解淀粉芽孢杆菌BW-13培养基和培养条件优化

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解淀粉芽孢杆菌BW-13产生的抗真菌物质特性研究与初步分离纯化

解淀粉芽孢杆菌BW-13产生的抗真菌物质特性研究与初步分离纯化
中图分类 号 : 3 . Q9 9 9 文献标 志码 : A 文章 编号 :0 64 0 ( 0 2 0 —0 20 1 0  ̄3 3 2 1 ) 10 4 —4
Cha a t r z to nd p e r c i n t0 f a i u g ls b t n e r c e i a i n a r f a tO a i n o ntf n a u s a c
( le e o o o ia n v r n n a gi e i g,Z ei g Un v ri fT c n lg ,Ha g h u3 0 3 ,C ia Co lg fBi l g c la d En io me t l En ne rn h j n ie s y o e h oo y a t n z o 1 0 2 hn )
fo t e cud x r c .A i l e k i he2 0 n a s r to ft e a tf n a ub tnc sd t c e r m h r ee ta t snge p a n t 2 m b o p i n o h n iu g ls sa ewa e e t d b y HPLC n l ss a ay i.
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
a sr t n a d D 9 a jn e c a g e i ou h o tg a h ,a ni n a s b tn ewa s ltd do p i n 2 3 no x h n ers c lmn c r mao rp y n a t u g l u sa c si ae o n f o
r d ai n n t e r n e o a ito .I h a g fpH3 9,t r d x r cs manti e ci ea a ial t u o i g a y  ̄ hec u e e ta t i an d a tv nd b sc l wi y ho tl sn n

解淀粉芽孢杆菌高密度发酵条件的优化

解淀粉芽孢杆菌高密度发酵条件的优化

第43卷第5期2017年5月中国测试CHINA MEASUREMENT &TESTVol.43 No.5May,2017doi 院 10.n857/j.issn.1674-5124.2017.05.0n解淀粉芽孢杆菌高密度发酵条件的优化王涛1>2,刘健\左建英2,张俊2,侯永春2,龚栽2,孙群(1.四川大学生命科学学院,四川成都610064 ; 2.四川龙蟒福生科技有限责任公司,四川眉山620036)摘要:该文探讨解淀粉芽孢杆菌(&omy/o/ique/ocien O lSd l的高密度工业发酵工艺优化,为解淀粉芽孢杆菌的工业 化生产提供依据。

以平板菌落直径、及培养后的活菌浓度为指标,对种子的保存方法、活化方式和培养基、发酵培养基 中的酵母粉和大豆蛋白粉用量以及发酵的后期调控进行筛选和优化。

筛选出最佳的工业菌种保存条件为30%甘油为 保护剂,-64益保存;最佳活化方法为采用PDA培养基活化,并经过一次48h活化和24h二次活化;最佳的转菌时间为在种子培养后17耀18h。

最佳的酵母粉和大豆蛋白粉浓度分别为20g/L和40g/L,发酵的后期调控需要进行补料和 流加氨水将pH控制在7.0依0.2,发酵时间延长至72h。

通过对发酵的基本条件进行筛选和优化,得到可在100L发酵 罐上进行高密度发酵的体系,发酵浓度可达常规发酵的100倍(>1x1014CFU/mL)。

关键词:解淀粉芽孢杆菌;保存;活化;高密度发酵文献标志码:A文章编号:1674-5124(2017)05-0049-04Optimization of high-density fermentation for B acillus am yloliquefaciensWANG Tao1,2,LIU Jian1,ZUO Jianying2,ZHANG Jun2,HOU Yongchun2,GONG Xiao2,SUN Qun1(1. College of Life Sciences,Sichuan University,Chengdu 610064, China;2.Sichuan Lomon Bio Technology Co.,Ltd.,Meishan 620036,China)Abstract:This study explored the high-density fermentation conditions of Bacillus amylolique/aciens 1841 by using colony diameter and culturing concentration as index.The optimal strain persevation conditions were using30%glycerol as protective agent stored at-64 益.The optimal strain activation was on the PDA medium with the first activation for 48 hours followed by the second for24 hours.By taking into accounting of fermentation cost and the product concentration,the cultureafter17-18 hours of seed fermentation was transferred to the fermentation tank of the optimal industrial fermentation medium,in which20 g/L yeast and40 g/L soy protein powder were added into the basic medium.By feeding ammonia water to maintain pH at7.0 ±0.2 in the late fermentation stage and fermentation time extended to72 hours,high-density fermentation could be achieved in the100 L fermentation tank with cells>1x1014CFU/mL,m ore than100 times of the conventional fermentation.Keywords:Bacillus amylolique/aciens;preservation;activation;high-density fermentation0弓丨言食品安全和环境问题,生物农药的使用已成为一种新近年来,由于化学农药的过渡使用导致了严重的 的趋势。

解淀粉芽孢杆菌胞外多糖发酵条件的优化

解淀粉芽孢杆菌胞外多糖发酵条件的优化

解淀粉芽孢杆菌胞外多糖发酵条件的优化
1. 背景介绍
解淀粉芽孢杆菌是一种能够合成胞外多糖的细菌,其胞外多糖具有广泛的生物活性和应用价值。

因此,解淀粉芽孢杆菌的胞外多糖发酵条件的优化具有重要的理论与应用价值。

2. 胞外多糖发酵条件的影响因素
胞外多糖发酵的关键因素主要包括菌株的选择、培养基的配方、发酵条件等。

其中,菌株的选择是胞外多糖产量的前提条件,培养基的配方是为了提供充足的营养和能量,而发酵条件则是控制细胞代谢和增加胞外多糖产量的关键。

3. 菌株的筛选与选择
根据文献报道,目前已知世界上有多个不同的解淀粉芽孢杆菌菌株能够产生胞外多糖。

因此,采用较高的胞外多糖产量的菌株进行后续的优化实验。

4. 培养基的配方优化
常见的培养基配方包括碳源、氮源、微量元素等。

在碳源方面,常用的有葡萄糖、玉米粉等。

在氮源方面,可以使用天然的酵母粉、食用菇粉等。

此外,添加若干微量元素,如MgSO4、KH2PO4等,则有助于产生胞外多糖的合成。

5. 发酵条件的优化
针对细胞代谢和胞外多糖合成,一些发酵条件需要进行优化,比
如 pH 值控制、温度、搅拌条件、氧气输送等。

据文献报道,较好的
pH 值是以5.0~7.0为宜,温度以30°C为宜。

此外,适当的搅拌条件
和氧气输送有利于微生物的生长和胞外多糖的合成。

6. 结论
综上所述,解淀粉芽孢杆菌胞外多糖发酵条件的优化是多方面综
合影响的结果。

通过选择较高的胞外多糖产量的菌株,配制合适的培
养基,以及优化发酵条件等措施,可以有效增加胞外多糖的合成产量,具有重要的理论意义和实践应用价值。

产淀粉芽孢杆菌培养条件优化

产淀粉芽孢杆菌培养条件优化

方案4:淀粉 2g 葡萄糖 5g 蛋白胨8g 磷酸氢二钾1.6g 无水氯化钙0.4g 蒸馏水 200ml PH 7.0~7.2 接种量2% 装液量 100ml 方案5:淀粉 3g 葡萄糖 3.75g 蛋白胨4g 磷酸氢二钾102g 无水氯化钙0.3g 蒸馏水 150ml PH 7.0~7.2 接种量2% 装液量75ml 方案6:淀粉 2g 葡萄糖 2.5g 蛋白胨4g 磷酸氢二钾0.8g 无水氯化钙0.2g 蒸馏水 100ml PH 7.0~7.2 接种量1% 装液量50ml 方案7:淀粉 2g 葡萄糖 2.5g 蛋白胨4g 磷酸氢二钾0.8g 无水氯化钙0.2g 蒸馏水 100ml PH 7.0~7.2 接种量3% 装液量50ml
三、仪器设备
超净工作台、756型分光光度计、摇床、 恒温箱、全自动灭菌锅、三角瓶、移液管 等玻璃仪器
756型分光光度计
恒温水浴锅
摇床
全自动灭菌锅
四、试剂
牛肉膏、蛋白胨、NaCl ,淀粉,无水氯 化钙,磷酸氢二钾,1mol/LNaoH、1 mol/LHcl 。
五、实验内容
5.1 按照配方
二、实验材料
2.1菌种:从土壤中分离 2.2培养基 基础培养基:牛肉膏蛋白胨培养基 牛肉膏 0.5g 蛋白胨 1g 氯化钠 0.5g 蒸馏水 100ml PH 7.0~7.2 固体培养 基再加琼脂 2g
2.3优化培养方案 方案1:淀粉 1g 葡萄糖 2.5g 蛋白胨 6g 磷酸氢二钾0.8g 无水氯化钙0.2g 蒸馏水100ml PH 7.0~7.2 接种量2% 装液量50ml 方案2:淀粉 1g 葡萄糖 2.5g 蛋白胨 4g 磷酸氢二钾0.8g 无水氯化钙0.2g 蒸馏水100ml PH 7.0~7.2 接种量2% 装液量50ml 方案3:淀粉 2g 葡萄糖 2.5g 蛋白胨 4g 磷酸氢二钾0.8g 无水氯化钙0.2g 蒸馏水100ml PH 7.0~7.2 接种量2% 装液量50ml

解淀粉芽孢杆菌CM3培养基及发酵条件优化

解淀粉芽孢杆菌CM3培养基及发酵条件优化

t e mp e r a t u r e w e r e s c r e e n e d b y s i n g l e f a c t o r t e s t . T h e n me d i u m c o mp o s i t i o n a n d c u h u r e c o n d i t i o n s w e r e o p t i mi z e d b y o r t h o g o n a l d e s i g n
Opt i mi z a t i o n o f Me di u m a n d Fe r me nt a t i o n l u s a my l o l i q u e f a c i e n s CM 3
正交设计试验对培养基组成 以及培养条件进行 了优化。结果 表明 , 最终优化后 的培养基组分为 : 玉米粉 2 %, 豆粕
0 . 5 %, 鱼粉 0 . 5 %, N a C l 0 . 1 %; 最佳发酵条件 : p H值 7 . 0 , 接种量 5 %, 培养 时间 4 8 h , 培养温度 3 1 o C; 在优化后 , 拮抗
细菌 C M 3的发酵液抑菌圈直径 可达 到 3 7 . 5 8 m m, 比优化前提高了 2 2 . 7 %。 关键词 : 解淀粉芽孢杆菌 ; 培养基优化 ; 正交设计
中图 分 类 号 : ¥ 4 7 6 文献标识码 : A 文章 编 号 : 1 0 0 2 — 2 4 8 1 ( 2 0 1 6 ) 1 1 — 1 5 7 7 — 0 7
Ab s t r a c t : T h e s t u d y a i ms t o o p t i mi z e t h e f e r me n t a t i o n c o n d i t i o n s o f B a c i l l u s a m y l o l i q u e f ci a e n s C M3 a n d d e t e mi r n e t h e s u i t a b l e

解淀粉芽孢杆菌活化条件

解淀粉芽孢杆菌活化条件

解淀粉芽孢杆菌活化条件
解淀粉芽孢杆菌(Bacillus subtilis)是一种常见的益生菌,广泛应用于食品工业和农业等领域。

下面是解淀粉芽孢杆菌的活化条件:
1.培养基选择:解淀粉芽孢杆菌可在适当的培养基上进行活
化。

常用的培养基包括液体培养基和固体培养基,如液体培养基LB(Luria-Bertani)、TSB(Tryptic Soy Broth)以及固体培养基LB-agar(含琼脂)等。

2.温度:解淀粉芽孢杆菌一般在适宜的温度下活化生长。


见的活化温度范围为30-37摄氏度。

在此温度范围内,解淀粉芽孢杆菌能够较好地进行生长和繁殖。

3.时间:解淀粉芽孢杆菌的活化时间可根据具体情况有所不
同。

通常,在液体培养基中,解淀粉芽孢杆菌的活化时间为12-24小时。

在固体培养基上,活化时间可能稍长,通常为24-48小时。

4.氧气供应:解淀粉芽孢杆菌是革兰氏阳性菌,对氧气的需
求较高。

在活化过程中,提供足够的氧气对菌体的生长和繁殖是至关重要的。

因此,在培养过程中要保持适当的通气和搅拌条件。

5.pH值:解淀粉芽孢杆菌的最适pH值范围约为
6.5-
7.5。


了保证最佳的活化效果,可以根据实际需要调整培养基的pH值,并在培养前进行适当的调整。

需要注意的是,以上的条件仅为常见的解淀粉芽孢杆菌活化条件,具体的活化条件可能会因菌株的不同和实验目的的不同而有所差异。

解淀粉芽孢杆菌抑菌活性成分鉴定及机理研究

解淀粉芽孢杆菌抑菌活性成分鉴定及机理研究

摘要解淀粉芽孢杆菌是生物防治领域中重要的菌株之一,其发酵分泌的多种抑菌物质,对真菌、细菌、放线菌、病毒均有较强的拮抗作用。

在医药、保健品、饲料、食品和化妆品等领域有广阔的应用前景。

以金黄色葡萄球菌为指示菌,选上清液的抑菌活性和乳酸浓度为指标,从实验室保藏的菌株中挑选初始乳酸产量为2.05 g⋅L-1,抑菌圈直径为15.4 mm的菌株,将其编号为B815。

对其进行分子生物学与生理生化鉴定,明确B815菌株为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。

对B815菌株进行常温常压等离子诱变(ARTP),结合特定的高通量筛选,获得乳酸产量为3.92 g⋅L-1,抑菌圈直径为20.3 mm,且能稳定遗传的突变菌株,将其编号为B815-1。

对B815-1菌株的培养基、培养条件进行优化,获得最优配方:麦芽糖10 g⋅L-1,蛋白胨15 g⋅L-1,MgSO4·7H2O 2 g⋅L-1,活性CaCO3 10 g⋅L-1;最优培养条件:培养温度50℃,初始pH 7,种龄3 h,接种量2%,装液量50 mL。

优化后,菌株的抑菌圈直径为25.6 mm,乳酸产量达到8.42 g⋅L-1。

菌株B815-1上清液中总抑菌物质的基本特性表征:热稳定范围为60℃以下,pH稳定范围为6~9,对中性蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、大豆多肽水解酶不敏感,胃蛋白酶对其活性略有影响;对肠炎沙门氏菌、铜绿芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、粪肠球菌、单核增生李斯特菌均有抑制活性。

菌株B815-1经模拟胃、肠液处理3 h后,活菌存活率分别为86.14%、95.14%。

菌株B815-1经80℃处理5 min后,活菌数由原来的7.00×108 CFU⋅mL-1下降为5.40×108 CFU⋅mL-1,存活率为77.4%。

建立酸沉、有机溶剂萃取,DEAE-Sepharose Fast Flow阴离子交换层析,半制备型RP-HPLC(反向高效液相)的分离纯化方案,从发酵上清液中得到两种抑菌活性成分。

解淀粉芽孢杆菌抗菌物质发酵培养基的优化

解淀粉芽孢杆菌抗菌物质发酵培养基的优化

解淀粉芽孢杆菌抗菌物质发酵培养基的优化杨胜远;韦锦;郑燮茹【期刊名称】《食品科学》【年(卷),期】2015(036)011【摘要】采用双向单因素试验法及正交试验法,以解淀粉芽孢杆菌K6为菌种,对发酵合成抗菌物质的改良兰迪培养基进行优化.结果表明:KC1对解淀粉芽孢杆菌K6抗菌活性物质的合成不利,FeSO4和CuSO4对抗菌活性物质的合成影响不大,而KH2PO4、MgSO4和MnSO4对抗菌活性物质的合成影响较显著.经优化获得适宜用于合成抗菌物质的兰迪培养基的配方为:L-谷氨酸钠5.0 g/L、葡萄糖15.0 g/L、KH2PO4 0.5 g/L、MgSO4 0.2 g/L、MnSO42.0 mg/L.优化兰迪培养基的组分较优化前的改良兰迪培养基显著减少,并更有利于抗菌活性物质的生物合成.【总页数】7页(P150-156)【作者】杨胜远;韦锦;郑燮茹【作者单位】韩山师范学院生物学系,广东潮州 521041;韩山师范学院生物学系,广东潮州 521041;韩山师范学院生物学系,广东潮州 521041【正文语种】中文【中图分类】Q815【相关文献】1.抗菌海洋解淀粉芽孢杆菌GM-1-2菌株摇瓶发酵培养基和发酵条件优化 [J], 汪晶晶;曹雪梅;李欢;暴增海;马桂珍;贾杰;王淑芳;罗志会2.解淀粉芽孢杆菌NCPSJ7菌株高产抗菌物质的发酵条件优化 [J], 裘纪莹;陈相艳;吴发萍;刘孝永;周庆新;王军华;王未名;陈蕾蕾3.淀粉液化芽孢杆菌抗菌脂肽发酵培养基及发酵条件的优化 [J], 方传记;陆兆新;孙力军;别小妹;吕凤霞;黄现青4.解淀粉芽孢杆菌fmbj37产γ-聚谷氨酸发酵培养基的优化 [J], 盛洁; 孟凡强; 吕凤霞; 赵海珍; 张充; 陆兆新5.解淀粉芽孢杆菌YF03产蛋白酶发酵培养基及发酵条件的优化 [J], 曹春红;李爽;王海燕;张广民;蔡辉益因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

解淀粉芽孢杆菌的培养基优化和放大研究

解淀粉芽孢杆菌的培养基优化和放大研究
Advances in Microbiology 微生物前沿, 2018, 7(3), 107-114 Published Online September 2018 in Hans. /journal/amb https:///10.12677/amb.2018.73013
Open Access
1. 引言
解淀粉芽孢杆菌是一种与枯草芽孢杆菌亲缘性很高的细菌,具有抑制植物病害的能力,能够产生多 种代谢产物,主要包括:抑菌蛋白类,脂肽类蛋白质,伊枯草菌素 A,表面活性物质,芬芥素,芽孢菌 素 D,大环内酯类,寡肽酶,肽类,聚酮化合物等[1]-[6]。解淀粉芽孢杆菌对多种作物的致病真菌有较好 的抑制效果,可制成生物制剂应用于植物病害防治上,因此其发酵工艺和比拟放大的研究具有非常重要 的意义。实验室分离的解淀粉芽孢杆菌(保藏号:CGMCC5043,专利号:ZL201210293465)能够降低灰霉 病、立枯病、根腐病和炭疽病等多种农作物病害的发病指数。本实验能过 PB 设计和正交试验设计优化 了菌株的培养基,同时在 50 L 发酵罐中进行了扩大培养,并采用以体积溶氧系数为基准的放大法进行了 比拟放大,为下一步工业化生产提供理论基础。
P0=( N 60 ) D5 ρ N p × 2 × 10−3
3
p 2 ND 3 Pg=2.25 × 10 0 0.08 Q
−3
0.39
kd = ( 2.26 + 3.3Ni )( Pg V )
0.56
υ s0.7 气时搅拌器输入液体的功率(千瓦) N——涡轮搅拌器转速(转/分) D——搅拌器直径(米) ρ——发酵液密度(公斤/米 3) Np——功率准数,试验罐和放大罐均为 2 档圆盘六平直叶涡轮,取常数 6 Pg——通气时搅拌器输入液体的功率(瓦) Q——通气量(毫升/分)

解淀粉芽孢杆菌胞外多糖发酵条件的优化

解淀粉芽孢杆菌胞外多糖发酵条件的优化

解淀粉芽孢杆菌胞外多糖发酵条件的优化胞外多糖是一类广泛存在于细菌、真菌和其他微生物中的生物大分子。

近年来,越来越多的研究表明,胞外多糖具有广泛的应用前景,包括生物医学、食品工业、环境保护等领域。

而淀粉芽孢杆菌则是一种常见的产生胞外多糖的微生物,因此研究淀粉芽孢杆菌胞外多糖的发酵条件优化具有重要意义。

淀粉芽孢杆菌胞外多糖的发酵条件对多糖产量和质量有着显著影响。

本文将从培养基组成、培养条件、发酵时间和搅拌速度等方面,探讨淀粉芽孢杆菌胞外多糖发酵条件的优化。

培养基组成是影响发酵效果的重要因素之一。

研究表明,淀粉、葡萄糖、酵母粉和酵母提取物等有机物对淀粉芽孢杆菌胞外多糖的产量和质量具有显著影响。

适当增加淀粉和葡萄糖的浓度可以提高多糖的产量,而适量添加酵母粉和酵母提取物则可以提高多糖的质量。

培养条件也对淀粉芽孢杆菌胞外多糖发酵有着重要影响。

温度、pH 值和氧气供应是常见的培养条件因素。

研究表明,适宜的温度可以促进淀粉芽孢杆菌生长和多糖产量,一般在30-37摄氏度之间较为适宜。

pH值对淀粉芽孢杆菌的生长和多糖产量也有较大影响,一般在6-8之间为最佳。

此外,适当调节氧气供应方式和速率,可以改善淀粉芽孢杆菌的生长和多糖产量。

发酵时间也是影响淀粉芽孢杆菌胞外多糖发酵的重要因素。

研究发现,随着发酵时间的延长,多糖的产量呈现出增加-平稳-下降的趋势。

因此,在进行淀粉芽孢杆菌胞外多糖发酵时,需要控制好发酵时间,以保证多糖产量的最大化。

搅拌速度也是影响淀粉芽孢杆菌胞外多糖发酵的重要因素之一。

适当调节搅拌速度可以改善培养基中氧气的分布和混合程度,促进淀粉芽孢杆菌的生长和多糖产量。

一般来说,适宜的搅拌速度应根据具体实验条件进行调节,以达到最佳发酵效果。

淀粉芽孢杆菌胞外多糖的发酵条件优化是一个综合性的问题,需要从培养基组成、培养条件、发酵时间和搅拌速度等方面进行综合考虑。

通过合理优化这些条件,可以提高淀粉芽孢杆菌胞外多糖的产量和质量,为其在各个领域的应用提供更好的基础。

解淀粉芽孢杆菌研究进展

解淀粉芽孢杆菌研究进展

4生物技术世界 BIOTECHWORLD1 前言解淀粉芽孢杆菌是一种好氧产芽孢的革兰氏阳性杆状细菌。

该菌在自然界分布广泛,易分离培养,对人畜无毒无害,不污染环境。

其代谢产物较为丰富,具有广谱抗菌活性和较强的抗逆能力,生长快,稳定性较好。

很适合作为生防菌大量生产和应用。

近年来大量学者对解淀粉芽孢杆菌进行了研究,为了方便以后对解淀粉芽孢杆菌的深层开发,本文将近年来国内外的部分研究进展归结于下。

2 解淀粉芽孢杆菌的分离、筛选以及鉴定解淀粉芽孢杆菌在自然界分布广泛,不但可在土壤、植物根际体表、深海水中及外界环境中存在,同时还在植物体内常见。

解淀粉芽孢杆菌易分离、易培养,通过抑菌作用筛选,再通过个体形态、生理生化特性、脂肪酸测定、16S rDNA 同源性序列分析,HPLC-MS 分析等方法鉴定。

解淀粉芽孢杆菌形态特征:革兰氏阳性;菌体杆状、形成芽孢,芽孢卵圆形,孢囊膨大;最适生长温度为28-30℃,最适宜生长的pH6.5-7.0。

生理生化性质:还原硝酸盐;水解淀粉;可利用D -葡萄糖,L-阿拉伯糖,甘露醇,D-木糖作为碳源;接触酶阳性;氧化酶阴性。

3 培养优化解淀粉芽孢杆菌的菌株,培养基成分和培养会影响菌的数量及代谢产物的分泌,不适宜的培养条件和配方,会导致菌株生长不良,胞外活性产物代谢量减少,具体体现在对培养基营养、温度、转速以及培养基的pH 值、接菌量、供氧量、光照等因素的调节。

优化实验方法多采用单因素实验、正交实验、响应面实验等方法进行单一或多种方法组合分析设计。

优化多以菌数,抑菌效果、杀线效果、产芽孢量、酶活力等作为指标,绘制其生长曲线。

实验室培养基碳源多为淀粉、葡萄糖等,为了获得特定代谢产物会以不同物质作为碳源,如褐藻酸钠为碳源,可收获高产的褐藻胶裂解酶,工业上多采用麦麸等价格较低廉的为营养物质,还可以利用有机废水作为碳源,不仅经济还可以处理废水,降低废水浓度。

4 活性物质分析解淀粉芽孢杆菌通过产生低分子量的抗生素以及抗菌蛋白质多肽等活性物质抑制病原菌及线虫,其大多代谢产物的活性物质具有热稳定性、对紫外照射和蛋白酶处理不敏感,耐酸耐碱性等特性。

211133782_解淀粉芽孢杆菌产α-淀粉酶的培养基优化

211133782_解淀粉芽孢杆菌产α-淀粉酶的培养基优化

解淀粉芽孢杆菌产α-淀粉酶的培养基优化徐海刚1,2,刘佳慧3*,熊 智2(1.贵州轻工职业技术学院,贵州贵阳 550000;2.西南林业大学 生命科学学院,云南昆明 650000;3.贵州省农作物技术推广总站,贵州贵阳 550000)摘 要:解淀粉芽孢杆菌是一类高效、安全、多功能并且具有极大的开发潜力的微生物菌种,尤其是随着研究水平的不断进步,解淀粉芽孢杆菌得到了广泛的应用。

本文以实验室筛选的解淀粉芽孢杆菌为实验菌株,通过液态培养基发酵,对淀粉浓度、接种量、发酵时间、培养基pH这4个因素进行单因素试验及正交优化试验。

结果表明,采取培养基初始pH 8.0、淀粉浓度1.5%、发酵时间60 h、接种量4%时解淀粉芽孢杆菌产生的α-淀粉酶活力最高。

关键词:解淀粉芽孢杆菌;α-淀粉酶;最佳发酵条件Optimization of Media for α-Amylase Production in BacillusamyloliquefaciensXU Haigang1,2, LIU Jiahui3*, XIONG Zhi2(1.Guizhou Light Industry V ocational and Technical College, Guiyang 550000, China; 2.College of Life Science, Southwest Forestry University, Kunming 650000, China; 3.Guizhou Crop Technology Promotion Station, Guiyang550000, China)Abstract:Bacillus amyloliquefaciens is a highly efficient, safe, multifunctional microbial strain with great development potential. Especially with the continuous progress of research, Bacillus amyloliquefaciens has been widely used. In this paper, using Bacillus amyloliquefaciens selected in the laboratory as the experimental strain, a single factor experiment and orthogonal optimization experiment were conducted on four factors, namely, starch concentration, inoculation amount, fermentation time, and culture medium pH, through liquid medium fermentation. The results showed that when the initial pH of the culture medium was 8.0, the starch concentration was 1.5%, the fermentation time was 60 h, and the inoculation amount was 4%,the α-amylase activity produced by Bacillus amyloliquefaciens was the highest .Keywords:Bacillus amyloliquefaciens; α-amylase; optimal fermentation conditions解淀粉芽孢杆菌属于一种对人畜无毒害的G+细菌[1],产芽孢,具有防治植物病害、促进植物生长、改善根际土壤微生物种群结构等作用,对于病害防治、植物促生和果蔬采后保鲜等具有重要意义[2]。

分离土壤中具有分解淀粉能力的芽孢杆菌实验设计方案

分离土壤中具有分解淀粉能力的芽孢杆菌实验设计方案

分离土壤中具有分解淀粉能力的芽孢杆菌实验设计方案第七组王孝廉钱晟东孟龙许瑞琪一、实验目的1.掌握土壤样品中微生物菌种分离和筛选技术的实验设计方案。

2.掌握富集、平板稀释涂布法、分离筛选产淀粉酶菌株的基本原理。

3.初步掌握从土壤样品中分离筛选产淀粉酶菌株的基本技术。

二、实验原理在自然条件下,产淀粉酶的细菌和其它各种细菌混杂生活在土壤中,要想分离出来必须建立相应的“筛子”。

淀粉酶能使淀粉分解成葡萄糖,而淀粉与碘液发生反应形成蓝色化合物。

葡萄糖不与碘液发生反应形成蓝色化合物,结果可使淀粉酶产生菌周围形成透明圈,从而筛选出淀粉酶产生菌。

微生物酶产生菌的筛选具体分为增殖培养、初筛和复筛过程。

增殖培养是通过控制培养基的营养成分和/或培养条件使样品中的目的菌得以大量繁殖,而非目的菌的生长受到抑制或繁殖减缓,从而提高样品中目的菌的数量和比例。

芽孢最主要的特点就是抗性强,对高温、紫外线、干燥、电离辐射和很多有毒的化学物质都有很强的抗性。

它帮助菌体度过不良环境,在适宜的条件下可以重新转变成为营养态细胞。

初筛是对所得的纯种进行检测。

由于淀粉酶是胞外酶,在分离培养基中加适量可溶淀粉通过平板透明圈法来检测淀粉酶产生菌。

筛选透明圈比值大的菌株接种到培养基中进行培养,再进行复筛。

复筛的目的是淘汰底产菌。

三、实验材料土壤样品:实验前一周在距土壤表层8-10 厘米左右处填埋馒头,实验前一天用塑料袋在预处理除取样。

富集培养基:蛋白胨1% NaCl 0.5% 可溶性淀粉0.05% PH 7.2~7.4选择培养基:蛋白胨0.5% NaCl 0.5% 可溶性淀粉1.0% 琼脂2% 葡萄糖0.1%PH7.2~7.4玻璃仪器: 培养皿12 副,试管10 支,三角瓶6 个,移液管10 支(1mL710支,5mL 3,10mL3 支),100mL 量筒2 个,玻璃棒,玻璃珠。

试剂:草酸铵结晶紫染液,95%乙醇,番红水溶液、碘液其它:酒精灯,硅胶塞,包装绳,包装纸, PH试纸,接种环,电子天平,称量纸, 高压蒸汽灭菌锅,摇床,角匙,记号笔等。

解淀粉芽孢杆菌活化条件

解淀粉芽孢杆菌活化条件

解淀粉芽孢杆菌活化条件研究报告一、菌种介绍解淀粉芽孢杆菌是一种常见的益生菌,具有广泛的抗逆性和适应性。

该菌能产生多种具有生物活性的次生代谢产物,如抗菌肽、脂肽、酶等,具有抗菌、抗虫、促进植物生长等作用。

因此,对于解淀粉芽孢杆菌的活化条件研究具有重要的实践意义和应用价值。

二、活化条件解淀粉芽孢杆菌的活化条件主要包括培养基成分、培养温度与湿度、培养时间与接种量、溶氧控制等因素。

在活化过程中,通过控制这些因素可以有效地提高解淀粉芽孢杆菌的活化效果。

三、培养基成分解淀粉芽孢杆菌的培养基成分主要包括碳源、氮源、无机盐、生长因子等。

其中,碳源和氮源是影响解淀粉芽孢杆菌生长和活化的重要因素。

在实践中,常用的碳源包括葡萄糖、淀粉等,氮源包括蛋白胨、尿素等。

此外,无机盐和生长因子也对解淀粉芽孢杆菌的生长和活化有重要影响。

四、培养温度与湿度培养温度和湿度是影响解淀粉芽孢杆菌生长和活化的重要环境因素。

在适宜的温度和湿度条件下,解淀粉芽孢杆菌的生长和活化效果较好。

通常情况下,解淀粉芽孢杆菌的生长温度范围为20-40摄氏度,最适生长温度为30-37摄氏度。

湿度方面,培养基的湿度应保持在一定范围内,以保证解淀粉芽孢杆菌的正常生长和活化。

五、培养时间与接种量培养时间和接种量也是影响解淀粉芽孢杆菌生长和活化的重要因素。

在适宜的培养时间和接种量条件下,解淀粉芽孢杆菌的生长和活化效果较好。

通常情况下,解淀粉芽孢杆菌的生长时间为12-24小时,最适生长时间为18-20小时。

接种量方面,应根据实验条件和实际情况选择适宜的接种量。

六、溶氧控制溶氧是影响微生物生长和活化的重要因素之一。

在解淀粉芽孢杆菌的培养过程中,应通过控制通气量、搅拌速度等措施来控制溶氧水平。

适宜的溶氧水平有助于促进解淀粉芽孢杆菌的生长和活化。

七、产物检测方法在解淀粉芽孢杆菌的培养过程中,应对产生的次生代谢产物进行检测和分析。

常用的检测方法包括光谱分析法、色谱分析法、质谱分析法等。

18327353_响应面法优化生物活菌剂解淀粉芽孢杆菌JT-84_发酵工艺

18327353_响应面法优化生物活菌剂解淀粉芽孢杆菌JT-84_发酵工艺

生物农药具有高效、低毒、低残留等优点,近年来在农业生产中逐渐取代化学农药的地位。

解淀粉芽孢杆菌是一种芽孢杆菌属的好氧革兰氏阳性杆菌,具有广谱抑菌活性,原因是这种菌株可以产出多种抑菌物质,对多种病原菌具有抑菌作用[1~3],其制剂已在农业病虫害防治上得到了广泛应用。

菌株产抗菌物质的能力对微生物相关产品如生物农药的开发和应用具有决定性作用,这其中的关键步骤就是微生物发酵条件的优化。

近年来,有关学者对解淀粉芽孢杆菌的培养基及发酵条件进行了优化[4~12]。

响应面法(Response surface methodology ,RSM )由Box 和Wilson 于1951年首次报道。

该方法所需试验次数少,且可以预测因素之间的相互作用,被越来越多的研究者使用[13]。

JT-84是我们具有自主知识产权的解淀粉芽孢杆菌,采用单因素试验和响应面法对其培养基与发酵条件进行优化,摘要:通过优化解淀粉芽孢杆菌JT-84的发酵工艺,为其产业化生产提供理论依据。

以解淀粉芽孢杆菌JT-84菌体生物量为指标,进行碳源(葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、甘露醇、可溶性淀粉和乳糖)、氮源〔(NH 4)2SO 4、尿素、NaNO 3、酵母粉、蛋白胨和牛肉膏〕和无机盐(CuSO 4、MgSO 4、NaCl 、ZnCl 2、CaCl 2和KCl )的单因素试验,并筛选出9个主要影响因素;然后,通过PB 试验和响应面分析等方法,对其发酵培养基配方进行优化,最终得到最佳发酵培养基配方为葡萄糖17.51g/L 、酵母粉9.88g/L 和CaCl 22.11g/L 。

在优化发酵培养基的基础上,以菌体生物量最大为标准,对发酵条件进行优化,得到最优发酵条件为菌体接种量8%、培养基初始pH 值6.5、发酵温度28℃、摇瓶转速140r/min 、发酵时间48h 。

关键词:解淀粉芽孢杆菌;培养基优化;PB 试验;响应面法中图分类号:TQ920.6文献标识码:A 文章编号:1008-1631(2018)06-0065-08收稿日期:2018-11-29基金项目:江苏省科技计划项目(BE2018396)作者简介:钱文静(1994-),女,安徽芜湖人,硕士研究生在读,研究方向为生物工程。

解淀粉芽孢杆菌T1增殖培养基配方及培养条件优化

解淀粉芽孢杆菌T1增殖培养基配方及培养条件优化

解淀粉芽孢杆菌T1增殖培养基配方及培养条件优化于靓;程德勇;熊儒先;缪礼鸿【摘要】以解淀粉芽孢杆菌T1为研究菌种,从5种培养基中选出最有利于其生长的基础发酵培养基,并通过单因子试验和正交试验,对基础发酵培养基的配方及发酵条件进行了优化.结果表明,解淀粉芽孢杆菌T1的最优培养基配方为复合氨基酸营养液1%、蛋白胨1.5%、糖蜜5%、可溶性淀粉2.5%.最优培养条件为pH 7.0,装瓶量80 mL/250 mL、接种量5%、温度37℃、摇床转速180 r/min、发酵时间36h.优化后的培养液中解淀粉芽孢杆菌T1活菌数由1.4×109 cfu/mL增加至3.5×109 cfu/mL.【期刊名称】《湖北农业科学》【年(卷),期】2014(053)015【总页数】4页(P3621-3624)【关键词】解淀粉芽孢杆菌;培养基;优化;活菌数【作者】于靓;程德勇;熊儒先;缪礼鸿【作者单位】武汉轻工大学生物与制药工程学院,武汉430023;武汉轻工大学生物与制药工程学院,武汉430023;武汉轻工大学生物与制药工程学院,武汉430023;武汉轻工大学生物与制药工程学院,武汉430023【正文语种】中文【中图分类】S188解淀粉芽孢杆菌是广泛存在于自然界的一种非致病性细菌,该菌与枯草芽孢杆菌亲缘性很高,次生代谢产物产生能力较强,能够分泌抗生素、抗菌蛋白、多肽类物质,从而对多种病原菌、真菌等具有良好的抑制作用[1-4]。

如权春善等[5]从堆肥中分离到一株对植物病原菌尖孢镰刀菌具有强抗菌活性的解淀粉芽孢杆菌Q-12;解淀粉芽孢杆菌FZB42对欧文氏菌引起的梨火疫病具有防治效果[6]。

研究表明解淀粉芽孢杆菌的抑菌物质为抑菌蛋白[7,8]。

解淀粉芽孢杆菌T1由武汉轻工大学资源与环境微生物研究室分离得到。

解淀粉芽孢杆菌T1能够产生非蛋白质类溶藻活性物质[9]。

这使其具有抑制有害藻,促进有益藻生长的功能。

因此解淀粉芽孢杆菌T1菌剂可防治微囊藻水华、修复养殖水体生态,还可安全应用于发酵生产、水产、动物饲料中。

1株解淀粉芽孢杆菌发酵培养基的设计及发酵条件的优化_车晓曦

1株解淀粉芽孢杆菌发酵培养基的设计及发酵条件的优化_车晓曦

1株解淀粉芽孢杆菌发酵培养基的设计及发酵条件的优化车晓曦1,2,3,李社增3,李校堃1,2*(1.吉林农业大学,吉林长春130118;2.教育部生物反应器与药物开发工程研究中心,吉林长春130118;3.河北农林科学院植物保护研究所,河北保定071000)摘要 [目的]为解淀粉芽孢杆菌的应用提供科学依据。

[方法]从最佳碳源、氮源、初始p H 值、发酵时间、发酵温度、接菌量和装液量的确定出发,针对一株新发现的解淀粉芽孢杆菌S AB -1进行发酵培养基的设计及发酵条件的优化。

[结果]从8种不同的碳源和氮源中确定了长效碳源水溶性淀粉、长效氮源棉籽粉与速效碳源葡萄糖、速效氮源酵母浸膏。

并优化了基础发酵培养基的发酵条件:温度31e 、转速180r /m i n 、发酵时间26h 、初始p H 值6.0、接菌量1%、装液量50m l/250m l 。

该条件下发酵后菌体产量为46.0@109/m l 。

[结论]该解淀粉芽孢杆菌在设计发酵条件下基本达到了工业规模化生产的要求。

关键词 解淀粉芽孢杆菌;碳源;氮源;基础培养基中图分类号 Q 936 文献标识码 A 文章编号 0517-6611(2010)18-09402-04Research on the D esi gn of the M ed i u m for the Amyl oli quefac i en s Bac illus Fer men tation and Op ti m i zation of Its Fer men tation Cond iti on CHE Xiao -xi et al (Jili n A gricult uralU ni versity ,Chang chun ,Jili n 130118)Abstract [Objective]The scientific basis o f the applicati on of a m yloliquefaciens bacill us was provi ded through the research .[M et hod]The desi gn of the fer mentati on medi u m for a ne w l y di scover i ng a my l o li que f ac i ens bac ill us -SAB -1was conducted for the optm i al fer mentati on cond-i ti on i ncl udi ng the carbon and nitrogen source ,the i niti a lp H,t he fer m ent a ti on tm i e and te mperature ,t he i noculati on a m ount and the a m ount o f li quid i n fer mentati on tank .[R esults]F rom 8different ki nds of carbon and n i trogen sources ,the l ong -ter m acting carbon source -so l uble starch ,t he l ong -ter m acti ng n itrogen source -cottonseedm ea,l and t he ava il abl e carbon source -g l ucose ,the avail ab l e n i trogen source -yeast ex -tracti ng soluti onw ere sel ected f or its cult uri ng .And t he optm i iz ed fer mentati on condition i n basalmedi u m w as as follo w s :t he te mperature ,87.8℉;t he s peed ,180r /m i n ;t he f er m entation tm i e ,26hours ;the i n itial p H val ue ,6.0;t he i nocul a ti on rate ,1%and t he liqui d vol u m e ,50m l/250m ,l under which condition ,the fer ment ati on y i e l d of the bacill us strai n w as 46.0@109/m.l [Concl usi on]T he a my l o li que f ac i ens ba -cill us fer mentati on i n t he desi gn of conditi on reached basica ll y t o t he de m and of t he sca l e i ndustrial producti on .K ey words Amy l oli que f aciens bacillus ;Carbon ;N itrogen ;Bas a lmedi u m作者简介 车晓曦(1985-),男,北京人,硕士研究生,研究方向:生物技术。

产纤维素酶解淀粉芽孢杆菌固体培养条件优化

产纤维素酶解淀粉芽孢杆菌固体培养条件优化

产纤维素酶解淀粉芽孢杆菌固体培养条件优化
张洁婧;吉丽;王芳;张建峰
【期刊名称】《广东化工》
【年(卷),期】2015(042)020
【摘要】文章以解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amylolique faciens)为研究对象,在固体培养基上培养并改变其发酵条件,通过刚果红染色法,测量其透明圈直径与菌落直径,并计算其比值来比较产生的纤维素酶的酶活性,从而确定解淀粉芽孢杆菌的最适宜产酶条件.通过实验得出结论:在pH为7、35℃下培养4天的解淀粉芽孢杆菌产生透明圈与菌落的直径比值最大为5.446.由此可知,在pH为7、35℃下培养4天条件下解淀粉芽孢杆菌产酶能力最强,可获得更多的纤维素酶.
【总页数】2页(P46-47)
【作者】张洁婧;吉丽;王芳;张建峰
【作者单位】吉林农业大学生命科学学院,吉林长春130118;吉林农业大学生命科学学院,吉林长春130118;吉林农业大学生命科学学院,吉林长春130118;吉林农业大学生命科学学院,吉林长春130118
【正文语种】中文
【中图分类】TQ
【相关文献】
1.产甘露聚糖酶解淀粉芽孢杆菌的筛选鉴定及产酶条件优化 [J], 汤文浩;江胜
2.解淀粉芽孢杆菌产纤维素酶及其酶解能力相关研究进展 [J], 戴圻霏;张斯童;孙旸;
陈光;沈丽君;曲嘉毅
3.一株解淀粉芽孢杆菌亚种产果聚糖培养条件优化 [J], 朱玉; 周慧; 李秀文; 陆娟
4.一株解淀粉芽孢杆菌亚种产果聚糖培养条件优化 [J], 朱玉;周慧;李秀文;陆娟
5.解淀粉芽孢杆菌固体培养条件优化 [J], 孙镇平;刘洪红;王忠敏;孙伟;单哲;李敬盼因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

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匀设 计 法对培 养基 进行 优 化. 结果表 明 : 玉 米粉和 低 浓度 的 Mn 抖对 B W一 1 3产 生抗 真 菌 活性 物质 的
促 进 效果 明显 . 最佳培 养基 配 方和发 酵 条件 为 : 玉米粉 3 2 g / L, 蛋 白胨 9 g / L, 氯化 锰 5 mg / L, 初 始
中图分 类号 : ¥ 4 8 2 . 2 8 文献标 志码 : A 文章 编号 : 1 0 0 6 — 4 3 0 3 ( 2 0 1 3 ) 0 1 — 0 0 3 5 — 0 5
Op t i mi z a t i o n o f me d i u m a n d f e r me n t a t i o n c o n d i t i o n s f o r t h e p r o d u c t i o n o f
第4 1卷 第 1 期
2 0 1 3年 2月
浙 江 工 业 大 学 学 报
J 0URNAL OF Z HE J I ANG UNI VE RS I TY OF TE CHNOL OGY
Vo 1 . 4 1 No . 1 Fe b .2 0 1 3
解 淀 粉 芽孢 杆 菌 B W一 1 3 培 养 基 和 培养 条 件 优 化
i n c l u d i n g d i f f e r e n t c a r b o n s o u r c e s ,n i t r o g e n s o u r c e s a n d me t a l i o n s we r e t e s t e d . Wh e n c o r n s t a r c h a n d Mn we r e u s e d,a n o b v i o u s l y i n c r e a s i n g o f a n t i f u n g a l s u b s t a n c e wa s o b s e r v e d . Th e
me d i u m a nd f e r me nt a t i on c o ndi t i o ns o pt i mi z e d wi t h u ni f or m de s i g n we r e a s f ol l o ws:c o r n s t a r c h
( C o l l e g e o f B i o l o g y a n d E n v i r o n me n t En g i n e e r i n g ,Z h e j i a n g Un i v e r s i t y o f Te c h n o l o g y ,Ha n g z h o u 3 1 0 0 3 2 ,C h i n a )
3 2 g / L,p e p t o n e 9 g / L, ma n g a n e s e c h l o r i d e 5 mg / L, i n i t i a l p H 5 . 0 ,l i q u i d v o l u me 3 0 mL i n 2 5 0 mI f l a s k ,i n o c u l u m s i z e 4 ,i n c u b a t i o n t e mp e r a t u r e 2 8 ℃ ,s h a k i n g s p e e d 2 0 0 r / mi n ,c u l t u r e
Ab s t r a c t : Ob j e c t :To o p t i mi z e me d i u m a n d f e r me n t a t i o n c o n d i t i o n s f o r t h e p r o d u c t i o n o f a n t i f u n g a l s u b s t a n c e p r o d u c e d b y Ba c i l l u s a my l o l i q u e f a c i e n s BW一 1 3 ,s i n g l e f a c t o r e x p e r i me n t s
a n t i f u n g a l s u b s t a n c e b y B a c i l l u s a my l ZHANG Xi a o — h on g,W A NG Kun,ZHU Ti n g — he n g,CUI Zhi — f e n g
发酵 P H 5 . 0 , 装液 量 3 0 mL, 接 种 量为 4 , 培 养 温度 2 8℃ , 摇 床 转速 2 0 0 r / mi n , 培养 时 间 1 4 4 h . 优 化后 5 L B w一 1 3发 酵液抑 菌 圈提 高到 2 8 . 5 mm, 比优 化 前提 高 了 2 8 . 9 4 . 关 键词 : 解 淀粉 芽孢 杆 茵 ; 抗 真 菌活性 物质 ; 培 养基优 化 ; 均 匀设 计
章小 洪 。 汪 琨, 朱廷 恒 , 崔志 峰
( 浙 江 工 业 大 学 生 物 与环 境 工 程 学 院 , 浙江 杭州 3 1 0 0 3 2 )
摘要 : 为 了提 高 解淀粉 芽孢 杆 茵 B a c i l l u s a my l o l i q u e f a c i e n s B W一 1 3抗 真 茵 活性 物 质 的 产量 , 本实 验 首先 用单 因素研 究不 同碳 源 , 氮源和微 量 元 素 对 B w一 1 3产 生抗 真 菌活 性 物质 的影 响 , 并使 用均
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