生物化学与分子生物学实验设计报告
生物化学实验报告
生物化学实验报告实验目的，通过本次实验，掌握生物化学实验的基本方法和技能，了解生物化学实验的原理和应用，提高实验操作能力和实验结果分析能力。
实验原理，生物化学实验是利用生物化学原理和方法，对生物体内的化学成分和代谢过程进行研究的实验。
其中包括蛋白质、核酸、酶、碳水化合物等生物分子的分离、鉴定和定量分析。
实验材料和仪器，本次实验所需材料包括，蛋白质、核酸、酶、碳水化合物等生物分子样品；试剂，酚酞、硫酸、氢氧化钠、蛋白质定性试剂、酶定性试剂等；仪器，分光光度计、离心机、电泳仪、显微镜等。
实验步骤：1. 蛋白质的定性实验，取少量蛋白质样品，加入蛋白质定性试剂，观察颜色变化并记录结果。
2. 核酸的定性实验，取少量核酸样品，加入核酸定性试剂，观察颜色变化并记录结果。
3. 酶的定性实验，取少量酶样品，加入酶定性试剂，观察反应情况并记录结果。
4. 碳水化合物的定性实验，取少量碳水化合物样品，加入酚酞试剂，观察颜色变化并记录结果。
5. 生物分子的定量分析，利用分光光度计、离心机、电泳仪等仪器，对生物分子进行定量分析。
实验结果分析，根据实验结果，可以对样品中的蛋白质、核酸、酶、碳水化合物等生物分子进行鉴定和定量分析，从而了解生物体内的化学成分和代谢过程。
实验结论，通过本次实验，掌握了生物化学实验的基本方法和技能，了解了生物分子的定性和定量分析方法，提高了实验操作能力和实验结果分析能力。
实验意义，生物化学实验是生物化学理论与实践相结合的重要环节，通过实验可以加深对生物化学原理和方法的理解，为今后的科研工作和实验教学提供了重要的基础。
在本次实验中，我们不仅学会了生物分子的定性和定量分析方法，还培养了实验操作能力和实验结果分析能力，为今后的科研工作和实验教学打下了良好的基础。
通过本次实验，我们对生物化学实验的原理和应用有了更深入的了解，提高了实验操作能力和实验结果分析能力，为今后的科研工作和实验教学打下了良好的基础。
生物化学实验报告
生物化学实验报告生物化学是一门研究生命体系中化学成分和物质转换过程的科学，其实验研究对于揭示生命的本质、改善人类生命质量具有重要意义。
本文将以实验报告的形式，介绍一次生物化学实验的设计、过程和结果。
一、实验目的本次实验的目的旨在从多个方面探究某种生物化学物质的结构、性质及功能，以及探索该物质在生命体系中的作用。
具体的实验目标包括：1. 通过化学方法及相关仪器对该化合物的分子结构进行分析和测定；2. 对该化合物的氧化还原性进行测定，并探究其可能的氧化还原反应机制；3. 通过光谱分析、酶活性测定等方法，确定该化合物在生命体系中的作用及其机制；4. 总结实验结果，探讨该化合物在生物化学领域中的应用及前景。
二、实验步骤本次实验主要包括以下步骤：1. 提取目标化合物。
选用某一生物体组织作为原料，在适当的化学反应条件下，经过酶促反应、液液抽提、柱层析等步骤，旨在获得目标化合物的高纯度样品。
2. 分析结构。
使用核磁共振(NMR)、高效液相色谱(HPLC)、紫外可见光谱(UV-vis)等现代科学仪器和技术，对提取的化合物进行结构分析和测定，以揭示化合物分子结构，及其性质和可能的反应机制。
3. 氧化还原性测定。
利用常用的氧化还原滴定法，对化合物的氧化还原性进行测定，及探究其可能的氧化还原反应机制。
4. 酶活性测定。
通过对该化合物活性酶的特定底物的催化反应，测定其反应速率及相关动力学参数，以推测该化合物在生命体系中的作用方式及机制。
5. 总结实验结果。
根据所测得的实验数据和分析结果，对该化合物的结构、性质及功能进行总结，即探讨其在生物化学领域中的应用及未来前景。
三、实验结果及分析根据实验数据和分析结果，我们可以得出以下结论：1. 通过化学反应及柱层析等步骤，我们从生物体组织中获得了目标化合物，并通过核磁共振(NMR)等技术分析，揭示了化合物的结构；2. 通过常用的氧化还原滴定法，我们测定了化合物的氧化还原性，并推测了其可能的氧化还原反应机制；3. 通过酶活性测定等方法，我们推测了该化合物在生命体系中的作用机制及性质，具体表现为一定的生物活性及催化能力；4. 综合以上实验结果，我们总结了该化合物在生物化学领域中的应用前景，并探讨了可能的发展方向及挑战。
《生物化学》和《分子生物学》课程实验教学大纲
《生物化学》和《分子生物学》课程实验教学大纲
课程名称：生物化学与分子生物学实验技术
英文名称：Experiment Technology of Biochemistry and Molecular Biology
课程编号：实验课性质：必修
课程负责人：崔行开放实验项目数：3
一、学时、学分
课程总学时：70
课程总学分：2.0
二、适用专业及年级
本大纲适用于医疗、公共卫生、口腔、护理、预防医学七年制学生。
三、实验教学目的与基本要求
掌握人体生命的物质基础，生物大分子的结构和功能。
掌握各种生物物质能量的正常代谢过程，代谢调节，代谢障碍和临床疾病的关系。
通过实验掌握基本的生物化学实验技术及验证部分课堂理论知识。
在实验教学中，要求学生掌握电泳技术、层析技术、分光光度法、离心技术、蛋白质及分子生物学等技术。
掌握蛋白质、核酸、酶类的提取、测定，学习血液成分生化测定，以及部分生物化学理论知识的验证。
掌握紫外—可见分光光度计、高速离心机、PCR仪、层析系统、电泳仪系统、电热恒温水浴箱、凝胶扫描仪、电动匀浆器等仪器的使用，了解其性能、适用范围及注意事项。
四、主要仪器设备
紫外—可见分光光度计、高速离心机、PCR仪、层析系统、电热恒温水浴箱、凝胶扫描仪、电泳仪、电动匀浆器等。
生物实验报告模板
篇一：生物化学实验报告册模板生物化学实验报告姓 名：学 号： 2012000000001专业年级：2012级生物技术组 别： 第五实验室生物化学与分子生物学实验教学中心一、 实验室规则1．实验前应认真预习实验指导，明确实验目的和要求，写出预实验报告。
2．进入实验室必须穿白大衣。
严格遵守实验课纪律，不得无故迟到或早退。
不得高声说话。
严禁拿实验器具开玩笑。
实验室内禁止吸烟、用餐。
3．严格按操作规程进行实验。
实验过程中自己不能解决或决定的问题，切勿盲目处理，应及时请教指导老师。
4．严格按操作规程使用仪器，凡不熟悉操作方法的仪器不得随意动用，对贵重的精密仪器必须先熟知使用方法，才能开始使用；仪器发生故障，应立即关闭电源并报告老师，不得擅自拆修。
5．取用试剂时必须“随开随盖”，“盖随瓶走”，即用毕立即盖好放回原处，切忌“张冠李戴”，避免污染。
6．爱护公物，节约水、电、试剂，遵守损坏仪器报告、登记、赔偿制度。
7．注意水、电、试剂的使用安全。
使用易燃易爆物品时应远离火源。
用试管加热时，管口不准对人。
严防强酸强碱及有毒物质吸入口内或溅到别人身上。
任何时候不得将强酸、强碱、高温、有毒物质抛洒在实验台上。
8．废纸及其它固体废物严禁倒入水槽，应倒到垃圾桶内。
废弃液体如为强酸强碱，必须事先用水稀释，方可倒入水槽内，并放水冲走。
9．以实事求是的科学态度如实记录实验结果，仔细分析，做出客观结论。
实验失败，须认真查找原因，而不能任意涂改实验结果。
实验完毕，认真书写实验报告，按时上交。
10．实验完毕，个人应将试剂、仪器器材摆放整齐，用过的玻璃器皿应刷洗干净归置好，方可离开实验室。
值日生则要认真负责整个实验室的清洁和整理，保持实验整洁卫生。
离开实验室前检查电源、水源和门窗的安全等，并严格执行值日生登记制度。
二、实验报告的基本要求实验报告通过分析总结实验的结果和问题，加深对有关理论和技术的理解与掌握，提高分析、综合、概括问题的能力，同时也是学习撰写研究论文的过程。
《生物化学与分子生物学实验》实验教学大纲
《生物化学与分子生物学实验》实验教学大纲课程名称：生物化学与分子生物学实验课程类别：必修课适用专业：生态学所属实验室：生物化学实验学时、学分：32学时1学分―、实验教学目的《生物化学与分子生物学实验》是和《生物化学与分子生物学》课程同时开设的实验课程，是理论教学的深化和补充，具有较强的实践性，是一门重要的技术基础课，可作为生物技术、生物科学、生态学专业学生的必修课。
通过实验教学，观察某些生化与分子生物学反应现象，使学生巩固和加深对生物化学与分子生物学基本知识和基本理论内容的理解，掌握生化与分子生物学实验的基本操作、实验原理及相关仪器的使用。
通过实践进一步培养学生的科学实验技能与严谨的科学态度，学生通过准确记录、科学分析并作出实事求是的实验报告能够加强提高自身观察问题、分析问题和解决问题的能力及设计和创新能力的培养。
二、实验教学要求本实验课程是生命科学本科实验教学的一个重要组成部分，在实验过程中要求学生自己动手，独立观察并完成实验报告，注重培养学生创新思维与能力。
实验通过学习滴定，比色，层析，电泳、PCR等生化与分子生物学相关基础实验技术，以及实验方法，操作技术，仪器的使用，来分析生物体中糖，蛋白质，核酸，酶等生化物质及代谢过程，培养学生具有初步的科学使用能力及严格的科学作风，掌握基本的生化与分子研究技能为深入各学科研究打下良好基础。
三、对学生的指导和要求（一）实验内容的安排实验课程内容涵盖了验证性实验、综合性实验，设计性创新性实验，在加强学生基本实验技能训练的同时通过设计创新性实验锻炼学生自己查找资料并结合所学基本知识进行实验设计，增加学生自身科研主动性，实验设置能够很好的培养学生的科研素养及动手能力。
(二)学生任务经过多层次的训练后，学生应达到下列要求：1•进一步巩固和加深对生物化学基本知识的理解，掌握生物化学实验的基本知识和基本操作技能。
如生物化学分离、制备、分析和鉴定技术。
2•提高观察问题、分析问题和解决问题的能力。
生物化学与分子生物学教案
生物化学与分子生物学教案标题：生物化学与分子生物学教案一、课程简介生物化学和分子生物学是生命科学领域的重要学科，它们从分子水平研究生命的现象和本质。
本教案旨在帮助学生理解生物化学和分子生物学的概念、技术和方法，掌握生命体系内化学反应的原理和机制。
二、课程目标1、理解生物化学和分子生物学的基本概念，掌握生命体系内的重要化学反应。
2、理解基因、蛋白质等生物大分子的结构与功能，掌握基因表达的调控机制。
3、掌握生物大分子的分离、分析、鉴定技术，了解生物学研究的实验设计和方法。
4、培养学生的科学素养，提高其分析问题、解决问题的能力。
三、课程内容1、生物化学基础：介绍生命体系内的化学反应、能量转换、物质代谢等基本概念和过程。
2、分子生物学：介绍基因、DNA、RNA、蛋白质的结构与功能，基因表达的调控机制等。
3、生物大分子的分离与分析：介绍生物大分子的分离、纯化、分析、鉴定技术，如蛋白质分离纯化、氨基酸序列分析、DNA测序等。
4、实验技术：介绍生物化学和分子生物学实验的基本技术和方法，如基因克隆、DNA重组、基因敲除等。
5、实验设计：培养学生根据研究问题设计实验、分析实验结果的能力。
四、教学方法1、课堂讲解：教师讲解基本概念、理论和实验技术。
2、案例分析：通过具体案例分析，帮助学生理解生物化学和分子生物学的应用。
3、实验室实践：学生在教师指导下进行实验操作，掌握实验技能。
4、小组讨论：学生分组讨论，培养团队协作和沟通能力。
5、问题解答：鼓励学生提问，教师解答学生的疑问。
五、评估方式1、课堂表现：学生的课堂参与度、小组讨论表现等。
2、作业：学生完成课后作业，检验学习成果。
3、实验报告：学生在实验后提交实验报告，包括实验目的、过程、结果和分析。
4、期末考试：全面考察学生对课程内容的掌握情况。
六、教学资源1、教材：选用优秀的生物化学和分子生物学教材，如《生物化学原理》、《分子生物学》等。
2、参考书：推荐相关领域的参考书，帮助学生深入学习。
最新生物化学设计性实验报告
最新生物化学设计性实验报告实验目的：本实验旨在通过设计性实验，探究特定生物化学过程的机制和特点，验证理论假设，并培养学生的科研能力和实验技能。
实验背景：生物化学是研究生物体化学组成、化学变化及这些变化与生物体功能之间关系的科学。
设计性实验是生物化学教学和研究中的重要组成部分，它能够帮助学生更好地理解生物化学的基本概念，并通过实践活动加深对知识的掌握。
实验材料：1. 酶类样品2. 底物溶液3. 缓冲液4. 酶活性测定试剂盒5. 分光光度计6. 离心机7. 微量移液器8. 试管和比色皿9. 冰浴和恒温水浴实验方法：1. 预实验：首先对酶样品进行纯化，并通过酶活性测定初步了解其活性范围。
2. 实验设计：根据预实验结果，设计一系列实验，包括不同pH值、温度、底物浓度对酶活性的影响。
3. 实验操作：a. 准备一系列不同pH值的缓冲液，并调整酶样品和底物溶液至相应pH值。
b. 在不同温度下（如25℃、37℃、50℃）测定酶活性，记录数据。
c. 改变底物浓度，观察米氏常数（Km）和最大速率（Vmax）的变化。
4. 数据分析：利用图表和统计学方法分析实验数据，得出酶活性与实验条件之间的关系。
实验结果：1. pH值对酶活性的影响图显示，酶活性在特定pH值下达到最大，而在过高或过低的pH值下活性显著降低。
2. 温度对酶活性的影响图表明，酶活性随温度升高而增加，但在接近50℃时急剧下降，表明酶可能发生变性。
3. 底物浓度实验结果显示，当底物浓度增加到一定程度后，酶活性趋于平稳，计算得到的Km值与文献值相近。
讨论与结论：通过本实验，我们验证了酶活性受pH值、温度和底物浓度的影响。
实验结果与理论预期相符，表明设计性实验是理解和掌握生物化学原理的有效手段。
同时，实验过程中可能出现的误差和问题也为我们提供了宝贵的学习和改进机会。
分子生物学实验报告
根据测得的O.D值，从标准曲线上查出相对应的RNA含量，按下式计算出制品中RNA的百分含量：
×100%
（4）醋酸纤维素薄膜电泳法分离测定RNA的四种碱基
1）RNA的碱水解：
称取0.20gRNA，溶于5ml 0.3mol/L KOH溶液中，使RNA的浓度达到20～30mg/ml。沸水浴加热30min。将水解液转入到锥形瓶中。冰浴，在冰浴过程中用高锰酸溶液滴定到水解液的PH值为3.5.在2500rpm离心10min。出去沉淀，上层液即是样品。
2）RNA基团鉴定和地衣酚法测定RNA含量的基本原理：
RNA含有核糖、嘌呤碱、嘧啶碱和磷酸组分，加硫酸煮沸可使其水解，用硝酸银、地衣酚和定磷试剂可分别鉴定嘌呤碱、核糖和磷酸组分。
A：嘌呤鉴定：
嘌呤碱与硝酸银反应可生成白色的嘌呤银化物沉淀。
H2SO4AgNo3
RNA嘌呤嘌呤银化物（白色或红棕色）
100℃
酵母含RNA 达2.67—10.0%，DNA 则少于0.03—0.516％。为此，提取RNA多以酵母为原料。
由于RNA得来源很多，因而提取制备方法也各异，一般有苯酚法、稀碱法和浓盐法、去污剂法和盐酸胍法。其中苯酚法又是实验室最常用的方法，次方法能够较好地除去DNA和蛋白质，提取的RNA具有生物活性，两种常见的方法原理为：
核糖定量反应：
RNA
HCl
93℃
4）使用电泳技术进行RNA鉴定的基本原理：
任何物质质点，由于其本身在溶液中的解离或是由于其表面对其他带电质点的吸附，会在电场中向一定的电极移动。一般来说，在碱性溶液中，分子带负电荷，在电场中向正极移动；而在酸性溶液中，分子带正电荷，在电场中向负极移动。不同质点在电场中的移动速度不同，常用泳动度（迁移率）来表示。即带电质点在单位电场强度下的泳动速度。电泳快慢与电场强度、溶液的PH值、溶液的离子强度、电渗现象有关。
生物化学实验报告册模板
生物化学实验报告册模板生物化学实验报告姓名：张三学号： 2012000000001专业年级： 2012级生物技术组别：第五实验室生物化学与分子生物学实验教学中心保持实验整洁卫生。
离开实验室前检查电源、水源和门窗的安全等，并严格执行值日生登记制度。
二、实验报告的基本要求实验报告通过分析总结实验的结果和问题，加深对有关理论和技术的理解与掌握，提高分析、综合、概括问题的能力，同时也是学习撰写研究论文的过程。
1．实验报告应该在专用的生化实验报告本上、按上述格式要求书写。
2．实验报告的前三部分①实验原理、②实验材料（包括实验样品、主要试剂、主要仪器与器材）、③实验步骤（包括实验流程与操作步骤）要求在实验课前预习后撰写，作为实验预习报告的内容。
预习时也要考虑并设计好相应实验记录的表格。
3．每项内容的基本要求（1）实验原理：简明扼要地写出实验的原理，涉及化学反应时用化学反应方程式表示。
（2）实验材料：应包括各种来源的生物样品及试剂和主要仪器。
说明化学试剂时要避免使用未被普遍接受的商品名和俗名。
试剂要标清所用的浓度。
（3）实验步骤：描述要简洁，不能照抄实验讲义，可以采用工艺流程图的方式或自行设计的表格来表示，但对实验条件和操作的关键环节应写清楚，以便他人重复。
（4）实验记录：包括主要实验条件、实验中观察到的现象及实验中的原始数据。
（5）结果（定量实验包括计算）：应把所得的实验结果（如观察现象）和数据进行整理、归纳、分析、对比，尽量用图表的形式概括实验的结果，如实验组与对照组实验结果的比较表等(有时对实验结果还可附以必要的说明)。
（6）讨论：不应是实验结果的重述，而是以结果为基础的逻辑推论。
如对定性实验，在分析实验结果的基础上应有中肯的结论。
还可以包括关于实验方法、操作技术和有关实验的一些问题，对实验异常结果的分析和评论，对于实验设计的认识、体会和建议，对实验课的改进意见等。
（7）结论：一般实验要有结论，结论要简单扼要，说明本次实验所获得的结果。
生物化学与分子生物学实验教程教学设计
生物化学与分子生物学实验教程教学设计一、前言生物化学与分子生物学实验是生物学专业重要的实验之一，也是培养学生实验操作技能和科研能力的重要途径。
本文档旨在为生物化学与分子生物学实验课程的教师提供一份教学设计，以便帮助教师们更好地开展实验教学工作，提高实验课教学质量。
二、实验设计思路本实验旨在帮助学生了解生物化学反应及分子生物学技术的基本原理，培养学生实验操作技能，提高学生实验设计、数据处理与分析及科学文献阅读等能力。
实验首先介绍PCR、蛋白质电泳、Western Blotting等基本技术原理，然后让学生利用这些技术进行数据收集、数据分析以及文献阅读分析等操作，以便加深学生对生物化学实验的实质理解。
三、实验流程1.实验一：DNA提取 * 软件操作：GeneTools软件操作，学生处理自己的数据，可自由选择实验材料； * 实验目的：了解DNA提取技术原理，学习基本的PCR技术，实践DNA扩增操作； * 实验操作：基于DNA提取，利用PCR扩增目标序列，通过基因克隆技术或元素分析进行确认。
2.实验二：蛋白质分析 * 软件操作：根据实验目的不同，选择不同的实验材料，如酵母细胞、细胞生物学等； * 实验目的：了解蛋白质分析技术原理，学习基本的电泳方案的设计、样品处理、文献阅读等技能； * 实验操作：离心样品，利用SDS-PAGE技术进行分离，然后利用Western blotting技术进行成像，获得目标蛋白质信息。
3.实验三：酶动力学实验 * 软件操作：根据实验目的不同，选择不同的实验材料； * 实验目的：学习常用酶中的蛋白质特性，了解酶的基本性质； * 实验操作：利用比色法测定酶的活性、酶的浓度、反应温度及pH等因素对酶活力的影响。
四、实验设备和材料•常规实验室设备及仪器：pH计、分光光度计、电泳仪、洗净浓液泵、高速离心计；•主要实验材料：酵母cell、酵母基因、细胞总RNA、大肠杆菌总蛋白、SDS-PAGE gel、antibody、DNA纯化试剂盒等。
2012分子生物学与生物化学实验操作设计与技能(2)
等著，
本书是知名度很高、 不断更新的《最新 分子生物学实验方 法汇编》(Current Protocols in Molecular Biologyc) 系列的精编版本。
作 者：（美）奥斯伯 等主编，金由辛 等译校 出 版 社：科学出版社 出版时间：2008-5-1 版 次：1页 数：1319字 数：2063000 定 价：￥180.00
溶液II的配制
• • • • • 溶液II：0.2N NaOH ， 1% SDS 配制： 500 ml 10% SDS 50 ml 2N NaOH 50 ml(也可用10N NaOH稀释) 取以上溶液，用灭菌去离子水定容至500 ml，充分混匀。室温保存（不需灭菌）。 此溶液保存时间最好不超过一个月，最好 现用现配。 • 注意：SDS易产生气泡，不要剧烈搅拌。
溶液III的配制
• 溶液 III ：3 M 醋酸钾（KAc）缓冲液， pH 5.6。 5 M 冰醋酸。 • 配制：500 ml • 醋酸钾 147 g • 冰醋酸 57.5 ml • 加入300 ml去离子水后搅拌溶解。待醋酸 钾溶解后，再加去离子水将溶液定容至500 ml。高温高压（121˚C，20分钟）灭菌后， 4℃保存。
TE缓冲液（pH 8.0）的配制
• 10×TE缓冲液（pH 8.0）：100 mM TrisHCl (pH 8.0), 10 mM EDTA (pH 8.0) 。 • 配制：1000 ml • 1 M Tris-HCl 缓冲液(pH 8.0) 100 ml • 500 mM EDTA (pH 8.0) 20 ml • 加入约800 ml的去离子水，均匀混合。溶 液定容至1 L。高温高压（121˚C，20分钟） 灭菌后，4℃保存。
分子生物学实验所需基本工具
分子生物学实验设计实验
分子生物学实验设计实验分子生物学实验设计实验题目：在大肠杆菌中表达绿色荧光基因（EGFP）学院：生命科学学院专业：生态学教师：吴传芳姓名/学号：余光辉/20方成/20一、实验目的在大肠杆菌中表达绿色荧光蛋白二、实验流程三、实验试剂、材料及步骤(一)质粒DNA的提取1.原理碱裂解法是一种应用最为广泛的制备质粒DNA的方法，其基本原理为：当菌体在NaOH和SDS溶液中裂解时，蛋白质与DNA发生变性，当加入中和液后，质粒DNA分子能够迅速复性，呈溶解状态，离心时留在上清中；蛋白质与染色体DNA不变性而呈絮状，离心时可沉淀下来。
经过苯酚、氯仿抽提，RNA酶消化和乙醇沉淀等简单步骤去除残余蛋白质和RNA，所得纯化的质粒DNA已可满足细菌转化、DNA片段的分离和酶切、常规亚克隆及探针标记等要求2.试剂LB培养液:胰蛋白胨（Tryptone）10g，酵母提取物（Yeastextract）5g，NaCl5g，琼脂（固体培养基）15g，用1NNaOH调pH7.5。
溶液Ⅰ：50mmol/L葡萄糖，10mmol/EDTA-Na，25mmol/LTris-HCl(pH8.0)溶液Ⅱ：0.4mol/LNaOH，2%SDS临用前1：1配制。
溶液Ⅲ：5mol/L醋酸钾60ml冰醋酸11.5ml双蒸水28.5ml卡那霉素(20mg/mL)抽提液（饱和酚：氯仿：异戊醇=25：24：1）无水乙醇70%乙醇TE缓冲液或ddH2O培养含有pET28a质粒和pEGFP-N3质粒的大肠杆菌收集裂解细菌、分离纯化质粒DNApET-28a-EGFP的表达及观察重组DNA的转化及重组子的鉴定质粒DNA的限制性内切酶酶切及重组DNA琼脂糖凝胶电泳检测3.材料含质粒pET-28a和pEGFP-N3菌液1.5ml塑料离心管EP管架微量取液器和取液器吸头常用玻璃器皿4.实验步骤（1）将带有质粒pET-28a和pEGFP-N3的大肠杆菌接种在液体培养基中（加氨苄青霉素50g/mL），37℃培养过夜（2）取培养菌液1.5mL置Eppendorf小管中，10000rpm2min，弃上清液（3）加入100L溶液I，漩涡器上充分混匀，在室温下放置10min（4）加入200L新配制的溶液Ⅱ，轻轻翻转2~3次，使之混匀，冰上放置5min（5）加入150L冰冷的溶液Ⅲ，加盖后温和颠倒数次使混匀，产生白色絮状物，冰上放置15min （6）10000rpm5min，取上清液于另一干净的离心管中（7）向上清液中加入等体积（约400L）酚/氯仿/异戊醇（25:24:1，v/v），振荡混匀，10000rpm10min，将上清液转移至新的离心管中（8）加入等体积（约370L）氯仿/异戊醇（24:1），混匀，离心2min,取上清液于新离心管中（9）向上清液加入2倍体积无水乙醇，混匀，-200C放置1h （10）12000rpm5min，倒去上清液，把离心管倒扣在吸水纸上，吸干液体（11）加0.8mL70%乙醇，离心1min，倒去上清液，真空抽干或室温自然干燥30min（12）加30LddH2O，-200C保存备用5.注意（1）饱和酚（取下层）单独吸200L，氯仿：异戊醇（24：1）吸200L（2）制备质粒过程中，所有操作必须缓和，不要剧烈振荡（特别是加入溶液II和III），以避免机械剪切力对DNA的断裂作用(二)DNA琼脂糖凝胶电泳检测1.原理在质粒提取的过程中，由于操作原因，提取的质粒可能有三种：线性DNA、开环DNA、闭环超螺旋DNA。
生物化学与分子生物学 (学科代码：071010)
生物化学与分子生物学（学科代码：071010）一、培养目标本学科培养德、智、体全面发展，具有坚实系统的生物化学与分子生物学理论基础与实践技能，了解生物化学与分子生物学发展的前沿和动态、能够适应我国经 济、科技、教育发展的需要，能熟练使用计算机，掌握一门外国语，成为二十一世纪的从事生物化学与分子生物学研究和教学的高层次人才。
学位获得者应能承担高 等院校、科研院所及高科技企业的教学、科研及开发管理等工作。
二、研究方向1．蛋白质生物化学、2．植物分子生物学、3．基因工程与生物技术、4．医学分子生物学、5．基因组学、6．蛋白质工程、7．环境基因组学、8．系统生物学三、学制及学分按照研究生院有关规定。
四、课程设置英语、政治等公共必修课和必修环节按研究生院统一要求。
学科基础课和专业课如下所列。
基础课:BI05101★细胞分子生物学★（4） BI45201★基因的分子生物学★（4）BI26204 分子遗传学（3）BI45203 生物化学与分子生物学实验原理（I）（3）BI66203 生物大分子的结构与功能（4）专业课:BI74201 生物信息学（2） BI64201 结构生物学I（晶体学）（2）BI64202 结构生物学II（波谱学）（2） BI64203 结构生物学III（光谱学）（2）BI45205 纳米生物学（2）BI45204 生物化学与分子生物学实验原理（II）（3）BI45206 分子免疫学（2） BI15202 神经发育分子生物学（2）BI25202 植物分子生物学与实验（3） BI25203 昆虫分子生物学（2）BI25204 生态学与生物多样性（2） BI35201 细胞生物学实验方法与原理（3）BI55205 实用生物医学论文写作（2） BI65204 核磁共振实验技术（1）BI65701 生物大分子晶体学实验（1） BI75201 生物大分子的分子设计及计算机模拟（2）MA05344 生物统计讲座（3） SH05115 生命科学史（4）BI06100 撰写科学基金申请书（1） BI46201 生化与分子生物学文献阅读与分析(I.文献阅读)（2）BI46203 基因组学（2）BI46202# 生化与分子生物学文献阅读与分析(II.综述写作)#（2）BI46204 高级生物化学（2） BI66204 生物大分子晶体学原理（4）BI66205 生物大分子波谱学原理（4）备注：1.★号课程为博士生资格考试科目；2.# 号课程要求研究生写一篇综述，最后正式发表才能得到2学分。
生物化学与分子生物学教学设计
生物化学与分子生物学教学设计前言生物化学与分子生物学是生命科学的重要组成部分，对于掌握生物学的基础知识、理解细胞机制、解读遗传密码、揭示生命活动规律等方面都有着重要的作用。
本文旨在通过对生物化学与分子生物学的教学设计，探究如何让学生深入了解这门学科，提高学科素养和学术实践能力。
教学目的1.了解生物化学与分子生物学的基本概念、基本原理和基本实验技术。
2.掌握生物大分子结构与功能及其调节机制，深入了解细胞进程分子调控、遗传信息传递的基本规律。
3.理解与掌握生物化学与分子生物学在生命科学领域中的重要作用。
4.提高学生的科学素养和学术实践能力，为进一步深造、从事研究工作打下扎实的基础。
教学内容生化分子结构与功能生物大分子即生命体系中的主要物质，它们的结构和功能具有十分重要的意义。
本课程将介绍以下内容：1.生物高分子的结构与功能：蛋白质、核酸、碳水化合物、脂质等的结构与功能。
2.分子间相互作用的基本规律和生物大分子结构与作用的定量关系。
3.生物大分子的动态机制：代表性的生物大分子运动及其分子机制，如：分子扭曲、反应等活动。
生化代谢与调控生物内部代谢反应是生命体系的基础，而代谢调控是生命活动的重要手段。
本课程将介绍以下内容：1.生物代谢反应的一般规律：能量转换、物质转换和代谢调控等。
2.代谢调控的基本原理及其调控的分子机制：代表性调控方式的分子作用机制。
3.代表性正常和发生代谢异常的生命活动相关代谢途径的研究典型案例。
分子遗传学DNA是生命之源，生物个体之间的差异即源自基因上的差异。
本课程将介绍以下内容：1.分子遗传学的基础：DNA的组成结构、复制与表达等。
2.分子遗传规律发现与探究：基因突变、基因聚类以及基因组结构变异的分子机理。
3.分子遗传学研究的相关前沿和新技术的检测及转化。
教学形式为使学生真正了解生物化学与分子生物学的理论与实践，教学形式安排如下：1.理论课程：通过教师讲解、PPT展示、课堂讨论等形式，讲述课程知识点和案例分析，引导学生探索生物化学与分子生物学的科学内涵与发展趋势。
生物化学与分子生物学教学设计
完善教学评价机制
建立多元化、综合性的教学评价机制 ，全面评价学生的知识、能力和素质 ，为教学改进提供科学依据。
THANKS
04
教学评价与反馈机制建立
过程性评价实施及效果分析
课堂参与度评价
通过观察学生的课堂表现，如提问 、讨论、小组合作等，评估学生的
学习投入程度。
作业与测验评价
定期布置作业和小测验，检查学生 对课堂内容的掌握情况，及时发现
并解决学习问题。
学习笔记评价
鼓励学生记笔记，定期检查笔记内 容，评估学生对知识点的理解和整 理能力。
团队协作和沟通技巧提升
团队协作能力培养
通过分组实验、团队项目等方式，让学生学会在团队中扮演不同 角色，发挥各自优势，共同完成任务。
沟通技巧训练
组织学生进行口头报告、学术海报展示等活动，提高学生的口头 表达和书面沟通能力。
学会倾听与尊重他人
引导学生在团队合作中学会倾听他人意见，尊重不同观点，建立 良好的人际关系。
掌握生物化学与分子生物学的基本概念和 原理，了解相关领域的研究进展和应用。
培养学生运用生物化学与分子生物学知识 分析和解决问题的能力，以及进行实验设 计和数据分析的能力。
培养学生对生命科学领域的兴趣和热情， 树立科学的世界观和价值观。
课程安排与时间表
课程安排
本课程包括理论授课、实验操作和课堂讨论三个部分。理论授课主要介绍生物化学与分子生物学的基本概念和原 理；实验操作部分将指导学生进行基本的实验操作和数据分析；课堂讨论部分将引导学生对相关知识进行深入思 考和探讨。
03
学生能力培养与素质提升
知识结构搭建和能力培养
掌握生物化学与分子生物学的基本概念和原理
通过课堂教学、实验操作和文献阅读等方式，帮助学生建立扎实的知识基础。
生物化学与分子生物学实验设计报告
生物化学与分子生物学实验设计报告班级2010级临床6班姓名、学号：刘顺伟：1010150622 李朝杰1010150619 评分一、实验项目：牛血清白蛋白的提取与鉴定二、实验目的1.掌握电泳的基本原理，加深对蛋白质两性解离性质的理解。
2.掌握醋酸纤维素薄膜电泳法分离血清蛋白质的基本操作。
3.掌握血清白蛋白的提取与鉴定方法。
三、实验原理带电粒子在电场中移动的现象称为电泳。
电泳技术被广泛用于许多大分子物质的分离与鉴定，电泳过程中带电粒子的移动速度与粒子荷电量、电场强度、粒子重量与半径及介质的黏度有关。
其中粒子荷电量又受周围介质的PH和离子强度的影响；电场强度则取决于电泳时所加的电压。
为了克服溶液对电泳离子的影响一般在电泳体系中加入不流动的固相支持物。
根据支持物的不同，将电泳分为许多种类，如滤纸电泳、醋酸纤维素薄膜电泳等。
牛血清白蛋白（即清蛋白）是牛血清中的简单蛋白，是血液的主要成分，分子量69 KD。
等电点4.88。
应用相同浓度硫酸胺盐析法将血清中白蛋白与其它球蛋白分离，最后用透析法除盐，即可提取白蛋白。
再利用醋酸纤维素薄膜电泳法对牛血清白蛋白进行分离，之后染色鉴定。
本实验系以醋酸纤维素薄膜为固体支持物，用于分离血清蛋白质，由于清蛋白及几种球蛋白的特性不同，可被分为清蛋白、α1、α2、β、γ球蛋白等部分：四、实验步骤（一）盐析取离心管一支加入牛血清2 ml、加入等量PBS（磷酸盐缓冲生理盐水）稀释血清，摇匀后，逐滴加入pH 7.2饱和硫酸铵溶液2ml，边加边摇，充分混匀，然后静止放置10分钟，再离心（4000 r/min）10 min，将上清液侵入试管中。
（二）透析取玻璃纸一张，折成袋形，将离心后的上清液倒入袋内，用线扎紧上口（注意要留有空隙），用玻璃棒悬在盛有半杯蒸馏水的100 ml烧杯内，使透析袋下半部侵入水中，对蛋白液进行透析，常用玻璃棒搅拌袋外（烧杯中）+，观液体，以缩短透析时间。
更换蒸馏水多次，用纳氏试剂检查袋外液体的NH4察颜色变化，直至袋内盐分透析完毕。
整理生物化学与分子生物学实验
生物化学与分子生物学实验1.分光光度计（1）基本原理：溶液溶质在其一定波长的吸收光中，其吸光度值与液层厚度和溶液浓度的乘积成正比，即遵循朗伯—比尔定律，通过也在一定液体厚度时测定其吸光度来与标准曲线比较从而测得待测液溶质浓度。
（2）吸光度与液层厚度和溶液浓度的乘积成正比，称为朗伯—比尔定律，简称比尔定律，即光的吸收定律。
其数学表达式为：A＝-lgT＝εbcA：吸光度，又称光密度“”；ε：吸光系数〔L·mol－1·cm－1〕；比例常数，称吸光系数b：样品光程〔cm〕，通常使用1.0cm 的吸收池，则b=1cm；c：样品浓度〔mol/L〕。
吸光度“A”具有加和性,即混合物的总吸光度等于溶液中的各组份各自在该波长下吸光度的算术和。
这是多元混合物分光光度法定量分析的基础。
假设溶液中各溶质的吸光系数ε相同，则各溶质吸光度的大小与溶质浓度成比例。
例：尿嘧啶核苷酸溶液用1cm石英吸收池测定260nm的吸光度为，用同一吸收池测定纯溶剂的吸光度为，已知其摩尔吸光系数×103 M-1cm，计算其摩尔浓度.∵A＝εbC∵A＝〔溶剂加样品的吸光度〕－〔溶剂的吸光度〕∴A＝－＝∵b＝1cm∴×10-5 mol / L〔2〕等电点的计算方法；标准曲线的制作〔1〕配置一系列浓度不同的标准溶液。
〔2〕在测定条件相同的情况下，分别测定其吸光度。
〔3〕以标准溶液浓度为横坐标〔不必考虑显色剂等引起的浓度变化〕，以相应的吸光度为纵坐标，绘制A-C关系图。
〔4〕在相同条件下测出样品溶液的吸光度，从标准曲线上查出浓度。
2、酪蛋白的提取过程：(1).原理；牛乳中主要的蛋白质是酪蛋白，它是一些含磷蛋白质的混合物，等电点为。
利用蛋白质在等电点时溶解度最低的性质，将牛乳的PH调至时，酪蛋白就沉淀出来。
用乙醇洗涤沉淀物，除去脂类杂质后便可得到纯化的酪蛋白。
(2).主要试剂：牛乳醋酸钠缓冲液0.2M,PH４.6，乙醇，乙醚，氢氧化钠PPT后面问题：〔1〕醋酸缓冲液、蒸馏水、乙醇、丙酮洗涤沉淀的目的分别是什么？醋酸缓冲液：调节PH到等电点。
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生物化学与分子生物学实验设计报告
班级2010级临床6班姓名、学号：刘顺伟：1010150622 李朝杰1010150619 评分
一、实验项目：牛血清白蛋白的提取与鉴定
二、实验目的
1.掌握电泳的基本原理，加深对蛋白质两性解离性质的理解。
2.掌握醋酸纤维素薄膜电泳法分离血清蛋白质的基本操作。
3.掌握血清白蛋白的提取与鉴定方法。
三、实验原理
带电粒子在电场中移动的现象称为电泳。
电泳技术被广泛用于许多大分子物质的分离与鉴定，电泳过程中带电粒子的移动速度与粒子荷电量、电场强度、粒子重量与半径及介质的黏度有关。
其中粒子荷电量又受周围介质的PH和离子强度的影响；电场强度则取决于电泳时所加的电压。
为了克服溶液对电泳离子的影响一般在电泳体系中加入不流动的固相支持物。
根据支持物的不同，将电泳分为许多种类，如滤纸电泳、醋酸纤维素薄膜电泳等。
牛血清白蛋白（即清蛋白）是牛血清中的简单蛋白，是血液的主要成分，分子量69 KD。
等电点4.88。
应用相同浓度硫酸胺盐析法将血清中白蛋白与其它球蛋白分离，最后用透析法除盐，即可提取白蛋白。
再利用醋酸纤维素薄膜电泳法对牛血清白蛋白进行分离，之后染色鉴定。
本实验系以醋酸纤维素薄膜为固体支持物，用于分离血清蛋白质，由于清蛋白及几种球蛋白的特性不同，可被分为清蛋白、α1、α2、β、γ球蛋白等部分：
四、实验步骤
（一）盐析取离心管一支加入牛血清2 ml、加入等量PBS（磷酸盐缓冲生理盐水）稀释血清，摇匀后，逐滴加入pH 7.2饱和硫酸铵溶液2ml，边加边摇，充分混匀，然后静止放置10分钟，再离心（4000 r/min）10 min，将上清液侵入试管中。
（二）透析取玻璃纸一张，折成袋形，将离心后的上清液倒入袋内，用线扎紧上口（注意要留有空隙），用玻璃棒悬在盛有半杯蒸馏水的100 ml烧杯内，使透析袋下半部侵入水中，对蛋白液进行透析，常用玻璃棒搅拌袋外（烧杯中）
+，观液体，以缩短透析时间。
更换蒸馏水多次，用纳氏试剂检查袋外液体的NH
4
察颜色变化，直至袋内盐分透析完毕。
将袋内液体倾入试管，即得牛血清白蛋白溶液。
（三）电泳
1．准备：取一条大小为 2.5cm×8cm 的醋酸纤维薄膜（可根据需要选择薄膜的大小），鉴别薄膜的光滑面和非光滑面，并用铅笔作标记，浸入缓冲液中，20分钟后，用镊子轻轻取出，将薄膜无光泽的一面向上，平放在干净滤纸上，薄膜上再放一张干净滤纸，吸去多余的缓冲液。
以醋酸纤维薄膜的无光泽面下端1.5cm处作为点样线。
2．点样：用点样器在盛有血清的表面皿中蘸取少量血清，点样器下端粘上薄层血清，然后将点样器竖直使其沾有血清的顶端紧贴在薄点样线上，待血清全部渗入膜内后，移开点样器。
3．电泳：将薄膜平贴于已放在电泳槽上、点样面朝下，光面朝上，点样端为阴极。
调电压100—120V或电流0.4---0.6 mA/cm，时间为50分钟左右关闭电源。
（四）染色通电完毕后，用镊子将薄膜取出，直接浸于染色液氨基黑10B 中 3～5 min后取出，立即浸于漂洗液中，分别用漂洗液Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ各漂洗5min，至背景无色，用滤纸吸干薄膜。
（五）鉴定比较样品与待测液中白蛋白在薄膜上的电泳结果，看位置是否一致
五、实验仪器和试剂
仪器：离心管、离心机、试管、玻璃纸、烧杯、比色磁盘、滴管、玻璃棒、电泳仪、醋酸纤维素薄膜、分光光度计。
试剂：牛血清待测液、牛血清样品、PBS（磷酸盐缓冲溶液，用0.01 mol/L 磷酸盐缓冲液（pH7.2）配制的0.9% NaCl溶液）、pH7.2饱和磷酸铵溶液、纳氏试剂、巴比妥缓冲液、氨基黑10B染色液、漂洗液、0.4N氢氧化钠溶液。
六、预测结果
位置一致，实验成功。
若在待测液的电泳结果中出现其他球蛋白的黑带区域，则说明提取不够纯。
若出现断带，则点样不好。
七、参考文献
《生物化学与分子生物学》，科学出版社，第二版；
《生物化学与分子生物学实验教程》，第四军医大学出版社（2010）。