导致对放射线抗拒的重要机制[1]。

RNAi对肝癌细胞放射增敏的实验研究

RNAi对肝癌细胞放射增敏的实验研究李高峰;王宏梅;陈龙华【摘要】目的探讨ATM基因表达沉默对肝癌细胞辐射增敏的影响.方法采用含ATM干扰片段的慢病毒感染HepG2细胞,将细胞制成单细胞悬液,给予不同剂量照射,照射后继续培养细胞,研究RNAi前后HepG2细胞照射后继续细胞集落形成率,利用Graphpad prism5.0软件拟和线性二次曲线模型和单击多靶模型,得出放射生物学参数.结果 HepG2细胞干扰前后D0值分别为:3.37±0.03、3.50±0.06,Dq值分别为1.73±0.02、1.21±0.03,α/β值分别0.72±0.11、3.52±0.30,D0、Dq、α/β值差异均有统计学意义.放射增敏比SER＝1.37.结论 RNAi ATM基因可以改变肝癌细胞的放射生物学参数,达到放射增敏的目的.ATM有望成为肝癌患者治疗的新靶点.【期刊名称】《重庆医学》【年(卷),期】2010(039)012【总页数】3页(P1492-1493,1496)【关键词】ATM;肝癌;RNAi;放疗【作者】李高峰;王宏梅;陈龙华【作者单位】广西柳州市工人医院肿瘤科,545005;南方医科大学南方医院放疗科,广州,510515;南方医科大学南方医院放疗科,广州,510515【正文语种】中文【中图分类】R735.7;R730.55原发性肝癌是中国常见的恶性肿瘤之一,具有发病率高、进展快、疗效差、死亡率高等特点,首选的治疗手段是手术,但大多数患者丧失了手术机会,放射治疗已成为肝癌非手术治疗的重要手段。

由于肝细胞的耐受量低于肝癌细胞的根治量,且放疗中存在的辐射抗拒,导致疗效不满意,为了能够降低辐射抗性而达到放疗增敏作用,作者以前的研究成功地对HepG2细胞的 ATM基因进行沉默,本研究对 ATM基因沉默的HepG2细胞进行放射,观察 RNA干扰(RNA interference,RNAi)前后HepG2细胞的生长情况及放射生物学参数,评价是否具有放射增敏作用。

生脉注射液对人鼻咽癌CNE-2细胞抗拒株的放射增敏作用

生脉注射液对人鼻咽癌CNE-2细胞抗拒株的放射增敘作用**收稿 EI 期:2019-07-28修回日期:2020-02-18* 国家自然科学基金委员会面上项目（81673718）:基于lncRNA/CDK6相关信号通路探讨益气活血养阴法增强鼻咽癌放射敏感性的分子机制，负责人：范钦；广东省科学技术厅科技计划项目（2016A020226034）：生脉饮增强鼻咽癌放射敏感性的作用机制研究，负责人：范钦；广东省自然科学基金委员会项目（2016A030313833）：姜黄素调控IncRNA 靶向的CCNDI 表达与逆转鼻咽癌放射抗拒的机制研究，负责人：李爱武* * 通讯作者：范钦，研究员，博士生导师，主要研究方向：中医药抗肿瘤研究「刘诗雅打朱道琦'，杨家彬J 娄丹丹'，高瑞娇S 吕英S 范钦1**（1.南方医科大学中医药学院分子生物实验室广州510515； 2.南方医科大学南方医院古中医科广州510515）摘要：目的探讨生脉注射液对人鼻咽癌CNE-2细胞抗拒株及其裸鼠移植瘤的放射增敏作用以及对STAT3、p-STAT3蛋白表达的影响。

方法通过细胞毒性实验筛选生脉注射液的最佳浓度，克隆形成实验检测用药前后放射敏感性；建立人鼻咽癌裸鼠移植瘤模型，荷瘤鼠随机分为空白组，生脉注射液低、高剂量组，生脉注射液低、高剂量联合照射组，照射组和姜黄素联合照射对照组。

计算肿瘤体积抑制率和抑瘤率。

蛋白免疫印迹法检测基因表达。

结果生脉注射液给药后.CNE-2R 细胞放射敏感性增加；与单纯照射组比较，高剂量联合照射组肿瘤体积抑制率及抑瘤率明显升高，其STAT3、p-STAT3表达亦显著下调。

结论生脉注射液对人鼻咽癌CNE-2细胞抗拒株CNE-2R 及其裸鼠移植瘤具有放射增敏作用，其增敏作用可能与抑制STAT3表达与活化相关。

关键词：鼻咽癌裸鼠移植瘤生脉注射液放射增敏doi: 10.11842/wst.20190728001 中图分类号:R285 文献标识码：A鼻咽癌是我国多发的恶性肿瘤，中国人群的发病率和死亡率明显高于世界平均水平叫放射治疗是目前临床首选的治疗手段,但是在临床治疗中发现许多患者存在放射抗拒现象，严重影响放疗疗效及其预后。

RNA干扰在肿瘤基因治疗方面的研究进展

导的硒促凋亡的后生遗传沉默来发挥作用。
２．４
Ｉ龇干扰在细胞凋亡上的研究
细胞凋亡与程序性死亡是多细胞动物生命过程
中必不可少的正常生理过程，它与细胞增殖具有同等重要的意义。细胞凋亡与程序性死亡的失控不仅扰乱了正常发育，而且还促进了肿瘤发生，与肿瘤发展有着密切的联系。凋亡抑制基因家族是高度保守的内源性基因家族，它们能抑制肿瘤细胞的凋亡．阻断凋亡抑制基因能促进肿瘤的凋亡，针对这一靶点设计ＲＮＡ干扰成为治疗肿瘤的可行策略。Ｓｕｒｖｉｖｉｎ基因广泛表达于人类胚胎、胎儿和许多恶性肿瘤组织中。而在终末分化的成人组织（胸腺、生殖腺除外）则不表达，它是人类基因组中最具代表性的肿瘤基因之一。ＺＨＥＮ等【１０］研究通过把能稳定表达阻断ｓｕｒｖｉｖｉｎ基因的ｓｈＲＮＡ质粒转染到人神经胶质瘤Ｕ２５Ｉ细胞系，发现肿瘤细胞的增殖减少、细胞凋亡增多、有丝分裂危象和细胞周期停滞，同时移植了这种细胞的裸鼠形成肿瘤的能力减弱，肿瘤血管的生成也受到抑制。抗凋亡因子６止２能够通过各种分子机制对线粒体介导的细胞凋亡发挥重要的调控作用。６０％－８０％恶性肿瘤组织都大量表达ｂｃｌ．２［ｕ】，应用ｓｉＲ－ＮＡ对其特异阻断后肿瘤细胞有５０％发生了凋亡，而ｓｈＲＮＡ．ｂｃｌ．２表达载体在小鼠模型中抑制移植瘤
对细胞周期的研究取得了突破性进展，发现了具有调节所有真核细胞周期的关键分子。包括细胞周期蛋白（ｃｙｃｌｉｎ）、细胞周期蛋白依赖性激酶（ＣＤＫｓ）和细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂（ＣＩ（Ｉ）。细胞周期的内源性调控主要是通过磷酸化和去磷酸化来调控ｃｙｃｌｉｎ－ＣＤＫｓ－ＣＫＩ途径实现的。ｃｙｃｌｉｎ和ＣＤＫｓ是细胞周期内源性调控的核心因子，其中ｃｙｃｌｉｎ的周期性积累与降解对细胞周期的进程起着关键性作用。ＣＫＩ能与ＣＤＫｓ、ｃｙｃｌｉｎ或ｃｙｃｌｉｎ—ＣＤＫｓ复合物结合而抑制ＣＤＫｓ的催化活性，ｃｙｃｌｉｎ和ＣＫｌ分别对ＣＤＫｓ进行正负调控。Ｃｙｃｌｉｎ．ＣＤＫｓ—ＣＫＩ形成的调控网络可以精细地调节细胞周期的运行，如果这种正负调控的平衡被打破，细胞就可能发生异常增殖而形成肿瘤。ＫＯＳＬＯＷＳＫＩ等［７］研究发现，胎盘特异性基因

RNA同时干扰四个不同基因对鼻咽癌细胞CNE2Z生长增殖的体内外实验研究复习进程

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学位论文作者：同期：≯／。

年厂月；／日此文档收集于网络，如有侵权请联系网站删除RNA鼻治疗多但由于和化疗药物的严重毒副作用，从而影响了预后，并限制了进一步提高患者生存率。

因此，从基因治疗的角度，寻找毒性低、疗效好、特异性强的新的治疗技术具有重要的临床意义。

RNA干扰技术是当今研究鼻咽癌基因治疗领域的‘一个热点。

它是一种转录后基因沉默现象，在以往的实验中，通过单基因RNA干扰能够抑制肿瘤细胞的生长增殖。

然而无论在基础研究或临床实验中，单独干扰某个基因对研究肿瘤的防治方面存在有很大局限性。

利用分子生物学技术，针对不同基因发展的基因治疗技术，通过改变或修饰相关基因及其表达产物的方式治疗恶性肿瘤已成为肿瘤生物治疗中最引人注目的研究领域，也可能是恶性肿瘤治疗的希望所在。

目前国内外研究同时干扰多个基因的报道较少。

尤其三个以上的基因同时干扰更为少见。

联合沉默肿瘤细胞中多个癌基因，会成为研究肿瘤基因治疗的一个前沿问题。

RNA干扰在鼻咽癌研究中的进展

RNA干扰在鼻咽癌研究中的进展
刘美莲;周克元
【期刊名称】《广东医学》
【年(卷),期】2011(32)7
【摘要】@@ RNA干扰(RNAi)是由双链RNA(dsRNA)分子介导的特异系列转录后基因沉默的机制,能高效、特异地抑制靶mRNA的表达.RNAi是一种典型的转录后基因调控方法,又称转录后基因沉默(post-transcriptional gene silencing, PTGS).RNAi现象自1998年被发现以来,研究者对其分子机制进行不断探索,目前其机制已经比较清楚.RNAi 特异效应发生在3个水平:转录后水平、转录水平和翻译水平.由3个效应RNA分子介导,分别为siRNA、shRNA、microRNA(miRNA).转录和转录后水平由siRNA/shRNA介导,翻译水平由miRNA介导.
【总页数】4页(P924-927)
【作者】刘美莲;周克元
【作者单位】广东医学院生物化学与分子生物学研究所,广东湛江,524023;广东医学院生物化学与分子生物学研究所,广东湛江,524023
【正文语种】中文
【相关文献】
1.RNA干扰与鼻咽癌的研究进展 [J], 唐智;王继群;张涛
2.利用RNA干扰技术研究PTX1在鼻咽癌中的功能 [J], 周文;李虹;冯湘玲;王磊;祝斌;李辉;姚开泰;任彩萍
3.RNA干扰文库的研究进展及其在肿瘤研究中的应用 [J], 赵宁
4.RNA干扰技术在水产动物抗病毒和抗寄生虫研究中的应用研究进展 [J], 宋华丽; 孙效迎; 孔祥会; 李莉; 裴超
5.RNA干扰在鳞翅目昆虫中的应用研究进展 [J], 张秋朗;刘建宏;徐进;叶辉
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肿瘤放射增敏剂在鼻咽癌放射治疗中的临床应用价值徐勇

肿瘤放射增敏剂在鼻咽癌放射治疗中的临床应用价值徐勇发布时间：2021-09-15T02:16:46.041Z 来源：《中国结合医学杂志》2021年6期作者：徐勇[导读] 本研究旨在分析肿瘤放射增敏剂应用于鼻咽癌放射治疗时能够产生何种效果，现对研究过程进行梳理，公布如下。

宁阳县第二人民医院山东泰安 271411【摘要】目的：观察分析肿瘤放射增敏剂应用于鼻咽癌放射治疗时的效果。

方法：80例患者随机分为观察组与对照组，放疗方式相同，区别之处在于，观察组患者放疗前静脉滴注肿瘤放射增敏剂。

比对两组治疗成效和不良反应发生情况。

结果：①观察组患者总缓解率为72.50%，高于对照组的52.50%，P＜0.05；②观察组不良反应总发生率为12.50%，低于对照组的27.50%，P＜0.05。

结论：肿瘤放射增敏剂应用于鼻咽癌放射治疗时，能够显著提高病灶缓解率，降低不良反应发生率。

【关键词】肿瘤放射增敏剂；鼻咽癌；放射治疗引言本研究旨在分析肿瘤放射增敏剂应用于鼻咽癌放射治疗时能够产生何种效果，现对研究过程进行梳理，公布如下。

1.资料与方法1.1一般资料综述自本院耳鼻喉科、肿瘤科于2018年2月～2021年2月收治的鼻咽癌患者中选取80例，将之作为主要分析对象。

纳入标准：（1）家族中近代亲属有鼻咽癌病史或长期食用腌制品，已经出现明显的鼻塞、涕中带血、听力下降、复视、头痛等症状，经鼻咽镜检查、病理组织学、EB病毒壳抗原-IgA抗体检测，确诊为鼻咽癌的患者；（2）根据医师的建议，决定接受放射治疗的患者；（3）知悉本研究并自愿配合，签署知情同意书的患者[1]。

排除标准：（1）同时患有其他肿瘤疾病以及严重心脑血管疾病、凝血功能障碍疾病的患者；（2）鼻咽部局限性病变经放疗后并未消退或复发，需行手术切除术的患者；（3）研究开展期间，鼻咽部原发性病灶已得到有效控制，需行颈淋巴结清扫术“收尾”的患者；（4）依从性不符合本研究要求，无法有效配合医护人员的患者。

姜黄素对鼻咽癌抗拒株的放射增敏作用及其机制研究

姜黄素对鼻咽癌抗拒株的放射增敏作用及其机制研究朱道琦;莫志贤;范钦;黄沐;刘钊汝;李爱武;邵萌;刘远亮;房淼;杨家彬;吕英【摘要】目的探讨姜黄素对放射诱导产生的鼻咽癌抗拒株CNE-2R的放射增敏作用及其机制.方法通过MTT实验筛选姜黄素的最佳浓度;对克隆生存实验结果进行L-Q拟合和单机多靶拟合,计算相关放射生物学参数;再通过流式细胞术检测细胞周期的改变;最后通过RT-qPCR实验检测细胞周期及DNA损伤修复相关基因的表达情况.结果浓度在10 μmol·L-1的姜黄素对CNE-2R细胞无明显抑制作用.给药后抗拒株CNE-2R的α/β值从6.56增加到1 596;SF2从1.93 Gy减少到0.361 Gy;N值从1.60减少到1.06;D0值从3.27减少到2.12;Dq值从1.53减少到0.12.细胞周期G2期明显增多,G1期稍微减少,S期明显减少.CDK4基因的表达明显上调,GADD45 g、BRCA1基因的表达明显下调.结论姜黄素通过调控GADD45 g、CDK4、BRCA1基因的表达,改变CNE-2R的细胞周期和影响DNA损伤修复,发生G2期阻滞,从而增加了抗拒株的放射敏感性.%Aim To investigate the effect of curcumin on radiosensitivity of radioresistant nasopharyngeal carcinoma cell line CNE-2R and its mechanism.Methods The concentration of curcumin was screened by MTT assay.Dose-survival curves were obtained according to the colony forming test for L-Q matching and multitarget-single hitting matching,while SF2 and the correlation parameters of radiation biology were calculated.The changes of cell cycle in CNE-2R cells caused by curcumin were also tested by flow cytometry(FCM).The differential expression of genes related to cell cycle and DNA damage repair were detected by RT-qPCR.Results CNE-2R cells could not be inhibited by 10 μmol·L-1 curcumin.Dealt with 10 μmol·L-1 curcumin for 24h,the value of α/β in creased to 1 596 from 6.56;the value of SF2 decreased to 0.361 Gy from 1.93 Gy;the value of N decreased to 1.06 from 1.60;the value of D0 decreased to 2.12 from 3.27;the value of Dq decreased to 0.12 from 1.53.FCM showed that the cells in G2 phase had a significant increase and the cells in S phase had a significant decrease after dealt with 10μmol·L-1 curcumin for 24 h.The expression of CDK4 was significantly up-regulated and GADD45g,BRCA1 were significantly down-regulated.Conclusion Curcumin radiosensitizes nasopharyngeal carcinoma cell line CNE-2R by changing cell cycle and affecting DNA damage repair through regulating the expression of CDK4,GADD45 g and BRCA1.【期刊名称】《中国药理学通报》【年(卷),期】2017(033)008【总页数】6页(P1086-1091)【关键词】姜黄素;鼻咽癌;放射增敏;克隆形成;细胞周期;RT-qPCR【作者】朱道琦;莫志贤;范钦;黄沐;刘钊汝;李爱武;邵萌;刘远亮;房淼;杨家彬;吕英【作者单位】南方医科大学中医药学院中药药理教研室,广东广州 510515;南方医科大学中医药学院中药药理教研室,广东广州 510515;南方医科大学中医药学院中药药理教研室,广东广州 510515;南方医科大学中医药学院中药药理教研室,广东广州 510515;南方医科大学南方医院古中医科,广东广州 510515;南方医科大学南方医院古中医科,广东广州 510515;南方医科大学中医药学院中药药理教研室,广东广州 510515;南方医科大学中医药学院中药药理教研室,广东广州 510515;南方医科大学中医药学院中药药理教研室,广东广州 510515;南方医科大学中医药学院中药药理教研室,广东广州 510515;南方医科大学南方医院古中医科,广东广州510515【正文语种】中文【中图分类】R282.71;R329.28;R342.3;R394.2;R739.630.22鼻咽癌是中国南方地区高发的一种恶性肿瘤，由于鼻咽癌组织中有10%～20%细胞对放疗射线抗拒，导致放疗后仍有局部残留或复发，继而降低治疗效果[1]。

新型多靶点药物ZD1839对鼻咽癌细胞CNE2放射敏感性研究

新型多靶点药物ZD1839对鼻咽癌细胞CNE2放射敏感性研究摘要】目的:研究ZD1839对鼻咽癌细胞株CNE2放射增敏作用。

方法:采用MTT法测定ZD1839的半数抑制浓度(IC50)，克隆形成实验计算细胞存活率,拟合生存曲线,流式细胞仪检测ZD1839联合放疗的凋亡率及细胞周期分布。

结果:单药组，CNE2细胞的存活率ZD1839浓度的增加而降低，其IC50约为2.26μmol/L。

联合组，ZD1839作用CNE2细胞24h后均见到放射增敏作用，增敏比为1.529±0.135。

ZD1839或照射均可增加凋亡率, 减少S期细胞比例及增加G2/M期细胞比例(P<0.01)。

结论:ZD1839联合电离辐射可提高鼻咽癌细胞的放射敏感性，其机制之一可能是ZD1839促进细胞凋亡、干扰细胞周期分布及下调Bcl-2蛋白表达。

【关键词】鼻咽癌；CNE2细胞株；ZD1839；放射增敏作用【中图分类号】R739.63【文献标识码】A【文章编号】1008-6455（2010）10-0213-02鼻咽癌病理类型以低分化鳞状细胞癌多见，临床治疗以放疗为主，晚期患者辅以化疗。

ZD1839（商品名为Iressa）是一种新开发的可供口服的选择性表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂，其通过小分子化合物竞争结合EGFR酪氨酸激酶催化区的Mg-ATP结合位点，抑制酪氨酸激酶活性，阻断激酶及其底物的磷酸化，彻底阻断异常的酪氨酸激酶的信号转导通路，来达到抗肿瘤目的［1］。

研究发现对鼻咽癌细胞株CNE2细胞具有明显的抑制作用［2］，但对鼻咽癌细胞放射敏感性的影响如何？有关报道尚不多见，本实验将ZD1839联合放疗应用于鼻咽癌细胞株CNE2细胞，通过克隆形成实验、流式细胞分析等观察ZD1839的放射增敏作用及其可能机制，以期为临床应用提供理论依据。

1材料与方法1.1材料:ZD1839由英国阿斯利康（Astra Zeneca）公司提供，MTT及碘化丙啶(PI)为Sigma公司产品,用PBS液配制成5mg／mL的溶液。

鼻咽癌放射抗拒细胞株CNE-2(R743)的建立及其差异表达蛋白的初步分析

鼻咽癌放射抗拒细胞株CNE-2(R743)的建立及其差异表达蛋白的初步分析苏颖;吴君心;何火聪;林可焴n;邹长棪【摘要】目的建立放射抗拒的人鼻咽癌(NPC)细胞株,探讨NPC细胞的放射抗拒机制.方法应用X射线反复照射NPC CNE-2细胞,总剂量为51 Gy,筛选出放射抗拒的细胞株CNE-2(R743).采用克隆形成实验测定细胞的放射敏感性,流式细胞术检测细胞周期特征;采用双向凝胶电泳结合质谱分析法鉴定差异表达蛋白.结果与CNE-2细胞相比,CNE-2(R743)细胞显示出更强的放射抗性,CNE-2(R743)细胞的放射抗性(存活分数SF2)是其亲本细胞CNE-2的1.49倍(P<0.05).CNE-2(R743)细胞周期分布中,S期比例较其亲本CNE-2细胞明显增高(P＜0.01),而G0/G1和G2/M期比例则下降(P＜0.01).与CNE-2相比,CNE-2(R743)细胞存在24个差异表达较显著的蛋白质,其中14个上调,10个下调.结论经辐射诱导所建立的细胞株CNE-2(R743)比其亲本对射线更加抗拒,并显示与亲本不同的细胞周期特征.存在与亲本差异表达的蛋白质,这些蛋白质可能与NPC细胞的放射敏感性相关.%Objective To establish a radioresistant cell subline from human nasopharyngeal carci noma cell line CNE-2 and investigate the mechanism of radioresistance. Methods Nasopharyngeal carci noma cells were exposed repeatedly to X-rays. After a total exposure dose of 51 Gy, a new radioresistant subline named CNE-2CR743) was obtained. For both CNE-2CR743) and its parent CNE-2 cells, the radi osensitivity was measured by clonogenic assay, and the cell cycle distribution was measured by flow cytom etry. Differentially expressed proteins in the two cell lines were separated by two-dimensional gel electro phoresis and identified by massspectrum analysis. Results The radioresistance of CNE-2 (R743) cells was stronger than that of the parent CNE-2 cells. The radioresistance (as regards to survival fraction, SF2) of CNE-2CR743) cells is 1. 49 times of that of CNE-2 cells(P<0. 05). The CNE-2CR743) subline also showed higher percentage of cells in S phase, but lower percentages in Go/G1 and G2/M phases. To tally 24 different proteins -were identified, 14 of -which were upregulated and 10 downregulated in the ra dioresistant CNE-2CR743), compared with CNE-2. Conclusion The new subline CNE-2CR743) is more radioresistant as compare with its parent CNE-2 cell line, and has a different cell cycle distribution. There exist differentially expressed proteins which may be involved in different radiosensitivities of naso pharyngeal carcinoma cell lines.【期刊名称】《福建医科大学学报》【年(卷),期】2011(045)006【总页数】6页(P398-403)【关键词】鼻咽肿瘤;辐射耐受性;蛋白质组学;细胞周期;肿瘤细胞,培养的【作者】苏颖;吴君心;何火聪;林可焴n;邹长棪【作者单位】福建医科大学,教学医院、福建省肿瘤医院,放射生物学研究室,福州,350014;福建医科大学,教学医院、福建省肿瘤医院,放射生物学研究室,福州,350014;福建医科大学,教学医院、福建省肿瘤医院,放射生物学研究室,福州,350014;福建医科大学,教学医院、福建省肿瘤医院,放射生物学研究室,福州,350014;福建医科大学,教学医院、福建省肿瘤医院,放射生物学研究室,福州,350014【正文语种】中文【中图分类】R329.2;R392.11;R739.630.22;R814.2鼻咽癌（NPC）是我国南方地区常见的恶性肿瘤之一。

RNA干扰叶酸受体1基因对鼻咽癌细胞耐药的影响的开题报告

RNA干扰叶酸受体1基因对鼻咽癌细胞耐药的影响的开题报告1.研究背景:鼻咽癌（nasopharyngeal carcinoma, NPC）是一种异质性肿瘤，其发病率在全球范围内存在明显的地域差异。

作为一种高度浸润性肿瘤，鼻咽癌患者容易出现局部复发和远处转移的情况，因此，对其治疗更具有挑战性。

在NPC治疗过程中，放疗和化疗是两种常用的治疗方式。

然而，临床研究表明，多数NPC患者对化疗存在耐药问题，限制了其治疗效果和生存率。

因此，寻找突破性的药物或治疗方法已成为治疗NPC的重要研究方向之一。

叶酸受体1（Folr1）是一种与叶酸代谢相关的蛋白质，可以影响癌细胞的生长和侵袭能力。

已有的研究表明，Folr1的异常表达与多种恶性肿瘤的发病和预后密切相关。

近年来，RNA干扰技术广泛应用于肿瘤治疗中，RNA干扰Folr1基因是否可以增加化疗对鼻咽癌的疗效以及对鼻咽癌细胞耐药性的影响，还有待进一步的研究探讨。

2.研究目的：本研究的目的是通过RNA干扰技术实现Folr1基因的靶向敲除，研究RNA干扰Folr1基因对鼻咽癌细胞HNE1耐药性的影响，以及Folr1靶向干扰对鼻咽癌细胞HNE1促进化疗药物敏感性的作用。

3.研究方法：通过构建稳定转染HNE1细胞的siRNA-Folr1载体，利用荧光定量PCR、Western blot和免疫荧光技术等方法检测Folr1的表达水平，并评估RNA干扰Folr1对HNE1细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响；利用CCK-8检测RNA干扰后HNE1细胞对化疗药物的敏感性。

4.预期结果：本研究预计可以通过RNA干扰Folr1基因抑制HNE1细胞增殖，促进细胞凋亡，改变细胞周期，并显著提高其对化疗药物的敏感性，从而探索RNA干扰Folr1基因在提高鼻咽癌细胞对化疗的疗效方面的应用前景。

人参皂苷Rg1对鼻咽癌CNE-2细胞凋亡、侵袭和迁移的影响

人参皂苷Rg1对鼻咽癌CNE-2细胞凋亡、侵袭和迁移的影响席婕;刘晖【摘要】目的探究人参皂苷Rg1对鼻咽癌CNE-2细胞凋亡、侵袭和迁移的影响.方法采用不同浓度的人参皂苷Rg1处理鼻咽癌CNE-2细胞,同时选择无显著细胞毒性的Rg1低浓度、中浓度、高浓度(观察组)进行后续实验,对照组不做Rg1处理.采用CCK-8检测细胞增殖倍数,使用流式细胞术检测细胞凋亡情况,Transwell实验检测细胞侵袭能力,划痕实验检测细胞迁移能力,免疫印迹法检测相关蛋白表达情况.结果与对照组比较,观察组人参皂苷Rg1浓度越高,CNE-2细胞数量越少,增殖倍数、侵袭能力及Ki-67、血管内皮生长因子的表达水平越低,Q2区凋亡细胞越多,Caspase-3蛋白表达水平越高,差异有统计学意义(P<0.01).划线24 h后,观察组的缝隙间距明显大于对照组,差异有统计学意义(P<0.01).结论人参皂苷Rg1可促进鼻咽癌CNE-2细胞凋亡,抑制CNE-2细胞增殖、迁移和侵袭能力,为临床治疗鼻咽癌提供新思路和理论基础.【期刊名称】《临床误诊误治》【年(卷),期】2018(031)012【总页数】6页(P99-104)【关键词】鼻咽肿瘤;人参皂苷类;细胞凋亡;肿瘤侵润【作者】席婕;刘晖【作者单位】710068 西安,陕西省人民医院耳鼻咽喉头颈外科;710068 西安,陕西省人民医院耳鼻咽喉头颈外科【正文语种】中文【中图分类】R739.63鼻咽癌是遗传因素、病毒感染和环境因素共同作用的结果[1-2]，具有地域集中性[3]，是鼻咽部表面上皮细胞覆盖所引起的肿瘤，30%～60%的患者出现肿瘤转移，目前的治疗方法尚未明显改善鼻咽癌的生存率[4]。

最新研究表明，人参的多数生物活性均可归因于一组称为人参皂苷的三萜皂苷[5-6]。

根据化学结构不同，人参皂苷分为原人参二醇(PPD型)和原人参三醇(PPT型)。

PPD型人参皂苷包括Rb1、Rb2、Rg3、Rh2、Rh3，PPT型人参皂苷包括Rg1、Rg2、Rh1[7]。

SIRT1基因沉默对鼻咽癌CNE-1细胞放射敏感性的影响

安徽医科大学学报Ada Unwersitatf Medicinalit Angut2051Feb;56(5)-209-网络出版时间：2020-17-2511：23网络出版地址/ttys:///t ueldcms/Uul/34.1405.R.2020224.1107.022.htmlSIRT1基因沉默对鼻咽癌CNE2细胞放射敏感性的影响肖宁、，李彬2，冯勇5余晓旭57可刚5马志跃2摘要目的探究SIRT1基因沉默对人鼻咽癌细胞CNEG放射敏感性的影响,为鼻咽癌临床治疗提供新的思路。

方法通过Western blot检测鼻咽癌组织及鼻咽癌细胞中SIRT1蛋白的表达情况。

通过脂质体转染SIRT1siRNA至CNEG细胞;利用CCK-C法和流式细胞术检测不同剂量（0、2、4、6、8Gp）的X射线放射处理对CNEC细胞增殖和凋亡的影响。

采用Western blot检测SIRT1沉默后,X射线放射对凋亡相关蛋白Bcl-2、Bap和CdaveX-Caspase3表达的影响。

结果鼻咽癌组织和鼻咽癌细胞中SIRT1蛋白的表达量高于癌旁组织及鼻咽正常上皮细胞NP69中的表达量（P<0.05）o靶向SIRT1基因的siRNA转染能特异性的抑制细胞中SIRT1的表达（P<0.05）Gp剂量的X射线放射处理能降低SIRT1siRNA组CNEG细胞增殖率，并增加凋亡率（P< 0.0、、。

用X射线照射SIRT1基因沉默的CNEC细胞，能增加促凋亡蛋白Bi和CdaveX-Caspase3表达量，降低抑凋亡蛋白BclT的表达量（P<0.05）。

结论SIRT1基因沉默可能通过抑制CNEC细胞增殖，并诱导细胞发生凋亡,从而增强CNEC细胞对放疗的敏感性,SIRT1基因有望成为鼻咽癌治疗的新靶点。

关键词鼻咽癌;SIRT1;基因沉默;放射敏感性;凋亡中图分类号R730.22文献标志码A文章编号1000-）492（2021）02-0287-07Uoi:r4.2405//t iss/1400-222.505）.45.425鼻咽癌是由EB病毒感染诱发的头颈部恶性肿瘤。

放射线诱导hEgr-1-CD对鼻咽癌CNE放射增敏作用的研究

放射线诱导hEgr-1-CD对鼻咽癌CNE放射增敏作用的研究邱素芳;潘建基;吴君心;谢云青;郑秋红;郑天荣【摘要】目的研究放射线诱导hEgr-1-CD自杀基因前药系统对鼻咽癌CNE细胞株放射增敏作用.方法将pcDNA3.1(+)Egr-1-CD利用脂质体转染的方法转染入鼻咽癌细胞株,给予不同剂量的X线照射观察基因表达与放射的剂量效应关系,观察不同的放射线及不同剂量的前药对鼻咽癌细胞的杀伤效应.结果电离辐射可诱导增强自杀基因阳性鼻咽癌CNE细胞株中CD基因的表达,电离辐射与前药5-Fc的联合应用大大增强了对自杀基因阳性细胞的杀伤作用,其杀伤作用大于单独自杀基因前药系统和单独照射.结论 hEgr-1-CD自杀基因前药系统对鼻咽癌CNE细胞株有放射增敏作用,其与放射联合应用对CNE细胞有明显的协同杀伤作用.【期刊名称】《实用癌症杂志》【年(卷),期】2007(022)002【总页数】5页(P119-123)【关键词】Egr-1启动子;CD自杀基因;辐射诱导;鼻咽癌细胞株【作者】邱素芳;潘建基;吴君心;谢云青;郑秋红;郑天荣【作者单位】350014,福建省肿瘤医院;350014,福建省肿瘤医院;350014,福建省肿瘤医院;350014,福建省肿瘤医院;350014,福建省肿瘤医院;350014,福建省肿瘤医院【正文语种】中文【中图分类】R739.63鼻咽癌对放射治疗敏感，目前已有三维适形及逆向调强等先进技术,但鼻咽癌的治愈率仍徘徊在75%左右[1]。

大剂量射线造成正常组织的损伤和后遗症如：放射性口干、张口困难、龋齿、听力下降、放射性脑病、放射性骨坏死等,导致患者生活质量低下，如何进一步提高疗效,减少后遗症及并发症,是当前我们放射肿瘤学研究急待解决的问题。

基因转移效率的高低是影响基因治疗效果的关键因素之一。

早期生长反应基因-1(Egr-1)启动子[2～4]可感受氧自由基经电离辐射刺激而诱导Egr-1基因的表达。