植物过氧化氢(H2O2)说明书
过氧化氢(H2O2)检测试剂盒(硫酸钛微板法)
北京雷根生物技术有限公司
2、 配制 100μM 丙酮-H2O2 溶液：取 H2O2 标准准确溶解于蒸馏水中，即得 10mM 的 H2O2。取 H2O2 准确溶解于丙酮中，即为 100μM 的丙酮-H2O2 溶液，按下表依次稀释：
加入物(ml) 丙酮-H2O2 溶液(100μM) 预冷丙酮 H2O2 含量(nmol)
北京雷根生物技术有限公司
简介：
过氧化氢(H2O2)检测试剂盒(硫酸钛微板法)
过氧化氢(H2O2)是生物体内最常见的活性氧分子，主要由 SOD 和 XOD 等催化产生， 由 CAT 和 POD 等催化降解。
Leagene 过氧化氢(H2O2)检测试剂盒(硫酸钛微板法)其检测原理是 H2O2 与硫酸肽反
自备材料：
1、 蒸馏水 2、 丙酮 3、 低温离心机 4、 96 孔板 5、 酶标仪
编号
TO1075 50T
Storage
1ml RT
10.5ml RT
1g
RT
100ml RT
1份
操作步骤(仅供参考)：
1、 准备样品： ①植物样品：取正常或逆境下的新鲜植物组织，清洗干净，擦干，切碎，迅速称取 5g，加 入 5ml 预冷的丙酮，在冰浴条件下迅速匀浆或研磨，4℃ 离心，收集上清液，测量提取液 总体积，4℃保存备用。 ②血浆、血清和尿液样品：血浆、血清按照常规方法制备后可以直接用于本试剂盒的测定， 4℃保存，用于过氧化氢的检测。 ③高活性样品：如果样品中含有较高浓度的过氧化氢，可以使用丙酮进行恰当的稀释。
有效期：12 个月有效。
相关：
编号 CC0005 CS0001 DF0111 DM0007 TC0699 TC1167
名称 磷酸缓冲盐溶液(1×PBS,无钙镁) ACK 红细胞裂解液(ACK Lysis Buffer) 中性福尔马林固定液(10%) 瑞氏-姬姆萨复合染色液 植物总糖和还原糖检测试剂盒(硝基水杨酸法) 尿素(Urea)检测试剂盒(脲酶波氏比色法)
过氧化氢(双氧水)安全技术说明书
双氧水安全技术周知卡一：成分/组成信息化学品名称：过氧化氢化学品英文名称：hydrogen peroxide化学品俗称：双氧水CAS No.：7722-84-1 分子式：H2O2 分子量：34.01有害物成分含量：过氧化氢，27.5% 35% CAS No.：7722-84-1二：危险性概述危险性类别：强氧化性、有腐蚀性侵入途径：食入、皮肤接触健康危害：吸入本品蒸气或雾对呼吸道有强烈刺激性。
眼直接接触液体可致不可逆损伤甚至失明。
口服中毒出现腹痛、胸口痛、呼吸困难、呕吐、一时性运动和感觉障碍、体温升高等。
个别病例出现视力障碍、癫痫样痉挛、轻瘫。
长期接触本品可致接触性皮炎。
燃爆危险：本品助燃，具强刺激性。
环境危害：无三：急救措施皮肤接触：脱去污染的衣着，用大量流动清水冲洗。
眼睛接触：立即提起眼睑，用大量流动清水或生理盐水彻底冲洗至少15 分钟。
就医。
吸入：迅速脱离现场至空气新鲜处。
保持呼吸道通畅。
如呼吸困难，给输氧。
如呼吸停止，立即进行人工呼吸。
就医。
食入：饮足量温水，催吐。
就医。
四：消防措施危险特性：爆炸性强氧化剂。
过氧化氢本身不燃，但能与可燃物反应放出大量热量和氧气而引起着火爆炸。
过氧化氢在pH 值为3.5～4.5 时最稳定，在碱性溶液中极易分解，在遇强光，特别是短波射线照射时也能发生分解。
当加热到100℃以上时，开始急剧分解。
它与许多有机物如糖、淀粉、醇类、石油产品等形成爆炸性混合物，在撞击、受热或电火花作用下能发生爆炸。
过氧化氢与许多无机化合物或杂质接触后会迅速分解而导致爆炸，放出大量的热量、氧和水蒸气。
大多数重金属（如铁、铜、银、铅、汞、锌、钴、镍、铬、锰等）及其氧化物和盐类都是活性催化剂，尘土、香烟灰、碳粉、铁锈等也能加速分解。
浓度超过74％的过氧化氢，在具有适当的点火源或温度的密闭容器中，能产生气相爆炸。
有害燃烧产物：本身不燃烧，分解助燃。
灭火方法：消防人员必须穿全身防火防毒服，在上风向灭火。
过氧化氢溶液说明书
过氧化氢溶液说明书一、产品概述过氧化氢溶液是一种化学试剂，化学式为H2O2。
它是一种无色液体，具有强氧化性和杀菌作用。
过氧化氢溶液广泛应用于医疗卫生、工业生产、环境保护等领域。
二、产品性能1. 强氧化性：过氧化氢溶液能与有机物、无机物发生氧化反应，能有效去除有机污染物、异味等。
2. 杀菌作用：过氧化氢溶液可破坏细菌的细胞膜和核酸，具有较强的杀菌消毒能力。
3. 稳定性：过氧化氢溶液在适当的储存条件下能长时间保持稳定，避免分解产生氧气。
三、产品用途1. 医疗卫生领域：过氧化氢溶液可用于伤口消毒、器械灭菌等。
它能迅速杀灭细菌、病毒和真菌，保持伤口清洁，促进伤口愈合。
2. 工业生产领域：过氧化氢溶液可用于漂白、脱色、废水处理等。
它能有效氧化去除有机物染料，提高产品质量。
3. 环境保护领域：过氧化氢溶液可用于空气净化、水质净化等。
它能分解有害气体、去除重金属离子，净化环境。
四、使用方法1. 伤口消毒：将过氧化氢溶液倒入清洁容器中，用棉球或纱布蘸取溶液轻擦伤口表面，保持伤口湿润。
2. 器械灭菌：将过氧化氢溶液浸泡于器械中，保持一定时间后取出，用无菌纱布擦拭干净。
3. 漂白脱色：将过氧化氢溶液稀释后，加入待处理物品中，浸泡一段时间后取出，用清水冲洗干净。
4. 废水处理：根据废水污染程度和处理要求，将适量的过氧化氢溶液添加到废水中，搅拌均匀后进行净化处理。
五、注意事项1. 使用过程中应佩戴防护手套、口罩等个人防护装备，避免溶液接触皮肤、眼睛等部位。
2. 避免过氧化氢溶液与可燃物接触，以免引起火灾或爆炸。
3. 储存过氧化氢溶液时，应避免阳光直射，存放在阴凉、通风干燥的地方，远离火源和易燃物。
4. 过氧化氢溶液应避免与酸、碱等物质混合，以免产生有毒气体或爆炸。
5. 使用过程中如有不适或误服，应立即停止使用，并及时就医。
六、包装与储存过氧化氢溶液通常采用密封塑料瓶包装，不透光。
每瓶标注有产品名称、规格、生产日期等信息。
植物叶片中过氧化氢含量测定方法的改进
5、离心：将反应后的离心管放入离心机中，离心10分钟，分离出上层清液。 6、检测：将上层清液滴加到光电倍增管上，记录光子数。
7、结果计算：根据光子数计算过氧化氢浓度。
三、注意事项
1、实验过程中要保持温度和pH值的稳定，以免影响实验结果。 2、选取的植物组织要健康、无病虫害，以保证实验结果的可靠性。
二、实验步骤
1、准备试剂和设备：准备好过氧化物酶、底物、缓冲液、离心管、离心机、 光电倍增管等。
2、样品处理：选取健康的植物组织，用蒸馏水冲洗干净，然后用滤纸吸干 表面水分。将组织切成小块，放入离心管中。
3、添加试剂：向离心管中加入适量的缓冲液、过氧化物酶和底物，充分混 合均匀。
4、反应：将离心管放入37℃恒温摇床中反应30分钟。
本次演示旨在探讨一种快速测定植物叶片叶绿素含量的方法，为相关研究提 供参考。
方法介绍
目前，测定植物叶片叶绿素含量的方法主要包括分光光度法、光谱法、荧光 法等。其中，分光光度法是最常用的方法之一。本实验采用分光光度法中的 Arnon-Noory公式，通过测量叶片在663nm和645nm处的吸光度来计算叶绿素含量。 该公式已被广泛应用于叶绿素含量的快速测定。
3、测量吸光度：将研磨好的匀浆倒入比色杯中，加入适量的80%丙酮溶液， 充分摇匀后，在分光光度计上分别测量663nm和645nm处的吸光度。
4、数据处理：根据Arnon-Noory公式计算叶绿素含量。
1、不同植物的叶绿素含量存在 差异
2、不同部位的叶片叶绿素含量 也有所不同
结论
通过实验，我们探讨了一种快速测定植物叶片叶绿素含量的方法，并发现不 同植物及不同部位叶片的叶绿素含量存在差异。这些差异可能是由植物本身的生 物学特性、环境因素等共同作用的结果。
过氧化氢（H2O2）安全使用说明书
过氧化氢（H2O2）安全使用说明书过氧化氢(H2O2) 安全使用说明书（一）理化性状与用途无色透明液体，深层时略带淡兰色。
密度；1.44；冰点-0.4℃；爆炸极限：26～100%。
用作氧化剂、漂白剂、杀菌剂、消毒剂、发色剂。
高浓度的过氧化氢可用作火箭动力燃料。
（二）毒性它的毒性主要是由它的活性氧化作用所引起的，如对眼睛、皮肤和黏膜的化学灼伤，以及使普通衣物着火等。
（三）短期暴露的影响由于本品不易挥发，吸入蒸气中毒的可能性很小，且它具有强烈烧灼感，故吞入的可能性很小。
主要是皮肤接触引起烧伤，是局部皮肤和毛发发白（但过一段时间后可复原），产生刺痛、瘙痒。
（四）长期暴露的影响由于量、时间、作用部位不同产生程度不等的化学灼伤。
渗入皮肤角质层后分解产生氧，使表皮起泡，因手掌、指尖及甲床等处角质层较厚，末梢神经丰富，疼痛更为剧烈，难以忍受。
剂量较大、冲洗不及时，可留下永久疤痕。
液滴溅入眼内，可引起结膜炎、虹膜睫状体炎及角膜上皮变性、坏死和浑浊，影响视力或导致完全失明。
（五）火灾与爆炸本品属爆炸性强氧化剂。
它本身是不燃的，但它能与可燃物反应并产生足够的热量而引起着火，又由于它分解所放出的氧能强烈助燃，最终可导致爆炸。
着火时用水扑救，并用水冷却其他容器，若发现高浓度过氧化氢容器排气孔中冒出蒸气，所有人员应迅速撤至安全地方，操作人员均应做到全身防护。
（六）化学反应性在碱溶液中极易分解，在强光，特别是短波射线照射下，也能发生分解。
能与许多有机物如糖、淀粉、醇类、石油产品等形成的混合物是敏感的，在冲击和热量或电火花作用下能发生爆炸，与氧化物混合，存在潜在的危险性。
（七）人身防护皮肤：应使用橡胶和氯丁橡胶手套、天然橡胶高统靴、聚氯乙烯防护服、聚乙烯围裙和袖套以及头巾等。
工作的场所应备有可用的安全淋浴和眼睛冲洗器具。
眼睛；戴护目镜、塑料面具。
（八）急救皮肤接触；应立即用水冲洗，也可以用3%高锰酸钾或2%碳酸钠溶液冲洗。
如皮肤灼伤剧痛不止，应用本巴比妥钠或咖啡，并防止继发性感染。
过氧化氢（H2O2）含量检测试剂盒说明书
过氧化氢（H2O2）含量检测试剂盒说明书可见分光光度法货号：BC3590规格：50T/48S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称规格保存条件试剂一液体100 mL×1瓶（自备）4℃保存试剂二粉剂×1瓶4℃保存试剂三液体12 mL×1瓶4℃保存试剂四液体60 mL×1瓶4℃保存标准品液体1 mL×1支4℃保存溶液的配制：1、试剂一：丙酮自备。
2、试剂二：临用前加入6 mL浓盐酸充分溶解备用，用不完的试剂4℃保存。
3、标准品：1mmol/mL H2O2标准液。
产品说明：H2O2是生物体内最常见的活性氧分子，主要由SOD和XOD等催化产生，由CAT和POD等催化降解。
H2O2不仅是重要的活性氧之一，也是活性氧相互转化的枢纽。
一方面，H2O2可以直接或间接地氧化细胞内核酸，蛋白质等生物大分子，并使细胞膜遭受损害，从而加速细胞的衰老和解体；另一方面H2O2也是许多氧化应激反应中的关键调节因子。
H2O2与硫酸钛生成黄色的过氧化钛复合物，在415nm有特征吸收。
技术指标：最低检出限：0.002 μmol/mL线性范围：0.0097-1.5 μmol/mL注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、丙酮、浓盐酸、研钵/匀浆器和冰。
操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）1、细菌、细胞或组织样本的制备：收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照每500万细菌或细胞加入1mL试剂一，超声波破碎细菌或细胞（功率20%，超声3秒，间隔10秒，重复30次）；8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
2、组织样本的制备：称取约0.1g组织，加入1mL试剂一进行冰浴匀浆；8000g 4℃离心10min，取全部上清液（注意吸取干净），置冰上待测。
植物(Plant)过氧化氢(H2O2)ELISA试剂盒说明书
本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断植物（Plant）过氧化氢（H2O2）ELISA检测试剂盒使用说明书检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。
往预先包被过氧化氢（H2O2）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。
用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的过氧化氢（H2O2）呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法1.样本不能含叠氮钠（NaN3），因为叠氮钠（NaN3）是辣根过氧化物酶（HRP）的抑制剂。
2.标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行。
3.植物萃取液或其它相关样本：请1000x g离心20分钟，取上清即可检测。
4.保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品1.酶标仪（450nm）2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3.37℃恒温箱操作注意事项1.试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。
从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。
3.浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。
4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5.所有液体组分使用前充分摇匀。
试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL3mL无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无注：标准品（S0-S5）浓度依次为：0、5、10、20、40、80μmol/L试剂的准备20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
实验40--植物组织中过氧化氢含量及过氧化氢酶活性测定
实验40 植物组织中过氧化氢含量及过氧化氢酶活性测定植物在逆境下或衰老时，由于体内活性氧代谢加强而使H2O2发生累积。
H2O2可以直接或间接地氧化细胞内核酸，蛋白质等生物大分子，并使细胞膜遭受损害，从而加速细胞的衰老和解体。
过氧化氢酶可以清除H2O2，是植物体内重要的酶促防御系统之一。
因此，植物组织中H2O2含量和过氧化氢酶活性与植物的抗逆性密切相关。
本实验用分光光度法测定过氧化氢含量，利用高锰酸钾滴定法和紫外吸收法测定过氧化氢酶活性。
一、过氧化氢含量的测定【原理】H2O2与硫酸钛（或氯化钛）生成过氧化物—钛复合物黄色沉淀，可被H２SO4溶解后，在415nm波长下比色测定。
在一定范围内，其颜色深浅与H2O2浓度呈线性关系。
【仪器和用具】研钵；移液管0.2ml×2支，5ml×1支；容量瓶10ml×7个，离心管5ml×8支；离心机；分光光度计。
【试剂】100μmol/L H2O2丙酮试剂：取30%分析纯H2O2 57μl，溶于100ml，再稀释100倍；2mol/L硫酸；5%（W/V）硫酸钛；丙酮；浓氨水。
【方法】1.制作标准曲线：取10ml离心管7支，顺序编号，并按表40-1加入试剂。
待沉淀完全溶解后，将其小心转入10ml容量瓶中，并用蒸馏水少量多次冲洗离心管，将洗涤液合并后定容至10ml刻度，415nm波长下比色。
2.样品提取和测定：(1)称取新鲜植物组织2~5g（视H2O2含量多少而定），按材料与提取剂1∶1的比例加入4℃下预冷的丙酮和少许石英砂研磨成匀浆后，转入离心管3000 r/min下离心10min，弃去残渣，上清液即为样品提取液。
(2)用移液管吸取样品提取液1ml，按表35-1加入5%硫酸钛和浓氨水，待沉淀形成后3000rpm/min离心10min，弃去上清液。
沉淀用丙酮反复洗涤3～5次，直到去除植物色素。
(3)向洗涤后的沉淀中加入2mol 硫酸5ml，待完全溶解后，与标准曲线同样的方法定容并比色。
过氧化氢(双氧水)
过氧化氢MSDS第一部分：化学品名称化学品中文名称：过氧化氢化学品英文名称: hydrogen peroxide技术说明书编码：559CAS No。
: 2014分子式：H2O2分子量: 50第二部分：危险性概述危险性类别：11（氧化剂），20（腐蚀品）侵入途径：吸入、食入健康危害：吸入本品蒸气或雾对呼吸道有强烈刺激性.眼直接接触液体可致不可逆损伤甚至失明。
口服中毒出现腹痛、胸口痛、呼吸困难、呕吐、一时性运动和感觉障碍、体温升高等.个别病例出现视力障碍、癫痫样痉挛、轻瘫。
长期接触本品可致接触性皮炎。
燃爆危险：本品助燃，具强刺激性。
第三部分：成分/组成信息有害物成分含量CAS No。
过氧化氢50% 2014第四部分：急救措施皮肤接触：脱去污染的衣着，用大量流动清水冲洗。
眼睛接触：立即提起眼睑，用大量流动清水或生理盐水彻底冲洗至少15分钟。
就医。
吸入：迅速脱离现场至空气新鲜处。
保持呼吸道通畅.如呼吸困难,给输氧。
如呼吸停止，立即进行人工呼吸.就医。
食入: 饮足量温水，催吐。
就医。
第五部分：消防措施危险特性：爆炸性强氧化剂。
过氧化氢本身不燃,但能与可燃物反应放出大量热量和氧气而引起着火爆炸。
过氧化氢在pH值为3.5～4。
5时最稳定,在碱性溶液中极易分解,在遇强光，特别是短波射线照射时也能发生分解。
当加热到100℃以上时，开始急剧分解。
它与许多有机物如糖、淀粉、醇类、石油产品等形成爆炸性混合物，有害燃烧产物：氧气、水。
灭火方法: 消防人员必须穿全身防火防毒服，在上风向灭火.尽可能将容器从火场移至空旷处。
喷水保持火场容器冷却，直至灭火结束。
处在火场中的容器若已变色或从安全泄压装置中产生声音，必须马上撤离。
灭火剂：水、雾状水、干粉、砂土。
第六部分:泄漏应急处理应急处理: 迅速撤离泄漏污染区人员至安全区，并进行隔离，严格限制出入。
建议应急处理人员戴自给正压式呼吸器，穿防毒服。
尽可能切断泄漏源。
防止流入下水道、排洪沟等限制性空间.小量泄漏：用砂土、蛭石或其它惰性材料吸收。
过氧化氢H2O2说明书
过氧化氢H2O2说明书过氧化氢（H 2O 2）测定方法说明书一、原理：过氧化氢H 2O 2可以与钼酸作用生成一种络合物在405nm 处测定其生成量可计算出H 2O 2的量。
二、试剂组成与配制：1、试剂一：液体60ml ⅹ1瓶，4℃保存6个月；2、试剂二：液体60ml ⅹ1瓶，4℃保存6个月（过饱和溶液，如有结晶析出，可60℃水浴溶解后使用）；3、H 2O 2标准品贮备液5ml ⅹ1瓶，4℃保存6个月；163mmol/L H 2O 2标准品应用液的配制：临用时按H 2O 2标准贮备液︰蒸馏水=1︰9比例稀释,现用现配。
三、操作方法：空白管标准管测定管试剂一（ml ）（37℃预温） 1 1 1蒸馏水（ml ） 0.1163mmol/L H 2O 2标准品应用液（ml ） 0.1样本（ml ） 0.1混匀，37℃准确反应1分钟试剂二（ml ） 1 1 1 混匀，于405nm 处，1cm 光径，蒸馏水调零，测各管吸光度值。
四、注意点：1、试剂要37℃预温10分钟。
2、样本取样量要做预试，若取样量太大，吸光度大于0.8以上必须将样本进行稀释。
若取样量太小，吸光度小于0.05以下，则要将取样量增加。
（标准管中的标准品应用液及空白管中的蒸馏水均要同样量增加）南京建成生物工程研究所南京建成科技有限公司地址：南京市中央路258－27号电话：（025）83360321新立基大厦11层1106室 83360969 83113890邮编： 210009 83112287(财务) 83360272(技术电话) 联系人：季建平传真：（025）83227943 83609960 投诉电话：（025）57713719/138********短信：138********建成主页：/doc/fa8012929.html, （建成生物）/doc/fa8012929.html,(建成科技)E -maiL:njjcbio@/doc/fa8012929.html,附录Ⅰ血清(浆)中H 2O 2的测定一、样本前处理：直接取原液检测。
植物过氧化氢(H2O2)说明书
本文由上海哈灵生物科技有限公司提供上海哈灵试剂供应商感谢您阅读本文植物过氧化氢(H2O2)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定植物组织，细胞及相关液体样本中过氧化氢(H2O2)的含量。
实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中植物过氧化氢(H2O2)水平。
用纯化的植物过氧化氢(H2O2)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入过氧化氢(H2O2)，再与HRP标记的过氧化氢(H2O2)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的过氧化氢(H2O2)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中植物过氧化氢(H2O2)浓度。
试剂盒组成：样本处理及要求：1. 组织标本：切割标本后，称取重量。
加入一定量的PBS，PH7.4。
用液氮迅速冷冻保存备用。
标本融化后仍然保持2-8℃的温度。
加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
分装后一份待检测，其余冷冻备用。
2. 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.3. 不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤：1.标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在第一、第二孔中分别加标准品100μl，然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。
过氧化氢(H2O2)含量检测试剂盒说明书 微量法
过氧化氢（H 2O 2）含量检测试剂盒说明书微量法注意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。
货号：BC3595规格：100T/96S 产品内容：试剂一：丙酮100mL×1瓶，4℃保存；（自备）试剂二：粉剂×1瓶，4℃保存；临用前加入3mL 浓盐酸充分溶解备用。
用不完的试剂4℃保存；试剂三：液体6mL×1瓶，4℃保存；试剂四：液体30mL×1瓶，4℃保存；标准品：液体1mL×1支，4℃保存，1mmol/mL H 2O 2标准液。
产品说明：H 2O 2是生物体内最常见的活性氧分子，主要由SOD 和XOD 等催化产生，由CAT 和POD 等催化降解。
H 2O 2不仅是重要的活性氧之一，也是活性氧相互转化的枢纽。
一方面，H 2O 2可以直接或间接地氧化细胞内核酸，蛋白质等生物大分子，并使细胞膜遭受损害，从而加速细胞的衰老和解体；另一方面H 2O 2也是许多氧化应急反应中的关键调节因子。
H 2O 2与硫酸钛生成黄色的过氧化钛复合物，在415nm 有特征吸收。
需自备的仪器和用品：可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、丙酮、浓盐酸、研钵和冰。
操作步骤：一、H 2O 2提取：1、细菌或细胞样品的制备：收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照每500万细菌或细胞加入1mL 试剂一，超声波破碎细菌或细胞（功率20％，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
2.组织样品的制备：称取约0.1g 组织，加入1mL 试剂一进行冰浴匀浆；8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
3、血清（浆）样品：按照每100μL 血清（浆）加入0.9mL 试剂一的比例充分混匀；8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
注意事项：1、由于试剂一易挥发，试剂一必须先预冷再加，研磨时必须在冰上研磨。
3%过氧化氢溶液说明书
3%过氧化氢溶液说明书
使用说明书
名称：3%过氧化氢溶液
成分：过氧化氢（H2O2）
用途：
1. 医学用途：医用级3%的过氧化氢溶液，能通过分解释放出氧，并具有消毒、防腐、除臭及清洁的作用。
可用以清洗创面、溃疡、脓窦、耳内脓液，以及涂抹治疗面部褐斑(肝斑)。
在应用时应注意不同的浓度，3%的溶液可用于清洗创面、溃疡、脓窦、耳内脓液，也可涂抹治疗面部褐斑(肝斑)。
2. 日常用途：如用于衣物、玩具、餐具等物品的消毒。
使用方法：
1. 清洁表面：使用蘸有3%过氧化氢溶液的布轻轻擦拭物体表面。
2. 消毒处理：将3%过氧化氢溶液喷洒或涂抹在待消毒物品上，等待数分钟后，使用清水冲洗干净。
注意事项：
1. 请勿直接喷洒到眼睛、口腔和皮肤上。
若不慎接触到眼睛，请立即用清水冲洗。
2. 对于浓缩过氧化氢溶液的保存，应密闭放置在避光和阴凉处。
3. 过氧化氢具有腐蚀性和强刺激性，在使用时请避免接触眼睛、口腔和皮肤。
4. 如有不适，请及时停止使用并咨询医生。
储存方式：密闭保存于阴凉、避光处，避免阳光直射和高温。
有效期：本产品有效期为1年，请在有效期内使用。
生产商：[公司名称]
联系方式：[电话号码]或[电子邮件地址]。
双氧水-安全技术说明书(MSDS)
双氧水-安全技术说明书(MSDS)双氧水-安全技术说明书（MSDS）1.产品和公司信息1.1 产品名称：双氧水1.2 公司名称：xxx公司1.3 地址：xxxxx1.4 电话：xxxx2.成分/组成信息2.1 双氧水的分子式为H2O2，是一种无色、无味的液体。
2.2 双氧水中含有30%、35%、50%、70%等不同浓度的氧化氢。
3.紧急救援措施3.1 皮肤接触：立即脱下被污染的衣物，用水冲洗至少15分钟，必要时就医。
3.2 眼睛接触：立即用大量流动清水冲洗至少15分钟，必要时就医。
3.3 吸入：迅速带入新鲜空气。
如呼吸困难，应立即进行人工呼吸和呼吸兼容性，必要时就医。
3.4 食入：立即就医。
4.消防措施4.1 灭火介质：建议使用二氧化碳、泡沫、干粉等灭火剂进行灭火。
4.2 灭火注意事项：当遇到火源时，可能会爆炸，所以需要在安全距离以外进行灭火。
4.3 防护装备：使用适当的防火和个人防护设备。
5.泄漏处置措施5.1 个人防护：戴防护手套、防护服和防护眼镜等必要的防护设备。
5.2 泄漏处置：封锁泄漏点、迅速收集可能泄漏的物质并置于容器内，清除泄漏区域。
如泄漏量较大，应选择花园管道进行排放。
5.3 废物处理：无害化处理，妥善处理废弃物。
6.操作注意事项6.1 操作前必须了解这种化学品的危害性和对人体皮肤和眼睛的刺激性。
6.2 操作时必须佩戴适当的防具（如手套、防护眼镜等）。
6.3 在操作过程中，请尽可能不要接触皮肤和眼睛，并避免吸入气雾，吞咽和吸入液体。
6.4 操作完成后应及时清洗所有操作器材，并保持工作场所整洁干净。
7.储存和运输注意事项7.1 储存：应存放在避光、防潮、通风、干燥的库房，远离可引发爆炸的材料和火源，并保持密封状态。
7.2 运输：在运输过程中，应避免与有机物、氧化性和还原性物质混合，保持干燥、通风、避光、防潮、防震，并严格遵守相关运输规定。
8.暴露控制和个人保护8.1 工程控制：在操作过程中要尽可能减少或避免释放物质。
过氧化氢（双氧水）
过氧化氢（双氧水）过氧化氢MSDS第一部分：化学品名称化学品中文名称：过氧化氢化学品英文名称：hydrogen peroxide技术说明书编码：559CAS No.：2014分子式：H2O2分子量：50第二部分：危险性概述危险性类别：11(氧化剂)，20(腐蚀品)侵入途径：吸入、食入健康危害：吸入本品蒸气或雾对呼吸道有强烈刺激性。
眼直接接触液体可致不可逆损伤甚至失明。
口服中毒出现腹痛、胸口痛、呼吸困难、呕吐、一时性运动和感觉障碍、体温升高等。
个别病例出现视力障碍、癫痫样痉挛、轻瘫。
长期接触本品可致接触性皮炎。
燃爆危险：本品助燃，具强刺激性。
第三部分：成分/组成信息有害物成分含量CAS No.过氧化氢50% 2014第四部分：急救措施皮肤接触：脱去污染的衣着，用大量流动清水冲洗。
眼睛接触：立即提起眼睑，用大量流动清水或生理盐水彻底冲洗至少15分钟。
就医。
吸入：迅速脱离现场至空气新鲜处。
保持呼吸道通畅。
如呼吸困难，给输氧。
如呼吸停止，立即进行人工呼吸。
就医。
食入：饮足量温水，催吐。
就医。
第五部分：消防措施危险特性：爆炸性强氧化剂。
过氧化氢本身不燃，但能与可燃物反应放出大量热量和氧气而引起着火爆炸。
过氧化氢在pH值为3.5～4.5时最稳定，在碱性溶液中极易分解，在遇强光，特别是短波射线照射时也能发生分解。
当加热到100℃以上时，开始急剧分解。
它与许多有机物如糖、淀粉、醇类、石油产品等形成爆炸性混合物，有害燃烧产物：氧气、水。
灭火方法：消防人员必须穿全身防火防毒服，在上风向灭火。
尽可能将容器从火场移至空旷处。
喷水保持火场容器冷却，直至灭火结束。
处在火场中的容器若已变色或从安全泄压装置中产生声音，必须马上撤离。
灭火剂：水、雾状水、干粉、砂土。
第六部分：泄漏应急处理应急处理：迅速撤离泄漏污染区人员至安全区，并进行隔离，严格限制出入。
建议应急处理人员戴自给正压式呼吸器，穿防毒服。
尽可能切断泄漏源。
防止流入下水道、排洪沟等限制性空间。
双氧水安全技术说明书
双氧水安全技术说明书双氧水安全技术说明书（上）一、产品概述双氧水是一种强氧化剂，化学式为H2O2，质量分数通常在30％~50％左右。
它是一种无色液体，具有很强的氧化性和易挥发性，在制药、化妆品和汽车等行业有着广泛的应用，同时也可以作为消毒剂使用。
本安全技术说明书旨在帮助用户更好地理解和使用双氧水，以及提高对于双氧水的使用安全性。
二、使用前须知1.双氧水应储存在阴凉、干燥、通风的场所，以避免暴露于高温、阳光直射及火源。
2.双氧水有较强的氧化性，应与有机物、可燃物、还原剂等隔离存放。
3.使用双氧水前，应佩戴防护手套、眼镜、口罩等必要的安全防护装备，并确保周围环境无明火或产生火花。
4.不得将双氧水直接倒入水中，应向水中缓慢加入，以免产生剧烈的反应。
5.双氧水应与其他化学品分开存放、运输。
6.在使用双氧水时，应先进行适当的试验，确保满足使用要求。
三、使用方法1.双氧水作为消毒剂使用时，应先将表面污物清洗干净，然后将适量的双氧水喷洒在表面，等待一定时间后用水清洗干净。
2.在制药、化妆品领域中，双氧水可以用于漂白或增白某些原材料，也可以作为氧化剂使用。
使用时应按照使用要求进行。
3.双氧水在汽车行业中，主要作为发动机冷却水的氧化剂使用。
在使用前，应先将发动机内的水排空，然后加入适量的双氧水并混合均匀。
四、应急处理1.万一发生双氧水泄漏事故，应立即迅速开展应急处理，必要时应调动专业救援队伍。
2.泄漏的双氧水会迅速挥发，因此在处理前要先穿戴适当的防护装备，以避免造成人员伤害。
3.泄漏的双氧水要立即清除，并用水清洗彻底。
五、注意事项1.双氧水是一种易挥发性液体，具有较强的腐蚀性和氧化性，必须防倒、防撞、防震动、防晒、防潮，以保证其稳定性和安全性。
2.如涉及到双氧水的储备、搬运、使用等工作，必须由专业人员操作，并按照规定进行操作。
3.双氧水应远离热源、火源、电子设备等易燃、易爆物品。
4.使用双氧水时，应先仔细阅读本安全技术说明书，并按照使用要求进行操作，以确保使用安全稳定。
过氧化氢(双氧水)化学品安全技术说明书
过氧化氢(双氧水)化学品安全技术说明书
第二部分：成分/组成信息
有害物成分含量CAS No. 过氧化氢35% 7722-84-1
第六部分：泄漏应急处理
应急处理：迅速撤离泄漏污染区人员至安全区，并进行隔离，严格限制出入。
建议应急处理
人员戴自给正压式呼吸器，穿防毒服。
尽可能切断泄漏源。
防止流入下水道、排
洪沟等限制性空间。
小量泄漏：用砂土、蛭石或其它惰性材料吸收。
也可以用大
量水冲洗，洗水稀释后放入废水系统。
大量泄漏：构筑围堤或挖坑收容。
喷雾状
水冷却和稀释蒸汽、保护现场人员、把泄漏物稀释成不燃物。
用泵转移至槽车或
专用收集器内，回收或运至废物处理场所处置。
双氧水msds
双氧水msds过氧化氢H2O2化学品安全技术说明书双氧水化学品安全技术说明书（MSDS）第一部分化学品及企业标志化学品中文名称：过氧化氢化学品俗名或商品名：双氧水化学品英文名称：hydrogenpero某ide;分子式：H2O2第二部分成分/组成信息√纯品混合物有害物成分过氧化氢浓度：35%CASNO：7722-84-1第三部分危险品概述危险性类别：第5.1类氧化剂侵入途径：吸入、食入、经皮吸收。
健康危害：吸入本品蒸气或雾对呼吸道有强烈刺激性。
眼直接接触液体可致不可逆损伤甚至失明。
口服中毒出现腹痛、胸口痛、呼吸困难、呕吐、一时性运动合感觉障碍、体温升高等。
个别病例出现视力障碍、癫痫样痉挛、轻瘫。
长期接触本品可致接触性皮炎。
环境危害：燃爆危险：本品助燃，具强刺激性。
第四部分急救措施皮肤接触：涎渐污染的衣着，用大量流动清水冲洗。
眼睛接触：立即提起眼睑，用大量流动清水或生理盐坍彻底冲洗至少15分钟。
就医。
吸入：迅速脱离现场至空气新鲜处。
保持呼吸道通畅。
如呼吸困难，给输氧。
如呼吸停止，立即进行人工呼吸。
就医。
食入：饮足量温水，催吐。
就医。
第五部分消防措施危险特征：爆炸性强氧化剂。
过氧化氢本身不燃，但能与可燃物反应放出大量热量合氧气而引起着火爆炸。
过氧化氢在pH值为3.5～4.5时最稳定，在碱性溶液中极易分解，在遇强光，特别是短波射线照射时也能发生分解。
当加热到100℃以上时，开始急剧分解。
它与许多有机物如糖、淀粉、醇类、石油产品等形成爆炸性混合物，在撞击、受热或电火花作用下能发生爆炸。
过氧化氢与许多无机化合物或杂质接触后会迅速分解而导致爆炸，放出大量的热量、氧合水蒸气。
大多数重金属（如铁、铜、银、铅、汞、锌、钴、镍、铬、锰等）及其氧化物合盐垒浼是活性催化剂，尘土、香烟灰、碳粉、铁锈等也能加速分解。
浓度超过74％的过氧化氢，在具有适当的点火源或温度的密闭容器中，能产生气相爆炸。
有害燃烧产物：氧气、水。
灭火方法：消防人员必须穿全身防火防毒服，在上风向灭火。
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植物过氧化氢（H2O2）酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定植物组织，细胞上清及相关液体样本中过氧化氢（H2O2）的含量。
实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中植物过氧化氢（H2O2）水平。
用纯化的植物过氧化氢（H2O2）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入过氧化氢（H2O2）,再与HRP标记的过氧化氢（H2O2）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的过氧化氢（H2O2）呈正相关。
用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中植物过氧化氢（H2O2）浓度。
样本处理及要求：1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。
3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。
通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
5. 组织标本：切割标本后，称取重量。
加入一定量的PBS，PH7.4。
用液氮迅速冷冻保存备用。
标本融化后仍然保持2-8℃的温度。
加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
分装后一份待检测，其余冷冻备用。
6. 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.7. 不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤：1.标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在第一、第二孔中分别加标准品100μl，然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。
（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为30 ng/L，20 ng/L，10 ng/L，5 ng/L， 2.5 ng/L）。
2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。
在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。
加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。
5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7.温育：操作同3。
8.洗涤：操作同5。
9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。
测定应在加终止液后15分钟以内进行。
注意事项：1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。
一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4．请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。
如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。
5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物请避光保存。
7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9．本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。
计算：Array以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。
（此图仅供参考）试剂盒性能：1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.95以上。
2.批内与批见应分别小于9%和11%检测范围：1.2 ng/L -40 ng/L保存条件及有效期：1.试剂盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6个月Plant H2O2FOR RESEARCH USE ONLYNamesGeneric Name：Plant H2O2 ELISA Kit.PurposeThis kit allows for the determination of H2O2 concentrations in Plant serum, blood plasma, and other biological fluids.Principle of the assayT he kit assay H2O2 level in the sample，use Purified H2O2 antibody to coat microtiter plate wells, make solid-phase antibody, then add H2O2 to wells, Combined H2O2 antibody which With HRP labeled , become antibody - antigen - enzyme-antibody complex, after washing Completely, Add TMB substrate solution,TMB substrate becomes blue color At HRP enzyme-catalyzed, reaction is terminated by the addition of a sulphuric acid solution and the color change is measured spectrophotometrically at a wavelength of 450 nm. The concentration of H2O2 in the samples is then determined by comparing the O.D. of the samples to the standard curve.Materials provided with the kitSpecimen requirements1.serum- coagulation at room temperature 10-20 mins，centrifugation 20-min at the speed of2000-3000 r.p.m. remove supernatant, If precipitation appeared, Centrifugal again.2.plasma-use suited EDTA or citrate or as an anticoagulant,mix 10-20 mins ,centrifugation20-min at the speed of 2000-3000 r.p.m. remove supernatant, If precipitation appeared, Centrifugal again.3.Urine-collect sue a sterile container, centrifugation 20-min at the speed of 2000-3000 r.p.m.remove supernatant, If precipitation appeared, Centrifugal again. The Operation of Hydrothorax and cerebrospinal fluid Reference to it.4.cell culture supernatant-detect secretory components, collect sue a sterile container,centrifugation 20-min at the speed of 2000-3000 r.p.m. remove supernatant,detect the composition of cells, Dilut cell suspension with PBS（PH7.2-7.4）, Cell concentration reached 1 million / ml, repeated freeze-thaw cycles, damage cells and release of intracellular components, centrifugation 20-min at the speed of 2000-3000 r.p.m. removesupernatant, If precipitation appeared, Centrifugal again.5.Tissue samples- After cutting samples, check the weight,add PBS（PH7.2-7.4）, Rapidlyfrozen with liquid nitrogen, maintain samples at 2-8℃after melting,add PBS（PH7.4）, Homogenized by hand or Grinders, centrifugation 20-min at the speed of 2000-3000 r.p.m.remove supernatant.6.extract as soon as possible after Specimen collection,and according to the relevantliterature, and should be experiment as soon as possible after the extraction. If it can’t, specimen can be kept in -20 ℃ to preserve, Avoid repeated freeze-thaw cycles.7.Can’t detect the sample which contain NaN3, because NaN3 inhibits HRP active. Assay procedure1.Dilute and add sample to Standard: set 10 Standard wells on the ELISA plates coated, add Standard 100μl to the first and the second well, then add Standard dilution50μl to the first and the second well, mix; take out 100μl form the first and the second well then add it to the third and the forth well separately. then add Standard dilution 50μl to the third and the forth well ,mix ; then take out 50μl from the third and the forth well discard, add 50μl t o the fifth and the sixth well ,then add Standard dilution 50μl to the fifth and the sixth well, mix ; take out 50μl from the fifth and the sixth well and add to the seventh and the eighth well, then add Standard dilution 50μl to the seventh and the eighth well ,mix ; take out 50μl from the seventh and the eighth well and add to the ninth and the tenth well, add Standard dilution 50μl to the ninth and the tenth well, mix , take out 50μl fro m the ninth and the tenth well discard(add Sample 50μl to each well after Diluting ,(density: 30 ng/L，20 ng/L，10 ng/L，5 ng/L，2.5 ng/L)2.add sample：Set blank wells separately (blank comparison wells don’t add sample and HRP-Conjugate reagent, other each step operation is same). testing sample well. add Sample dilution 40μl to testing sample well, then add testing sample 10μl (sample final dilution is 5-fold), add sample to wells , don’t touch the well wall as far as possible, and Gently mix.3.Incubate: After closing plate with Closure plate membrane ,incubate for 30 min at 37℃.4.Configurate liquid: 30-fold (or 20-fold)wash solution diluted 30-fold (or 20-fold) with distilled water and reserve.5.washing：Uncover Closure plate membrane, discard Liquid, dry by swing, add washing bufferto every well, still for 30s then drain, repeat 5 times, dry by pat.6.add enzyme：Add HRP-Conjugate reagent 50μl to each well, except blank well.7.incubate：Operation with 3.8.washing：Operation with 5.9.color：Add Chromogen Solution A 50ul and Chromogen Solution B to each well, evade the light preservation for 15 min at 37℃10.Stop the reaction：Add Stop Solution50μl to each well, Stop the reaction(the blue color change to yellow color).11.assay：take blank well as zero , Read absorbance at 450nm after Adding Stop Solution and within 15min.Important notes1.The kit takes out from the refrigeration environment should be balanced 15-30 minutes inthe room temperature, ELISA plates coated if has not use up after opened, the plate should be stored in Sealed bag.2.washing buffer will Crystallization separation, it can be heated the water helps dissolvewhen dilute . Washing does not affect the result.3.add Sample with sampler Each step, And proofread its accuracy frequently, avoids theexperimental error. add sample within 5 min, if the number of sample is much , recommend to use Volley .4.if the testing material content is excessively higher (The sample OD is bigger than the firststandard well ),please dilute Sample (n-fold), Please diluente and multiplied by the dilution factor.（×n×5）.5.Closure plate membrane only limits the disposable use, to avoid cross-contamination.6.The substrate evade the light preservation.7.Please according to use instruction strictly, The test result determination must take themicrotiter plate reader as a standard.8.All samples, washing buffer and each kind of reject should according to infective materialprocess.9. Do not mix reagents with those from other lots.CalculateAssay range1.2 ng/L -40 ng/LStorage and validity1．Storage ： 2-8℃. 2．validity ： six months.Take the standard density as the horizontal, the OD value for the vertical ,draw the standard curve on graph paper, Find out the corresponding density according to the sample OD value by the Sample curve, multiplied by the dilution multiple, or calculate the straight line regression equation of the standard curve with the standard density and the OD value ,with the sample OD value in the equation, calculate the sample density, multiplied by the dilution factor, the result is the sample actual density.This chartis for reference only。